食品检验中乳酸菌鉴定方法的探讨

目的评价GB 4789《食品安全国家标准食品微生物学检验》中乳酸菌的鉴定方法。方法选择5种双歧杆菌、4种乳酸杆菌和1种链球菌共10株乳酸菌,分别采用GB 4789标准中的方法、API生化鉴定系统、16S rRNA基因序列分析法和RiboPrinter全自动基因指纹图谱分析法进行鉴定。结果 GB 4789对乳酸杆菌和嗜热链球菌鉴定效果较好,对双歧杆菌的鉴定能力较弱;API鉴定乳酸菌一般至"属"水平;16S rRNA序列分析和RiboPrinter系统可鉴定乳酸菌至"种"水平,婴儿双歧杆菌的鉴定结果为长双歧杆菌婴儿亚种。结论建议GB 4789标准中增加分子生物学方法作为乳酸菌鉴定方法的补充,同时建议及时更新标准中菌株的分类和名称。     

"雪莲"中主要菌的分离鉴定及其发酵性能研究

为弄清"雪莲"中菌的种类及发酵性能,获得性能优良的乳酸复合发酵剂,采用"雪莲"整体切片镜检、微生物分离培养、纯化及生理生化鉴定的方法对"雪莲"中的菌进行分离、鉴定;以发酵乳酸度和组织状态为指标,研究了乳酸菌单菌的发酵性能及不同菌株复合发酵酸奶的特性.结果表明,"雪莲"中的乳酸茼初步被鉴定为乳酸杆菌、双歧杆菌、乳酸球菌;与单独使用"雪莲"发酵酸奶相比,复合菌株发酵酸奶的感官品质较好,具有一般酸奶没有的特殊香味.     

昆明酸浆米粉优势乳酸菌筛选及发酵性能研究

从昆明酸浆米粉中首次筛选适合于米粉发酵的优势乳酸菌菌株,研究不同培养温度对优势菌分离纯化效果的影响,探讨发酵性能。采用高通量筛选技术及应用产酸能力、发酵活力与酸浆米粉的感官评价程序,筛选发酵优势菌株,并利用微量生化反应对优势菌进行分类鉴定。结果表明:在37℃分离培养条件下乳酸杆菌较占优势,获得发酵性能优良的乳酸杆菌R1、R9、R11菌株。鉴定菌种结果:R1菌株为大双歧杆菌(Bifidobacterium magnum)、R9菌株为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、R11菌株为米酒乳杆菌米酒亚种(Lactobacillus sakei ss sakei)。其中R9菌株产酸能力最强,发酵活力最高,使酸浆米粉韧性高;R1菌株使酸浆米粉的米香风味最佳;R11菌株使酸浆米粉口感爽滑。可利用此3株发酵性能优良的乳酸杆菌人工制备酸浆米粉复合发酵剂,进一步开发研制优良品质的酸浆米粉。     

啤酒中乳酸杆菌的分离纯化和鉴定

通过介绍啤酒中乳酸杆菌分离、纯化和鉴定 ,研究不同乳酸杆菌在啤酒酿造中的分布状况 ,以便进一步研究采用现代技术PCR进行快速检测     

人源长双歧杆菌长亚种i772的分离、鉴定及特性研究

分离人源双歧杆菌,对其进行鉴定及特性研究。从健康婴儿粪便中分离得到1株疑似双歧杆菌,对其进行鉴定,分析其益生菌特性和发酵特性。结果显示:1株分离自婴儿粪便样品的菌株被鉴定为长双歧杆菌,命名为长双歧杆菌长亚种i772,研究发现其对25种抗生素敏感;在人工模拟消化液试验中存活率为3.22%;在体外干预THP-1细胞试验中其使促炎免疫因子IL-8、TNF-α和TLR4分别比对照组提高了12.71,5.71,12.56倍。在发酵乳制备试验中,在不影响整体喜好度的前提下,添加长双歧杆菌i772显著(P<0.05)提高了发酵乳的黏度和黏聚性。结论:人源长双歧杆菌i772具有耐受人工胃肠液,调节免疫的特点,适于作为益生菌添加于发酵乳中。     

猪源双歧杆菌的分离纯化及初步鉴定

本研究选用双歧杆菌增殖培养基，从13d龄和30d龄未断奶健康仔猪肠道和粪便中分离纯化出双歧杆菌，进行了各种生理生化鉴定实验，对其进行了初步鉴定。     

板栗水解液的乳酸发酵工艺研究

本文采用正交试验，确定了用保加利亚乳酸杆菌与嗜热链球菌菌混合发酵板栗水解液，并以双歧乳酸杆菌发酵板栗水解液为参照，找出混合发酵的最佳工艺条件为Ａ１Ｂ２Ｃ３，双歧乳酸菌发酵的最佳工艺条件为Ａ２Ｂ３Ｃ３Ｄ３。     

乳酸菌分离培养基对粪便样品筛选能力的探究

目的探究在不同氧气条件下,不同的常用乳酸菌分离培养基分离婴儿粪便样品中微生物的能力,找出最合适的益生菌分离培养基及相关分离条件。方法以婴儿粪便为原料,在利用乳酸杆菌选择性琼脂培养基(Lactobacillus selective broth, LBS)、MRS以及MRS5.2 3种培养基对同一样品在有氧和厌氧条件下分别进行涂布培养。随后对样本内菌群进行16S rRNA扩增子测序,通过对测序数据的菌落组成、α多样性、β多样性及后续代谢的模拟分析,阐释了不同培养基对粪便样品的筛选特征,包括筛选后菌群的组内多样性、组间多样性、菌群功能预测以及培养基中乳酸菌所占比例等。结果对于婴儿粪便样品,所测5种分离条件均能对肠道中的乳酸杆菌进行有效分离。在厌氧条件下除LBS培养基外,各培养基中均有双歧杆菌出现,所占比率约在20%～30%之间,同时有氧环境下的MRS培养基中也存在少量双歧杆菌,所占比率约为5%。结论对于粪便样品中乳杆菌分离能力最适的条件是37℃下厌氧条件的LBS培养基,对双歧杆菌分离能力最适的条件是37℃下厌氧环境下的MRS培养基。     

牛肝菌对动物肠道微生物的影响

通过灌胃牛肝菌溶液并与益生元和生理盐水形成阳性对照和阴性对照,收集3组小鼠的粪便从中提取DNA,并根据细菌的16S rRNA基因序列设计双歧杆菌属、乳酸杆菌属的特异性引物。结果表明,通过荧光定量扩增图得出CT值:阳性对照组<试验组<空白对照组,阳性对照组的对数转换后的拷贝数值高于其余2组且空白组的对数转换后的拷贝数最低。试验结果说明在食用一定量牛肝菌后肠道中的乳酸杆菌属和双歧杆菌属有一定促进作用,能够刺激二者的生长繁殖,使得肠道中乳酸杆菌和双歧杆菌数量增加。     

双歧杆菌豆奶粉的研制

本文对双歧杆菌的分离、鉴定，双歧杆菌菌粉的制备工艺，双歧杆菌豆奶粉的制备及其稳定性进行了研究。采用发酵工艺、冷冻干燥工艺及喷雾干燥工艺等生产的双歧杆菌豆奶粉的活菌稳定期在6个月以上。     

双歧杆菌豆奶粉的研制

对双歧杆菌的分离、鉴定、双歧杆菌菌粉的制备工艺，双歧杆菌豆奶粉的制备及其稳定性进行了研究。采用发酵工艺，冷冻干燥工艺及喷雾干燥工艺等生产的双歧杆菌豆奶粉的活菌稳定期在６个月以上。     

耐氧双歧杆菌的分离、鉴定和饮用

从中年人粪便中分离到１３６株可疑双歧杆菌,通过耐氧力测定获得一株耐氧性菌,经属和种的系统生理生化鉴定,确认为长双歧杆菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｅｔｅｒｉｕｍｌｏｎｇｕｍ）,小范围饮用实验表明,该菌对便秘有疗效。     

双歧杆菌保健饮料的生产

双歧杆菌是人体肠道内正常的菌群之一,对人体具有许多有益的生理功能（应设法通过多种渠道增加体内该菌的含量）。文章从三个方面介绍双歧杆菌保健饮料（1）双歧杆菌在人体内的生量功能：维持肠道菌群平衡治序肠道功能紊乱：抗肿瘤作用;营养作用,免疫功能,延缓机衰老。（2）双歧杆菌的分离,培养,鉴定和驯化：常用的4种厌氧分离培养设备和技术;培养基;鉴定,耐氧驯化。（3）生产工艺及关键控制点：共同发酵法,共生发酵法。     

基于FemAB基因特异引物的动物双歧杆菌PCR检测方法的建立

分离和鉴定了两株双歧杆菌,通过16SrDNA通用引物扩增条带测序和非特异引物随机扩增法扩增条带测序推测其为动物双歧杆菌。随后使用以编码肽聚糖肽桥形成蛋白(Peptidoglycan bridge formation protein)FemAB基因为目的扩增片段设计的特异引物进行了扩增鉴定。结果表明,此特异引物对这两株动物双歧杆菌菌株扩增结果为阳性,其他对照菌株扩增结果为阴性,且扩增条带测序结果与预计一致。FemAB基因在PCR特异扩增法鉴定细菌种属中具有较好的分辨能力,并使用其建立了动物双歧杆菌PCR检测方法。本研究旨为应用FamAB基因鉴定细菌种属以及双歧杆菌属微生物的鉴定提供了数据参考。     

双歧杆菌的分离,鉴定与驯化

文章叙述了从婴儿粪便中分离与鉴定双歧杆菌的方法，并对婴儿双歧杆菌耐氧与耐温驯化进行了研究，使驯化后的菌种更适合于工业化生产。     

双歧杆菌的分离鉴定及保藏性能研究

为丰富发酵剂及益生菌菌种资源,从内蒙古阿拉善盟采集7份新生婴儿粪便样品,在传统细菌分离方法的基础上,通过添加莫匹罗星锂盐和X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)改良基础培养基,快速有效地分离获得双歧杆菌。结合全自动微生物分析系统和API20A试剂条鉴定菌种。结果共分离获得6株双歧杆菌,其中3株动物双歧杆菌,2株青春双歧杆菌,1株短双歧杆菌。试验验证甘油浓度为70%时冷冻保藏效果最佳。     

双层包埋型益生菌制品检测方法的研究

为了研究双层包埋型益生菌制品的检测方法,采用生理盐水和专用稀释液分别对双层包埋型益生菌制品进行样品前处理后,使用改良MC琼脂、MRS琼脂培养法进行乳酸杆菌计数培养的比较,同时采用TPY琼脂、BL琼脂和BBL琼脂培养基,使用厌氧培养法,进行双歧杆菌计数培养的比较.经专用稀释液处理的制品其益生菌数量检出率较采用生理盐水处理的高10倍,且乳酸杆菌的检测以MRS培养基为佳,双歧杆菌的检测以BBL培养基为佳.可见使用专用稀释液是进行双层包埋型益生菌制品样品前处理的较好方法,可以显著提高制品的乳酸杆菌和双歧杆菌的检出率.     

双歧杆菌口服液的研制

本文以驯化的耐氧双歧杆菌为主要发酵菌株，乳酸球菌和乳酸杆菌为辅助发酵菌株，以大豆灭酶副产品煮汁为基本原料，进行生产双歧杆菌微生态调节剂的研究。     

乳酸菌及双歧杆菌制品的生产工艺

介绍了乳酸杆菌和双歧杆菌生物学特性,及它们对人体健康的功能及相应保健食品的生产工艺.     

黄酒发酵醪中特有乳酸杆菌检测和培养基的研究及初步鉴定

通过可溶性淀粉的添加量、培养温度、"X"物质的添加量三因素三水平对黄酒发酵醪中乳酸杆菌培养基配方和培养方法的正交试验研究,以及性能的测定和初步鉴定,表明:黄酒发酵醪中乳酸杆菌培养、分离的培养基配方和培养方法为:加饭酒稀释至酒精度14.5%voL、加"X"物质的量1.3%、加可溶性淀粉0.5%或不加、培养温度18℃或30℃、压盖密封培养;黄酒后发酵醪中的优势菌,在上述培养基中18℃生长良好,25℃及以上生长不良或生长极慢,初步鉴定为乳酸杆菌的新种,命名为黄酒乳酸杆菌Ⅱ-1(Lactobacillus chinese-rice-wineⅡ-1)。黄酒前发酵醪中的优势菌,在上述培养基中30℃生长良好,20℃及以下生长缓慢,初步鉴定为乳酸杆菌的新种,命名为黄酒乳酸杆菌Ⅱ-2(Lactobacillus chinese-rice-wineⅡ-2)。