双酶提取蒲公英根多糖工艺优化及其抗氧化性研究

以蒲公英根烘焙粉为原材料,研究了酶添加量、酶解温度和酶解时间在单酶和双酶协同酶解条件下对多糖得率和DPPH自由基清除率的影响,并采用响应曲面法优化了酶解工艺参数。结果表明,单酶法提取1 g蒲公英根多糖的适宜条件为:料水比(g∶mL)1∶30,纤维素酶酶解温度50℃,酶添加量1.0 mL;木瓜蛋白酶酶解温度60℃、酶添加量2.0 mL。双酶法多糖提取率高于单酶法,影响多糖得率的工艺因素主次顺序为酶解时间、酶解温度、酶添加量。适宜的多糖提取条件为:料水比(g∶mL)1∶30,木瓜蛋白酶悬液(200 U/mL)添加量1.98 mL,纤维素酶悬液(200 U/mL)添加量0.99 mL,55℃提取1.9 h,此时多糖得率为32.97%±0.13%,DPPH自由基清除率为92.31%±0.25%。烘焙和酶解工艺可提高蒲公英根多糖得率和DPPH自由基清除率。     

藕节多糖的复合酶提取工艺优化及其抗氧化活性

目的：优化复合酶法提取藕节多糖的工艺，并研究其体外抗氧化活性。方法：在单因素试验结果基础上，以酶添加量、酶解温度、酶解时间及液料比为自变量，多糖得率为响应值，利用Box-Behnken响应面法进行工艺优化。以DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除率为指标考察藕节多糖的体外抗氧化活性。结果：复合酶由纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶按质量比1:1:1组成。复合酶提取藕节多糖最佳工艺为酶添加量1.6%、酶解温度53℃、酶解时间89min、液料比13:1 mL/g、酶解p H5.5，此条件下藕节多糖得率为6.57%，与回归模型的理论预测值6.54%误差小于5%。藕节多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基均具有较强的清除作用，半数抑制浓度分别为1.079、1.281、0.984 mg/mL。结论：复合酶法可显著提高藕节多糖得率，工艺简便可行，获得的藕节多糖具有体外抗氧化活性。     

响应面优化纤维素酶法提取桂花多糖工艺及其抗氧活性研究

目的:优化桂花多糖的提取工艺,并评价桂花多糖的抗氧化活性。方法:以桂花多糖得率为响应值,在单因素实验基础上,以液料比、酶解温度、酶解时间、酶添加量为实验因素,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件;采用自由基清除能力体系评价桂花多糖的抗氧化活性。结果:通过二次回归模型响应面分析,影响桂花多糖得率的因素按主次顺序排列为:纤维素酶添加量酶解时间液料比酶解温度;确定纤维素酶解桂花多糖最佳工艺条件为纤维素酶添加量6.0mg/m L、液料比8∶1m L/g、酶解温度55℃、酶解时间80min,在此条件下桂花多糖得率为18.43%,模型方程理论预测值为19.05%,两者相对误差小于5%。桂花多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH和O2-·自由基的半数抑制浓度分别为0.846mg/m L、1.256mg/m L,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论:采用响应面法优化得到了桂花多糖的最佳提取工艺,该工艺方便可行,得到的多糖具有较强的抗氧化活性。     

纤维素酶法提取决明子粗多糖的工艺优化及其抗氧化活性

目的:优化纤维素酶法提取决明子粗多糖的工艺,并研究决明子粗多糖的体外抗氧化活性。方法:在单因素实验的基础上,以酶解时间、酶解温度、酶用量、液料比及酶解pH为自变量,多糖得率为响应值,利用BoxBehnken响应面法进行工艺优化。以对DPPH自由基和羟自由基清除率的大小为指标考察决明子粗多糖的体外抗氧化活性。结果:纤维素酶法提取决明子粗多糖最佳工艺为酶用量1.4%、酶解时间50 min、液料比24:1 mL/g、酶解pH5.4、酶解温度48℃,此条件下决明子多糖得率为11.67%,与回归模型的理论预测值11.91%误差小于5%。决明子粗多糖对DPPH自由基和羟自由基均具有较强的清除作用,半数抑制浓度分别为1.025 mg/mL和0.894 mg/mL。结论:纤维素酶法可显著提高决明子粗多糖得率,工艺简便可行,获得的决明子粗多糖具有体外抗氧化活性。     

响应面优化纤维素酶法提取茶花多糖工艺及其抗氧化活性研究

目的:优化纤维素酶提取茶花多糖的工艺,并评价其抗氧化活性。方法:以茶花多糖得率为响应值,在单因素实验基础上,以液料比、酶解温度、酶解时间、酶添加量为实验因素,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件;采用自由基清除能力体系评价茶花多糖的抗氧化活性。结果:通过二次回归模型响应面分析,影响茶花多糖得率的因素按主次顺序排列为:酶解时间酶解温度液料比酶添加量;确定纤维素酶酶解茶花多糖最佳工艺条件为纤维素酶添加量5.0 mg/m L、液料比9∶1 m L/g、酶解温度48℃、酶解时间71 min,在此条件下茶花多糖得率为15.28%,模型方程理论预测值为15.91%,两者相对误差小于5%。茶花多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH和O-2·自由基的半数抑制浓度分别为0.974、1.342 mg/m L,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论:采用响应面法优化得到了茶花多糖的最佳提取工艺,该工艺方便可行,得到的多糖具有较强的抗氧化活性。     

白花丹参多糖酶法提取条件的响应面优化及其抗氧化活性研究

研究响应面优化复合酶法提取白花丹参多糖的工艺,并评价其抗氧化活性。以白花丹参多糖提取率为响应值,液料比、酶解温度、酶解时间、复合酶(木瓜蛋白酶:纤维素酶:果胶酶=2:2:1)添加量为实验因素,采用响应面法建立数学模型,优化提取条件,并初步探讨白花丹参多糖的理化性质,考察白花丹参多糖对DPPH和·OH自由基的清除能力。结果表明,通过二次回归模型响应面分析,液料比、酶解时间、温度、复合酶添加量四因素对白花丹参多糖提取率的影响依次减弱;最佳工艺条件为酶解温度52℃、时间70 min、复合酶添加量8.0 mg/mL、液料比例为45:1 mL/g,在此条件下多糖提取率为13.36%,模型方程理论预测值为13.70%,两者相对误差小于5%。白花丹参多糖为左旋型、酸性多糖,易溶于水,并具有较强的抗氧化活性,对DPPH和·OH自由基的半数抑制浓度分别为0.969 mg/mL和3.114 mg/mL,但抗氧化活性小于VC。采用响应面法优化得到了白花丹参多糖的最佳复合酶提取工艺,得到的多糖具有较强的抗氧化活性。     

山银花多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究

目的:研究纤维素酶提取山银花多糖的最佳工艺条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法:以山银花多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解时间、液料比、酶解p H、酶添加量为试验因素,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件。山银花多糖抗氧化活性检测使用DPPH、·OH和O_2~-·自由基清除能力体系。结果:纤维素酶酶解提取山银花多糖最佳条件为:酶解时间80 min,液料比14.6 mL/g,酶解pH 5.2,酶添加量8.0 mg/mL,酶解温度50℃,在此条件下山银花多糖实际得率为15.76%,与理论预测值16.05%相对误差小于5%。液料比对多糖得率影响最显著,酶添加量、酶解pH次之,酶解时间影响最小。山银花多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH、·OH和O_2~-·自由基清除的半数抑制浓度IC_(50)分别为0.941、1.238、1.786 mg/mL。结论:获得山银花多糖纤维素酶酶法提取的最佳条件,该工艺条件方便可行,获得的多糖具有较强的自由基体外清除能力。     

双酶法提取大蒜多糖工艺优化及其体外抗氧化活性研究

以大蒜为原料,采用双酶法提取大蒜多糖,用苯酚-硫酸法测定多糖含量。通过单因素试验考察了纤维素酶添加量、果胶酶添加量、酶解时间、酶解温度对大蒜多糖得率的影响,在单因素试验的基础上,采用响应曲面法设计四因素三水平试验进行回归分析,优化大蒜多糖的提取工艺,并探讨其体外抗氧化活性。试验结果表明,4个因素对大蒜多糖得率影响的大小依次为:酶解时间纤维素酶添加量酶解温度果胶酶添加量;最佳提取工艺条件为:纤维素酶添加量2.0%,果胶酶添加量2.0%,酶解时间160min,酶解温度50℃,在此条件下大蒜多糖得率为34.76%,与预测值相差0.12%,拟合度良好。大蒜多糖对O2-·、·OH、DPPH自由基均表现出较强的清除能力,且清除率随多糖浓度的增加而增大,呈明显的量效关系。因此,大蒜多糖可作为天然绿色的抗氧化剂添加到食品中,具有良好的开发前景。     

金耳酵母状孢子多糖双酶法提取工艺及其抗氧化性

为提高金耳酵母状孢子多糖得率,在单因素试验的基础上,通过Plackett-Burman试验和正交试验优化金耳酵母状孢子多糖的提取工艺;并通过测定金耳酵母状孢子多糖DPPH自由基和羟自由基清除率对其体外抗氧化活性进行探究。结果表明,金耳酵母状孢子多糖最佳提取工艺条件：纤维素酶200 U/g孢子粉,果胶酶50 U/g孢子粉,酶解时间80 min,酶解温度55℃,酶解pH值为4.5,料液比1∶40（g/mL）,在该提取条件下,金耳酵母状孢子多糖得率为（8.41±0.36）% 。体外抗氧化试验表明,金耳酵母状孢子多糖对DPPH自由基和羟自由基的IC50值分别为7.06 mg/mL和19.33 mg/mL。     

黑皮鸡枞菌多糖提取工艺及抗氧化活性研究

以黑皮鸡枞菌子实体为试验材料,研究复合酶法提取黑皮鸡枞菌多糖的最佳工艺条件,并测定黑皮鸡枞菌多糖的抗氧化活性。分别考察复合酶比例、液料比、复合酶添加量、酶解温度、酶解pH、酶解时间对多糖提取率的影响,根据单因素试验结果,设计响应面试验优化提取工艺。通过测定DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率评价黑皮鸡枞菌多糖的抗氧化活性。黑皮鸡枞菌多糖提取条件确定为：以纤维素酶∶果胶酶∶木瓜蛋白酶为4∶3∶3制备复合酶,复合酶添加量3.0%,液料比47∶1 (mL/g),酶解温度54℃,酶解pH 7.5,酶解时间73 min,此时,多糖提取率达18.75%。黑皮鸡枞菌多糖浓度为4.0 mg/mL时,DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率分别达93.44%、47.58%,表现出较强的抗氧化活性。复合酶提取黑皮鸡枞菌多糖的方法具有较高的多糖提取率及抗氧化活性。该方法可以为黑皮鸡枞菌多糖的开发和利用提供理论依据和新的思路。     

响应面法优化复合酶提取芦荟多糖工艺及其抗氧化活性分析

研究复合酶提取芦荟多糖的工艺,并测定其抗氧化性。在单因素试验的基础上,利用响应面法对复合酶提取芦荟多糖的条件进行了优化,通过测定芦荟多糖的总抗氧化能力、DPPH自由基和羟自由基清除能力研究其抗氧化性。结果显示,当料液比1∶30（g/mL）、果胶酶与纤维素酶配比1∶3、pH 4.5时,优化最佳提取条件为加酶量0.3%、酶解温度48 ℃、酶解时间40 min,此条件下芦荟多糖的提取率为5.65%,和超声波辅助法相比提取率提高了4.2%。芦荟多糖具有较好的抗氧化性,随着质量浓度的增加,其总抗氧化能力、DPPH自由基和羟自由基清除能力逐渐增强,在25 mg/mL时其DPPH自由基和羟自由基清除率分别达到75%和90%。复合酶法是一种新的、有效的芦荟多糖提取方法;芦荟多糖具有较好的抗氧化性。     

马齿苋多糖提取工艺优选及活性初筛

以多糖提取得率为指标,采用正交试验对加酶超声辅助法提取马齿苋多糖的工艺条件进行了优化。方法:以未经酶解和未采用超声处理的传统水提醇沉法得到的多糖做对照,通过近红外光谱分析加酶超声处理对马齿苋多糖结构的影响并对马齿苋多糖的抗氧化活性进行分析。结果表明:在纤维素酶2.5%,超声温度60℃,超声功率70 W,超声时间20 min,多糖提取得率达到18.40%。结论:近红外光谱分析表明,加酶超声对多糖的结构没有显著影响,提高了多糖提取率。体外抗氧化性实验表明,所提取马齿苋多糖具有较强的总抗氧化能力,对.OH和DPPH均有较好的清除能力,活性大小与多糖的浓度呈明显的线性关系。     

响应面试验优化复合酶法提取碎米荠多糖工艺及其抗氧化活性

利用人工种植的碎米荠为原料,研究其粗多糖的提取工艺参数及抗氧化活性。首先对提取条件的单因素进行优化,在单因素试验基础上,进行提取条件的响应面优化。单因素优化条件为:质量分数2%复合酶(m(纤维素酶)∶m(果胶酶)=2∶1)、酶解时间90 min、酶解温度60℃、酶解pH 4.0。响应面优化结果为:酶解时间91.8 min、酶解温度57.1℃、酶解pH 4.17。在此条件下,碎米荠粗多糖提取率最高,粗多糖提取率预测值为4.14%,验证实验得到实际粗多糖的平均提取率为4.07%;与理论预测值相比,其相对误差约为1.62%。抗氧化活性研究结果显示,碎米荠多糖具有抗氧化活性,且效果优于VC。该实验结果为碎米荠多糖的提取以及多糖的性质研究提供理论依据。     

复合酶法提取石榴籽多糖的工艺优化

探讨应用复合酶法提取石榴籽多糖的最佳工艺条件。以多糖得率为考察指标,在单因素试验基础上,通过D-最优混料试验设计优化复合酶配比,Box-Behnken试验设计优化得出影响因素的最佳参数水平,进而得出最佳工艺条件。结果显示：复合酶最优配比为果胶酶24.2%、纤维素酶67.2%、甘露聚糖酶8.6%;并以此参数为基础,得到复合酶法提取石榴籽多糖的最佳工艺条件为液固比20∶1（mL/g）、介质pH 4.5、酶解温度48.5 ℃、酶解时间287 min,在此条件下,石榴籽多糖得率为2.83%。     

淫羊藿叶多糖工艺优化及抗氧化活性

探索和优化超声复合酶解提取淫羊藿叶粗多糖工艺。在单因素试验的基础上,通过正交试验优化复合酶添加量,再采用Box-Behnken设计和响应面优化超声复合酶解提取工艺参数。结果显示:不同酶添加量对多糖提取得率的影响次序是:纤维素酶果胶酶木瓜蛋白酶α-淀粉酶,最佳复合酶(木瓜蛋白酶、果胶酶、纤维素酶和α-淀粉酶)的添加量分别为50、250、200、100 U/g;最佳提取条件为提取温度46.8℃、超声时间42.3 min、p H 4.3、超声功率311 W。在此实验条件下,粗多糖提取得率为5.98%,与模型预测值(6.2%)接近。粗多糖通过琼脂糖离子交换和葡聚糖分子筛凝胶柱色谱分离纯化,得到3个主要多糖组分(EPs-1、EPs-2、EPs-3),多糖组分采用DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除和铁离子还原能力实验进行了抗氧化活性评价。结果表明,超声复合酶提取作为一个高效和环保的提取技术,可以应用于从植物原料中提取活性成分;抗氧化活性实验显示3个多糖组分都具有显著的抗氧化活性,其活性呈添加量依赖关系。这些结果说明淫羊藿多糖可以探索作为潜在的抗氧剂应用于功能食品和药品。     

响应面法优化松茸多糖酶法提取工艺及其体外抗氧化性分析

为确定复合酶（纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶）提取松茸多糖的最佳工艺,并对其体外抗氧化活性进行初步研究,在单因素试验的基础上,以料液比、pH值、酶解时间和酶解温度为影响因素,利用Box-Behnken方法进行四因素三水平试验设计,以多糖提取率为响应值,进行响应面分析;分别用邻苯三酚自氧化法和对DPPH自由基的清除作用测定松茸多糖的体外抗氧化性。结果表明：多糖提取的最佳工艺为料液比1∶40（g/mL）、pH 5、酶解温度35 ℃、酶解时间71 min,松茸多糖的提取率预测值为7.06%,验证值为6.95%,与预测值相对误差为1.56%;松茸多糖对超氧阴离子自由基和DPPH自由基具有较强的清除作用,其IC50值分别为0.565 mg/mL和0.454 mg/mL。因此,复合酶法提取松茸多糖高效、简单,可用作松茸多糖的提取工艺;松茸多糖具有明显的体外抗氧化活性。     

响应面法优化草菇抗氧化肽的酶法制备工艺

以草菇为原料提取蛋白质,蛋白酶酶解蛋白制备抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为指标,在单因素实验基础上,结合响应面法优化草菇抗氧化肽的提取工艺。通过超滤分离纯化获得不同分子量的肽段,采用DPPH自由基清除率、Fe2+螯合率和还原力法测定超滤组分的抗氧化活性。结果表明:中性蛋白酶为最优酶解蛋白酶,最佳酶解工艺条件为酶解时间3.70 h,加酶量3.81%,底物质量浓度3.11 g/100 mL,在此条件下,酶解产物的DPPH自由基清除率为69.85%±2.52%。通过超滤分级制备所得分子量最小的肽段F1（<3 kDa）具有最高的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率、Fe2+螯合率和还原力分别为78.81%±1.56%、91.05%±1.65%、0.47±0.02。草菇抗氧化肽可作为潜在的天然抗氧化剂来源得到开发利用。     

沙蚕多糖提取工艺及抗氧化活性研究

对沙蚕多糖提取工艺条件的优化和抗氧化活性进行研究。在单因素试验基础上,采用响应面法对温度、料液比、时间3个因素进行优化。在提取温度83℃、料液比1∶25(g/mL)、提取时间3.5 h的最佳条件下,沙蚕多糖的提取率为1.76%,与预测值1.77%相当。经测定沙蚕多糖对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基均有较好的清除作用,表明沙蚕多糖具有抗氧化活性。     

超声辅助果胶酶法提取红树莓花色苷及其成分测定

本研究利用超声辅助果胶酶法来提取制备红树莓花色苷,通过单因素实验,研究花色苷提取工艺中果胶酶浓度、料液比、酶解pH、酶解温度、超声时间和超声功率对提取液中花色苷含量的影响,结合响应面实验对提取工艺进行了优化,对比超声辅助果胶酶法和单一提取法所得的花色苷含量,并利用超高效液相色谱仪串联四级杆/飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF)对树莓花色苷进行结构鉴定。结果表明:红树莓花色苷最佳提取条件为:果胶酶浓度5 mg/g、料液比1:15(g/mL)、酶解pH3、酶解温度50℃、酶解时间60 min、超声时间20 min和超声功率450 W,此时所得花色苷含量为127.51 mg/100 g。超声辅助酶法所得到花色苷含量较酶法提高了24.58 mg/100 g,较超声法提高40.40 mg/100 g,较单一提取法,超声辅助酶法具有更好的提取效果。经过超高效液相色谱三重四级杆飞行质谱分离中主要花色苷为:芍药素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-阿拉伯糖苷和矢车菊素-3-芸香糖苷。     

超声波辅助酶法提取北五味子多糖工艺研究

建立了超声波辅助复合酶(纤维素酶/蛋白酶/果胶酶=1∶1∶1)提取北五味子多糖的方法。以多糖的提取率为研究指标,通过设计正交试验和响应面优化试验,对超声波辅助复合酶法提取北五味子多糖的工艺进行了优化。确定最佳工艺条件为酶解温度45℃,缓冲液pH 4.6,复合酶用量2%,酶解时间为2.0h,超声波功率166W,萃取温度56℃,萃取时间39 min。在此最佳条件下,北五味子多糖提取量达到105.36mg/g。超声波辅助复合酶法应用到多糖的提取领域,节省了时间,降低了溶剂消耗,且明显提高了多糖的提取率,该法操作方便,简单易行,为北五味子多糖工业化生产提取提供了理论依据。