牛至精油对腐生葡萄球菌抑制作用机制

为研究牛至精油对腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)的作用机制,本实验采用琼脂平板打孔法,通过抑菌圈直径确定牛至精油对腐生葡萄球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),由微生物生长曲线、电导率、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、紫外物质吸收与扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)观察来综合评价牛至精油对腐生葡萄球菌的作用效果。结果:牛至精油对腐生葡萄球菌的MIC为0.25%,菌体经MIC与2 MIC牛至精油处理后,其进入对数生长期的时间明显延滞,菌体内容物大量外泄,胞外AKP与LDH活力明显提高,菌体生长受到影响,其作用效果与处理的体积分数呈正相关。同时,菌体细胞壁与细胞膜的结构发生改变,扫描电子显微镜观察结果表明腐生葡萄球菌经MIC牛至精油处理6 h后,菌体发生变形;而经2 MIC牛至精油处理后,其表面破裂、外膜剥落,最终导致菌体死亡。因此,牛至精油通过破坏腐生葡萄球菌菌体细胞壁与细胞膜的完整性来发挥其抑菌作用。     

肉桂精油对成团泛菌和腐生葡萄球菌的抑菌活性及其机理

本文利用滤纸片法和二倍稀释法分别测定了肉桂精油对成团泛菌及腐生葡萄球菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)以及最小杀菌浓度(MBC)来评估肉桂精油对其的抑菌活性,通过扫描电镜、透射电镜探究肉桂精油对成团泛菌和腐生葡萄球菌的形态影响,以及通过测定细胞膜的通透性、细胞膜的完整性和膜电位来共同阐释肉桂精油对两种菌活性抑制的机理。结果表明肉桂精油对成团泛菌和腐生葡萄球菌的生长均有较强的抑制作用,且对腐生葡萄球菌的抑菌作用明显强于成团泛菌的抑制作用;肉桂精油改变细胞的形态、增加膜的通透性、破坏了膜的完整性、并造成了细胞内容物的泄露、膜电位的降低,从而导致细菌的死亡。     

银杏叶提取液对腐生葡萄球菌的作用机理

为研究银杏叶提取液对水产品特定腐败菌--腐生葡萄球菌的作用机理,作者采用肉汤稀释和平板计数法测定其对腐生葡萄球菌的最小抑菌浓度(Minimal Inhibitory Concentration, MIC),并通过细菌生长曲线、碱性磷酸酶量、电导率与蛋白质质量浓度,综合评价银杏叶提取液对腐生葡萄球菌菌体生长、细胞壁和细胞膜通透性、完整性的影响;由扫描电镜观察不同处理浓度的银杏叶提取液对腐生葡萄球菌菌体的作用效果。结果得出:银杏叶提取液对腐生葡萄球菌的MIC为100 mg/mL;MIC与2MIC质量浓度下银杏叶提取液对腐生葡萄球菌的抑菌率分别为60.58%和81.34%。提取液作用于腐生葡萄球菌后,菌体生长受到抑制,细胞壁完整性被破坏,细胞膜通透性随之提高;由扫描电镜观察表明,银杏叶提取液处理后的腐生葡萄球菌出现细胞变形、胞间粘结等现象,菌体结构受到影响,最终得出银杏叶提取液主要通过对其菌体细胞膜和细胞壁的破坏实现其抑菌效果。     

茶多酚-肉桂精油复合保鲜剂抗氧化活性及抑菌作用

为了研究茶多酚-肉桂精油复合保鲜剂抗氧化活性和对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。采用体外抗氧化法测定了复合保鲜剂抗氧化能力。通过抑菌圈大小确定抑菌效果和最小抑菌浓度(MIC),结合抑菌活力、细菌生长曲线、细胞壁完整性和细胞膜通透性,综合评价复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的影响。结果表明,复合保鲜剂清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的IC50分别为4.02μg/m L、9.15μg/m L、0.61 mg/m L。复合保鲜剂能够有效抑制金黄色葡萄球菌的生长,MIC为0.5 mg/m L,且能够破坏细胞壁和细胞膜。综上所述复合保鲜剂具有很强的抗氧化活性,对金黄色葡萄球菌有很好的抑菌效果,其可能的抑菌机理是破坏细胞壁,影响细胞膜的通透性。     

复合保鲜剂对腐生葡萄球菌的抑菌活性及其作用机理

以山梨酸钾、双乙酸钠和异抗坏血酸钠作为复合保鲜剂的基本成分,研究其对虾皮中腐生葡萄球菌的抑菌作用。通过酶标法来确定复合保鲜剂对腐生葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC),测定抑菌活力、细菌生长曲线、细胞膜完整性、碱性磷酸酶(AKP)含量等指标,并结合细菌超微结构观察,综合评价复合保鲜剂对腐生葡萄球菌的作用效果。结果表明:复合保鲜剂能明显降低腐生葡萄球菌的生长速率,其最低抑菌浓度(MIC)为109μg/mL,最低杀菌浓度(MBC)为219μg/mL,抑菌活力均在使用初期的作用最强(约3h);随着作用时间的延长,菌液中的碱性磷酸酶量显著增多,在260nm处的吸收值显著增加,表明菌体内部核酸与蛋白质外泄,菌体细胞壁与细胞膜受到破坏。此外,电镜扫描结果显示,试验组的菌体发生干瘪破裂现象,细胞质从细胞内大量渗出。故一定浓度的复合保鲜剂对虾皮中的腐生葡萄球菌有抑制(杀灭)作用,对细胞体有一定破坏作用。     

复合生物保鲜剂对金黄色葡萄球菌的抑菌作用研究

研究了壳聚糖、溶菌酶与茶多酚配制而成的复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。采用琼脂平板打孔法确定复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),结合抑菌率、抑菌活力、细菌生长曲线、膜完整性、AKP活性与细菌超微结构,综合评价复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的影响。结果得出,复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的MIC与MBC分别为0.8 mg/mL与1.6 mg/mL,随着作用时间的延长,复合保鲜剂对金黄色葡萄球菌的生长抑制明显,菌体的细胞壁与细胞膜完整性受到破坏,菌体细胞中的AKP量增多,影响菌体细胞的代谢循环,菌体内部的核酸与蛋白质外泄,抑制其正常生长。由细菌超微结构观察发现,菌体细胞经复合保鲜剂处理后,造成菌体扭曲变形,细胞壁破裂,细胞质外渗。表明复合保鲜剂可破坏菌体的细胞壁,影响胞膜稳定性与胞内环境,最终导致菌体死亡。     

青花椒精油抑制蜡样芽孢杆菌的活性与机理

青花椒精油是一种兼具药用和调味功能的天然精油,已报道具有良好的抑菌活性,应用前景广泛。然而,其抑菌机制却鲜有报道,本研究以蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）为研究对象,从理化、形态学和代谢水平解析青花椒精油的抑菌机制。结果表明,青花椒精油中包含多种已经报道的抑菌活性成分,其对蜡样芽孢杆菌的最小抑菌质量浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌质量浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）分别为2.0、4.0 mg/mL。青花椒精油能破坏蜡样芽孢杆菌的细胞壁和细胞膜,导致细胞质渗漏。在亚抑菌质量浓度（0.5 MIC）下的青花椒精油能够诱导蜡样芽孢杆菌在代谢水平上的显著变化。生物信息学分析表明,青花椒精油对蜡样芽孢杆菌造成了细胞膜损伤、能量代谢障碍、氨基酸代谢紊乱等多方面的影响。本实验对青花椒精油抑制蜡样芽孢杆菌的机制进行探讨,有助于青花椒精油在食品安全领域的开发和应用。     

香旱芹精油对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

采用微波辅助水蒸气蒸馏提取出香旱芹精油,对其成分进行GC-MS分析,通过测试其对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)评价其抑菌效果。分别从菌体微观形态、细胞溶出物、蛋白质和钾离子泄漏等方面研究香旱芹精油对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。实验结果表明香旱芹精油的主要成分为百里香酚(45.85%)、对伞花烃(20.72%)和γ-松油烯(23.57%),其对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为75mm,MIC为0.25μL/mL,MBC为0.5μL/mL。香旱芹精油可使金黄色葡萄球菌细胞膜受到损伤,使细胞膜表面出现塌陷和破裂,并引起菌体细胞溶出物、蛋白质以及钾离子的泄露,从而导致菌体的死亡。     

仙草提取物对大肠杆菌的抑制作用

为探究仙草提取物对大肠杆菌的抑制作用,测定其对大肠杆菌的抑菌圈大小、最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）,通过液相色谱测定其抑菌成分的含量和对应的MIC 和MBC;通过碱性磷酸酶试验测定其对细胞壁通透性的影响,通过测定电导率和OD260 nm 变化,分析其对细胞膜完整性和通透性的影响。结果表明：仙草提取物的抑菌圈为（21.69±2.15）mm,最小抑菌浓度为0.17 g/mL（生药浓度）,最小杀菌浓度为0.33 g/mL。提取物中芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、迷迭香酸和咖啡酸的含量分别为6.63、0.47、0.34、0.32、0.01 mg/g,迷迭香酸、咖啡酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、齐墩果酸、熊果酸的MIC 分别为4.78、5.10、6.05、1.61、0.84、0.34、0.33 mg/mL,其对应的MBC 分别为9.55、10.20、12.10、3.21、1.68、0.68、0.65 mg/mL。仙草提取物能通过增加细胞壁、细胞膜的通透性及破坏其细胞膜的完整性,有效抑制大肠杆菌的生长。     

孜然精油抑菌机制

为了探究孜然精油的抑菌作用,本文以大肠杆菌等常见致病菌为研究对象,通过牛津杯实验、最小抑制浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定、微生物生长曲线和杀菌曲线的绘制等对其抑菌活性进行定性分析,然后采用电子显微镜法和相对电导率测定法对其抑菌机理进行探讨。结果表明:孜然精油对大肠杆菌和福氏志贺氏菌作用最为明显(MIC均为25 μg/mL,MBC均为50 μg/mL),推测其作用机理是改变了微生物细胞膜的渗透性,从而使细胞形态发生收缩、局部变形、细胞壁和细胞膜的破坏、细胞质的损耗等异常改变,进而导致细胞死亡。以上研究结果表明,孜然精油对细菌生长具有一定的抑制作用。     

茶皂素对食源性腐败酵母的抑菌能力及作用机理

该研究通过测定抑菌圈直径、最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）和最低杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）,评价茶皂素对酿酒酵母、鲁氏接合酵母及白色假丝酵母三种食源性腐败酵母的抑菌能力,并筛选出机理研究指示菌;进而通过考察时间-杀菌曲线、生物膜抑制率、菌体细胞形态、细胞膜通透性、细胞膜完整性、遗传物质以及蛋白泄露和胞内总蛋白等指标,阐述茶皂素抑菌机理。抑菌能力试验结果显示茶皂素对三种腐败酵母均有抑菌作用,其中酿酒酵母抑菌直径为16.00 mm,MIC和MBC分别为0.05、0.10 mg/mL,抑菌效果最为显著。以酿酒酵母为指示菌的抑菌机理研究结果表明：茶皂素可使菌体直接进入衰竭期;可显著抑制生物膜形成;可致菌体细胞发生不可逆转的塌陷扭曲;能破坏细胞膜完整性,增大细胞膜通透性,使胞内核酸和蛋白质大量泄露,还可干扰DNA正常合成,阻滞蛋白质合成表达。因此,茶皂素有望成为食品加工中针对食源性腐败酵母的一种天然食品防腐剂,该研究也可为拓展天然防腐剂在高渗食品中的应用提供理论依据。     

荔枝木质精油体外抑菌活性及稳定性研究

采用牛津杯法测定荔枝木质精油抑菌活性,以气体扩散法测定荔枝木质精油对7种常见食源性致病菌（大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、单核细胞增生李斯特菌、枯草芽孢杆菌）、3种常见霉菌（黑曲霉、桔青霉、黄曲霉）的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌浓度（minimum bactericidal concentration,MBC）。同时进行荔枝木质精油抑菌活性的酸碱稳定性、热稳定性、紫外稳定性研究。结果表明：荔枝木质精油对受试细菌和霉菌均有抑制效果,其中对受试的革兰氏阳性菌抑制效果优于革兰氏阴性菌;对大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、黄曲霉和桔青霉的 MIC 分别为 20、5、10、40、5、5、2.5、40、80、40 μL/mL;荔枝木质精油具有良好的紫外稳定性;加热处理并未对其抑菌效果产生显著影响;酸性条件下精油抑菌效果优于中性条件。     

肉桂精油气相熏蒸金黄色葡萄球菌的抗菌机理

该研究主要探讨了肉桂精油的抗菌活性及其对金黄色葡萄球菌的抗菌机制,实验采用气相熏蒸法研究精油的气相抗菌活性,通过TEM、电导率实验、FT-IR、荧光光谱等方法探讨肉桂精油的气相抗菌机制。结果表明肉桂精油具有显著的气相抗菌活性,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为0.25μL/m L,最低杀菌浓度(MBC)为0.5μL/m L。TEM观察显示,经肉桂精油气熏后的金黄色葡萄球菌菌体细胞膜破损溶解,细胞皱缩,从而引起内容物外泄。电导率实验进一步表明气熏后的菌体细胞膜通透性提高,并通过测试OD260发现核酸外泄与精油浓度变化的正相关关系。通过FT-IR图与荧光光谱图,发现肉桂精油引起金黄色葡萄球菌菌体蛋白构象的变化,并通过分析酰胺Ⅰ带推测在气熏过程中菌体蛋白二级结构发生无序变化,以及通过荧光强度和波长峰位的变化判断肉桂精油气熏后菌体蛋白发生了改变,暴露出更多的发色基团。由此可见,肉桂精油气相熏蒸金黄色葡萄球菌可能的抑菌机理是改变菌体细胞膜通透性和形态,并改变了菌体蛋白的二级结构和三级结构。     

七种精油对多重耐药鲍曼不动杆菌的抑制作用

本文研究了肉桂等精油对多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)的体外抑菌效果,采用药敏纸片扩散法和微量肉汤稀释法测定其对MDRAB的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC),筛选出抑制效果最好的精油和绘制出该精油对MDRAB的动态杀菌曲线。用棋盘稀释法研究MIC值最小的两种精油联合抗MDRAB的效果。结果表明肉桂精油对MDRAB的抑菌效果最强,抑菌圈直径为29.30±1.16 mm,MIC值为0.62μL/mL,且对MDRAB的抑菌活性存在浓度依赖性,另外肉桂精油与薰衣草精油联合抗MDRAB有相加作用,与薄荷精油联合抗MDRAB有部分协同作用;薰衣草精油和薄荷精油也有较强抑菌效果,MIC值依次为1.25μL/mL和2.50μL/mL;丁香精油对MDRAB有中度抑菌活性,MIC值为10μL/mL;冬青精油和绿茶精油对MDRAB的抑菌作用相对较弱,MIC值为20μL/mL;安息香精油对MDRAB的抑制作用很弱甚至无抑制作用。因此,肉桂精油对MDRAB的抑菌效果最强,且对MDRAB的抑菌活性与浓度正相关,另外与薰衣草精油和薄荷精油有联合抗MDRAB作用,为临床用药提供有效指导。     

水蒸气蒸馏法提取茜草精油抑菌活性及其机理的研究

以滤纸片及刃天青法测定受试菌抑菌圈直径及MIC、MBC,为水蒸气蒸馏法提取所得茜草精油的抑菌活性提供依据;另外,通过受试菌在受到精油作用后生长曲线、电导率及表面超微结构的变化初步研究了精油的抑菌机理。抑菌圈、MIC和MBC结果表明:精油对G+(表面葡萄球菌)和G-(痢疾杆菌)效果较强;对G+(枯草芽孢杆菌)和G-(大肠杆菌)效果较弱。生长曲线、细胞膜通透性及细菌细胞超微结构的研究结果表明:抑菌机理可能源于茜草精油能有效地抑制细菌的对数生长期分裂速度,导致细胞膜渗透性的增加。     

卵黏蛋白抑菌活性及其作用机制

研究了卵黏蛋白对导致禽蛋腐败的常见微生物——金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌以及对致龋齿的变异链球菌的抑菌活性及作用机制。采用最小抑菌浓度(MIC)和牛津杯法测定卵黏蛋白的抑菌活性,分析卵黏蛋白对其中3种菌生长动力曲线的影响;利用流式细胞仪与扫描电镜分析其抑菌机制。结果表明:卵黏蛋白对金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、变异链球菌的MIC分别为62.5,125,1 000μg/m L,并有明显的抑菌圈产生;对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌的抑制作用较差,无明显抑菌圈。卵黏蛋白对菌体生长起到延缓对数期或缩短稳定期的作用,并使菌体细胞膜的通透性发生改变。扫描电镜结果显示,卵黏蛋白使菌体细胞形态发生变化,细胞膜损伤或者破坏。卵黏蛋白通过对菌体细胞膜造成损害而发挥其抑菌活性。     

植物精油对柑橘的保鲜效果

为开发研制新型植物源柑橘保鲜剂,测定了13种植物精油对柑橘主要致腐菌意大利青霉和指状青霉的抑菌作用,确定最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）和最低杀菌浓度（minimum bactericidal concentration, MBC）,并进行了菌丝生长的抑制试验和柑橘损伤接种试验。结果显示,13种植物精油中抑菌效果最佳的是丁香、牛至以及桂皮,对意大利青霉的抑菌圈分别为35.81、39.32、43.11 mm,指状青霉的抑菌圈分别为21.5、27.89、39.03 mm。这3种植物精油对意大利青霉菌的MIC分别为0.05%、0.05%、0.012 5%,MBC分别为0.1%、0.05%、0.012 5%,对指状青霉菌的MIC分别为0.1%、0.1%、0.012 5%,MBC分别是0.2%、0.1%、0.012 5%。0.1%的丁香、牛至和桂皮对菌丝生长的抑制率为100%。在损伤接种试验中发现指状青霉的致病力大于意大利青霉菌,对照在第4天贮藏中腐烂面积为10.19 cm²,约为意大利青霉的8倍。0.1%牛至、丁香...     

植物乳杆菌SCB2505代谢物对液化沙雷氏菌的抑菌机理

液化沙雷氏菌是畜产食品在低温贮藏中的一种常见致腐菌和食源性病原菌。该实验通过最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)和生长曲线分析植物乳杆菌SCB2505代谢物对液化沙雷氏菌的抑菌活性,并通过高温、过氧化氢酶及蛋白酶、pH处理和乳酸排除实验分析抑菌物质组成,再通过生物被膜抑制率、细胞壁和细胞膜完整性、菌体形态变化的研究来分析其抑菌机理。结果表明,植物乳杆菌SCB2505代谢物对液化沙雷氏菌的MIC为8 mg/mL,其抑菌物质的高温耐受性较好,pH越低其抑菌效果越好,但相同pH的乳酸溶液不具有抑菌活性,过氧化氢酶和蛋白酶对其抑菌圈大小有显著影响,推测抑菌物质可能为乳酸盐、细菌素与过氧化氢的复合物。植物乳杆菌SCB2505代谢物能明显抑制液化沙雷氏菌生物被膜合成,破坏细胞壁和细胞膜的完整性,使得菌体皱缩凹陷,甚至裂解死亡。该研究结果说明植物乳杆菌SCB2505代谢物作为天然防腐剂在动物食品防腐领域具有较好的应用前景。     

留兰香-有机盐复合纳米微乳体系构建及抑菌活性研究

采用气相色谱-质谱联用技术分析留兰香精油组成,发现其主要物质为氧化胡椒烯酮和柠檬烯,分别占精油含量的39.74%和32.56%。构建拟三元相图研究留兰香微乳体系,发现抗坏血酸钠和山梨酸钾对微乳相行为没有显著影响。通过最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）、最低杀菌浓度（minimum bactericidal/fungicidal concentration,MBC/MFC）和杀菌动力学实验研究抑菌活性,最后通过扫描电子显微镜和细胞膜通透性实验探究体系抑菌机理。结果显示：留兰香微乳体系对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酿酒酵母菌和拜耳酵母菌均有抑制作用,MIC介于8～32 μL/mL,MBC/MFC介于32～128 μL/mL;并且在MBC条件下,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别在处理60、90 min后全部失活。在留兰香微乳体系作用下,大肠杆菌核酸迅速外泄,并在电子显微镜照片中发现菌体形态出现扭曲、褶皱,甚至完全破裂。说明体系通过破坏细胞膜,改变细胞膜的结构和功能,使细胞内溶物外泄,从而杀死菌体。     

复合精油对黄曲霉联合抑菌作用研究

采用联合抑菌评价方法,通过测定植物精油抑菌圈直径、最低抑菌浓度(Minimum Inhibition Concentration,MIC)、最低生长下降浓度(Reduction Concentration,RC)、联合抑菌指数(Fractional Inhibitory Concentration,FIC),对植物精油单独及联合使用后的抑菌效果进行评价,筛选最佳抑制黄曲霉活性作用的复合精油种类及配比。结果表明:大蒜、肉桂、丁香、薄荷精油单独或复合使用均有较强抑制黄曲霉活性的作用。大蒜与肉桂精油联合抑菌评价为相加作用。当大蒜精油与肉桂精油复合体积比为1∶3时,复合精油具有最佳抑制黄曲霉活性的效果。因此,复合精油作为有效防霉保鲜成分具有良好的研发与应用前景。