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相似文献
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1.
以巴戟天为原料,通过酶辅助浸提法提取多糖,采用化学和仪器分析法研究多糖的pH、相对黏度、溶解性、光谱特征、空间构像等理化性质,采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠ,COLⅠ)和骨钙素(osteocalcin,OCN)分泌量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,评价多糖提取物对成骨细胞增殖的影响。结果表明,巴戟天多糖属于酸性多糖,pH为6.15±0.13,相对黏度为1.26±0.12,具有糖的特性和三股螺旋结构,溶解性较好,不含蛋白质或多肽;巴戟天多糖提取物浓度为50 μg/mL时,MC3T3-E1细胞增殖率极显著增加(P<0.01),达149.67%,COLⅠ和OCN的分泌量极显著增加(P<0.01),分别增加44.98%和85.01%,ALP活性极显著提高(P<0.01),提高了258.95%。表明巴戟天多糖提取物能显著促进MC3T3-E1细胞增殖与分化。  相似文献   

2.
研究证实牛乳铁蛋白具有成骨活性功能,既能刺激成骨细胞增殖,也能诱导破骨细胞凋亡。骨骼的生长发育是一动态平衡的生物过程,是通过成骨细胞诱导的骨生成和破骨细胞诱导的骨吸收所调节的。采用成骨细胞MC3T3-E1细胞与破骨前体细胞RAW264.7细胞1∶1的比例直接接触的共培养方式,研究不同浓度(20、100、500μg/m L)的牛乳铁蛋白对共培养中成骨细胞和破骨细胞活性以及破骨细胞骨吸收功能的影响。首先,通过碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒检测共培养上清中的ALP活性,发现低浓度的牛乳铁蛋白能够抑制成骨细胞的ALP活性,而中高浓度的牛乳铁蛋白能够显著地促进成骨细胞的ALP活性。利用TRAP活性检测试剂盒及ELISA检测试剂盒,则发现低中浓度的牛乳铁蛋白能够促进破骨细胞的TRAP活性,而高浓度的牛乳铁蛋白能够显著地抑制破骨细胞的TRAP活性和共培养体系RANKL/OPG的比值。最后,通过骨吸收陷窝实验,证实了中高浓度组的牛乳铁蛋白能够显著地抑制破骨细胞的骨吸收功能。结果表明了高浓度的牛乳铁蛋白在共培养体系中不仅能够促进成骨细胞的活性,并且对破骨细胞具有抑制活性及功能的作用。  相似文献   

3.
以14种水产动物卵为原料,筛选出具有较高促前成骨MC3T3-E1细胞增殖活性的鲫鱼卵水溶性糖蛋白,采用响应面法优化了鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(Sialoglycoprotein of Carassius auratus eggs,Ca-SGP)的提取工艺,并评价Ca-SGP对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。结果表明,14种水产动物卵中,鲫鱼卵糖蛋白唾液酸含量最高,且对MC3T3-E1细胞增殖率最高,分别为5.76%和145.71%;采用单因素和响应面试验优化得到制备Ca-SGP的最优提取工艺为:NaCl浓度为0.38 mol/L、提取时间为4.2 h、液料比为1:3.88 w/v,在此条件下,Neu5Ac得率的预测值为592 mg/100 g,验证值为588.47 mg/100 g。Ca-SGP对骨形成作用的研究结果表明,Ca-SGP显著提高MC3T3-E1细胞增殖至135.56%,显著提高COL I、OCN和OPN的分泌量,分别提高到32.23、261.46和85.89 ng/mL,显著提高成骨细胞矿化能力至241.67%,说明Ca-SGP具有显著促骨形成作用(P<0.05)。以上研究为寻找安全、有效抗骨质疏松功能因子提供新途径。  相似文献   

4.
为探究玫瑰香葡萄果皮提取物(Grape skin extracts,GSE)对砷致雄性小鼠生殖毒性的影响,本文选昆明种纯系雄性小鼠,通过饮水摄入10 mg/L砷诱发小鼠生殖毒性,以4.5 mg/kg·BW的玫瑰香GSE灌胃干预砷毒性过程。60 d后检测发现,砷染毒组小鼠睾丸系数显著下降(P<0.05),睾丸组织结构出现病理性改变,精子质量和数量显著降低(P<0.05),睾丸组织中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性和还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量显著下降(P<0.05)、H2O2和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)浓度显著增高(P<0.05);与砷染毒组相比,GSE干预组小鼠睾丸系数升高,睾丸组织结构损伤减轻,精子总数显著升高、畸形率显著下降(P<0.05),睾丸组织SOD活性和还原型GSH含量显著升高、H2O2和MDA浓度显著降低(P<0.05)。结果表明,玫瑰香葡萄果皮提取物能缓解砷的雄性生殖毒性,提高小鼠睾丸组织的抗氧化能力,对雄性生殖功能有一定的保护作用。  相似文献   

5.
目的:研究鲫鱼卵唾液酸糖肽(Ca-SGPP)对成骨细胞MC3T3-E1骨形成活性及OPG/RANKL基因表达水平的影响。方法:在MC3T3-E1细胞中加入不同浓度的Ca-SGPP,采用MTT法、试剂盒和茜素红染色法检测Ca-SGPP对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响;利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测MC3T3-E1细胞骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、骨保护素(OPG)及核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因m RNA表达水平。结果:Ca-SGPP可显著促进MC3T3-E1细胞增殖及ALP、OCN和COL I的分泌,提高MC3T3-E1细胞矿化能力,上调其BMP-2表达水平及OPG/RANKL的比值,且分子质量大的糖肽效果更佳。结论 :CaSGPP具有促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的能力,其机制可能与OPG/RANKL比值上调有关。  相似文献   

6.
以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1、大鼠破骨细胞和大鼠为实验模型,通过测定碱性磷酸酶(ALP)活性、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、骨溶蚀陷窝和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)荧光染色等多种骨代谢生化指标,研究源于鸡蛋蛋黄的水解蛋黄粉改善骨代谢的生理作用机制。结果表明:水解蛋黄粉通过促进成骨细胞生长、抑制破骨细胞分化与破坏、提高骨端生长板细胞活性等机制改善骨代谢、促进骨骼生长。  相似文献   

7.
目的:从红虾副产物中提取虾肽,研究其促MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化及矿化的活性。方法:用MTT法检测不同浓度虾肽对MC3T3-E1成骨细胞存活率的影响;诱导成骨细胞分化,在3 d和7 d时,测定其碱性磷酸酶(ALP)活性,在7 d和14 d时,测定其细胞骨钙素(OCN)及Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)含量,21 d时茜素红染色测定细胞诱导培养矿化程度;采用qPCR和Western blot方法检测虾肽对OPG/RANKL/RANK信号通路中骨形成关键基因和蛋白OPG、RANKL以及RUNX2表达的影响。结果:虾肽质量浓度为0.02,0.05,0.1 mg/mL时,显著促进MC3T3-E1细胞的增殖;ALP、OCN及COL-Ⅰ的含量相较于对照组均增加,矿化结节面积显著增大(P <0.05);此外,虾肽上调了ALP、OCN、COL-Ⅰ基因的表达,促进OPG和RUNX2基因及蛋白表达的水平,抑制RANKL基因及蛋白表达的水平。结论:虾肽能促进MC3T3-E1成骨细胞增殖分化与矿化,激活OPG/RANKL/RANK信号通路,从而促进成骨细胞的分化及骨形成。  相似文献   

8.
采取动态吸附与洗脱单因素实验优化大孔树脂纯化熟地黄黄酮的工艺条件,并将动物小鼠随机平均分为空白对照组(0.1 mL/g 生理盐水)、阳性对照组(0.10 mg/g 西洋参)、低(0.05 mg/g)、中(0.10 mg/g)、高剂量(0.15 mg/g)纯化产物组,连续灌胃30 d后,对各组小鼠进行负重游泳试验,通过对负重游泳时间、肌糖原、肝糖原、血清中尿素氮、乳酸等指标的测定,考察熟地黄黄酮纯化产物对小鼠运动耐力的影响。结果表明,大孔树脂纯化熟地黄黄酮的最佳提取工艺为:pH为5,质量浓度为8 mg/mL的样品溶液60 mL,以2 mL/min流速,上样至H103大孔树脂饱和吸附后,采用150 mL 80%乙醇溶液,以1 mL/min流速洗脱,产物黄酮的含量由2.52%提高至12.18%。与空白对照相比,不同剂量的纯化产物可显著延长小鼠游泳力竭时间(P<0.05,P<0.01),提高体内肝、肌糖原的储备(P<0.05,P<0.01),加快乳酸代谢(P<0.05,P<0.01),并降低血清中尿素氮的生成(P<0.05,P<0.01),表明熟地黄黄酮有助于增强机体的运动耐力。  相似文献   

9.
目的 研究壳寡糖(chito-oligosaccharide,COS)和N-乙酰氨基葡糖(N-acetyl-glucosamine,NAG)对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1的作用.方法 分别将NAG、COS以10,100,500,1 000,2 000 mg/L的浓度加入培养基中,通用MTT法观察它们对体外培养的成骨细胞的作用.结果 NAG的5个浓度梯度均能促成骨细胞增生,以1 000 mg/L的效果最为明显,COS的5个浓度都有较明显的促细胞增生的作用,以500 mg/L为最适浓度.结论 NAG和COS对体外培养的成骨细胞均有一定程度的促增生作用,其机制有待进一步研究.  相似文献   

10.
目的 研究壳寡糖(chito-oligosaccharide,COS)和N-乙酰氨基葡糖(N-acetyl-glucosamine,NAG)对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1的作用.方法 分别将NAG、COS以10,100,500,1 000,2 000 mg/L的浓度加入培养基中,通用MTT法观察它们对体外培养的成骨细胞的作用.结果 NAG的5个浓度梯度均能促成骨细胞增生,以1 000 mg/L的效果最为明显,COS的5个浓度都有较明显的促细胞增生的作用,以500 mg/L为最适浓度.结论 NAG和COS对体外培养的成骨细胞均有一定程度的促增生作用,其机制有待进一步研究.  相似文献   

11.
目的 分析鲣鱼鱼卵营养成分组成,优化鲣鱼鱼卵糖蛋白(Katsuwonus pelamis roe glycoprotein, TGP)制备工艺,并考察其对MC3T3-E1成骨细胞增殖活性的影响。方法 采用食品安全国家标准方法测定鲣鱼鱼卵基本营养成分及其氨基酸、脂肪酸和胆固醇含量;以糖蛋白得率为评价指标,采用单因素实验结合响应面法研究优化TGP制备工艺;应用细胞毒性检测试剂盒(cell counting kit-8, CCK-8)检测TGP对MC3T3-E1细胞增殖活性的影响。结果 鲣鱼鱼卵中水分含量(72.79±0.33) g/100 g,蛋白质含量(21.09±0.03) g/100 g,脂肪含量(3.91±0.06)g/100g,灰分含量(1.50±0.01)g/100g,总糖含量(0.50±0.01)g/100g。鱼卵中氨基酸总量(727.38±8.77) mg/g,其中必需氨基酸占39.42%,鲜味氨基酸占30.68%,且谷氨酸含量最高(84.61±0.98) mg/g。鱼卵中含有17种脂肪酸,其中二十二碳六烯酸(docosahexaenoi cacid,DHA)和二十碳五烯酸...  相似文献   

12.
目的:优化龟甲蛋白提取工艺,筛选龟甲促成骨细胞(MC3T3-E1)增殖活性组分。方法:以蛋白含量及对MC3T3-E1细胞增殖率为指标筛选龟甲蛋白提取方法;以料液比、提取温度、时间为自变量,龟甲蛋白含量为因变量,进行单因素提取研究,结合响应面试验设计,获得提取龟甲蛋白最佳工艺;通过超滤技术将龟甲蛋白按分子量分为5个不同组分:总提组分(组分1),Mw>10 kDa组分(组分2),Mw:3~10 kDa组分(组分3),Mw:1~3 kDa组分(组分4),Mw<1 kDa组分(组分5),CCK8法测定不同浓度龟甲蛋白(12.5、25、50、100、200 μg/mL)及其不同组分对MC3T3-E1细胞增殖率的影响。结果:磁力搅拌方法得到的龟甲蛋白含量最高,且活性最佳,龟甲蛋白最佳提取条件为料液比1:13(g/mL)、提取温度30℃、提取3 h,此条件下测得龟甲蛋白含量为15.16%;龟甲蛋白不同组分均能促进MC3T3-E1前成骨样细胞增殖,并呈浓度依赖性,在浓度为200 μg/mL时,组分1~5对细胞的增殖率分别为20.58%、25.30%、30.24%、37.89%、38.15%,分子量小于1 kDa的组分促MC3T3-E1细胞增殖活性最佳。结论:本研究为龟甲蛋白的制备工艺提供参考,并证明龟甲蛋白及其不同组分均具有较好的促成骨细胞增殖活性,其中分子量小于1 kDa组分对MC3T3-E1细胞增殖的效果最佳。  相似文献   

13.
为了探讨微波辐射预处理提取花叶滇苦菜总黄酮的工艺优化及其总黄酮提取液乙酸乙酯萃取物的抑菌活性,在单因素实验基础上,采用正交试验定总黄酮提取最佳工艺;参照CLSI标准测定乙酸乙酯萃取物对铜绿假单胞菌(ATCC9027)、铜绿假单胞菌耐药菌(PA1)、金黄色葡萄球(ATCC29213)、金黄色葡萄球菌耐药菌(SA1)、大肠杆菌(ATCC25922)等5种细菌的抑菌活性。结果表明,花叶滇苦菜地上部分总黄酮提取的最佳工艺为:微波辐射时间为120 s,微波功率为350 W,乙醇浓度为60%,水浴温度70℃,料液比1:40 g/mL,水浴时间为60 min,此时,黄酮得率为38.328 mg/g。地下部分总黄酮提取的最佳工艺为:微波辐射时间为90 s,微波辐射功率为490 W,乙醇浓度为70%,料液比1:30 g/mL,水浴温度为80℃,水浴时间为90 min,其黄酮得率为7.232 mg/g。乙酸乙酯萃取物具备一定抑菌活性,对金黄色葡萄球菌耐药菌的MIC分别为4(地上部分)和8 mg/mL(地下部分)。当浓度低于16 mg/mL时,对铜绿假单胞菌、铜绿假单胞菌耐药菌和大肠杆菌均无抑制作用。微波辐射预处理对花叶滇苦菜总黄酮的提取具有指导意义,总黄酮提取液乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用。  相似文献   

14.
目的:用网络药理学方法,探讨人参、桑椹单味药与药对的水提物、醇提物改善骨质疏松症作用的分子机制。方法:观察人参、桑椹单味药与药对的水提物、醇提物对小鼠睾丸间质细胞(TM3)增值率及睾酮分泌影响和药对的水提物及醇提物对成骨细胞(MC3T3-E1)增值率及碱性磷酸酶(ALP)活力的影响。通过中药成分数据库TCMSP、GeneCards、OMIM数据库分别收集人参、桑椹化学成分及成分与疾病相关靶点,取交集后,运用STRING数据库分析关键靶点间的蛋白相互作用,利用DAVID数据库进行生物功能和通路分析;相关结果采用Cytoscape 3.7.0进行构图和网络拓扑结构分析;并应用Autodock软件对潜在药效物质和关键靶点进行分子对接。结果:TM3给药组与模型组比较,药对各浓度细胞增殖率极显著高于单味药各浓度值,且呈浓度依赖性,其中浓度为200 μg/mL时增殖率最高,增殖率分别是97.31%、91.67%(P<0.01),睾酮分泌量分别是3.48、3.06 ng/mL。MC3T3-E1给药组与空白组比较,细胞增殖率明显升高。在药对水提物给药组中200 μg/mL浓度细胞增殖率最高,增殖率为155%;醇提物给药组中100 μg/mL时细胞增殖率最高,增殖率为142.8%;ALP分析结果显示药对水提物给药组及醇提物组均具有明显升高效果。本研究共收集到28个活性成分,69个关键靶点,GO功能富集收集到257个生物过程,34个分子功能,62个细胞组分;KEGG通路富集共收集到109条通路;分子对接结果显示,潜在药效物质与关键靶点IL6、ALB、MAPK8、CASP3对接结果能量低于0 kcal/mol。结论:本文揭示了人参-桑椹药对改善骨质疏松症可能的潜在药效物质和作用靶点,为人参-桑椹的开发和后续研究打下了基础。  相似文献   

15.
目的:比较研究不同蕨菜制品醇提取物的体外抗氧化和降血糖活性。方法:分别采用Folin-Ciocalteu法、NaNO2 -Al(NO33法测定总酚和总黄酮含量;通过DPPH法、ABTS法、普鲁士蓝法、α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制活性评价体外抗氧化、降血糖活性;Pearson法分析成分含量与活性的相关性。结果:不同蕨菜醇提物的总酚和总黄酮含量、抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性差异显著。其中鲜品醇提取物的总酚、总黄酮含量最高,分别可达(593±3.45)mg GA/g、(156.75±1.28)mg RT/g,且鲜品醇提取物铁离子还原能力、ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力最强;湿品醇提取物对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶的抑制作用最强。不同蕨菜醇提取物总酚、总黄酮的含量与其抗氧化活性均呈极显著正相关关系(P<0.01),与降血糖活性均呈显著正相关关系(P<0.05)。结论:蕨菜鲜品抗氧化活性较强,湿品降血糖活性较强,可能活性成分为多酚类和黄酮类成分。  相似文献   

16.
采用响应面分析法对辣木叶黄酮的超声提取工艺进行优化。以乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度为考察因素,总黄酮得率和氧自由基吸收能力(ORAC)值为响应值,进行四因素三水平的Box-Behnken实验设计,最优条件:乙醇浓度70%,料液比1∶27(g/m L),提取时间46 min,提取温度50℃,在此条件下,总黄酮得率为(48.93±0.44)mg RE/g,ORAC值为(2747.17±301.51)μmol TE/g,与预测值(49.23 mg RE/g,2853.99μmol TE/g)的误差为0.6%和3.7%。采用聚酰胺树脂对辣木叶黄酮粗提物进行纯化,纯化后黄酮含量为65.89%,ORAC值为(5923.48±228.65)μmol TE/g,且纯化前后均表现出较强的DPPH和ABTS自由基清除能力,其EC50值分别为0.45、0.10 g/m L和0.26、0.05 mg/m L。结果表明超声提取是一种高效的提取辣木叶黄酮方法;聚酰胺树脂可有效提高辣木叶提取物中的黄酮含量并显著提高其抗氧化性。   相似文献   

17.
This study was performed to evaluate the effects of skullcap (Scutellaria baicalensis Georgi, SBG) on differentiation of RAW 264.7 cell into osteoclast-like cells and bone resorption of mature osteoclast to propose candidates for the prevention or treatment of osteoporosis. In the screening of 140 natural products, the selected SBG methanol extract dramatically reduced tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) activity to 21% at 10 μg/mL. The proliferation was evaluated using the MTT assay, and the survival rates of RAW 264.7 cells treated with 10–100 μg/mL extract were over 80% with most concentrations. The chloroform fraction from SBG (SBG-C) decreased TRAP activity. The SBG-C increased the expression of the pro-apoptotic protein Bax and reduced the expression of the anti-apoptotic protein Bcl-2. It also stimulated caspase-3 activity in osteoclasts. In addition, the actin rings were loose and fuzzy in the presence of these fractions. A resorption pit was formed by multinucleated osteoclastic cells, but was not observed in the presence of the SBG-C (10 μg/mL). In conclusion, we found SBG suppressed osteoclast differentiation and bone resorption. It also inhibited osteoclast survival. Therefore SBG is expected to be a natural source for the development of functional food and medical agents to prevent or treat osteoporosis.  相似文献   

18.
目的:为探索适宜分离和纯化桑白皮多糖的大孔树脂,研究其最佳纯化工艺参数。方法:通过静态吸附-洗脱试验对十种不同型号大孔树脂(H103、HP20、AB-8、X-5、D-101、DM301、DA-201、NKA-9、HPD-722、HPD300)的吸附量、吸附率及解吸率进行考察,优选最佳纯化树脂,并研究了上样液pH、上样质量浓度、上样速度、洗脱剂体积分数、洗脱剂用量及洗脱流速对其纯化工艺的影响,确定最佳纯化工艺参数。结果:D-101型为最优树脂,最佳上样条件为:pH=3.0、上样浓度为4.0 mg/mL、上样速度为2.0 BV/h;最佳洗脱条件为:75%的乙醇洗脱液、洗脱剂用量为3.5 BV、流速为1.0 BV/h。经过该工艺纯化后,桑白皮中多糖的纯度由16.12%±1.20%提高到了74.45%±1.15%。结论:D-101型大孔树脂能够很好的富集、纯化桑白皮中的多糖,为更高效的利用桑白皮资源提供了理论依据。  相似文献   

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