美拉德反应改性壳聚糖产物体外抗氧化能力的研究

利用美拉德反应对壳聚糖进行改性来提高其抗氧化能力.通过测定改性后壳聚糖美拉德反应产物(MRPs)的DPPH自由基清除率、还原能力及螯合铁离子能力,确定不同壳聚糖粘度及浓度、葡萄糖浓度、pH和温度的反应条件对MRPs体外抗氧化能力的影响.结果表明,壳聚糖经改性后,MRPs体外抗氧化能力得到显著改善(p＜0.05).MRPs的DPPH自由基清除率、还原能力与葡萄糖浓度、壳聚糖浓度和温度呈现正相关趋势.低、中粘度壳聚糖MRPs仅在还原能力上有显著差异(p＜0.05).1％的低、中粘度壳聚糖改性后MRPs铁离子螯合率比改性前分别提高了34.41％、24.5％.pH在3.6～5.4内对壳聚糖MRPs体外抗氧化能力有比较复杂的影响.     

卵白蛋白体外模拟胃肠道消化产物的抗氧化活性及其结构表征

为探究蛋白经体外模拟胃肠道消化后消化产物的抗氧化活性变化规律,以卵白蛋白为研究对象,测定消化产物的体外抗氧化活性,然后利用H2O2构建Caco-2细胞氧化损伤模型,测定细胞存活率、活性氧(ROS)水平,探究消化产物的细胞抗氧化活性。利用电喷雾轨道阱串联质谱鉴定抗氧化活性最强组分(分子质量1 ku的产物)的抗氧化肽。结果表明:卵白蛋白经体外模拟胃肠道消化后,产物的体外抗氧化活性增强并具有浓度依赖性。其组分分子质量越小,抗氧化活性越强。分子质量1 ku的产物具有最强的抑制细胞氧化损伤和清除活性氧能力。质谱鉴定出的3条肽序列均具有较强的抗氧化活性,序列分别为CFDV、CVSP和MPFR。以上结果显示,体外模拟胃肠道消化对卵白蛋白消化产物的抗氧化活性提高以及抗氧化活性肽段的释放具有积极作用。     

虎斑乌贼生殖腺多肽的制备工艺优化及其体外抗氧化活性

为了实现乌贼副产物的高值化利用,以虎斑乌贼生殖腺作为枯草芽孢杆菌的唯一发酵基质,以发酵液的蛋白酶活力和非蛋白氮含量为评价指标,通过单因素及正交试验确定最佳的发酵工艺。同时,对发酵产物的体外抗氧化活性及其氨基酸组成进行了研究。结果表明,最佳的发酵条件为:底物质量浓度为30 mg/m L,培养基的初始p H值6. 0,发酵温度34℃,发酵时间60 h。在此条件下,发酵液的蛋白酶活力及非蛋白氮含量分别为(66. 66±0. 64) U/m L和(1. 10±0. 02) mg/m L。所得的发酵产物具有良好的体外抗氧化活性,其羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力及亚铁离子螯合能力的IC50值分别为19. 40、8. 90和1. 75 mg/m L。氨基酸组成分析表明,发酵产物中赖氨酸含量最高,其抗氧化氨基酸和疏水性氨基酸的含量分别占总氨基酸含量的63. 3%和39. 1%,具有很好的抗氧化潜力,可作为天然抗氧化剂或功能性食品添加剂应用于食品加工中。     

抗氧化能力的体外测定方法研究进展

水果、蔬菜、茶叶和红葡萄酒等食品被认为对人体健康具有积极的作用,其主要原因在于这些产品中的一些天然产物具有抗氧化作用。随着对天然抗氧化物质的关注程度不断提高,研究者开发出许多种体外抗氧化能力测定方法。常用的体外抗氧化测定方法有:总氧自由基清除能力法、还原能力测定法、ABTS自由基清除能力法、DPPH自由基清除能力法、羟自由基清除能力法、超氧自由基清除能力法和脂质过氧化法等。这些方法的反应原理和反应环境各不相同。作者系统地介绍了体外各种抗氧化能力测定方法,分析了这些方法的原理、特点和优缺点,并且对现行方法在实际中的应用现状和研究动态进行了评述。     

大米蛋白体外消化产物抗氧化活性的研究

为了研究大米清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白体外消化产物的抗氧化活性,用Osborne法从大米粉中提取大米四种蛋白。采用胃-胰蛋白酶分步酶解,选择DPPH·,ABTS+·,·OH自由基清除能力和Fe2+金属离子螯合能力四个指标对消化产物的抗氧化活性进行综合评价。与市售的大豆肽比较,大米四种蛋白经模拟体外消化后具有良好的抗氧化活性。其中醇溶蛋白的消化产物抗氧化活性最好,DPPH·,ABTS+·,·OH自由基清除能力和Fe2+金属离子螯合能力的半抑制浓度分别为30.88 mg/m L、27.61 mg/m L、5.43mg/m L、0.18 mg/m L。大米四种蛋白酶解产物的Fe2+螯合能力半抑制浓度均小于1 mg/m L,具有良好的Fe2+螯合能力。研究结果表明大米四种蛋白的体外消化酶解物具有不同大小的抗氧化活性,分子量集中在181~1000 Da范围内,是一种易于被人体吸收的抗氧化肽。     

制备花生抗氧化肽的蛋白酶筛选研究

选用7种食品级蛋白酶水解花生蛋白,研究单一酶作用和双酶组合作用对水解产物水解度及体外抗氧化能力的影响,结果表明:除风味蛋白酶外,单一酶以及其他单酶两两组合对花生蛋白的水解程度都很小,其中碱性蛋白酶作用较好一些.风味蛋白酶单独作用以及与其他酶组合作用于花生蛋白,其水解度都很高,最高可达33.7%;以不同方法测定不同酶解产物的抗氧化能力表明,碱性蛋白酶作用产物抗氧化能力最强,双酶组合作用对水解产物的抗氧化能力影响不大,因此选用碱性蛋白酶做进一步酶解条件优化的研究.     

荧光法及化学发光法在保健食品抗氧化体外实验中的应用

保健食品体外抗氧化能力评价实验具有简便、快捷的特点.发射光谱法是目前常用的保健食品体外抗氧化能力检测方法.本文对发射光谱法中的荧光法及化学发光法各自原理、特点、仪器、检测方法、应用范围进行了分析比较,并举例说明了这2种方法在保健食品抗氧化体外实验中的应用特点.     

银杏花粉黄酮苷的恶味乳杆菌B2生物转化产物及其抗氧化活性评价

目的：研究恶味乳杆菌B2（Lacbacillus perolens B2）生物转化对银杏花粉黄酮组分及其抗氧化活性的影响。方法：分析银杏花粉及其生物转化产物的提取物和各自石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相萃取物的得率和高效液相色谱图,通过2,2’-连氮基-双-（3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力评价其体外抗氧化活性,通过对H2O2损伤小鼠巨噬细胞RAW264.7的保护作用评价其细胞抗氧化活性。结果：通过L. perolens B2的生物转化,提取物及各相萃取物得率均有所提高,银杏花粉主要黄酮苷被转化为以山柰酚为代表的黄酮苷元,并富集于乙酸乙酯萃取相。体外抗氧化活性评价显示,通过L. perolens B2的生物转化,提取物和各相萃取物的体外抗氧化能力均得到提高,其中生物转化产物的乙酸乙酯相萃取物的体外抗氧化活性最高。细胞实验显示,供试的银杏花粉及其生物转化产物的提取物和各自的乙酸乙酯相萃取物均可减缓由H2O2损伤导致的RAW264.7细胞凋亡,并且存在剂量依赖关系。生物转化产物的提取物及乙酸乙酯相萃取物对H2O2损伤RAW264.7细胞的保护能力均高于对应的银杏花粉样品,其中生物转化产物的乙酸乙酯相萃取物保护能力最强,当其质量浓度为15 μg/mL时,几乎可以完全保护RAW264.7细胞不受H2O2损伤。结论：通过L. perolens B2的生物转化,银杏花粉主要黄酮苷被转化为以山柰酚为代表的黄酮苷元,提取物及各相萃取物的得率、体外抗氧化活性及对H2O2诱导损伤的RAW264.7细胞的保护作用均显著提高（P＜0.05）,其中生物转化产物的乙酸乙酯相萃取物抗氧化活性最高。     

超滤法分离富集谷朊粉抗氧化活性肽

为了研究谷朊粉酶解产物中发挥抗氧化活性的肽片段,采用截留不同相对分子质量的超滤膜对谷朊粉酶解产物进行初步分离富集,并通过测定各级多肽的亚铁离子螯合能力、对亚油酸的自氧化抑制能力以及对ABTS自由基的清除能力来评价其体外抗氧化能力.结果表明:抗氧化能力由弱到强依次为:大于10 000＜10 000～5 000＜小于5 000.对于相对分子质量在5000以下的组分,当质量浓度为0.2、0.4 mg/mL时,亚铁离子螯合能力是超滤前样品的2倍左右;对亚油酸自氧化的抑制能力在36 h后比其它相对分子质量片段的组分效果明显;而当质量浓度为4 mg/mL时,TEAC值达到1.45 mmol/L Trolox;并且由高效液相色谱法对其相对分子质量进行分析发现,小分子肽占了绝大部分,说明抗氧化肽主要集中在相对分子质量2 000以下.     

多指标评价酶解蚕蛹蛋白产物的抗氧化活性

以DPPH·清除率、O_2~-·清除率、还原能力和金属离子螯合力等4种常用的体外抗氧化模型,研究蚕蛹酶解产物的抗氧化活性。研究结果表明:8种酶解产物中,碱性蛋白酶酶解产物的综合抗氧化能力较好,DPPH·清除率为38.91%;O_2~-·清除率为43.69%;还原能力为1.982;金属离子螯合力为0.624。     

米根霉和酵母菌组合发酵对燕麦总酚及体外抗氧化活性和理化指标的影响

研究燕麦米根霉和酵母菌组合发酵过程中总酚含量、体外抗氧化活性及理化指标的变化,测定了燕麦发酵产物中总酚的含量,并对体外抗氧化活性进行研究,结果显示:随着发酵时间的延长,燕麦的总酚含量和不同体外抗氧化能力均有显著提高,燕麦总酚含量在72 h时最大,为后趋于稳定,清除率最高可达66.30%;铁离子还原力不断增大,最大值为0.385μmol/g FeSO_4当量。发酵产物pH下降显著,最低可达3.81;总酸含量随着发酵时间增加显著,发酵结束时达渐减少。     

ORAC法测定保健食品抗氧化能力体内外实验对比分析

目的：探讨ORAC(oxygen radical absorbance capacity)荧光法测定保健食品抗氧化能力的体内体外实验结果的相关性。方法：以VC和3种保健食品为样品,用ORAC荧光法作为检测方法,用抗氧化能力(即Trolox当量)作为定量依据,通过体内体外实验测定保健食品的抗氧化能力。结果：ORAC荧光法测定保健食品抗氧化能力体内体外的实验结果存在一定相关性。当体外检测样品抗氧化值折合小鼠灌胃剂量大于25μmol Trolox/kg时,用该样品连续灌胃小鼠30d,动物体内抗氧化实验结果呈现阳性。结论：通过ORAC荧光法体外实现测定保健食品抗氧化能力,能够推测用同样方法检测动物体内抗氧化实验的结果。     

青梅汁抗氧化特性的研究

探讨了青梅汁的体外抗氧化作用。采用化学模拟体系对其总抗氧化能力,清除·OH、DPPH·及O_2~-·的能力进行测定;通过体外动物试验,研究了青梅汁对37℃孵育后H_2O_2诱导的脂质过氧化产物MDA的生成和红细胞溶血的影响。结果表明,6°Brix青梅汁的总抗氧化能力为362 U/mL,强于1.0 mg/mL的VC,BHA和BHT,同时对·OH,O_2~-·及DPPH·具有较强的清除能力,且可抑制MDA的产生和红细胞溶血。说明青梅汁具有较强的抗氧化能力。     

鸡肉和猪肉蛋白质酶解动力学及产物性质分析

采用体外模拟方法,对两种蛋白的消化动力学及其产物抗氧化活性进行了分析。结果显示,鸡肉蛋白更容易被蛋白酶所水解,生成更多的游离氨基酸和非蛋白氮(NPN),具有较低的K_m值和较高的V_(max)。体外抗氧化活性结果显示,经胃液、肠液消化后,两种蛋白消化产物的抗氧化活性显著增强(p≤0.01),且差异显著(p≤0.01),除脂质过氧化抑制活性外,鸡肉蛋白消化产物显示出更强的体外抗氧化活性。研究表明,不同膳食蛋白具有不同的消化动力学性质,其产物具有不同抗氧化活性。     

罗非鱼内脏蛋白酶解超滤产物的抗氧化活性研究

将罗非鱼内脏蛋白水解得到可溶性多肽,利用超滤技术对水解产物进行分级分离,并检测酶解产物及其超滤产物的体外还原能力、清除DPPH自由基能力、清除超氧阴离子能力及抑制卵黄磷脂氧化能力。结果表明:酶解可以得到分子量范围宽、具有多种抗氧化能力的多肽;超滤分级后,分子量5kDa的多肽组分抗氧化能力最强,尤其是该组分清除超氧阴离子的能力及抑制脂质过氧化的能力接近VC,其IC50值与VC的IC50值处于同一个数量级。     

小麦蛋白水解物对肠道上皮细胞抵御氧化应激损伤的作用

采用双酶和三酶对小麦蛋白复合水解,获得富含谷氨酰胺(Gln)的双酶酶解产物(PWGH)和三酶酶解产物(AWGH)。比较小麦蛋白及其2种酶解产物经体外模拟消化前、后,抵御肠上皮细胞(Caco-2)氧化应激损伤能力的变化。结果表明:2种水解产物均能在一定程度上缓解细胞因氧化应激损伤导致的存活率降低现象,减少细胞氧化损伤的程度。二者经体外模拟消化降解后仍有此作用,而小麦蛋白的体外模拟消化产物对损伤细胞存活率无显著影响。2种水解产物均能在一定程度上提高氧化应激损伤细胞的抗氧化能力,提高细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)水平,减少损伤细胞的脂质氧化,然而,经体外模拟消化降解后,PWGH仍有上述作用,而AWGH对损伤细胞的抗氧化能力和GSH水平无显著影响。研究表明:体外模拟消化对AWGH的活性肽段有破坏,而PWGH活性肽段经消化后仍有保留。值得注意的是,小麦蛋白经体外模拟消化,其产物(WGH)虽能减少损伤细胞的脂质氧化,但对损伤细胞的抗氧化能力和GSH水平均无显著影响。     

常见药食植物提取物体外抗氧化活性的评价

本实验选用普鲁士兰法、邻二氮菲-Fe2+氧化法、光照核黄素一氮蓝四唑(NBT)法和DPPH·(1,1-Diphenyl一2-Picryl-Hydrazyl)法四种常用的体外抗氧化活性评价方法,以蒸馏水、80%乙醇和乙酸乙酯作为样品提取剂,对27种常见的植物原料的抗氧化能力进行全面的比较分析.结果表明,不同植物体外抗氧化能力差别较大,同种植物对不同抗氧化能力也存在一定差异,而同一植物的三种提取物在同一个抗氧化评价指标上也有差距.     

体外模拟消化对大米谷蛋白结构及水解产物生物活性的影响

通过体外模拟消化,研究不同消化时间下谷蛋白结构与抗氧化和血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制活性的关系.利用内源荧光光谱和傅里叶变换红光谱测定谷蛋白水解过程结构变化.通过测定水解产物抗氧化能力和ACE抑制率表征酶解产物的活性,利用四极杆串联飞行时间质谱鉴定具有抗氧化...     

利用线虫模型评价乳酸菌体内抗氧化能力及其与体外抗氧化参数的对比

通过对24株乳酸菌(Lactobacillus)羟自由基清除能力、DPPH自由基清除能力以及还原能力的测定,比较其体外抗氧化能力的大小,而后将乳酸菌喂食秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans),并用质量分数为0. 003%的过氧化氢对线虫进行刺激,比较喂食不同乳酸菌的线虫寿命,分析乳酸菌在线虫体内缓解氧化损伤的能力。结果显示,植物乳杆菌(L. plantarum) Lp11不仅具有较高的体外抗氧化能力,还能有效缓解线虫体内因过氧化氢刺激引起的氧化应激,且缓解效果最好。体外抗氧化指标与线虫LT50值的相关性分析结果显示羟自由基清除能力这一体外抗氧化指标与缓解线虫氧化应激的效果具有较强相关性(P 0. 01),能较好反映乳酸菌在线虫体内的抗氧化效果。     

茯砖茶抗氧化活性物质的提取工艺研究

本研究旨在优化茯砖茶提取工艺,用以高效制备具有优良抗氧化活性的茯砖茶提取物,为其产品研发及应用提供理论依据。本文选用二苯基苦基苯肼自由基(DPPH自由基)、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力和还原能力等评价产物体外抗氧化活性;兼顾产物得率与抗氧化活性设计正交试验,采用多指标综合评分法系统研究了不同乙醇体积分数、温度、料液比和提取次数等因素对产物的影响。结果表明茯砖茶乙醇提取物具有较好的体外抗氧化活性。通过综合评分法优化得到产物得率与抗氧化活性皆优的茯砖茶提取工艺:乙醇体积分数40%、提取温度80℃、料液比1∶10(g/mL)、提取次数3次(每次1小时)。