茶叶活性成分的抗炎作用及其机制研究进展

茶叶中主要活性成分如茶多酚、茶氨酸、茶黄素具有较好的抗炎作用,且茶多酚效果最佳。虽然茶多酚的抗氧化作用被世界公认,但这并不是其发挥抗炎作用的唯一机制,其机制应与抑制炎症因子、调节相关炎症信号通路、抗氧化等综合作用有关。本文综述了茶叶及茶叶成分茶多酚、茶氨酸、茶黄素的抗炎作用及其机制,其中重点阐述了主要儿茶素组分表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)的抗炎机制,为茶叶抗炎作用的深入研究提供参考,为健康饮茶和茶叶抗炎功能产品的研发提供理论依据。     

青刺果抗氧化肽的分离纯化、结构鉴定及其分子对接解析

采用超滤、强阴离子交换层析法分离并纯化青刺果蛋白酶解物,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基清除率为评价指标,筛选具有较好抗氧化活性的肽组分。通过LC-MS/MS鉴定肽序列,结合生物信息学方法分析其理化特性,并进一步利用红外光谱、分子对接技术解析其二级结构特征及与Keap1蛋白的对接位点。研究结果表明,分离得到的4个组分中F-1组分具有更好的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率达到27.67%。选择活性更高,且分子质量小于1 kDa的肽组分,测定得到的3条肽(TALDVPPPR、TLSDAGVGGL和DLINGGKDA)的DPPH自由基清除率,其IC₅₀值分别为0.43、0.83、0.51 mg/mL,其中TALDVPPPR的抗氧化活性相对较高。二级结构分析结果表明,3条抗氧化肽均由α-螺旋、β-折叠和β-转角构成,其中TALDVPPPR的α-螺旋含量相对较低,使其更易与自由基结合。分子对接结果显示,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA以氢键和疏水作用与Keap1蛋白...     

猪血浆半胱氨酸蛋白酶抑制肽的筛选及其机制

本研究对猪血浆中半胱氨酸蛋白酶抑制肽进行了制备筛选,并对其抑制动力学和作用机制进行了研究。通过胰蛋白酶酶解制备的猪血浆多肽中,分子量在0～3 kDa的多肽组分抑制率为35.15%,其抑制活性最高;利用UPLC-Q-TOF联用质谱鉴定,从猪血浆多肽组分中鉴定多肽氨基酸序列,分析得到的多肽氨基酸序列有35条,根据目标蛋白来源和细胞定位,选择其中两条氨基酸序列,并命名其为PP1、PP2,PP1为EAVLGLWGKVNVDEVGGEALGR、长度为22 aa,分子量为2 267.2 Da,其蛋白来源为血红蛋白,PP2为VILGAHEEYHLGEGVQEIDVSK,长度为22 aa,分子量为2 421.2 Da,其蛋白来源为纤溶酶原;然后将抑制肽PP1、PP2与组织蛋白酶L模拟分子对接,分析可知抑制肽与组织蛋白酶L可以通过活性中心紧密结合,分子间作用力键长范围为1.961 04～5.018 80?,其中PP1作用位点为H3、H4、H6、H14、N15、GLY20、GLN21和GLY23,组织蛋白酶L的作用位点为H166、H234、H239、H244、H256、H313、LYS117、SER158...     

6种常见肽的成分分析及其苦味掩盖机制研究

为研究酵母抽提物(YE)掩盖肽的苦味的机制,利用高效液相等方法分析了6种常见肽的成分,结合感官评价得到结论:在5％浓度下,分子质量≥1000 u的肽段没有苦味,分子质量≤400 u的肽段具有强烈的苦味;而在添加0.03％的酵母抽提物后,肽的苦味明显降低,分子对接试验表明YE中的腺嘌呤核糖核苷酸(AMP)能与苦味受体T2...     

乳清分离蛋白掩蔽花椒苦味机制研究

花椒是我国重要的香辛料及药用植物,因含有7-甲氧基香豆素而具有明显的苦味。花椒的苦味限制了花椒产品的开发和利用。本实验旨在探索乳清分离蛋白对花椒苦味的掩蔽效果及作用机制。选用花椒油树脂为基质,通过感官实验和电子舌考察了乳清分离蛋白对花椒苦味的掩蔽效果,采用分子对接技术探究了乳清分离蛋白对花椒苦味的掩蔽机制。结果表明,乳清分离蛋白可显著降低花椒油树脂的苦味,且花椒油树脂的苦味降低值与乳清分离蛋白的添加量存在质量浓度-效应关系;当其用量为1.00%,花椒油树脂溶液浓度为0.5%时,苦味降低值ΔBI为1.8,说明苦味掩蔽效果较好。分子对接模型显示7-甲氧基香豆素与β-乳球蛋白在第二个聚类具有20个对接构象,最低结合自由能为-5.90 kcal/mol,是两者发生相互作用最有可能的结合区域。因此,乳清分离蛋白是通过与7-甲氧基香豆素结合后阻止其与苦味受体结合而减少苦味的产生,该研究结果可为花椒加工产品的矫味提供参考依据。     

甜叶菊废渣提取物及其主要成分异绿原酸的抗炎作用

目的:研究甜叶菊废渣提取物及其主要成分异绿原酸的抗炎作用.方法:通过建立LPS诱导小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)炎症模型和角叉菜胶致小鼠足部肿胀模型,以一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)等为检测指标,检测甜叶菊废渣提取物及其主要成分异绿原酸的体内外抗炎作用.结果...     

恩诺沙星抗体免疫检测及其分子识别机制研究

兽药恩诺沙星对人体具有较强的毒副作用,检测恩诺沙星残留对保障食品安全具有重要的作用。本研究将恩诺沙星与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物注射免疫BALB/c小鼠制备恩诺沙星单克隆抗体,并建立基于单克隆抗体的酶联免疫法检测样品羊奶中恩诺沙星的方法。将筛选出的杂交瘤细胞注射小鼠提取腹水,并以此单克隆抗体建立直接竞争ELISA方法。其半数抑制率(IC50)为0.71±0.05 ng/m L,最低检测限(IC15)为0.04±0.02 ng/m L。检测羊奶样品含恩诺沙星在10~200 ng/m L时回收率为96.56~105.10%,且与HPLC法检测呈良好线性关系(R2=0.9998)。最后利用计算机生物信息学构建恩诺沙星抗体的可变区三维结构并与抗原进行分子对接。结果显示Arg98、Asp99、Gly101、Thr50、Ser51、Ala82、Tyr85等氨基酸残基在抗体抗原识别过程中起关键作用。这些信息对今后抗体结构修饰具有理论指导意义。     

基于网络药理学与分子对接和实验验证探讨费菜抗炎作用的分子机制

目的:本文基于网络药理学技术与分子对接和实验验证探讨费菜抗炎作用机制。方法:利用TCMSP、HERB等数据库,以口服生物利用度≥30%为筛选条件,得到费菜药效成分及其潜在靶点。利用GeneCards、OMIM等数据库查找炎症相关靶点,通过STRING数据库和Cytoscape3.8.0软件绘制PPI蛋白互作图,分析费菜中抗炎的关键药效成分和潜在作用靶点。利用David数据库对潜在作用靶点进行GO富集和KEGG信号通路富集,并进行可视化分析。应用AutoDock软件将药效成分与核心靶点进行分子对接,并进行可视化分析。利用高效液相色谱法分析药效成分。采用LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型,验证药效成分的抗炎作用。结果:筛选得到5个药效成分及相关靶点130个,抗炎靶点421个,两者取交集后获得费菜潜在抗炎靶点22个,其中关键靶点有PPARG、EGFR、TP53等,发挥关键作用的主要成分为β-谷甾醇和没食子酸。GO及KEGG富集分析结果表明,β-谷甾醇和没食子酸主要通过调控聚合酶II启动子的转录正调控、神经元凋亡过程的正调控和脂多糖反应等生物过程,通过癌症通路、乙型肝炎、TNF信号通路、MAPK信号通路等信号通路发挥抗炎作用。分子对接结果显示抗炎药效成分均与靶点蛋白分子对接结果良好。高效液相色谱法证明费菜中含有药效成分β-谷甾醇和没食子酸。实验验证结果表明,β-谷甾醇和没食子酸可显著降低促炎因子NO含量,提高抗炎因子IL-10含量（P<0.05）,发挥抗炎作用。结论:本研究揭示了费菜通过调控多靶点、多途径发挥抗炎作用,为费菜的研究和应用奠定了基础。     

马氏珍珠贝来源DPP-IV抑制活性肽的虚拟筛选及其作用机制

为了快速发现马氏珍珠贝来源二肽基肽酶IV（dipeptidyl peptidase IV,DPP-IV）抑制活性肽,本研究利用数据库中20个已报道的DPP-IV抑制肽组成训练集,构建了药效团模型并通过测试集分子和Fisher随机验证法对模型进行了评估。利用在线网站PeptideCutter,以珍珠贝肉蛋白为原料,进行虚拟酶解。使用最优药效团模型（Hypo1）对虚拟酶解获得的192个低分子肽（氨基酸数小于或等于5）进行初步筛选,接着以分子对接的方法进一步筛选,并且对潜在的DPP-IV抑制活性肽进行固相合成,体外验证其活性并分析其作用机制。结果表明,药效团结合分子对接技术筛选了4个理论上可能具有高活性的DPP-IV抑制肽,即LPIY、VQDR、PIY和APSL。其中,VQDR、PIY没有表现出抑制活性,而LPIY和APSL具有较高的DPP-IV抑制活性,其IC₅₀值分别为521.19 和258.67 μmol/L。与DPP-IV相互作用的机理表明,肽LPIY和APSL与DPP-IV活性口袋中的氨基酸残基形成了多个氢键,且N-端第二个位置的脯氨酸（P）也均与活性口袋中的残基形成了Pi-Alkyl作用,因此促进了LPIY和APSL的DPP-IV抑制作用。本研究为高效筛选珍珠贝来源的DPP-IV抑制肽提供了理论方法。     

基于LPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎症模型的榴莲壳多酚抗炎作用及其分子机制

采用80%甲醇溶剂提取榴莲壳中多酚组分,并测定其总酚和总黄酮含量,基于体外化学方法和LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型,探究榴莲壳的抗氧化和抗炎活性及其分子机制。结果表明,榴莲壳提取物富含多酚类化合物,具有较强的体外抗氧化活性,且在LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型中能降低一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)的表达,减少NO和ROS的产生,并降低炎症细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)在基因和蛋白水平上的表达,从而展现较强的抗炎活性。其内在的分子机制可能是通过抑制IκB-α和p65蛋白磷酸化,降低NF-κB信号通路的表达,减少机体的炎症损伤。     

三叶青原花青素结构分析

利用核磁共振碳谱、反相高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术联合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）技术对三叶青根、茎及叶原花青素进行结构分析。结果表明,三叶青原花青素主要由原花青定和原翠雀定构成,末端单元以儿茶素为主,延伸单元以表儿茶素和表没食子儿茶素为主。三叶青根、茎及叶原花青素的平均聚合度分别为4.89±0.33、3.77±0.19及4.45±0.48。利用MALDI-TOF MS检测出三叶青根、茎原花青素的三聚体到十聚体,叶原花青素的三聚体到十一聚体。每个聚体内部普遍存在（表）儿茶素和（表）没食子儿茶素结构单元,没食子酰基化以及A型连接。三叶青根、茎及叶原花青素在结构上具有一定的相似性。本研究结果可为三叶青原花青素的基础研究和开发利用提供一定参考。     

三叶青茎部不同溶剂提取物的功能成分、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性研究

目的 以三叶青茎部为原料,探究三叶青不同溶剂提取物的功能成分、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性。方法 采用乙醇超声法提取三叶青,获得醇提液及残渣。醇提液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对其进行分步萃取,残渣则采用蒸馏水多次提取,最终得到4种提取物。分别测定4种提取物总酚、总黄酮、总皂苷、总多糖、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性,并进行相关性分析。结果 4种提取物中乙酸乙酯萃取物总酚、总黄酮、总皂苷含量最高,分别为40.22%±1.01%、38.56%±0.64%、6.15%±0.21%,正丁醇萃取物总多糖含量最高,为9.29%±0.25%。各萃取物均具有抗氧化和酪氨酸酶抑制活性,其中乙酸乙酯萃取物清除1,1-二苯基-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、超氧阴离子、2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-3-氧代-1-氧(2-phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-3-oxide-1-oxyl,PTIO)自由基、羟自由基能力和铁离子还原能力(ferric reducing antioxidant power, FRA...     

响应面法优化三叶青总黄酮提取工艺及不同产地三叶青的质量评价

目的:优化三叶青总黄酮的提取工艺,比较不同产地三叶青的总黄酮得率,并采用指纹图谱结合化学模式识别的方法对其质量进行综合评价.方法:在单因素实验的基础上,以三叶青总黄酮得率为评价指标,运用Box-Behnken法优化三叶青总黄酮的提取工艺;在最佳提取工艺下,测定不同产地三叶青的总黄酮得率;在建立三叶青HPLC指纹图谱的基...     

不同提取工艺翅果油抗氧化能力与活性成分的分析

采用DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基清除能力法和PF还原法测定了不同提取工艺(超临界CO2流体萃取法,有机溶剂提取法,直压冷榨法,直压热榨法和红外热榨法)制得的翅果油、翅果油中极性和非极性部分的抗氧化能力,同时对翅果油中的微量活性成分进行了分析,并对翅果油中微量活性成分含量与其抗氧化能力进行了相关性分析。结果表明,除羟基自由基清除能力外,不同翅果油对DPPH自由基、ABTS自由基清除能力和Fe3+还原能力不同,5种提取工艺所得翅果油的极性部分抗氧化活性最强,全油次之,非极性部分抗氧化活性最弱。在翅果油的极性部分中,红外热榨法的DPPH自由基清除能力最强,为1 080.35μmolTE/100 g,直压冷榨的羟基自由基清除能力最强,为38 272.82μmolTE/100 g,有机溶剂提取的ABTS自由基清除能力最强,为2 000.76μmolTE/100 g,红外热榨的Fe3+还原能力最强,为2 771.89μmolTE/100 g。翅果油中微量生物活性成分与抗氧化活性相关性分析表明,翅果油中的生物活性成分含量与4种抗氧化活性指标均呈极显著正相关(p 0.01),γ-生育酚、δ-生育酚和羽扇豆醇是翅果油中重要的抗氧化基础物质。     

红芪活性成分免疫调节作用及机制研究进展

免疫功能受损或免疫系统紊乱会导致机体疾病发生,影响人身体健康,基于调节机体免疫治疗疾病已成为临床应用热点。红芪作为甘肃大宗药材,临床应用广泛,具有抗肿瘤、抗炎、免疫调节等多种药理作用。红芪活性成分主要有红芪多糖、黄酮类、萜类、皂苷类等,其中红芪多糖为红芪发挥免疫调节作用主要的物质基础。红芪增强机体免疫力主要体现在增强免疫器官功能,诱导免疫细胞分化、促进免疫因子分泌,提高单核巨噬细胞吞噬功能、调节炎性因子水平以及激活相关通路等方面来达到其抗肿瘤、抗炎作用。本文主要对红芪活性物质免疫调节作用进行阐述,为红芪的进一步临床开发应用提供思路。     

Kinetics and mechanism of bacterial inactivation by ultrasound waves and sonoprotective effect of milk components

Inactivation of Escherichia coli and Listeria monocytogenes were investigated in buffer and milk upon treatment with ultrasound waves (USW). In addition, sonoprotective effect of milk components and ultrasound-induced changes in bacterial cells were investigated using scanning electron microscopy (SEM). Bacterial cells were added to phosphate buffer, whole milk, skim milk, or simulated milk ultrafiltrate (SMUF). To determine the sonoprotective effect of milk components, lactose (5%), casein (3%), or β lactoglobulin (0.3%) was added to SMUF. Samples were sonicated with 24 kHz pulse USW while maintaining the system temperature between 30 to 35 °C. Aliquots were drawn at set times during sonication and bacteria were enumerated by surface plating appropriate dilutions on selective and nonselective media plates. Escherichia coli exhibited significantly higher D values in whole (2.43 min) and skim milk (2.41 min) than phosphate buffer (2.19 min). Listeria monocytogenes also showed higher D values in whole (9.31 min) and skim milk (8.61 min) compared to phosphate buffer (7.63 min). Data suggest that milk exerts a sonoprotective effect on these bacteria. Escherichia coli exhibited a log-linear inactivation kinetics followed by tailing whereas L. monocytogenes showed 1st-order kinetics throughout. Among the milk components tested, presence of lactose in SMUF resulted in significantly higher D values than SMUF for both organisms suggesting that lactose was exerting a protective effect on bacteria. SEM images showed that USW caused mechanical damage to the cell wall and cell membrane of bacteria leading to their inactivation.     

泡菜发酵过程中主要化学成分变化规律的研究

以市售白菜为原料对泡菜自然发酵过程中主要化学成分 进行理化分析,找出其物质代谢规律;并研究讨论了不同 食盐浓度、碘、花椒等对化学成分变化规律的影响。     

葡萄酒中8种主要半挥发性成分的快速测定

目的建立在线凝胶渗透色谱-气相色谱-质谱法(gel permeation chromatography-gas chromatographymass spectrometry,GPC-GC-MS)快速测定葡萄酒中8种主要半挥发性成分的分析方法。方法 8种主要半挥发性成分用凝胶渗透色谱-气相色谱-质谱仪的选择离子模式测定,外标法定量。对凝胶渗透色谱的收集时间、提取剂的种类、用量及提取时间进行优化。采用优化后的方法对我国7个葡萄酒主要产区的135个样品进行测定。结果 8种半挥发性成分的浓度与其峰面积间呈良好的线性关系,线性相关系数均大于0.993。获得了我国7个主要葡萄酒产区、不同品质的葡萄酒中8种主要半易挥发性成分的含量范围,初步对其含量进行了排序。结论该方法操作简单、快速,适用于葡萄酒中半挥发性成分的快速测定。通过对获得的数据进行客观分析,可提供一种评价葡萄酒的风格、典型性和酿酒质量等技术指标的新途径。     

Changes in major antioxidant components of tomatoes during post-harvest storage

The objective of this study was to study overall nutritional implication of storage on tomatoes (cv. Tradiro), harvested from a commercial greenhouse in Canterbury, New Zealand. The harvested tomatoes were stored at 7, 15 and 25 °C, for a period of 10 days. The soluble phenolics and ascorbic acid contents of tomatoes showed slight increases during storage, regardless of temperature. The mean lycopene content of tomatoes stored at 15 and 25 °C on the 10th day of storage was, approximately, 2-fold (7.5 mg/100 g) than of the tomatoes stored at 7 °C (3.2 mg/100 g). The soluble antioxidant activity increased from 17–27% during the storage period of tomatoes.