阿魏菇凝集素分离纯化及理化性质的研究

通过对新疆阿魏菇凝集素的提纯及分析,了解凝集素的基本理化特性,为深入探究阿魏菇凝集素的免疫调节活性在理论上奠定了基础。对阿魏菇组织实体打浆、PBS浸提、硫酸铵沉淀、冷冻干燥,DEAE-cellulose、Sepharose-4B等层析柱法分离纯化得到较为纯净的凝集素。采用小鼠血液测定凝集素凝集效价的方法初步研究凝集素的理化性质。分离纯化得到较为纯净的凝集素,此凝集素在温度升高至70℃时,凝血活性全部丧失;pH 4~9条件下,凝集素活性较为稳定,在pH 2以下及pH 10以上凝集素活性逐渐消失。盐度升高,凝集素活性降低;D-半乳糖是其良好的抑制剂;金属离子对凝集素活性的影响各不相同。     

阿魏菇凝集素分离纯化及理化性质的研究

通过对新疆阿魏菇凝集素的提纯及分析,了解凝集素的基本理化特性,为深入探究阿魏菇凝集素的免疫调节活性在理论上奠定了基础。对阿魏菇组织实体打浆、PBS浸提、硫酸铵沉淀、冷冻干燥,DEAE-cellulose、Sepharose-4B等层析柱法分离纯化得到较为纯净的凝集素。采用小鼠血液测定凝集素凝集效价的方法初步研究凝集素的理化性质。分离纯化得到较为纯净的凝集素,此凝集素在温度升高至70℃时,凝血活性全部丧失;pH 4~9条件下,凝集素活性较为稳定,在pH 2以下及pH 10以上凝集素活性逐渐消失。盐度升高,凝集素活性降低;D-半乳糖是其良好的抑制剂;金属离子对凝集素活性的影响各不相同。     

麦胚凝集素分离纯化工艺研究

麦胚凝集素是麦胚中一种具有生物学活性蛋白质.根据甲壳素和麦胚凝集素的性质,以甲壳素作为吸附固相,建立了从麦胚中提取、分离和纯化麦胚凝集素的绢丝布袋法工艺.试验结果显示,采用40%～45%的饱和硫酸铵制备粗麦胚凝集素样品时,粗品麦胚凝集素溶液与布袋中甲壳素的使用比例在3:1～1:1,甲壳素吸附麦胚凝集素的时间为19 h,SDS-PAGE凝胶电泳显示可获得纯化度近100%的麦胚凝集素样品.纯化的麦胚凝集素相对分子质量为20415.     

小麦胚凝集素的分离与纯化工艺

麦胚凝集素（WGA）是麦胚中一种具有生物学活性的蛋白质,将它从小麦麦胚中提取出来,能提高面粉生产企业经济效益。利用壳聚糖作为吸附剂,建立了从小麦胚中提取、分离和纯化麦胚凝集素的尼龙布袋法生产工艺;利用SDS凝胶电泳对纯化麦胚凝集素进行鉴定。结果显示,采用40％～45％的饱和硫酸铵制备粗WGA样品;粗品麦胚凝集素溶液与布袋中壳聚糖的使用比例在3：1～1：1;壳聚糖吸附麦胚凝集素的时间为20h,电泳显示可获得较纯化的麦胚凝集素样品。纯化的麦胚凝集素相对分子量为20412。     

小麦胚凝集素的分离与纯化工艺

麦胚凝集素(WGA)是麦胚中一种具有生物学活性的蛋白质,将它从小麦麦胚中提取出来,能提高面粉生产企业经济效益。利用壳聚糖作为吸附剂,建立了从小麦胚中提取、分离和纯化麦胚凝集素的尼龙布袋法生产工艺;利用SDS凝胶电泳对纯化麦胚凝集素进行鉴定。结果显示,采用40～45的饱和硫酸铵制备粗WGA样品;粗品麦胚凝集素溶液与布袋中壳聚糖的使用比例在3:1～1:1;壳聚糖吸附麦胚凝集素的时间为20h,电泳显示可获得较纯化的麦胚凝集素样品。纯化的麦胚凝集素相对分子量为20412。     

响应面法优化麦胚凝集素分离纯化工艺研究

麦胚凝集素是一种具有生物学活性的蛋白质,将其从麦胚中提取、开发,能促进麦胚的综合利用,提高相关生产企业经济效益。依据Box-Behnken试验设计原理,进行饱和度硫酸铵质量分数、甲壳素用量和甲壳素吸附麦胚凝集素时间的响应面优化分析。建立了提取、纯化麦胚凝集素优化工艺的二次多项数学模型。优化麦胚凝集素分离、纯化工艺参数:饱和硫酸铵质量分数为47.5%、甲壳素用量为2.0:1和甲壳素吸附麦胚时间为19 h。优化工艺模型预测麦胚凝集素相对得率的理论值为92.1%,验证试验显示麦胚凝集素实际提取率为92.7%。     

生物凝集素分类与纯化的研究进展

凝集素是一类具有糖专一性,可促使细胞凝集的糖蛋白。凝集素已广泛应用于化学、生物化学、生物学、免疫学及医学等各个领域。本文主要对生物凝集素的分类与纯化方法进行了较为系统的阐述,为凝集素资源的开发提供一定的参考和借鉴。     

菜豆凝集素的分离及相对分子质量测定

以菜豆为原料,考察了硫酸铵饱和度、pH值对菜豆凝集素分离效果的影响,采用凝集效价法和SDS-PAGE凝胶电泳法测定凝集素含量及相对分子质量。分离最佳条件为:硫酸铵饱和度60%、pH5.5;所得鲜菜豆中凝集素的含量为189.7mg/100g;凝胶电泳最佳水平为:样品浓度10mg/g、进样量20μl、分离胶浓度12%、电压电流分别为50V、25mA,在此条件下分析得出菜豆凝集素相对分子质量约为204.07kD。     

西兰苔凝集素的分离纯化及性质研究

本文采用硫酸铵沉淀法,分别以生理盐水,蒸馏水,pH=7.2的Tris-HCl缓冲液,pH=7.2的磷酸缓冲液为浸提液,对西兰苔凝集素进行提取,然后依次利用DEAE-52阴离子交换层析和SephadexG-75对凝集素粗品进行分离纯化,并对纯化后的西兰苔凝集素的部分性质进行研究。结果表明:pH=7.2的Tris-HCl缓冲液的提取率最高,为3.57±0.02%;纯化后的西兰苔凝集素分子量约为27 ku,糖含量为7.60±0.03%,其凝血活力为28;糖抑制试验表明,西兰苔凝集素的凝集活性受D-甘露糖和阿拉伯糖的抑制;热稳定性实验表明90℃以下凝集素的凝集活性不受温度影响,有较好的热稳定性。此外,西兰苔凝集素的最适pH范围是7~8,强酸强碱环境中其凝血活性明显下降。在含有Ca2+的溶液中其凝集活性有所增强,表明西兰苔凝集素活性受Ca2+影响较大。     

刀豆凝集素提取、分离及产物分析研究

以新鲜刀豆为原料,实验得出了提取刀豆凝集素的最优条件为:提取温度为2212,提取时间为2.5h,甲酸溶液中NaCI浓度为0.20mol/L,甲酸浓度为0.7mol/L,料液比为1:50(W/V).所得刀豆凝集素活力为102.96HU/g,蛋白质提取量为11.15mg/g.提取液经硫酸铵分级沉淀、透析得到刀豆凝集素粗品,经HPLC分析表明,刀豆凝集初步分离产物有多种不同分子量的蛋白质构成,分子量分布范围较广,从150000D到1300D左右.分子量为710000左右的组分占22.65%,分子量为36000D左右的组分占15.55%.初步分离产物中刀豆凝集素的含量较高.     

库拉索芦荟凝集素的分离与纯化

目的:对库拉索芦荟凝集素进行分离、纯化与初步鉴定。方法:库拉索芦荟经捣碎匀浆、盐析、透析后得到库拉索芦荟凝集素的粗提液;兔血凝集反应测试初步检测粗提液成分;将粗提液进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和葡聚糖G-75凝胶柱层析,对分离组分进行分析;将洗脱液浓缩,再用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和葡聚糖G-200凝胶柱层析对组分进行分析。结果:发现库拉索芦荟粗提液可以凝集兔血,证明在粗提液中具有芦荟凝集素成分。对粗提液检测、分离,获得三种蛋白质组分;经凝血活性检测,只有第一个蛋白峰具有凝集活性且凝集效果较粗提液进一步提高。再次分离纯化洗脱液,可知其由两个组分组成。结论:库拉索芦荟凝集素由两种组分组成。     

年糕中微生物的分离纯化和鉴定

通过对发生腐败变质的真空包装年糕中微生物进行分离、纯化和反证得到2株细菌、3株酵母菌、1株霉菌。经过形态观察、生理生化、微生物鉴定系统等方法,初步鉴定2株细菌分属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、不动杆菌属(Acinetobacter sp.),3株酵母菌都属于假丝酵母属(Candida spp.),1株霉菌属于构巢曲霉(Aspergillus nidulans)。     

稻米中蛋白体的分离纯化及表征

以糙米为原料,建立利用低浓度氢氧化钠从稻米胚乳中分离蛋白体的方法。以蛋白体体积分数为指标,得到蛋白体分离条件为：碱液浓度14 mmol/L、液料比12 mL/g、搅拌时间90 min、超声功率90 W、超声温度35℃和超声时间40 min,蛋白体体积分数达20.10%。再经0.1、5.0μm滤膜过滤及4.0 mol/L氯化钙去除残余淀粉,获得纯化的蛋白体。所得蛋白体呈微球形,有荧光;具有16、22、33、57 ku的蛋白亚基;X-衍射19.9°处显示β-折叠峰;红外1 464、1 534 cm^-1属于AmideⅡ带;拉曼1 303、1 651 cm^-1属于AmideⅢ和AmideⅠ带,均为蛋白质的特征吸收。因此,以低浓度氢氧化钠分离并经微孔滤膜和氯化钙纯化从稻米中获取蛋白体是可行的,这为研究稻米胚乳中蛋白体的结构和性质提供了方法学参考。     

黄酒中丁二酸的分离、纯化和鉴定

采用AB-8大孔树脂和反相C18柱色谱分离获得了黄酒中的1个较强极性的物质,经红外光谱显示该物质含有C=O键和C-O键,并有-CH2-存在;核磁共振谱图显示含有-COOH和-CH2-基团,其比例为1:1;GC-MS证实了该物质的纯度较高,基峰质荷比为55,M+1峰的质荷比为119,含有COOH+(m/z=45)和亚稳态离子峰C2H3+(m/z=27)的碎片,综合解析后推断该物质为丁二酸,为黄酒酿造过程中微生物发酵所产生,对黄酒的风味和功能都具有重要影响.     

Winged bean lipoxygenase—Part 1: Isolation and purification

Lipoxygenase was isolated and purified from dried winged bean seeds by ammonium sulphate fractionation, gel filtration, DEAE-Sephadex ion exchange chromatography and hydroxyapatite chromatography. Two major isoenzymes, FI and FII, were separated by ion exchange chromatography and were further purified by elution through a hydroxyapatite column. These resulted in a 105- and 171-fold purification and 7% and 9% recovery for FI and FII, respectively. FI and FII had similar Rf values of 0.25 on polyacrylamide gel electrophoresis. A minor band of Rf 0.01 was detected in ammonium sulphate fractions but was not further enriched and purified in succeeding steps.     

年糕中腐败霉菌的分离纯化与控制的研究

针对广东地区年糕在储藏、运输过程中易滋生霉菌等问题进行研究。从已发霉变质的年糕中经过分离、纯化得到4株霉菌,并进行初步鉴定,结果表明它们分别为曲霉菌(Aspergillus)、青霉菌(Penicillium)和单端孢霉(Trichothecium)。选取5种抑菌剂分别对分离出的4株霉菌进行抑菌试验,结果表明脱氢醋酸钠抑菌效果最佳,而作为天然防腐剂的肉桂精油也表现出较好的抑菌效果;若能将两者结合使用,则可达到抑菌、防腐和延长年糕保质期的目的。     

蒲公英糖蛋白的分离纯化及结构分析

通过DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-100葡聚糖凝胶层析手段分离纯化,从蒲公英中分离纯化得到三种蒲公英糖蛋白(TMGP)-a、b、c,采用薄层层析法对其纯度进行鉴定,结果显示三种成分均为均一组分。经分析,蒲公英糖蛋白粗品TMGP和均一品TMGP-a、TMGP-b、TMGP-c中多糖的含量为79.12%、71.23%、70.25%、74.35%;蛋白质的含量为:13.35%、19.79%、20.78%、17.60%。β-消除反应说明三种蒲公英糖蛋白均一品都含有O-连接型糖蛋白。经红外光谱分析,TMGP-a糖蛋白可能含有少量硫酸基;TMGP-b糖链中可能是硫酸化多糖;TMGP-c含有吡喃糖β-糖苷键。     

藜麦多糖的分离纯化及结构初步分析

以藜麦粉为原料,采用超声波辅助法提取得到藜麦粗多糖。粗多糖经AB-8大孔树脂吸附,DEAE纤维素柱分离得到QPs-Ⅰ、QPs-Ⅱ、QPs-Ⅲ3种多糖。通过Sephadex G-100葡聚糖凝胶层析柱对QPs-Ⅰ进一步纯化得到QPs-Ⅰ-Ⅰ。采用气相色谱、紫外光谱和红外光谱对藜麦多糖QPs-Ⅰ-Ⅰ的结构进行初步研究。结果表明:多糖QPs-ⅠⅠ由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖6种糖组成,且各组成比例为:鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=0.61∶0.85∶0.92∶1.19∶2.22∶23.41。紫外光谱检测显示QPs-Ⅰ-Ⅰ在260～280nm处未见核酸和蛋白质等大分子的吸收峰,红外检测证实QPs-Ⅰ-Ⅰ具有多糖的特征吸收峰。     

根瘤菌胞外多糖的分离纯化及组分分析

以根瘤菌发酵液为原料,提取纯化发酵液中胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS),并对其多糖组分进行分析。采用木瓜蛋白酶与sevage法结合脱蛋白,并利用柱层析法对胞外多糖进行单组分离和纯化,分别得到EPS 1-1、EPS 2-1、EPS 3-1、EPS 4-1和EPS 5-1等5种相对较纯的单一组分。分别采用不同色谱法对上述各单一组分的纯度、结构、相对分子量及单糖组成进行分析和测定,表明各个组分均具有多糖特征峰,且均是以β-型糖苷键连接的吡喃糖,其中EPS 1-1和EPS 3-1是β构型的半乳吡喃糖; 5种多糖组分均主要由具有不同摩尔比的半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成,除了EPS 4-1之外,在其他组分中还检测到了不同含量的岩藻糖、鼠李糖和阿拉伯糖等。     

枸杞多糖的分离纯化及结构研究

枸杞子经提取,醇沉,得到枸杞水溶性多糖粗品(LBP)。最佳乙醇沉淀添加量为50 m L浓缩液中添加80 m L体积分数95%乙醇;最佳乙醇醇沉时间为12 h;Sevag法除蛋白次数为6次,脱除率为83.45%。枸杞粗多糖经DEAE-52纤维素(OH-)色谱柱、Sephedex G-50柱层析纯化后,得到LBP1和LBP2。采用紫外光谱扫描和Sephedex G-100柱层析鉴定LBP1和LBP2均为分子质量相对均一的组分。高效液相色谱检测LBP1和LBP2的相对分子质量分别为367和358。苯酚-硫酸法测得:LBP1和LBP2的中性糖含量分别为82.20%和74.50%;咔唑-硫酸法测得LBP1和LBP2的半乳糖醛酸含量为7.50%和14.30%。气相色谱测得LBP1的单糖组成摩尔比为半乳糖∶甘露糖∶葡萄糖=1.79∶1.00∶3.08;LBP2的单糖组成的摩尔比为半乳糖∶甘露糖∶葡萄糖=1.32∶1.00∶7.38。红外光谱测定结果显示,LBP1和LBP2均由吡喃糖构成。β消去反应检测得LBP1和LBP2与氨基酸是通过O-糖苷键相连。刚果红实验证明LBP1和LBP2均不存在三股螺旋结构。粒度实验表明,溶液酸碱度会影响枸杞多糖的粒度分布。