乌鸡低聚肽铁配合物的稳定性研究

以乌鸡为原料制备乌鸡低聚肽铁配合物,以分子量分布和铁含量为指标,对乌鸡低聚肽铁配合物的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性进行了考察。结果表明:在温度为20⁸0℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为380℃时,乌鸡低聚肽铁配合物各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的铁含量无显著性差异;在pH为3⁹时,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到6%,铁含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有58.4%以上的铁含量;乌鸡低聚肽铁配合物经过蛋白酶消化后,分子质量小于1 000 u的总含量略有升高,但升高不到8%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有37.6%的铁含量。这说明乌鸡低聚肽铁配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性。     

海洋胶原低聚肽的制备及其稳定性研究

利用两步酶解法制备出海洋胶原低聚肽,在对其基础理化成分进行分析的基础上,以分子量分布为指标,利用HPLC分子排阻的方法,研究了pH,温度和蛋白酶消化对海洋胶原低聚肽稳定性的影响。结果显示:(1)pH分别为2,4,6,8,10和37℃水浴2h后,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过3%;(2)分别于20℃,40℃,60℃,80℃和100℃下水浴2 h后,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过2%;(3)分别经过胃蛋白酶单独消化,胰蛋白酶单独消化,先胃蛋白酶消化再胰蛋白酶消化,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过6%。表明pH,温度和蛋白酶消化对海洋胶原低聚肽组分的影响很小,海洋胶原低聚肽具有良好的pH稳定性,热稳定性以及消化稳定性。     

豌豆低聚肽硒螯合物的稳定性研究

以豌豆低聚肽和亚硒酸钠为原料制备豌豆低聚肽硒螯合物,对其水分、酸溶蛋白、总氮、分子质量分布的基础理化性质进行研究,然后以分子质量分布和硒含量为指标对螯合物的热稳定性、酸碱稳定性、消化稳定性进行考察。结果表明,豌豆低聚肽硒螯合物水分含量为(14. 17±1. 12)%(质量分数),酸溶蛋白含量为(23. 22±0. 12)%(质量分数),总氮含量为(23. 87±0. 30)%,分子质量分布在1 000 Da以下的占比超过76%。在温度25～100℃时,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于2%,硒含量变化不显著。在pH=3～11,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于3%,硒含量虽有一定变化,但含量仍在78%以上。经过胃蛋白酶、胰蛋白酶和2种酶共同消化后,分子质量在1 000 Da以下的部分比例均都在90%以上,而硒含量变化不显著。这说明豌豆低聚肽硒螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性。     

海洋骨胶原低聚肽钙配合物的稳定性

以三文鱼骨为原料制备海洋骨胶原低聚肽钙配合物,以分子量分布和钙含量为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对海洋骨胶原低聚肽钙配合物稳定性的影响。结果表明:海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有较好的热稳定性,各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的钙含量无显著性差异;海洋骨胶原低聚肽钙配合物在酸性和碱性条件下,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到8%,钙含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有65%以上的钙含量;海洋骨胶原低聚肽钙配合物经过蛋白酶消化后,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到6%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有40.5%的钙含量。这说明海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,是一种具有潜力的肽钙补充剂产品。      

海洋骨胶原低聚肽钙配合物的稳定性

以三文鱼骨为原料制备海洋骨胶原低聚肽钙配合物,以分子量分布和钙含量为指标,研究了热处理、pH和体外胃肠道模拟消化对海洋骨胶原低聚肽钙配合物稳定性的影响。结果表明:海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有较好的热稳定性,各个分子量区间的比例变化不超过2%,配合物的钙含量无显著性差异;海洋骨胶原低聚肽钙配合物在酸性和碱性条件下,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到8%,钙含量有所降低,但在广泛的pH范围内仍然有65%以上的钙含量;海洋骨胶原低聚肽钙配合物经过蛋白酶消化后,分子量小于1000u的总含量略有升高,但升高不到6%,经过胃蛋白酶消化和胰蛋白酶共同消化后,仍然有40.5%的钙含量。这说明海洋骨胶原低聚肽钙配合物具有一定的热稳定性、pH稳定性以及消化稳定性,是一种具有潜力的肽钙补充剂产品。     

乌鸡低聚肽铁的分离纯化及结构鉴定

为了考察乌鸡低聚肽铁中肽段的结构,以乌鸡为原料,以氯化亚铁为铁源制备乌鸡低聚肽铁,对其总蛋白质质量分数、螯合率、得率进行测定,结果表明乌鸡低聚肽铁总蛋白质质量分数为(56.79±0.18)%,螯合率为(83.53±0.15)%,得率为(40.86±0.14)%。然后利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对其进行分离纯化,收集4个组分峰,利用四极杆飞行时间串联质谱仪(QTOF质谱仪)测定肽序列,分析出1个肽段,氨基酸序列为Thr-Ser-Gly-Met-Pro,相对分子质量为491.56。     

乌鸡低聚肽的成分分析及抗氧化活性研究

在对乌鸡低聚肽氨基酸组成及相对分子质量分布分析的基础上,对其保护过氧化氢(H2O2)所致人肝癌细胞(Hep G2)氧化损伤的作用进行了研究。采用不同浓度乌鸡低聚肽作用Hep G2细胞4 h,然后用150μmol/L H2O2对细胞进行氧化损伤,4 h后以细胞存活率、细胞内活性氧(ROS)水平、一氧化氮(NO)及乳酸脱氢酶(LDH)释放量评价乌鸡低聚肽对H2O2所致Hep G2细胞氧化损伤的保护作用。研究结果表明,乌鸡低聚肽中谷氨酸含量最高(17.26%),其次是天冬氨酸(9.52%);相对分子质量小于1000 u的组分高达92.33%;乌鸡低聚肽具有提高细胞存活率、抑制细胞内ROS生成、减少NO及LDH释放的功能,对降低Hep G2细胞的氧化应激水平及提高细胞抗氧化能力具有较好的作用效果。从细胞水平上揭示了乌鸡低聚肽对过氧化所致的氧化损伤具有一定的预防保护作用。     

乌鸡低聚肽亚铁螯合物的分离纯化与结构鉴定

从乌鸡中酶解得到乌鸡低聚肽,然后与亚铁螯合制备乌鸡低聚肽亚铁螯合物,螯合率为84.76±0.12%。乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有较高的蛋白质含量,高达54.64±1.03%。并且分子量较低,其中分子量小于1000 u的占85.50%。通过扫描电镜、红外光谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物的结构进行分析,结果表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物是一种新型的铁螯合物。体外稳定性研究表明乌鸡低聚肽亚铁螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和体外消化稳定性。通过反相高效液相色谱对乌鸡低聚肽亚铁螯合物进行分离纯化,选择一个主要的组分进行收集,然后利用质谱仪进行质谱分析。从乌鸡低聚肽亚铁螯合物的主要组分中鉴定出一个五肽,氨基酸序列为Thr-Ser-Gly-Met-Pro。乌鸡低聚肽亚铁螯合物可作为一种铁补充剂用于食品添加剂、营养物及医药制品中。     

基于肽组学的大豆低聚肽制备稳定性评价

目的:对多肽原料开展更精准的稳定性评价和品质鉴别。方法:采用高分辨液质联用对不同批次原料进行多肽组学分析,结合热度分析、主成分分析等就样品间共性与差异特性展开探讨。结果:从每批次原料中鉴定到多肽约1 000条,肽段长度分布均以短肽为主。多肽集合分析发现批次间除共性多肽101条外还有众多差异性多肽。此外,PCA主成分分析显示第5批次原料与其他原料间存在较大差异。结论:在相同工艺条件下不同批次间原料的多肽组成整体表现为共性与差异并存,在实际生产过程中,应加强质控以逐步缩小差异增强共性,进而提升工业制备稳定性。     

玉米低聚肽螯合钙的结构表征及其体外稳定性

以玉米低聚肽和氯化钙为原料制备玉米低聚肽螯合钙,通过分析氨基酸组成、电镜扫描、紫外扫描来表征玉米低聚肽螯合钙的结构特征,并分析其体外稳定性。结果表明：玉米低聚肽经过螯合后,结构和形态都发生了改变;有吸收峰且吸收强度有很大的变化;玉米低聚肽螯合钙在20～80℃、非强酸强碱、胃蛋白酶消化作用下,均具有较好的稳定性。     

乌鸡肽铁(Ⅱ)螯合物的制备及红外光谱鉴定

以乌鸡低聚肽为原料,FeCl2为铁源优化乌鸡肽铁(Ⅱ)螯合物的制备工艺,通过测定铁离子螯合率和多肽铁得率衡量螯合效果,并通过傅里叶红外光谱对螯合产物进行结构分析。优化结果表明,乌鸡肽铁(Ⅱ)螯合物的最佳螯合条件为:乌鸡肽浓度,4%(g/mL);乌鸡肽与亚铁盐的质量比,5∶1,pH值,4。在此条件下乌鸡肽铁(II)螯合物的螯合率为(84.76±0.12)%,螯合物得率为(40.27±0.15)%。红外光谱分析表明,乌鸡肽铁(Ⅱ)螯合物中Fe2+与NH2+以及-COO-形成配位键,说明成功生成了一种新型肽铁螯合物。     

紫苏高F值低聚肽的制备研究

以紫苏粕为原料通过酶法水解制备紫苏高F值低聚肽,探讨Alcalase蛋白酶对紫苏粕中蛋白质水解的进程曲线。结果显示其最适条件为底物质量浓度5%(g/100ml)、pH8.5、温度60℃、酶添加浓度5ml/100g底物、时间240min,此水解液进一步用木瓜蛋白酶水解,水解条件为pH7.0、温度55℃、加酶量1%、时间4h,然后用活性炭吸附去除低聚肽中的芳香族氨基酸,吸附条件为pH4.0、温度40℃、活性炭用量7%(m/V)、时间3h,最后得到F值可达79.25的紫苏低聚肽。     

玉米高F值低聚肽的生理功能及其制备工艺

阐述了玉米高F值低聚肽的生理功能、制备工艺及其应用。玉米高F值低聚肽具有高含量支链氨基酸低含量芳香族氨基酸的特点,有抗疲劳、辅助治疗肝性脑病、改善病人的蛋白质营养状况等功能,其制备工艺主要包括:玉米蛋白粉经脱脂脱杂、酶解、去芳香族氨基酸、脱盐纯化得到生物活性寡肽。     

乌鸡肽铁(Ⅱ)螫合物的制备及红外光谱鉴定

以乌鸡低聚肽为原料,FeCl2为铁源优化乌鸡肽铁(Ⅱ)螯合物的制备工艺,通过测定铁离子螯合率和多肽铁得率衡量螯合效果,并通过傅里叶红外光谱对螯合产物进行结构分析.优化结果表明,乌鸡肽铁(Ⅱ)螯合物的最佳螯合条件为:乌鸡肽浓度,4％ (g/mL);乌鸡肽与亚铁盐的质量比,5:1,pH值,4.在此条件下乌鸡肽铁(Ⅱ)螯合物的螯合率为(84.76±0.12)％,螯合物得率为(40.27±0.15)％.红外光谱分析表明,乌鸡肽铁(Ⅱ)螯合物中Fe2+与NH2+以及-COO-形成配位键,说明成功生成了一种新型肽铁螯合物.     

榆耳高F值低聚肽的制备及氨基酸组成分析

以榆耳为原料,提取榆耳中蛋白质,NH4Cl盐析,胰凝乳蛋白酶水解,羧肽酶去除芳香族氨基酸,收集10.6ku～2.0ku超滤膜截留范围的低聚肽,测其氨基酸组成及F值.结果表明,榆耳低聚肽的F值为22.67,支链氨基酸组成为是缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸,含量为34.8％.     

高收率低苦味值大豆低聚肽的制备

以大豆分离蛋白为原料,以酶解收率为指标对最优的酶解工艺进行研究。在单酶水解的基础上,用复合碱性蛋白酶,中性蛋白酶,胰蛋白酶进行水解,通过正交试验确定了复合酶的最佳水解条件为:碱性蛋白酶/中性蛋白酶/胰蛋白酶加酶1∶2∶3,温度50℃,酶解时间4.5h,在此最佳条件下,酶解收率为86.76%,大豆低聚肽含量为93.49%,苦味值比单酶水解明显降低。     

玉米低聚肽硒螯合物的理化性质及稳定性

以玉米低聚肽和亚硒酸钠为原料制备玉米低聚肽硒螯合物,对其水分、酸溶蛋白、总氮(粗蛋白)、分子量分布进行了考察,然后以螯合态的硒含量和分子量分布为指标,研究了螯合物对温度、pH、消化方式的稳定性,结果表明:玉米低聚肽硒螯合物的螯合率为54.25%±0.24%,得率为53.02%±0.17%,水分含量为7.46%±0.07%,酸溶蛋白含量为16.38%±0.03%,总氮含量为21.17%±0.35%,分子量低于1000 u的比例为85.1512%。在25~100℃环境下,分子量低于1000 u的比例变化不超过7%,硒含量最低不小于70%;在pH=2~12的环境下,分子量低于1000 u的比例变化最高不超过16%,硒含量最低仍在75%以上;在经过胃蛋白酶、胰蛋白酶和两种酶的消化后,分子量低于1000 u的比例分别增加5%、7%和8%,硒含量最低仍在70%以上。这说明玉米低聚肽硒螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性。     

乌鸡肽免疫调节作用的研究

对乌鸡肽的基本理化指标进行了测定,并对其免疫调节活性进行研究。应用WST-8法检测不同浓度乌鸡肽对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,以吞噬能力和NO的生成量为指标评价乌鸡肽对小鼠腹腔巨噬细胞活力的影响。乌鸡肽主要含有相对分子量低于1000U的短肽,对ConA诱导的T-淋巴细胞增殖和LPS诱导的B-淋巴细胞增殖均有显著的促进作用。浓度为100μg/mL时,显著促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能中性红的能力和NO生成。乌鸡肽具有较好的增强免疫调节的能力。     

乌鸡肽的营养成分及其功能特性研究

探讨乌鸡肽的营养成分及功能,为其深度开发打下基础。利用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶水解乌骨鸡肌肉、活性炭脱色法制备乌鸡肽,高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法检测乌鸡肽的总氨基酸及游离氨基酸含量及相对分子质量分布区间、纳升级液相色谱串联质谱(Nano liquid chromatography tandem mass spectrometry,Nano LC-MS/MS)技术鉴定其组成成分。结果表明,游离氨基酸占总氨基酸的比例为1.74%,总氨基酸含量较高者为Leu、Ala、His、Pro、Met和Phe,游离氨基酸含量较高者为Glu、Pro、Asp、Arg、Gly和Ala;相对分子质量分布范围为0至6 918 Da,其中1 084 Da以下的比例达到88.91%;Nano LC-MS/MS鉴定出源于107种蛋白质的2 287种肽段序列,其中种类最为丰富的蛋白为参与骨骼肌修复的蛋白及酶类。该研究较为全面的分析乌鸡肽的营养成分,并表征了其功能,为乌鸡肽的潜在应用价值研究打下基础。     

乳清低聚肽的制备及其抗氧化活性

利用两步酶解法制备出乳清低聚肽,对其基础理化成分、氨基酸组成和分子量分布进行了分析,从羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除能力以及还原能力四个方面评价其抗氧化活性。组成分析结果表明:总蛋白质含量为86.83%,氨基酸组成丰富,富含抗氧化性氨基酸,其中亮氨酸、缬氨酸、脯氨酸含量较高;分子量小于1000u的组分高达85.78%,132~576u范围内组分占59.55%。抗氧化实验结果显示:乳清低聚肽具有较强的抗氧化活性,并且呈量效关系,对羟基自由基和DPPH自由基的半抑制浓度(IC50值)分别为:2.3、4.2mg/mL,浓度为2.5mg/mL时的还原能力与0.012mg/mL的抗坏血酸相当。