侧柏内生真菌G21代谢产物稳定性及发酵条件优化

[目的]了解侧柏内生真菌G21代谢产物的稳定性,并对其发酵条件进行优化。[方法]不同p H值(2~12)或不同温度(20~120℃)处理G21发酵液,并利用生长速率法测定其抑菌活性变化。采用正交试验法及响应面法对G21发酵条件进行优化。[结果]G21发酵液具有广谱农用抗真菌活性,对苹果腐烂病菌及葡萄白腐病菌抑制作用显著;其发酵液在中性(p H 6~8)及较低温度(50℃)下稳定。优化G21发酵培养基组成为蛋白胨3.1 g/L、葡萄糖11.8 g/L、硫酸镁0.58 g/L、磷酸二氢钾1.0 g/L。[结论]G21发酵液处理过程应避免酸碱及高温,优化得培养基G21发酵产物抑菌活性显著提高。     

雪白弯颈霉C41发酵液稳定性及粗提物的抑菌活性

[目的]研究雪白弯颈霉C41菌株固体发酵粗提物的抑菌活性及其发酵液在不同条件下的稳定性。[方法]采用菌丝生长速率法,以7种植物病原真菌为供试菌,测定雪白弯颈霉C41固体发酵粗提物的抑菌活性;以玉米弯孢菌叶病菌为指示菌,测定发酵液在不同条件下的稳定性。[结果]固体发酵粗提物对玉米灰斑病、玉米弯孢菌叶斑病和玉米大斑病病菌菌丝生长均具有较强的抑制作用,抑制率分别为90%、84.38%和80%。发酵液在25~60℃范围内有较好的热稳定性,温度高于60℃则稳定性降低;有较广泛的酸碱稳定性,在pH值为6时抑菌活性最好;发酵液对日光和紫外线的稳定性较强。[结论]雪白弯颈霉C41菌株的代谢产物具有广谱的抑菌活性和较好的稳定性。     

长枝木霉T6发酵液稳定性及粗提物抑菌活性

[目的]明确长枝木霉T6菌株发酵液在不同环境下的稳定性及其粗提物的抑菌活性。[方法]以苹果树腐烂病菌为指示菌,采用生长速率法测定发酵液在不同条件下的稳定性,并以11种植物病原菌物为供试菌,研究发酵液粗提物的抑菌活性。[结果]稳定性试验表明:发酵液耐121℃高温,耐强酸强碱,自然光及紫外光处理对其抑菌活性无影响;在4℃及常温下可储存至少60 d以上保持活性不变。抑菌试验表明:发酵液粗提物对苹果树腐烂病菌、苹果树斑点落叶病菌、油菜根腐病菌和立枯丝核菌菌丝生长具有较强的抑制作用,其抑制率分别为100%、93.32%、92.35%和91.49%。[结论]长枝木霉T6菌株代谢产物具有较强的稳定性和广谱的抑菌活性。     

草茎点霉SYAU-06菌株诱导产孢方法研究

[目的]筛选出适合草茎点霉SYAU-06菌株产孢的培养基和诱导方法。[方法]采用控制变量法测定不同培养基及不同培养条件下菌株孢子器的产生数量。[结果]鸭跖草汁的添加有利于菌株产孢,固体发酵缩短了孢子器的形成时间。草茎点霉SYAU-06菌株的最佳产孢培养基为OMA+鸭跖草汁培养基;适宜孢子器形成的温度为25～30℃;最佳光照时间为12 h/d;最适pH值范围为7～8。[结论]在人工提供适当的条件下能够诱导该菌产生分生孢子器。     

拮抗假单胞菌SU8对几种植物病原真菌的抑制作用

[目的]评价拮抗假单胞菌SU8的生防潜力,开发绿色农药。[方法]采用平板对峙法和打孔法研究拮抗假单胞菌SU8、发酵滤液及其乙酸乙酯提取物的抑菌活性。[结果]假单胞菌SU8对稻瘟病菌的抑制效果最好,抑菌带宽度达4.53 cm,辣椒炭疽病菌次之,其余从强到弱依次为烟草赤星病菌、水稻纹枯病菌和小麦赤霉病菌;发酵滤液对水稻纹枯病菌、稻瘟病菌、小麦赤霉病菌、辣椒炭疽病菌、烟草赤星病菌抑菌活性较弱;乙酸乙酯提取物对烟草赤星病菌的抑制效果最好,抑菌带宽度为3.92 cm,对水稻纹枯病的抑菌带宽度为2.34 cm,对其他植物病原菌的抑菌效果从大到小依次为稻瘟病菌、辣椒炭疽病菌和小麦赤霉病菌。[结论]拮抗假单胞菌SU8具有可开发仿生农药的前景。     

白鲜皮水提物对植物病原真菌的抑菌活性

[目的]研究白鲜皮水提物抑制植物病原菌活性成分并进行鉴定,为开发植物源农药提供依据。[方法]采用生长速率法测定抑菌效果。采用大孔树脂、高速逆流、柱层析法等对活性成分分离。[结果]白鲜皮水提物对辣椒立枯病菌、番茄灰霉病菌、人参枯萎病菌、人参根腐病菌等具有良好的抑菌活性。且对番茄灰霉病菌抑菌活性显著,40%乙醇洗脱部位及单体的EC50值分别为1 203、393.36 mg/L,单体经鉴定为梣酮。[结论]白鲜皮水提物具有良好的抑菌活性,分离所得单体为白鲜皮中抑制番茄灰霉病菌的主要活性成分。     

防治蔬菜灰霉病解淀粉芽胞杆菌的分离鉴定及抑菌特性

[目的]为研制防治蔬菜灰霉病的新型生物农药,进行高效生防菌的分离筛选及抑菌特性研究。[方法]通过形态学、生理生化和16S rDNA序列分析,对拮抗菌进行鉴定;采用平板扩散法测定发酵液的抑菌特性。[结果]分离筛选出1株对黄瓜灰霉病具有高效拮抗作用解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);该菌株在生长对数期产生抗菌物质,并在30-38 h达到最大值;产生的抗菌物质有很好的热、酸碱稳定性,紫外线照射不敏感,常温储存6个月活性保持在80%以上;抗菌谱测定表明其对黄瓜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、番茄叶霉病菌(Fulvia fulva)、黄瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)等多种病原菌具有显著抑菌效果。[结论]该菌株所产抗菌物质性能稳定,抗菌谱宽,抑菌力强,具有开发成新型广谱生物农药的潜力。     

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FS6摇瓶发酵条件优化

[目的]对解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FS6的摇瓶发酵工艺进行优化。[方法]通过对发酵培养基成分和发酵条件的单因素试验和正交试验,测定生防菌株FS6对人参立枯丝核菌的抑菌效果和菌体生长量,来确定其最适发酵培养基和发酵条件。[结果]最适摇瓶发酵培养基配方为葡萄糖30 g,酵母浸粉40 g,Mg SO_4·7H_2O_2 g,甘油10 m L,K_2HPO_42 g,H_2O 1000 m L;最优培养条件为接种量6%,摇瓶装液量50 m L/250m L,摇床转速160 r/min,初始p H值6.0,培养温度28℃,培养时间12 h。[结论]解淀粉芽孢杆菌FS6在最适摇瓶发酵培养基及发酵条件下,对人参立枯病菌的抑菌活性最好,为该菌株的工业化生产奠定了基础。     

N-苯磺酰基-3-酰基吲哚苯甲酰腙类化合物的抑菌活性

[目的]研究N-苯磺酰基-3-酰基吲哚苯甲酰腙类化合物中具有潜在应用价值的抑菌先导化合物。[方法]在0.1 g/L质量浓度下,采用菌丝生长速率法分别测定了21种N-苯磺酰基-3-酰基吲哚苯甲酰腙类化合物1~21对小麦赤霉病菌、白菜黑斑病菌、烟草赤星病菌、棉花枯萎病菌和水稻稻瘟病菌的室内抑菌活性。[结果]化合物1、2、4、10和17对5种植物病原真菌均表现出较好的抑菌活性;如化合物4,抑菌率分别为51.70%、63.20%、54.30%、44.10%和45.20%,表现出广谱抑菌活性;尤其是对白菜黑斑病菌的抑菌率高达63.20%,超过阳性对照霉灵(52.60%)的抑菌活性。[结论]化合物1、2、4、10和17对所测植物病原真菌均表现出较好的抑菌活性,初步拟定将5个化合物作为进一步衍生修饰的先导化合物。     

海洋生境芽孢杆菌HTTAZ10-03菌株的抑菌作用

[目的]研究海洋生境芽孢杆菌HTTAZ10-03的抑菌应用潜力。[方法]通过gyr B序列同源性等分析鉴定菌株,96孔板和抑菌率法测试MIC值和抑菌谱,PCR扩增菌株2个重要生防基因,盆栽实验测定菌株对番茄叶霉病和油菜菌核病的防治效果。[结果]HTTAZ10-03菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),菌株具有与抑菌活性有关的fen D,itu C基因簇,茄链格孢病菌抑菌MIC值为2 m L/L,对番茄灰霉等8种植物病原菌抑制率74.1%~85.4%,番茄叶霉病和油菜菌核病菌的防效为62.1%~63.6%。[结论]芽孢杆菌HTTAZ10-03具有较好的杀菌剂开发潜力。     

吸水链霉菌A03抗菌活性产物发酵条件的优化

[目的]吸水链霉菌A03是自主分离的高效拮抗菌株,其活性代谢产物对多种植物病原真菌具有强烈抑制作用;为了建立其高产发酵工艺,并为过程放大提供技术参数,利用正交设计和单因素试验对其发酵培养基和培养条件进行优化。[结果]获得的最适发酵培养基配方(g/L):葡萄糖5,可溶性淀粉5,黄豆粉10,磷酸二氢钾0.5,碳酸钙1,七水硫酸镁0.1;最优培养条件:液体种子菌龄40 h,500 mL摇瓶装液量80 mL,接种量为体积分数12%,摇床转速180 r/min,培养温度28℃,发酵周期216 h;发酵液抑菌直径达3.04 cm。[结论]成功建立了该菌株的小试发酵工艺,发酵水平提高了52.0%,发酵周期缩短30.77%。研究结果为其发酵代谢调控和过程放大提供了基本参数。     

香草醛异■唑衍生物的设计合成及杀菌活性

为了寻找结构新颖、杀菌活性更好的绿色农药。选用天然产物香草醛作为基本原料,引入五元杂环异■唑结构,首次设计并合成了28个香草醛异■唑类衍生物。结构经核磁共振氢谱、碳谱及高分辨质谱分析确认。测试了所有目标衍生物对烟草灰霉病菌(Botrytis cinerea)、层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)、木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)、玉米圆斑病菌(Bipolaris zeicola)、胶胞炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、草茎点霉菌(Phoma herbarum)6种广谱菌的杀菌活性。杀菌活性测定结果显示：在50μg/mL质量浓度下,部分化合物对6种真菌的菌丝生长均具有一定抑制作用,2-甲氧基-4-(5-苯基异■唑-3-基)苯乙酸酯对6种真菌的抑菌活性整体良好,对玉米圆斑病菌等3种菌的抑菌活性超过对照组百菌清;2-甲氧基-4-(5-(4-乙基苯基)异唑-3-基)苯酚对烟草灰霉病菌的抑菌活性最高,抑菌率可以达到93%。初步构效关系表明,对活性片段香草醛上的酚羟基进行乙酰化衍生,有助于提高化合物对6种病原菌的抑菌活性,为...     

蜡梅籽生物碱类成分及其抗氧化和抑菌活性

[目的]研究蜡梅(Chimonanthus praecox)籽中生物碱成分及其抗氧化和抑菌活性。[方法]应用硅胶柱层析法进行分离纯化并鉴定化合物结构。使用ABTS和FRAP法检测抗氧化能力,并考察其对甘蓝链格孢菌、葡萄灰霉菌、番茄叶霉菌的抑菌效果。[结果]分离得到1种化合物,鉴定为洋蜡梅碱(calycanthine)。其对ABTS阳离子自由基清除作用较强,IC_(50)值为(3.24±0.08)mg/L;抑菌结果显示其对3种菌株均具有一定的抑菌活性。[结论]洋蜡梅碱具有较强的抗氧化活性和抑菌活性。     

蓝莓溃疡病生防链霉菌CX3的抑菌效果及其鉴定

[目的]为了明确从吉林省长白山保护区池西保护站马鞍山云杉人工林林下土壤分离,所获得1株拮抗菌株(编号记为CX3)的生防效果及分类地位。[方法]分别采用平板对峙法和杯碟法测定该菌株活菌及其发酵液的抑菌活性和抑菌谱;并通过形态学、生理生化特征、16S rRNA序列分析等方法研究了其分类地位。[结果]该菌株对13种供试植物病原菌均有抑制作用,抑菌谱广,其中对蓝莓溃疡病菌有极强的抑制作用,抑菌带达25.91 mm,发酵液的抑菌圈直径达31.73 mm;根据其菌株形态、生理生化特性、16S rRNA序列比对,最终鉴定菌株为链霉菌属Streptomyces sp.。[结论]该菌株对蓝莓溃疡病菌有显著的抑制效果,应用开发前景良好,此次是国内首次报道该菌株杀真菌活性。     

海洋放线菌BM-2菌株产生抑菌物质的发酵条件

海洋放线菌BM-2菌株在不同配方的培养基和不同的发酵条件对进行液体发酵,以植物病原真菌禾谷镰刀菌为指示菌,采用打孔法测定发酵液的抑菌活性,研究其产生抑菌物质的发酵条件.结果认为:海洋放线菌BM-2菌株产生抑菌物质的最佳培养基为可溶性淀粉14 g、乳糖16 g、黄豆粉16 g、磷酸氢二钾3 g、碳酸钙4 g、氯化钾0.4 g,海水1000 mL,初始pH值7.5;发酵条件为接种量7%(体积分数)、温度28 ℃、装瓶量80 mL(250 mL)、转速190 r/min、培养时间5 d.     

放线菌TL05-22菌株发酵液的抑菌谱及稳定性

[目的]研究放线菌TL05-22发酵液的抑菌谱及稳定性。以16种植物病原真菌和6种细菌为供试菌,采用菌丝生长速率法、杯碟法测定拮抗放线菌TL05-22发酵液的抑菌谱;以苜蓿尖镰孢根腐病菌为指示菌,杯碟法测定发酵液的传代稳定性、热稳定性、酸碱稳定性及紫外线稳定性。[结果]放线菌TL05-22发酵液对16种植物病原真菌和6种细菌均具有不同程度的抑菌活性,其中供试真菌以对苜蓿尖镰孢根腐病菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径达33.68 mm;供试细菌中以对大白菜软腐病菌的抑菌效果最强,抑菌圈直径达29.12 mm。将发酵液于60~100℃处理30、60 min,抑菌活性没有明显变化;发酵液在pH值6~14时抑菌活性未发生明显变化,但在pH<6条件下抑菌活性明显下降;连续培养10代,发酵液抑菌活性无明显变化。[结论]放线菌TL05-22的代谢产物具有广谱抑菌活性和较强的稳定性,具有一定开发价值。     

一株人参广谱拮抗菌株的筛选、鉴定及抗菌物质性质

[目的]筛选出对人参7种病原菌都具有很好抑菌效果的菌株,明确菌株种类和产生的抗菌物质性质,为进一步研究应用奠定基础。[方法]采用平板对峙培养法筛选获得1株广谱抑菌菌株LG2,通过形态学、生理生化和16S r RNA序列分析鉴定其种类;采用热、酸碱、蛋白酶和紫外照射处理,测定明确LG2产生的活性物质性质;通过田间试验测定发酵液对人参灰霉病的防治效果。[结果]通过筛选获得1株广谱抑菌菌株LG2,鉴定其为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae);通过混菌法测定其产生抗菌物质具有很好的耐热、耐酸碱、耐蛋白酶和抗紫外线的性质;田间试验证明,LG2发酵5倍稀释液对人参灰霉病的防治效果达73.99%,与对照药剂50%嘧菌环胺WG 0.67 mg/L的防效相当(74.13%)。[结论]获得1株具有很好应用前景的菌株LG2。     

四氟醚唑手性异构体对植物病原真菌的活性差异

[目的与方法]采用菌丝生长速率法,明确四氟醚唑手性异构体及外消旋体对小麦纹枯病菌、小麦赤霉病菌、水稻纹枯病菌、草莓灰霉病菌、大豆炭疽病菌的活性差异。[结果]四氟醚唑外消旋体对小麦纹枯病菌的抑菌活性最高,EC_(50)值为0.700 mg/L;对大豆炭疽的抑菌活性最弱,EC_(50)值为4.047 mg/L;对小麦赤霉病菌、水稻纹枯病菌、草莓灰霉病菌的抑菌活性也较强,EC_(50)值介于1.164~1.263 mg/L之间。(+)-四氟醚唑对5种菌抑菌活性高于(-)-四氟醚唑或外消旋体,(-)-四氟醚唑与(+)-四氟醚唑对小麦纹枯病菌、小麦赤霉病菌、水稻纹枯病菌、草莓灰霉病菌、大豆炭疽病菌的EC_(50)比值分别为1.49、1.98、1.69、4.11、2.01,其中对草莓灰霉病菌的抑菌活性差异最显著。[结论]四氟醚唑外消旋体及手性异构体对5种病原菌均有不同程度的抑菌活性,(+)-四氟醚唑为优映体。     

贵州水晶葡萄病原真菌分离鉴定及室内抑菌活性测试

[目的]确定引起贵州水晶葡萄采后贮藏病害的病原真菌种类及室内筛选用于该病害的主要防治杀菌剂。[方法]对病原菌进行分离纯化鉴定,通过科赫法则确定致病菌种类;筛选12种商品杀菌剂对炭疽病菌进行抑菌活性测定,筛选出有效药剂,为防治该病害提供一定的理论依据。[结果]从贵州省凯里市水晶葡萄采后贮藏病害分离鉴定出3株病原菌,为青霉菌(Penicillium sp.)、炭疽病菌(Clletotrichum gloeosporioides)和链格孢菌(Alternaria sp.),采用科赫法则,对3株病原真菌进行刺伤回接,发现3株均为水晶葡萄在贮藏过程中的主要致病菌。12种杀菌剂对水晶葡萄炭疽病菌进行室内抑菌活性测试结果表明:均具有较好的抑制活性,其中50%咯菌腈WP、50%苯菌灵WP、42%噻菌灵SC和43%戊唑醇SC对水晶葡萄炭疽病菌抑制活性最好,其EC50值分别为0.1024、0.1386、0.1624、0.1974 mg/L。[结论]凯里水晶葡萄采后病害病菌为青霉菌、炭疽病菌和链格孢菌;筛选出12种药剂针对水晶葡萄采后病害炭疽病菌的药剂,其中50%咯菌腈WP对炭疽病菌具有较好抑制效果,为水晶葡萄采后贮藏病害防治提供理论基础。     

一株海洋专性放线菌的分类鉴定及其抑菌活性

[目的]对一株海洋专性放线菌进行菌种鉴定,并考察其抑菌物质的性质。[方法]通过形态特征、生理生化特性以及16S rRNA基因序列分析,对专性海洋放线菌CMZ023进行鉴定;采用管碟法测定抑菌谱;测定菌株CMZ023抑菌物质的性质。[结果]鉴定菌株CMZ023为Salinispora arenicola,该菌对革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌、啤酒酵母以及多种植物病原真菌均有拮抗作用。其抑菌物质粗提液耐酸碱、耐高温,紫外照射不影响抑菌活性。[结论]该菌株具有开发成新型广谱生物农药的潜力。