北虫草多糖提取工艺优化及其细胞氧化损伤保护作用

目的:优化北虫草多糖的提取工艺,研究北虫草多糖对血管平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用L₉(34)正交实验法优化多糖提取工艺,利用羟自由基法、DPPH自由基法和FRAP法检测北虫草多糖清除自由基的能力。在细胞水平上构建过氧化氢诱导细胞氧化损伤模型,采用MTT法、ROS细胞染色法评估北虫草多糖对过氧化氢诱导大鼠主动脉平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。结果:北虫草多糖的最佳提取条件为:提取温度90 ℃,料液比1:30 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,最高得率为7.94%±0.16%。在多糖浓度为1.6 mg/mL时对羟自由基和DPPH自由基的清除能力以及总抗氧化能力分别为75.57%±1.39%、80.23%±2.75%和(0.22±0.01) mmol/mg。细胞实验表明北虫草多糖可显著抑制过氧化氢诱导细胞内ROS生成,提高细胞存活率。结论:成功优化北虫草多糖提取工艺,北虫草多糖具备良好的体外清除自由基的活性,对由氧化应激所导致的心血管疾病中起到很好的防治意义。     

皂荚多糖超声波提取工艺优化及体外抗氧化活性研究

以皂荚多糖为研究对象,在单因素实验的基础上,采用响应面法对皂荚多糖的超声波提取工艺进行优化,并对多糖进行体外抗氧化活性的研究。结果表明:最佳提取工艺条件为:提取温度50 ℃,液料比35:1 (mL/g),提取时间30 min,超声功率285 W,提取3次,多糖得率为30.65%±0.25%。抗氧化实验表明,皂荚多糖具有一定的抗氧化能力,其对超氧阴离子自由基、DPPH自由基、羟自由基清除作用的IC₅₀分别为:10.3、6.9、1.5 mg/mL。     

荷叶离褶伞多糖提取工艺优化及抗氧化活性研究

本研究以荷叶离褶伞多糖为对象,采用单因素与响应面法对多糖提取温度、提取时间、液料比、次数进行优化,进一步研究了荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性。结果表明:在提取温度为89 ℃,时间为3 h,液料比为30:1 (mL/g),提取2次时,荷叶离褶伞多糖得率为5.35%±0.12%,与预测值相近。荷叶离褶伞多糖的抗氧化活性与多糖浓度在0~1.0 mg/mL范围内呈现剂量依赖关系,多糖浓度在1.0 mg/mL时,DPPH和ABTS自由基清除率分别达到45.87%±2.12%和76.49%±1.56%。荷叶离褶伞多糖对DPPH和ABTS自由基半抑制浓度IC₅₀分别为1.40、0.44 mg/mL,说明荷叶离褶伞多糖具有较好的抗氧化能力。     

火龙果花的体外抗氧化物提取工艺优化及其抗炎活性

旨在为探究火龙果花的抗氧化物提取工艺及其抗炎活性。选取火龙果花为原料,用热回流法提取,以粗提液对DPPH自由基及OH自由基的清除能力为指标,先进行单因素实验,考察提取温度、料液比、提取时间以及乙醇浓度对粗提物抗氧化活性的影响,再采用L₉(34)正交试验法,优化火龙果花的体外抗氧化物提取工艺。结果表明:70%乙醇,1:30 g/mL料液比,75 ℃下回流加热3.0 h为最优提取条件,在最佳提取工艺下粗提物对DPPH自由基、OH自由基的IC₅₀值分别为0.273、0.288 mg/mL,且在一定范围内,粗提物的浓度越高,其抗氧化活性越好,量效关系明显。最佳工艺条件下,粗提物对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞产生的NO有很强的抑制作用,且与浓度呈正相关,具有剂量依赖性,其半抑制浓度IC₅₀值为13.94 μg/mL,该提取物具有很好的抗炎活性。     

黄秋葵超微粉多糖提取工艺的优化及其抗氧化活性测定

以黄秋葵为原料,制备黄秋葵超微粉,利用响应面设计法优化黄秋葵超微粉多糖的提取工艺,并测定其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基的清除能力和还原力。结果表明:最优工艺条件为料液比1:100(g/mL)、微波时间2 min、超声波时间14 min、超声波功率800 W,此条件下黄秋葵超微粉多糖的得率为27.68%±0.42%。黄秋葵超微粉多糖的体外抗氧化活性在四种体系中的IC₅₀值分别是1.53、4.12、6.38、2.49 mg/mL,具有较好的抗氧化活性。     

五种药食同源花提取物体外协同抗氧化作用

通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除试验和2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(2,2-azobis-(2-amidinopropane)dihydrochloride,AAPH)诱导红细胞溶血试验评价菊花、金银花、槐花、代代花、白扁豆花水提物和水提物的复配物(菊花50%,槐花18%,白扁豆花15%,代代花12%,金银花5%)的抗氧化性,并讨论五种药食同源花的协同抗氧化作用。结果表明五种药食同源花的提取物及其复配物均具有一定程度的抗氧化能力。在DPPH体系中,根据自由基的半数清除率(IC₅₀值),各提取物抗氧化能力大小顺序为复配物(IC₅₀=97.83 μg/mL) > 槐花(IC₅₀=98.63 μg/mL) > 菊花(IC₅₀=140.79 μg/mL) > 金银花(IC₅₀=146.35 μg/mL) > 代代花(IC₅₀=692.24 μg/mL) > 白扁豆花(IC₅₀=701.51 μg/mL),复配物表现出明显的协同抗氧化效果。AAPH诱导红细胞溶血体系中,复配物和槐花提取物表现出很强的溶血抑制作用,而金银花、菊花、代代花以及白扁豆花提取物仅表现出较弱的抑制作用。剂量在50~300 μg/mL时槐花提取物对红细胞的溶血抑制率小于复配物,当剂量达到300 μg/mL时,槐花提取物和复配物对红细胞的溶血抑制率分别为77.83%±1.85%和80.94%±1.46%,这说明五种药食同源花提取物之间存在协同抗氧化作用。     

西番莲果皮多糖微波辅助提取工艺优化及其体外抗氧化性

利用响应面优化微波辅助提取西番莲果皮多糖工艺,并研究其体外抗氧化活性。在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken实验设计对料液比、提取时间和微波功率条件对多糖提取率的影响进行优化和分析。确定微波辅助提取最佳工艺参数:料液比1:27 g/mL,提取时间3.4 min,微波功率420 W,此条件下提取率为14.12%±0.41%,是传统水浴提取的1.5倍。西番莲果皮多糖体外抗氧化实验表明:微波辅助提取的西番莲果皮多糖在浓度为1.0 mg/mL时,DPPH·和·OH的清除率分别为74.02%和14.41%,其IC₅₀值分别为0.374和61.06 mg/mL。     

响应面法优化西洋参果多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性

目的：对西洋参果实中的多糖进行提取,结合响应面法对提取工艺进行优化,并对西洋参果多糖是否具有体外抗氧化活性进行研究。方法：本研究以新鲜的西洋参果实为原料,采用了水提醇沉法提取其中的多糖。用单因素实验以及响应面法对提取工艺进行了优化。从DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率以及还原能力三个方面进行果多糖的体外抗氧化活性研究。结果：最佳工艺参数为：提取时间为2.5 h,乙醇浓度为80%,料液比为1:16 g/mL,此时的多糖得率为29.47%±0.65%,与模型预测值相当。在以下三方面考察了西洋参果多糖的体外抗氧化活性：多糖浓度为3.4 mg/mL时,其DPPH自由基清除率达75.14%±0.65%,IC₅₀值为0.71 mg/mL;多糖浓度为3.4 mg/mL时,其羟基自由基的清除率可达71.82%±1.43%,IC₅₀值为0.87 mg/mL;多糖的浓度为1.0 mg/mL时,其总还原力达到了0.730,并且其体外抗氧化能力随西洋参果多糖浓度的增加而增强。结论：抗氧化活性的实验结果说明了西洋参果多糖具有较好的抗氧化活性。本研究可以为西洋参果多...     

水-碱连续提取黄皮疣柄牛肝菌粗多糖的理化性质及抗氧化活性研究

以黄皮疣柄牛肝菌Leccinellum crocipodium(Letellier.)Watliag为原料,采用水提醇沉法从黄皮疣柄牛肝菌子实体中提取得到水提粗多糖(LPS),再用碱提醇沉法从菌渣中提取得到碱提粗多糖(LPJ),研究两种黄皮疣柄牛肝菌粗多糖理化性质与抗氧化活性。结果表明:水提粗多糖LPS与碱提粗多糖LPJ得率分别为18.44%±1.30%与5.50%±0.69%。LPS呈海绵状,颜色呈浅咖色;LPJ呈蓬松粉末状,颜色呈黄褐色。LPS多糖含量、糖醛酸含量、硫酸根含量、总酚含量均显著高于LPJ(P<0.05)。LPS与LPJ抗氧化活性随着浓度的增加而逐渐增强。LPS、LPJ浓度为4 mg/mL时,DPPH自由基的清除率(87.55%±0.51%、54.31%±2.72%)、羟基自由基清除率(54.53%±1.61%、46.50%±0.64%)、ABTS阳离子自由基清除率(81.56%±4.43%、68.79%±1.23%)、还原力吸光度值(1.41±0.02、1.16±0.01)均达到最大值,而浓度为3 mg/mL时,超氧阴离子自由基清除率(89.16%±2.42%、85.94%±2.98%)达到最大值。说明LPS与LPJ具有较好的抗氧化能力,且LPS优于LPJ。     

乙醇/硫酸铵双水相体系提取蕨麻多糖及其抑菌抗氧化活性

利用乙醇/(NH₄)₂SO₄在水溶液中形成的双水相体系作为多糖提取剂,采用响应曲面结合BBD中心组合实验设计,优化了蕨麻多糖双水相提取工艺;以滤纸片扩散半径作为抑菌活性考察指标;采用硫酸亚铁-过氧化氢-水杨酸氧化法和焦性没食子酸自氧化化法考察蕨麻多糖对活性自由基的清除能力。实验结果表明,在最佳提取条件下(1∶35 (g/mL),55 ℃,60 min),蕨麻多糖得率(14.46%±0.12%);抑菌实验结果表明,蕨麻多糖对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌属于抑菌高敏感型,对枯草芽孢杆菌属于抑制中度敏感型;蕨麻多糖对三种菌的抑制作用说明,多糖具有一定的抑制细菌活性,且对于不同的菌种的抑制作用具有选择性。抗氧化活性研究表明,蕨麻多糖具有清除自由基的能力,对·OH及O₂-·的清除率分别为(76.38%±0.21%)和(25.01%±0.14%);对应的极限浓度分别为3.6 mg/mL和3.0 mg/mL。以上实验结果说明,通过响应曲面优化结合BBD实验设计,能够确定蕨麻多糖提取因素与得率之间的二次函数模型,为多糖的提取提供了定性与定量评价指标;同时蕨麻的体外抑菌抗氧化活性表明,蕨麻多糖具有一定的体外抑菌抗氧化活性。     

五味子多糖提取工艺优化及其对α-葡萄糖苷酶抑制活性分析

以五味子为原料,采用单因素实验探究超声功率、提取温度、复合酶添加量和提取时间对五味子多糖得率的影响.在此基础上,通过正交试验优化超声辅助复合酶提取五味子多糖工艺.随后,基于酶抑制和荧光光谱探索五味子多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性.结果表明,超声辅助复合酶提取五味子多糖最优工艺参数组合为:超声功率200 W、提取温度30...     

两种方法提取佛手渣多糖及其对巨噬细胞RAW264.7免疫调节活性的研究

本文以提取精油和黄酮后的佛手渣为原料,分别采用连续相变萃取(CPE)法和热水浸提法(HWE)法提取佛手多糖,在单因素实验的基础上,以佛手多糖提取率为指标,通过响应面优化得出两种方法的最佳提取工艺,并利用RAW264.7巨噬细胞模型评价佛手多糖的免疫活性,采用MTT法、中性红比色法和Griess法分别检测佛手多糖对RAW264.7细胞的生长、吞噬活性和释放NO能力的影响。结果表明,CPE法提取佛手多糖的最佳工艺条件为:温度99 ℃,时间4.5 h,流速66 L/h,提取率为16.09%±0.12%,得率为21.31%±0.13%;HWE法提取佛手多糖的最佳工艺条件为:95 ℃,时间6.0 h,液料比63 mL/g,提取率为15.43%±0.21%,得率为20.22%±0.16%;与HWE法相比,CPE法将佛手多糖提取率提高了4.28%(P<0.05),得率提高了5.39%(P<0.05),且提取时间缩短了1/4。佛手多糖在浓度低于500 μg/mL时对RAW264.7巨噬细胞无明显毒性作用,且可以促进NO的分泌以及提高吞噬活性。上述结果说明,CPE法适合佛手多糖的提取,优于传统的HWE法,且佛手多糖具有免疫类保健食品和药品开发的潜力。     

北五味子多糖对RAW264.7细胞的免疫调节作用

北五味子是我国传统中药材,近年来因其具有的护肝、安神等多种功效而得到了广泛地关注和研究。本实验提取北五味子多糖并超滤处理获得不同分子质量的多糖组分Sp1(100 ku)和Sp2(10~100 ku),分别按不同质量浓度对小鼠巨噬细胞系RAW264.7孵育处理,通过检测细胞增殖活性、吞噬能力、NO分泌水平及培养基中细胞因子(细胞白介素(interleukin,IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α))的含量,并与脂多糖实验组进行对比,评价北五味子多糖在免疫调节方面的作用。结果显示,较低分子质量的Sp2组分活性较强,在500.00μg/m L以上时,可以对小鼠巨噬细胞RAW264.7的吞噬能力、NO分泌水平、IL-1β和TNF-α含量有普遍的促进作用,显现出良好的免疫提高潜力,而较高分子质量的Sp1组分活性较弱。     

壳聚糖絮凝法纯化牛蒡多糖的工艺优化

本实验以牛蒡根为材料,以多糖保留率、蛋白清除率和脱色率为评价指标,在单因素实验的基础上设计正交试验,优化壳聚糖对牛蒡多糖提取液的絮凝纯化工艺。同时,与传统的水提醇沉法制备多糖作对照,检验了壳聚糖絮凝工艺的纯化效果及制备样品的抗氧化活性。结果表明:当壳聚糖用量为1.2 mL/g,絮凝时间为15 min,提取液pH为4时,牛蒡多糖得率为40.01%±0.11%,纯度为65.39%±0.67%,均优于传统的水提醇沉多糖。另外,体外抗氧化实验表明,壳聚糖絮凝法制备的多糖清除DPPH自由基的能力及对氧化损伤的酵母细胞的保护率均高于传统的水提醇沉多糖。综上,相比于传统的醇沉法,壳聚糖絮凝法是一种更优的纯化牛蒡多糖的方法。     

超声波辅助酶法提取北五味子多糖工艺研究

建立了超声波辅助复合酶(纤维素酶/蛋白酶/果胶酶=1∶1∶1)提取北五味子多糖的方法。以多糖的提取率为研究指标,通过设计正交试验和响应面优化试验,对超声波辅助复合酶法提取北五味子多糖的工艺进行了优化。确定最佳工艺条件为酶解温度45℃,缓冲液pH 4.6,复合酶用量2%,酶解时间为2.0h,超声波功率166W,萃取温度56℃,萃取时间39 min。在此最佳条件下,北五味子多糖提取量达到105.36mg/g。超声波辅助复合酶法应用到多糖的提取领域,节省了时间,降低了溶剂消耗,且明显提高了多糖的提取率,该法操作方便,简单易行,为北五味子多糖工业化生产提取提供了理论依据。