人参香皂中人参总皂苷含量的测定

采用超声提取法对人参香皂中的人参总皂苷进行提取,溶剂萃取法对人参总皂苷进行纯化,用香草醛-高氯酸比色法对纯化后样品进行了人参总皂苷含量的测定,检测波长为540 nm。实验结果表明,香草醛-高氯酸比色法在0.02~0.24 mg内线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率为96.04%,RSD为2.29%(n=5)。所测6种人参香皂中人参总皂苷的质量分数为1.72~9.66 mg·g-1。     

人参柔顺洗发水中人参皂苷的鉴别和含量测定

建立了人参柔顺洗发水中人参皂苷Rg1,Re和Rb1的鉴别和含量测定方法.采用薄层色谱(TLC)法,以氯仿-甲醇-水(体积比2∶1∶0.1)为展开溶剂,对人参皂苷进行鉴别;通过高效液相色谱(HPLC)法,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,测定洗发水中人参皂苷的含量.结果显示TLC法能同时鉴别人参皂苷Rg1,Re和Rb1;HPLC法中人参皂苷Rg1,Re和Rb1的线性回归方程分别为Rg1∶y=246 683x -7 070.6,r=0.999 9;Re∶y=388 224x - 11 320,r=0.999 9;Rb1∶y=216 383x+3 644.9,r=0.999 9;平均回收率分别为99.69％,97.39％和98.05％,RSD值分别为1.62％,1.75％和0.68％.     

人参皂苷的提取和精制工艺研究

以西洋参茎叶为原料，索氏提取法提取西洋参茎叶原料中人参皂苷，并采用高氯酸比色法，以人参皂苷标准品Re为对照品，分析西洋参茎和叶中人参皂苷的含量。结果表明，叶中人参皂苷的含量明显高于茎。故以叶为原料，研究不同的提取和精制工艺。结果表明：超声波提取人参皂苷提取率较水煎煮提取大。比较大孔树脂吸附和溶剂萃取两种不同精制工艺，正丁醇溶剂萃取精制得到的人参皂苷含量较大孔树脂吸附大，其人参皂苷提取率较大孔树脂吸附高，再经Al2O3脱色，得到西洋参叶人参皂苷含量均在90％以上。     

HPLC法测定红参中人参皂苷Rg1的含量

建立红参药材中人参皂苷Rg1的含量测定方法。利用高效液相色谱(HPLC)法测定红参中人参皂苷Rg1的含量,采用Ulitimate XB-C18(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相∶乙腈-水(23∶77);柱温:室温;流速:0.7 m L·min-1;检测波长:203 nm;进样量为10μL。人参皂苷Rg1的线性回归方程为A=438355.8C-1328.9(r=0.9999)。人参皂苷Rg1在0.1~5μg范围内呈良好的线性关系。人参皂苷Rg1的平均回收率为103.6%,RSD为1.581%。采用此法测定红参中人参皂苷Rg1的含量,准确可靠,可用于该药材的质量控制。     

田间条件下二甲戊灵在人参土壤中的消解动态及对人参根部皂苷的影响

[目的]以3年生人参作为研究对象,对其喷施不同剂量的二甲戊灵,检测二甲戊灵在田间条件下生长的人参土壤中的消解动态以及最终在植物样品(人参根部)中的残留量,同时检测二甲戊灵对人参根部皂苷的影响。[方法]用乙酸乙酯对土壤和样品进行提取,Florisil-SPE净化柱进行净化,气相色谱-质谱联用进行检测;人参皂苷含量使用高效液相色谱进行检测。[结果]二甲戊灵有良好的线性关系,在土壤中回收率为84.27%～102.37%,RSD为2.69%～4.24%;在人参根中回收率为84.94%～101.79%,RSD为1.68%～2.35%。4种剂量的二甲戊灵在土壤中消解动力学方程符合一级动力学方程,半衰期分别为23.18、9.50、18.83、18.67 d。采收期人参根部未检测出二甲戊灵的残留。在采收期时,人参根部皂苷Rg1的含量上升,而Rb1的含量下降。[结论]二甲戊灵在参地土壤中属于易降解农药。     

人参皂苷的提取和精制工艺研究

以西洋参茎叶为原料,索氏提取法提取西洋参茎叶原料中人参皂苷,并采用高氯酸比色法,以人参皂苷标准品Re为对照品,分析西洋参茎和叶中人参皂苷的含量。结果表明,叶中人参皂苷的含量明显高于茎。故以叶为原料,研究不同的提取和精制工艺。结果表明:超声波提取人参皂苷提取率较水煎煮提取大。比较大孔树脂吸附和溶剂萃取两种不同精制工艺,正丁醇溶剂萃取精制得到的人参皂苷含量较大孔树脂吸附大,其人参皂苷提取率较大孔树脂吸附高,再经A l2O3脱色,得到西洋参叶人参皂苷含量均在90%以上。     

超临界CO2萃取人参叶中人参总皂苷的工艺研究

目的：应用Box-Benhnken响应曲面设计优化超临界CO₂萃取人参叶中人参叶总皂苷的工艺条件。方法：利用超临界CO₂技术提取人参叶中的总皂苷，采用紫外分光光度法对萃取物中总皂苷的含量进行测定，通过Box-Benhnken响应曲面设计进行多元线性回归和二项式拟合考察超临界CO₂萃取条件对人参总皂苷提取率的影响。结果：分光光度法测定波长为205 nm时，总皂苷质量浓度为0.0508～0.1016 mg/mL呈现良好的线性关系(r=0.9977)，超临界萃取条件萃取温度为40℃，萃取压力为20 MPa，物料粒度为80目，乙醇夹带剂含量为0.25 mL时，人参叶中的人参总皂苷平均提取率为15.89%，平行测定三次最高提取率为16.07%，相对标准偏差为1.53%。结论：采用超临界CO₂萃取人参叶中人参总皂苷，高效、环保、工艺稳定，适用于工业化推广。     

高效液相色谱法同时测定三七提取物中三七皂苷R1与人参皂苷Rg1、Rb1含量

建立了高效液相色谱法同时测定三七提取物中三七皂苷R1与人参皂苷Rg1、Rb1含量的方法。采用高效液相色谱仪,Agilent ODS-C18(5μm,4.6mm×250mm)液相色谱柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速为1.0 mL/mim,检测波长为203 nm,柱温为35℃。结果表明,三七皂苷R1在度15.29~244.60 mg/L的范围内(r=0.9998),人参皂苷Rg1在14.30~228.90 mg/L范围内(r=1.0000),人参皂苷Rb1在13.13~210.11 mg/L范围内(r=1.0000),线性关系良好。三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1平均加标回收率分别为99.54%、101.61%、102.99%,峰面积相对标准偏差RSD(n=6)分别为1.67%、0.93%、0.92%。该方法简便、准确,重现性好,可以对三七提取物中三七皂苷R1与人参皂苷Rg1、Rb1进行定量分析。     

乙醇体系中金属离子催化转化人参皂苷Rb1的研究

人参皂苷Rb1是人参中的主要皂苷之一,但人体吸收量极少,而其衍生物Rg3、Rk1、Rg5却易于人体吸收,但其制备和分离成本较高。针对以上问题将人参皂苷Rb1在50%乙醇水溶液体系和无水乙醇体系中进行催化条件的优化,并分析其产物。实验发现,通过对金属离子催化效果的筛选,选取NbCl₅为反应催化剂;在50%乙醇水溶液体系中最优条件下反应,Rg3得率为18.29%;在无水乙醇体系中最优条件下反应,Rg3得率为49.45%。根据两组反应产物的对比,推测在50%乙醇水溶液体系反应时,水可能供给电子基团,并生成更多水合化合物即20(S)-25-OH-Rg3和20(R)-25-OH-Rg3;在无水乙醇体系反应时,电子基团可能无法供给,形成双键,生成其他化合物即Rk1和Rg5。该发现为金属离子催化人参皂苷以制备稀有人参皂苷的方法奠定了理论基础。     

人参皂苷对骨髓间充质干细胞分泌干细胞因子的影响

目的探讨人参皂苷对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)分泌干细胞因子的影响。方法通过密度梯度离心法从健康志愿者抗凝骨髓中分离、培养BMSC,传代3代后,采用流式细胞术鉴定其细胞表型;MTT法检测不同浓度人参皂苷(50、100、150、200、300、400 mg/ml)作用不同时间(24、48、72、96 h)对BMSC增殖活性的影响;ELISA检测200 mg/ml人参皂甙作用不同时间(24、48、72 h)对BMSC分泌干细胞因子SCF-1和干细胞衍生因子SDF-1α水平的影响;RT-PCR法检测200 mg/ml人参皂甙作用24 h对BMSCSCF-1和SDF-1αmRNA转录水平的影响。结果第3代BMSC的CD44、CD29和CD105表达阳性,而CD34、CD45和HLA-DR表达阴性,BMSC的纯度为90%;BMSC与不同浓度的人参皂苷共培养不同时间,细胞的增殖活性均明显增强(P<0.05),200 mg/ml人参皂苷作用96 h细胞的增殖活性最高(P<0.05),但无明显的时间和剂量依赖性;人参皂苷对BMSC SCF-1和SDF-1α的分泌及mRNA的转录具有明显的促进作用。结论人参皂苷能增强BMSC分泌干细胞因子,有望应用于辅助干细胞治疗。     

人参皂苷的定向生物转化研究进展

稀有人参皂苷是人参的重要活性成分,但其含量极低或需经过肠道转化才能产生,工业生产中常通过去糖基、脱水等方法将常见人参皂苷转化为稀有人参皂苷。基于此,本文概述了人参皂苷的构效关系及常用转化方法,总结了微生物、酶法定向转化人参皂苷的最新进展,着重介绍了益生菌、食药用真菌转化人参皂苷制备功能食品,以及糖苷酶筛选和组合在提高人参总皂苷转化效率及产率等方面的研究进展;同时探讨了基因工程、溶剂工程、固定化酶等技术对人参皂苷转化效率、产率的影响,展望了蛋白质工程、合成生物学等方法在人参皂苷转化及合成方面的潜在应用价值,为稀有人参皂苷的规模化生产提供了基础。     

人参皂苷Rg3体外经皮渗透特性研究

研究人参皂苷Rg3体外经皮渗透特性以及不同促渗剂的影响。测定人参皂苷Rg3与经皮渗透相关的物理参数。通过扩散池试验,采用HPLC法测定人参皂苷Rg3的累积透过量(Q),拟合Q-t曲线,考察体外经皮渗透性能;测定β-环糊精、吐温-80、油酸、氮酮、薄荷油的增渗倍数(ER),考察不同促渗剂对人参皂苷Rg3经皮渗透性质的影响。人参皂苷Rg3的表观溶解度为66.70μg/mL,油水分配系数(logP)为2.63,熔点为312.2℃。人参皂苷Rg3经皮渗透为恒速过程;不同促渗剂对人参皂苷Rg3的促渗作用存在差异,薄荷油增渗倍数为2.38。人参皂苷Rg3体外释放符合零级过程,薄荷油对其促渗作用效果显著,可作为一种具有发展潜力的新型外用镇痛化合物。     

HPLC法同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1的含量

目的:采用HPLC法同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1含量。方法:采用SGE protecol C18(5μm,4.6×250mm)色谱柱,流动相为乙腈—水梯度洗脱(0~12min,19∶81;12~60min,19~36∶81~64),检测波长为203nm,流速1.0mL/min,进样量20μL。结果:人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1分别在25.625~430mg/L、26.875~410mg/L、10.625~170mg/L范围呈线性,相关系数r分别为0.9999、0.9998、0.9996;该方法重复性及回收率均符合要求。结论:本法用于同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1的含量,具有简便、准确、高效等特点。     

大孔吸附树脂对两种人参皂苷的竞争性吸附研究

人参皂苷Re和人参皂苷Rg1是天然产物人参提取物中重要的药用成分,具有多种药理作用。目前关于两种皂苷的分离纯化普遍采用大孔吸附树脂分离的方法。但由于两种皂苷结构相似,结晶分离纯化难度较大,尤其是在树脂吸附过程中存在竞争吸附问题。本文利用利用D101大孔吸附树脂考察了树脂吸附人参皂苷Re和Rg1混合物的动力学性能和竞争吸附作用,同时分析了吸附作用机理,为系统利用吸附树脂纯化天然产物提供技术参考。     

人参活性物质的提取及人参柔顺洗发水的研制

为优化人参活性物质Rg1、Re、Rb1的提取工艺,研制人参柔顺洗发水,采用L9（33）正交试验表设计人参皂苷的提取工艺,选用药粉目数、溶剂倍量、提取时间为考察因素,以人参皂苷Rg1、Re、Rb1为测定指标筛选最佳工艺参数;结合头发梳理测试,研究人参提取液在洗发水中的最佳添加量。结果发现：人参提取液最佳制备工艺为24目粉末,7倍量水,提取1 h;人参提取液在洗发水中的最佳添加量为15%。可以得出：人参活性物质———皂苷类成分的提取工艺方便且结果可靠,洗发水研制路线全面、合理,可为产业化生产提供实验数据。     

泡沫分离法分离人参皂苷

通过对浓缩倍数和收率的测定,考察了气速、pH值、进料浓度、进料量以及通气类型、操作方式等因素对人参皂苷泡沫分离效果的影响. 结果表明, 泡沫分离是分离浓缩人参皂苷的一种简便有效的方法.     

RP-HPLC-UV法测定清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg1、Rb1的含量

目的采用RP-HPLC-UV色谱法同时测定清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的含量影响。方法采用色谱柱:依利特C_(18)柱(Sinochrom ODS-BP,4.6mm×200mm,5μm),流动相采用A为乙腈,B为水,梯度洗脱,流速为1.0mL·min~(-1),进样量为10μL,检测波长为203nm,柱温25℃,理论塔板数大于6000。结果在100min内,人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1分离度良好,进样的含量与色谱峰面积具有良好的线性关系,人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的线性方程分别为:y=0.5752x-0.0961 (r=0.9994)、y=1.3157x-0.2006(r=0.9998)、y=0.6637x+0.2091(r=0.9997),人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的平均加样回收率分别是:101.08%(RSD=1.77%)、99.40%(RSD=2.55%)、100.11%(RSD=2.83%)。结论本文建立的含量测定方法快捷稳定可靠,加样回收率高,适用于清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的含量测定,为清心莲子饮的质量评价提供了理论支持和实验依据。     

人参活性成分对药物代谢酶和转运体的调控作用研究进展

人参的活性成分复杂,具有广泛的药理作用。临床应用时应当注意避免人参-药物相互作用和人参误用导致的毒副反应。人参对药物代谢酶和转运体的调控作用可能是其产生不良反应及人参-药物相互作用的重要原因。人参活性成分可以影响多种P450酶、UGTs酶和OATPs等转运体的活性。目前,对人参-药物相互作用相关的研究报道较少。本文查阅了近年来国内外人参对药物代谢酶及转运体调控作用的文献并进行归纳总结,综述了近几年来人参及其主要人参皂苷单体对药物代谢酶及转运体调控作用的研究进展。本文为人参的临床合理应用和人参-药物相互作用的预防提供了借鉴和参考,降低由人参及其活性成分引发的药物不良反应的可能性。     

人参皂苷对骨髓间充质干细胞通过旁分泌途径治疗心肌缺血的促进作用

目的探讨人参皂苷对骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cell,BMSC)通过旁分泌途径治疗心肌缺血的促进作用。方法从SD大鼠胫骨和股骨中分离培养BMSC,取第3代BMSC,流式细胞术检测细胞表面抗原CD44、CD45、CD34和CD29的表达。建立大鼠心肌缺血模型,将模型鼠随机分为模型组(每天常规喂食水)和人参皂苷组[每天常规喂食水及人参皂苷液(100 mg/100 ml),每日3次,100 ml/次],给药的同时,均经大鼠尾静脉缓慢注射BMSC悬液(1×105个/ml),1 ml/只,另设空白对照组(未建模的SD大鼠)。分别采集模型组建模后24、48、72 h及人参皂苷组建模后72 h的大鼠心脏血,分离血清,ELISA法检测血清中干细胞因子(stem cell factor,SCF)、干细胞衍生因子(stromal cell derived factor-1,SDF-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)的分泌水平。体外迁移试验检测不同浓度SDF-1(1、10、100 ng/ml)对BMSC迁移的影响;取各组大鼠建模后24、48、72 h的心肌组织提取液,检测其对BMSC及经SDF-1抑制剂AMD3100作用的BMSC迁移的影响。结果大鼠BMSC表面表达CD44、CD29,不表达CD34、CD45。模型组大鼠血清中细胞因子SCF、SDF-1、VEGF、CXCR4的分泌水平随建模时间延长显著上升,人参皂苷组大鼠建模后72 h血清中各细胞因子的表达水平均明显高于模型组(P<0.05)。SDF-1可显著增加BMSC的迁移数,且呈浓度依赖性(P<0.05);模型组和人参皂苷组大鼠心肌组织提取液作用BMSC的迁移数随建模时间的延长显著上升(P<0.05),两组相同时间点间差异有统计学意义(P<0.05);人参皂苷组72 h的大鼠心肌组织提取液作用的AMD3100处理的BMSC的迁移数明显低于模型组72 h(P<0.05)。结论人参皂苷能促进BMSC旁分泌作用,提高BMSC对心肌缺血性疾病的疗效,可作为治疗该疾病的辅助药物。     

高效液相色谱法定量分析竹节参中人参皂苷Rb1的含量

用RP-HPLC测定竹节参中人参皂苷Rb1的含量,采用Venusil ABS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm5,μm),以乙腈-水(35∶65)为流动相,流速1 mL/min,检测波长203 nm。结果表明,人参皂苷Rb1在25～500μg/mL间线性关系良好(r=0.999 4),平均加样回收率为99.64%,RSD=1.52%。该方法快速、准确、重现性好,可用于竹节参中人参皂苷Rb1的含量测定。