黄秋葵籽多糖的组成结构及抗氧化活性研究

目的 分析黄秋葵籽多糖的组成结构并对其抗氧化活性进行评价。方法 样品经DEAE-52阴离子交换柱和Sephacryl S-400凝胶色谱柱进行分离纯化得到黄秋葵籽多糖组分(OSPs), 采用尺寸排阻色谱柱分析其分子量, 并对其化学成分、单糖组成、糖苷键链接方式、红外光谱(FTIR)结构信息及抗氧化活性进行研究。结果 分离纯化的OSPs重均分子量为7.09×105 Da, 数均分子量为7.01×105 Da, Mw/Mn为1.01, 表明OSPs有较高的纯度, 得率为0.45%。酸降解和糖醇衍生化后经气相色谱测得OSPs由甘露糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和鼠李糖组成, 摩尔百分比为38:32.84:17.14:9.13:2.88。FTIR结果表明OSPs含有甘露糖残基。高碘酸氧化、Smith降解实验结果表明OSPs主要含有1→、1→6、1→2、1→2,6糖苷键。此外, OSPs具有良好的抗氧化能力,特别是对O2-自由基的清除。结论 通过对OSPs组成结构及抗氧化活性研究, 有利于对黄秋葵籽资源的高值化利用。     

杏鲍菇多糖组分的分离纯化及结构鉴定

目的 对含有岩藻糖(fucose, Fuc)的杏鲍菇多糖进行分离纯化, 并分析其结构。方法 通过水提分级醇沉得到60%乙醇醇沉杏鲍菇多糖(Pleurotus eryngii polysaccharides, PEP)。杏鲍菇多糖经离子交换层析和凝胶层析分离纯化, 采用凝胶渗透色谱法(gel permeation chromatography, GPC)测定PEP各组分的相对分子质量; 高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)检测岩藻糖; 傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectrum, FT-IR)、X-射线衍射(x-ray diffractometer, XRD)分析、原子力显微镜(atomic force microscope, AFM)观察等方法对PEP各组分进行结构表征。结果 PEP经分离纯化得到PEP-1、PEP-2和PEP-3共3种多糖组分, 分子量依次为1.585×106、4.266×104和1.995×103 Da。岩藻糖存在于PEP-1组分中; FT-IR显示PEP-1和PEP-2存在C-O-C键拉伸和吡喃环构型; PEP-2存在β型糖苷键, PEP-3为β-葡聚糖。XRD结果显示3个组分多糖结晶指数分别为38.89%、47.22%和20.00%。AFM观察结果显示, PEP-1整体呈现流星状结构, 多糖粒子聚集; PEP-2为链状螺旋结构且以小球状体聚集; PEP-3呈现小螺旋棒状结构。结论 PEP分离纯化得到3个组分多糖, 岩藻糖存在PEP-1组分中。     

百合多糖的纯化与化学结构鉴定研究

本研究从百合水提液中分离纯化得到两种多糖LP1、LP2,得率分别为鲜百合重0.55%、0.25%,经纸层析和凝胶柱层析鉴定均为单一组分,将这两种多糖进行气相色谱和凝胶柱层析分析,结果如下:LP1由葡萄糖、甘露糖组成,比例为1:2.46,分子量为7.94×104LP2由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸组成,比例为1:0.73:2.6:1.8:0.84,分子量1.815×104     

条斑紫菜中四个多糖组分的提纯及组成分析

利用离子交换柱层析和凝胶柱层析法对条斑紫菜热水提取物中的多糖进行了分离纯化,共获得四个不同的多糖组分．柱层析法测出它们的分子量分加别为2.2×105、2.0×104、1.8×105和1.5×104。采用气相色谱及化学分析等方法测出多糖各种组成成分的含量。     

拐枣不同部位多糖的结构特征及活性分析

为明确拐枣不同部位多糖的结构及生理活性的差异，采用水提醇沉法制备了三种拐枣多糖（HDP）-全果多糖（HDPW）、籽多糖（HDPS）和果梗多糖（HDPP）。通过紫外-可见光谱、高效尺寸排阻色谱、离子色谱、傅里叶红外光谱和扫描电子显微镜对其结构进行对比，研究结果表明，三种HDP均为酸性多糖，由不同摩尔比例的岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸组成，HDPW、HDPS和HDPP的分子量均有三个色谱峰，其中HDPS的中、低分子量值（45.72×104~165.75×104 u）要高于HDPW（0.34×104~12.53×104 u）和HDPP（0.51×104~21.26×104 u），红外光谱表明HDPW及HDPP含有α-糖苷键，而HDPS是一种含有β-糖苷键的多糖。HDP对DPPH自由基、ABTS自由基和α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度范围分别为0.015~0.043 mg/mL、0.47~1.21 mg/mL和0.13~9.99 mg/mL，当HDPW和HDPP的质量浓度在0.1 mg/mL及以上时，可显著提升胰岛素抵抗HepG2细胞（IR-HepG2）的葡萄糖消耗率，较模型组最高可提高7.66%。较HDPS而言，HDPW和HDPP结构相似且显示出了更好的抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制活性，更强的IR-HepG2葡萄糖摄取促进能力，研究为拐枣的综合利用提供一定的理论依据和数据支持。     

海带中褐藻糖胶分级纯化及结构分析

为了纯化海带褐藻糖胶及研究褐藻糖胶结构,利用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱分离海带褐藻糖胶粗品,得到LP-1、LP-2、LP-3和LP-4 4个组分,通过Sephadex G-150凝胶柱对硫酸根含量较高组分LP-2、LP-3和LP-4进行进一步分离纯化及分子量测定,最终LP-2获得两种均一多糖LP-21和LP-22,其分子量分别为123和105 k Da,LP-3和LP-4为均一多糖,分子量分别为74和32 k Da。通过高效液相色谱法分析得率较高的组分(LP-21、LP-22和LP-3)单糖组成,用红外色谱法分析其结构。高效液相色谱结果表明,分级纯化后的组分(LP-21、LP-22和LP-3)主要由L-岩藻糖、D-半乳糖组成,还有少量D-葡萄糖、D-甘露糖、D-氨基葡萄糖、L-鼠李糖、D-木糖和D-葡萄糖醛酸。红外光谱分析表明,LP-21和LP-22的硫酸根主要结合在岩藻糖C_4位,LP-3硫酸根主要结合在岩藻糖C_2或C_3位上。     

蛹虫草固体发酵培养基多糖的分离纯化及组成分析

为研究蛹虫草固体发酵培养基中多糖的分离纯化及组成,本实验利用水提醇沉法与Sevage法相结合,得到蛹虫草固体发酵培养基粗多糖(CMSMP).经DEAE-cellulose 52柱层析分离得到纯化蛹虫草固体发酵培养基多糖组分(CMSMPI)后,采用紫外光谱、醋酸纤维素薄膜电泳和Sephadex G-150凝胶柱层析鉴定其纯度,高效液相色谱及红外光谱分析其组成、结构.结果表明,CMMSP1为均一多糖,且由木糖、阿拉伯糖和葡萄糖三种单糖组成.同时红外光谱显示,CMSMP1具有典型多糖吸收峰.     

低分子量南瓜多糖的提取、纯化及结构初步研究

采用水浸提法提取低分子量南瓜粗多糖.通过DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和sephacryl s-100 HR凝胶过滤层析得到南瓜低分子量多糖(LwPP-Ia),通过高效液相色谱测定了LWPP-Ia的纯度,显示为单一峰,分子量为6267Da.运用高效液相离子色谱测定了单糖组成,为葡萄糖(27.75%)、果糖(7.70%)、半乳糖(9.12%).紫外扫描显示无蛋白、核酸杂质.红外光谱鉴定表明含有多糖的特征吸收峰,并含有吡喃糖环.     

发芽糙米中粗多糖的纯化及分子量测定

本文对发芽糙米粗多糖进行纯化,通过比较活性炭吸附法、过氧化氢氧化法、大孔树脂吸附法三种方法的脱色效果,以及Sevage法、三氯乙酸法、酶与Sevage结合方法三种方法的脱蛋白效果,筛选出发芽糙米粗多糖脱色、脱蛋白的最佳方法。分别比较了DEAE-Sepharose CL-6B、DEAE Fast Flow、DEAE Sepharose 52三种柱层析填料对糙米粗多糖的层析纯化效果,筛选出最优填料。并对纯化后的发芽糙米多糖各组分进行分子量的测定。结果表明:大孔树脂AB-8对发芽糙米粗多糖脱色效果最佳,脱色率为86.57%,多糖损失率为28.96%。酶-Sevage法脱蛋白效果较好,且多糖损失率低,脱蛋白率为74.36%,多糖损失率为14.09%。对发芽糙米多糖进行柱层析的最佳填料为DEAE-Sepharose CL-6B。根据线性回归方程计算其平均分子量,水洗多糖组分的平均分子量为1.47×105 Da,盐洗多糖组分的平均分子量分别为9.62×105、5.59×106、3.15×105 Da。结论:确定了针对发芽糙米粗多糖的去除蛋白质和脱色的方法,并筛选出最佳的柱层析填料,分离出四个组分发芽糙米多糖,为发芽糙米粗多糖的提取、纯化、分离逐渐转变为工业化生产提供了理论基础。     

冬虫夏草多糖单糖组成及免疫活性研究

以鲜冬虫夏草为原料,采用水提醇沉、Sevag法脱蛋白制备鲜冬虫夏草粗多糖(FCSP),通过苯酚硫酸法、考马斯亮蓝法、高效凝胶渗透色谱联用蒸发光散射检测器(HPGPC-ELSD)、傅立叶红外变换光谱(FT-IR)及离子色谱-脉冲安培检测器联用法(HPAEC-PAD)对FCSP的纯度、分子量分布、单糖组成进行分析,并考察FCSP刺激巨噬细胞增殖和释放NO、TNF-α的免疫活性。结果表明,粗多糖FCSP由葡萄糖(59.13%)、甘露糖(21.73%)和半乳糖(19.14%)三种单糖组成,且含有1.186×104 kDa(3.510%)、1.070×103 kDa(24.232%)和2.115×10 kDa(72.258%)三个多糖组分;体外细胞实验表明,FCSP可显著增强巨噬细胞增殖活性,有效刺激细胞释放NO和TNF-α(P<0.05)。FCSP良好的免疫调节作用可为后期药品的开发以及冬虫夏草新资源食品的申报提供参考。     

荞麦叶黄酮的提取工艺优化及其抗氧化性

为了对荞麦叶黄酮的提取和抗氧化性进行研究,采用响应面法对超声波法辅助提取荞麦叶黄酮的工艺进行了优化,高效液相色谱（HPLC）法分析了荞麦叶黄酮成分,并对荞麦叶黄酮的抗氧化性进行了测定。结果表明:当超声频率45 kHz、超声功率100 W、液料比30:1 mL:g、超声时间22 min,超声温度为28 ℃,乙醇体积分数为51%时,荞麦叶黄酮的提取量为80.311 mg/g,与预测值81.414 mg/g相对误差为1.35%,表明该模型预测值与实际值拟合效果良好。HPLC检测表明,荞麦叶黄酮的主要成分为芦丁和槲皮素,其含量分别为66.5%和13.9%。抗氧化试验表明,荞麦叶黄酮对DPPH自由基（DPPH·）、ABTS自由基（ABTS+·）和羟基自由基（·OH）的半清除浓度（IC₅₀）分别为0.012、0.044、0.344 mg/mL,表明其具有较强的抗氧化能力。本试验为荞麦叶的综合利用提供了理论依据。     

酵母细胞壁多糖分子量分布和结构的初步分析

以啤酒酵母细胞壁多糖为研究对象,比较了Sevage法和三氯乙酸(TCA)法脱蛋白效果,利用凝胶渗透色谱法(GPC)测定了细胞壁多糖的分子量分布,用葡聚糖凝胶G-100对多糖进行了纯化,最后用红外光谱法分析了多糖组分D的结构,结果表明:Sevage法脱蛋白效果较好,GPC测定结果得出酵母细胞壁多糖有5个组分,其重均分子量为1.31745×105、7.0863×104、3.6988×104、1.8277×104、8.342×103。红外光谱分析得出多糖组分D在890.51cm-1和808.48cm-1有特征吸收,为β-D-吡喃型结构,在844cm-1处没有吸收峰,不含有或含有少量的α-型糖苷键。     

赤灵芝多糖分离纯化及体外抗氧化性研究

对赤灵芝多糖进行分离、纯化和体外抗氧化性研究。从赤灵芝中提取粗多糖,通过离子交换色谱、葡聚糖凝胶色谱对粗多糖进行分离纯化,采用凝胶渗透色谱、气相色谱进行分子量和单糖组成测试,对GLPa-2、GLPb-1、GLPc 3个级分进行了体外抗氧化性研究。结果表明,3个多糖级分主要由葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖组成,但单糖的摩尔比不同;GLPa-2、GLPb-1、GLPc的重均分子量分别为3.65×10~5,3.87×10~4,1.38×10~4 Da;各样品对自由基的清除率随浓度升高而增大,呈量效关系,分子量最大的GLPa-2抗氧化活性最佳,表明赤芝多糖的抗氧化活性与其组成相关。     

黄伞子实体多糖PAP2的分离纯化及其结构初步鉴定

从黄伞子实体中提取出水溶性粗多糖,经DEAE Sepharose Fast Flow和SuperdexTM 200柱层析分离纯化得到一种多糖组分PAP2。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)检测其为均一多糖组分,平均分子质量为2.1×106u;经高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ESLD)检测表明PAP2主要由葡萄糖组成;结合红外光谱、核磁共振1H NMR和13C NMR分析表明,黄伞子实体多糖PAP2是一种α-D-吡喃葡聚糖,主链为1-4糖苷键,存在1-6糖苷键的支链。     

产胞外多糖乳杆菌的筛选及多糖功能的研究

本论文从大连地区海产品消化腺中筛选产胞外多糖(EPS)的乳杆菌属菌株,并研究其所产EPS的功能特性,选出一株目标菌,对其EPS分离纯化,测定纯化后各多糖组分的相对分子量。获得EPS产量相对较高的菌株经16S r RNA序列测定鉴定为Lactobacillus plantarum subsp.plantarum-4,Lactobacillus plantarum-12,Lactobacillus plantarumsubsp.plantarum-49;对3株植物乳杆菌及其EPS进行清除DPPH自由基的测定,Lactobacillus plantarum-12的EPS浓度为0.5 mg/mL时,清除率为48.82±3.88%,显著高于另外2株菌(p0.05);测定植物乳杆菌的EPS抑制E.coli ATCC25922在HT-29细胞上的粘附效果,Lactobacillus plantarum-12的EPS浓度为0.2mg/mL时,抑制率为78.23%±2.46%,显著高于另外两株菌(p0.05);Lactobacillus plantarum-12的EPS可显著抑制E·coli ATCC25922刺激HT-29细胞产生IL-8(p0.05)。Lactobacillus plantarum-12的EPS经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱、Sepharose CL-6B凝胶柱和Sephacryl HR S200凝胶柱层析分离得到两组分,测定两组分的相对分子质量分别为8.5×10~4 u和7.4×10~4 u。     

Purification and identification of a novel heteropolysaccharide RBPS2a with anti-complementary activity from defatted rice bran

A novel heteropolysaccharide RBPS2a with anti-complementary activity was obtained from defatted rice bran by hot water extraction, ethanol precipitation, and purified by gel chromatography after anion-exchange chromatography. This fraction exhibited more potent anti-complementary activity than other polysaccharide fractions. RBPS2a was eluted as a single symmetrical narrow peak on high-performance gel-permeation chromatography (HPGPC) and the average molecular weight was 90,000 Da. We found RBPS2a contained 86.7% polysaccharide and 8.7% protein. The amino acid pattern showed that RBPS2a contained large amount of glutamic acid, arginine, aspartic acid, lysine, and alanine. The molar content of the above five amino acids constituted 59.31% of the total amino acids. Gas chromatography of absolute acid hydrolysate of RBPS2a suggested that it was composed of arabinose, xylose, glucose and galactose with a molar ratio of 4:2:1:4. The Fourier-transform infrared spectra (FT-IR) and ¹H, ¹³C NMR spectroscopy analysis revealed that RBPS2a had a backbone consisting of β-(1→3)-linked d-galacopyranosyl residues substituted at O-2 with glycosyl residues composed of α-d-xylose-(1→4)-α-d-arabinose-(1→ and α-d-glucose-(1→4)-α-d-arabinose-(1→ linked residues. Furthermore, some of the fractions extracted and purified from defatted rice bran exhibited strong anti-complementary activity. Among these fractions, the purified polysaccharide RBPS2a had the highest activity.     

潮汕沿海龙须菜的营养成分和多糖组成分析

对南澳海域龙须菜的营养成分及其活性多糖的组成进行了分析。结果表明,龙须菜粗蛋白、总糖、粗脂肪、粗纤维、灰分含量分别为(%):19.14、43.76、0.5、4.8、28.77,并富含人体八种必需氨基酸和牛磺酸及Fe、Zn等必需微量元素;其多糖含量为31.05%,用DEAE-纤维素离子交换柱层析,可从热水提取的多糖中分离出3个级分;化学分析、纸层析和红外光谱分析表明龙须菜多糖主要由D-半乳糖和3,6-内醚-L-半乳糖组成的含有β-糖苷键的硫酸多糖,但各级分3,6-内醚-L-半乳糖及硫酸基含量相差较大;该多糖的主要组分是低浓度NaCl洗脱的由55.8%D-半乳糖和42.1%3,6-内醚-L-半乳糖以及9.12%硫酸基构成的。     

黄秋葵多糖的提取、分离及其体外结合胆酸盐能力的分析

探讨黄秋葵结合胆酸的有效组分的分离纯化,通过水提醇沉提取黄秋葵粗多糖(raw polysaccharide,RPS),经DEAE-纤维素阴离子交换层析柱分离得到3种多糖洗脱组分E1、E2和E3;对3种组分的体外结合胆酸能力进行分析。结果显示： 组分E1和E2有较高的胆酸结合能力,分别为参照药物消胆胺的10.82%和10.60%,黄秋葵多糖体外结合胆酸作用较强。     

灵芝发酵麸皮粗多糖的组成及抗氧化活性分析

为研究灵芝发酵麸皮粗多糖组成及抗氧化活性,对比分析了灵芝发酵前后麸皮粗多糖的体外抗氧化活性和组分,并通过高效液相色谱、傅里叶红外光谱初探灵芝发酵麸皮粗多糖的结构。结果表明:灵芝发酵麸皮粗多糖（GWBP）在4.0 g/L浓度下的DPPH、羟基自由基清除率和还原力分别为91.37%、95.74%和0.92,显著高于未发酵麸皮粗多糖（WBP）（P<0.05）。GWBP组分中黄酮、多酚、蛋白含量分别为5.41、12.74和206.41 mg/g,显著高于WBP（P<0.05）。GWBP是一种吡喃糖,主要由葡萄糖、木糖和核糖等组成,分子量为4.172×103 Da。灵芝液态发酵可以提高麸皮粗多糖的抗氧化活性,改变粗多糖的组成成分。本研究为灵芝发酵麸皮粗多糖天然抗氧化的开发提供参考。