4种野生菌多酚的体外抗氧化活性

测定了黄皮疣柄牛肝菌、马勃菌、黑牛肝菌及鸡枞等4种野生菌多酚含量并研究了粗多酚的抗氧化活性。结果表明:4种野生菌的60%(体积分数)乙醇提取物对DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基都具有很好的清除能力,且该清除能力与多酚浓度呈现良好的剂量相关性。4种野生菌都具有较好的铁离子还原能力,EC_(50)值介于0.02~0.04。总体来说,在4种野生菌中,黄皮疣柄牛肝菌多酚抗氧化活性最好,黑牛肝菌相对其他野生菌抗氧化活性较差。     

高抗氧化活性茶叶粗多糖提取工艺研究

以安溪铁观音为原料,以产品得率、茶多糖含量和DPPH自由基清除率为评价指标,考察先70%醇提+后水提和先水提+后70%醇沉等2种提取方式对茶多糖特性的影响。结果表明,与先水提+后70%醇沉相比,采用先70%醇提+后水提制备的粗茶多糖得率低,而多糖含量及DPPH自由基清除率则极显著提高。进一步通过正交试验分析发现,料液比和温度对粗茶多糖的DPPH自由基清除率呈显著性影响,料液比对粗茶多糖含量呈显著性影响,乙醇浓度则呈显著性影响粗茶多糖产品得率。为获得高活性且含量高的粗茶多糖,最优化工艺参数为乙醇浓度60%、料液比1∶10(g/mL)、提取温度90℃和提取时间20 min。     

云南产黄皮疣柄牛肝菌基本营养成分和抗氧化活性

对采集自云南省25个产地的29个黄皮疣柄牛肝菌(Leccinum crocipodium)样本的基本营养成分、多酚含量及其抗氧化活性进行了测定和分析。结果表明,菌体粗蛋白含量为24.54% DW~37.25% DW,粗脂肪含量为0.88% DW~3.78% DW,可溶性总糖含量为7.03% DW~19.03% DW,粗灰分含量为4.31% DW~7.07% DW;多酚含量丰富,为12.25 mg GAE/g DW~24.44 mg GAE/g DW;多酚粗提物表现出很好的DPPH·、ABTS⁺·清除活性、FRAP还原能力以及Fe²⁺螯合能力;总酚含量与ABTS⁺·清除活性和FRAP还原能力的显著正相关(p<0.01),表明黄皮疣柄牛肝菌粗多酚可能是其抗氧化活性的主要因素之一。云南产黄皮疣柄牛肝菌营养组成丰富,具有高蛋白低脂肪,粗多酚提取物抗氧化活性强的特点。     

板蓝根抗氧化成分的提取及活性分析

采用95%乙醇提取板蓝根,并用石油醚、氯仿和正丁醇依次萃取,醇提后药渣通过水提醇沉法制备粗多糖。采用铁氰化钾还原反应、超氧阴离子自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基三种抗氧化模型,比较上述极性部位的抗氧化活性,并考察抗氧化活性与总糖含量的关系。结果表明,板蓝根不同极性部位的抗氧化活性差异较大,与总糖含量相关性较小。其中,氯仿萃取物对超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除率最高,IC50值分别为3.38、0.19mg/mL,是从板蓝根中筛选非多糖类天然抗氧化剂的重要部位。醇提后药渣通过水提醇沉法制得的粗多糖部位总糖含量最高,为18.66%。板蓝根所具有的抗氧化活性可能是该药发挥解"内毒"作用的重要机制。     

壳聚糖絮凝法纯化牛蒡多糖的工艺优化

本实验以牛蒡根为材料,以多糖保留率、蛋白清除率和脱色率为评价指标,在单因素实验的基础上设计正交试验,优化壳聚糖对牛蒡多糖提取液的絮凝纯化工艺。同时,与传统的水提醇沉法制备多糖作对照,检验了壳聚糖絮凝工艺的纯化效果及制备样品的抗氧化活性。结果表明:当壳聚糖用量为1.2 mL/g,絮凝时间为15 min,提取液pH为4时,牛蒡多糖得率为40.01%±0.11%,纯度为65.39%±0.67%,均优于传统的水提醇沉多糖。另外,体外抗氧化实验表明,壳聚糖絮凝法制备的多糖清除DPPH自由基的能力及对氧化损伤的酵母细胞的保护率均高于传统的水提醇沉多糖。综上,相比于传统的醇沉法,壳聚糖絮凝法是一种更优的纯化牛蒡多糖的方法。     

紫贻贝多糖提取及其体外抗氧化活性研究

采用水提、酸提、碱提三种方法提取紫贻贝多糖,提取率分别为7·9%、3·5%、8·3%。体外抗氧化活性研究结果表明:紫贻贝多糖对羟基自由基、超氧阴离子自由基和亚硝酸根均有清除能力,且随着多糖浓度增加呈相关关系,还原力测定也获得类似结果。不同提取方法获得的多糖样品抗氧化能力有差异,水提和碱提多糖要优于酸提多糖。      

紫贻贝多糖提取及其体外抗氧化活性研究

采用水提、酸提、碱提三种方法提取紫贻贝多糖,提取率分别为7·9%、3·5%、8·3%。体外抗氧化活性研究结果表明:紫贻贝多糖对羟基自由基、超氧阴离子自由基和亚硝酸根均有清除能力,且随着多糖浓度增加呈相关关系,还原力测定也获得类似结果。不同提取方法获得的多糖样品抗氧化能力有差异,水提和碱提多糖要优于酸提多糖。     

多糖中金属离子对其抗氧化活性及抗肿瘤活性的影响

采用水提醇沉法制备香菇、海带、枸杞多糖粗品,Sevage法除蛋白制得初级纯化多糖。利用EDTA-2Na去除多糖粗品和纯品中的金属离子,比较去除前、后多糖抗氧化活性及抗肿瘤活性的变化。结果表明:3种多糖均含有Al、Ca、Mn等多种金属元素,只是含量各不相同。去除金属离子后,多糖对ABTS自由基、DPPH自由基的清除能力均下降,对羟自由基的清除能力变化不一。其中枸杞多糖质量浓度为600μg/mL时抗氧化活性变化最为显著,ABTS自由基清除率由26.31%降至17.25%,DPPH自由基清除率由59.80%降至38.40%。枸杞多糖纯品在去除金属后对人乳腺癌细胞MCF-7的体外抑制活性呈下降趋势。结论:多糖中的金属元素是多糖活性中心构成的一部分,对其活性具有重要影响。     

中国蛤蜊多糖的抗氧化性及抑菌性

以中国蛤蜊全脏器为材料,碱提醇沉法进行多糖的提取,采用Sevag 法去除多糖中的蛋白,分别测定提取物中多糖的含量、清除羟自由基( ·OH)能力、清除超氧阴离子自由基(O2－ ·)能力及抑菌活性。结果表明：碱提法所提多糖含量较高,提取率为15.45%(以中国蛤蜊干粉计)。中国蛤蜊多糖具有较强的抗氧化能力,多糖质量浓度为0.8mg/mL时对O2－ ·的清除率达86.49%;对 ·OH清除率达49.31%。中国蛤蜊多糖对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有抑制作用,其最小抑菌质量浓度分别为12.5、25、25mg/mL,对金黄色葡萄球菌抑制作用最明显、枯草芽孢杆菌次之、大肠杆菌最不明显,。由此可知,中国蛤蜊多糖对 ·OH 和 O2－ ·具有一定的体外抗氧化性能,在一定实验质量浓度范围内,随着多糖质量浓度的增大,其抗氧化活性逐渐增强。多糖对革兰氏阳性菌的抑制效应强于革兰氏阴性菌。     

蛹、米虫草多糖含量及抗氧化活性比较研究

旨在研究不同来源北虫草子实体多糖的含量差异以及分级醇沉各组分的抗氧化活性差异。通过热水浸提、分级醇沉法分别获得蛹虫草多糖(Cordyceps militaris polysaccharide,CMP)、米虫草多糖(Cordyceps oryzae polysaccharide,COP);以DPPH自由基清除率、羟基自由基(·OH)清除率和铁离子还原能力法(ferric reducing antioxidant power,FRAP)评价两种多糖的体外抗氧化活性;构建H_2O_2致PC12细胞氧化损伤模型,比较两种虫草多糖对氧化损伤的PC12细胞的保护作用。不同乙醇浓度沉淀获得的虫草多糖中,米虫草多糖提取率及含量高于蛹虫草多糖;米虫草多糖对DPPH自由基、·OH清除率分别可达66.43%、69.22%,蛹虫草多糖可达73.69%、73.50%;FRAP法测得蛹虫草多糖抗氧化能力较强。细胞试验结果表明,氧化损伤的PC12细胞经两种多糖处理后细胞存活率皆有不同程度的提升,呈浓度依赖性,蛹虫草多糖组细胞存活率最高可达90.45%,米虫草多糖组细胞存活率最高可达82.62%。以蚕蛹为培养基的蛹虫草在多糖提取率及含量方面低于以大米为培养基的米虫草,但其多糖对自由基清除能力及PC12细胞保护作用优于米虫草多糖,具有较好的抗氧化能力。     

黄皮疣柄牛肝菌多糖结构鉴定及对小鼠盲肠与粪便中短链脂肪酸的影响

本实验采用水提醇沉法从黄皮疣柄牛肝菌中提取粗多糖，经脱色、脱蛋白后得到黄皮疣柄牛肝菌多糖（polysaccharides from Leccinum crocipodium (Letellier.) Watliag，LCP），凝胶渗透色谱法测定LCP分子质量，高效液相色谱法测定LCP单糖组成，紫外光谱鉴定LCP纯度，红外光谱分析LCP结构，动物实验研究LCP对小鼠盲肠内容物及粪便中短链脂肪酸的影响。结果表明，该多糖单糖组成为甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖，其物质的量之比为4.34∶0.35∶0.08∶13.39∶3.35∶0.75∶1.80；重均分子质量为1.540×105 Da；红外光谱分析表明LCP是含有α-(1→6)糖苷键以及β-型糖苷键的吡喃型多糖；动物实验表明LCP对小鼠盲肠及粪便中乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸的产生都有较大影响，不同的灌胃剂量对小鼠产生短链脂肪酸的影响有较大差异，以高剂量LCP对短链脂肪酸的产生影响最大。     

荷叶离褶伞多糖提取工艺优化及抗氧化活性研究

本研究以荷叶离褶伞多糖为对象,采用单因素与响应面法对多糖提取温度、提取时间、液料比、次数进行优化,进一步研究了荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性。结果表明:在提取温度为89 ℃,时间为3 h,液料比为30:1 (mL/g),提取2次时,荷叶离褶伞多糖得率为5.35%±0.12%,与预测值相近。荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性与多糖浓度在0~1.0 mg/mL范围内呈现剂量依赖关系,多糖浓度在1.0 mg/mL时,DPPH和ABTS自由基清除率分别达到45.87%±2.12%和76.49%±1.56%。荷叶离褶伞多糖对DPPH和ABTS自由基半抑制浓度IC₅₀分别为1.40、0.44 mg/mL,说明荷叶离褶伞多糖具有较好的抗氧化能力。     

北虫草多糖提取工艺优化及其细胞氧化损伤保护作用

目的:优化北虫草多糖的提取工艺,研究北虫草多糖对血管平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用L₉(3⁴)正交实验法优化多糖提取工艺,利用羟自由基法、DPPH自由基法和FRAP法检测北虫草多糖清除自由基的能力。在细胞水平上构建过氧化氢诱导细胞氧化损伤模型,采用MTT法、ROS细胞染色法评估北虫草多糖对过氧化氢诱导大鼠主动脉平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。结果:北虫草多糖的最佳提取条件为:提取温度90 ℃,料液比1:30 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,最高得率为7.94%±0.16%。在多糖浓度为1.6 mg/mL时对羟自由基和DPPH自由基的清除能力以及总抗氧化能力分别为75.57%±1.39%、80.23%±2.75%和(0.22±0.01) mmol/mg。细胞实验表明北虫草多糖可显著抑制过氧化氢诱导细胞内ROS生成,提高细胞存活率。结论:成功优化北虫草多糖提取工艺,北虫草多糖具备良好的体外清除自由基的活性,对由氧化应激所导致的心血管疾病中起到很好的防治意义。     

罗布麻茶黄酮的分离富集及其抗氧化、抗疲劳活性

选用不同柱色谱材料,对罗布麻茶黄酮进行分离富集,并对其体外抗氧化活性及体内抗疲劳作用进行评价。结果表明,聚酰胺树脂对罗布麻茶黄酮的富集效果最好,吸附率达65.08%,解吸率达41.27%;体外抗氧化实验结果表明,罗布麻茶黄酮对ABTS⁺·、DPPH·、·OH自由基清除能力较强,当浓度为0.20 mg/mL时,其对DPPH·清除率达98.5%±0.18%,优于同浓度下阳性对照组V_C,具有良好的抗氧化能力;体内抗疲劳试验结果显示,罗布麻茶黄酮能有效延长小鼠的力竭游泳时间,提高小鼠肝糖原储备量,降低血清尿素氮含量,增强体内抗氧化酶系活力等,表现出良好的抗疲劳作用。     

超高压提取青钱柳多糖条件优化及抗氧化活性

试验以青钱柳叶为原料,研究青钱柳多糖的超高压提取工艺,对提取的青钱柳粗多糖进行抗氧化活性试验。采用单因素及正交试验对青钱柳多糖的超高压提取工艺进行优化,结果显示,青钱柳多糖最佳提取条件为:料液比1︰25(g/mL)、提取温度30℃、提取压力500 MPa。在此条件下,青钱柳多糖得率最高,为3.70%。将青钱柳粗多糖进行清除DPPH自由基、清除羟基自由基试验,以抗坏血酸(VC)为对照,测定青钱柳叶粗多糖的体外抗氧化能力。结果表明,青钱柳叶粗多糖清除DPPH自由基效果较好且较对照组浓度低,最高清除率为93.0%,而清除羟基自由基效果低于对照。     

酪蛋白水解物的类蛋白反应修饰产物的分离纯化及其抗氧化活性研究

本文采用木瓜蛋白酶在pH 6.5的条件下对酪蛋白进行水解2 h,水解产物测得DPPH 35.89%±0.13%,超氧阴离子清除能力为21.39%±0.33%,还原能力为53.00%±2.00%。分别导入Tyr、Phe和Try对水解产物进行修饰,结果表明类蛋白反应时间为6 h时,三种产物的抗氧化性最高,其中Try修饰产物抗氧化性最好,测得DPPH、超氧阴离子清除能力、还原能力分别46.84%±1.16%、34.10%±0.32%、70.00%±2%(p0.05)。随后,将Try修饰下的产物进行分离纯化,使用装有G-15葡聚糖凝胶的色谱柱,水为洗脱液,上样浓度为20 mg/mL,流速为0.5 mL/min,洗脱效果最佳,得到三个峰,分别测定其抗氧化性,结果表明峰二的抗氧化性最好,测得DPPH、超氧阴离子清除能力、还原能力分别为58.46%±0.57%、38.42%±0.47%和80.00%±0.02%(p0.05)。将峰二产物通过液相色谱进一步分离鉴定,得到单一峰,证明蛋白纯化下的产物纯度较高。最后,得到了高纯度的抗氧化肽。     

利用香菇菌丝体发酵藜麦及其发酵产物中粗多糖的抗氧化评价

以藜麦为固体培养基,利用香菇菌丝体将其发酵,通过正交试验设计探讨碳源、氮源、碳氮源添加比例、时间等因素对发酵产物中粗多糖含量的影响,测定最适发酵条件下发酵产物中粗多糖抗氧化活性。最终得出以粗多糖为目标产物的最适发酵条件为:碳源为淀粉,氮源为牛肉膏,碳氮源添加比例5:1,发酵时间15 d;在此条件下,香菇与藜麦的发酵产物中粗多糖含量达(58.89±1.33)mg/g,较未发酵藜麦提升了31倍;且其对DPPH·自由基和ABTS·^+自由基均表现出较好的体外清除效果,当粗多糖浓度为20 mg/mL时,其对DPPH·自由基和ABTS·^+自由基的清除能力均达到最高,分别为76.57%与60.16%。利用香菇菌丝体发酵藜麦后,能够大大提升藜麦培养基中多糖的含量,且发酵后的粗多糖具有较好的抗氧化能力,为发酵产物作为功能性食品的可行性提供一定数据支持。     

鳞柄小奥德蘑多糖提取工艺的优化及抗氧化活性

研究鳞柄小奥德蘑多糖的最佳提取工艺及其体外抗氧化活性。采用正交实验法优化提取工艺,蒽酮-硫酸法和3,5-二硝基水杨酸法（DNS法）测定多糖含量,分别采用普鲁士蓝法、水杨酸法和邻苯三酚自氧化法测定鳞柄小奥德蘑多糖的抗氧化能力。研究结果显示,影响鳞柄小奥德蘑粗多糖得率的主次因素为:料液比>提取时间>提取温度>提取次数,多糖的最佳提取工艺为:料液比1∶40,提取时间1 h,提取温度90℃,提取次数3次。在最佳提取工艺条件下,水提法提取鳞柄小奥德蘑粗多糖的得率约8.84%。体外抗氧化活性测定结果表明,鳞柄小奥德蘑粗多糖对·OH的清除效果比较明显,随着质量浓度的升高,清除效果越发显著（p<0.05）,4 mg/m L的粗多糖对·OH的清除率达48.94%±12.32%;鳞柄小奥德蘑粗多糖具有一定的还原能力;对O-2·的清除能力较弱。因此,鳞柄小奥德蘑中粗多糖的含量较高且具有一定的抗氧化能力,可用于开发研制多糖药物和保健性食品等深加工产品。      

亚麻籽粕抗氧化肽制备工艺的响应面法优化

以亚麻籽粕蛋白为原料,酶解制备抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为实验指标,通过单因素实验,筛选最佳蛋白酶并考察底物浓度、酶添加量、温度、pH及时间等对酶解物抗氧化能力的影响。在单因素实验基础上,采用响应曲面法进行酶解工艺条件的优化。结果表明:采用胰蛋白酶作为最适酶,酶解的最佳工艺条件为:底物浓度2%,温度37 ℃,酶解时间3.00 h,加酶量为4000 U/g,pH8.5,在该条件下,1 mg/mL酶解产物的DPPH自由基清除率及超氧阴离子自由基清除率分别为(63.64%±0.023%)和(19.98%±0.098%),0.5 mg/mL酶解产物的ABTS自由请清除率为(88.11%±0.059%)。说明亚麻籽粕抗氧化肽具有良好的抗氧化活性。