微生物产弹性蛋白酶

综述了微生物产弹性蛋白酶的国内外研究进展及应用前景。     

微生物产弹性蛋白酶分子研究进展

本文从分子水平对微生物产弹性蛋白酶的研究概况进行了综述。内容包括不同菌源性弹性蛋白酶基因克隆、基因序列及功能分析、基因表达的调控、利用蛋白质工程对菌源性弹性蛋白酶进行改造,目的是从分子水平时弹性蛋白酶的转录表达、酶学反应机制进行阐释,最终提高酶的表达量,拓宽酶的应用范围。     

米曲霉蛋白酶动力学特性的研究

研究了在不同底物浓度、温度和pH下米曲霉蛋白酶水解酪蛋白产生酪氨酸的动力学特性。在反应时间为10min时,最佳反应温度为50℃,最佳反应pH为9。实验表明米曲霉蛋白酶水解酪蛋白生成酪氨酸的反应符合米氏方程,根据实验数据回归得到温度为40℃时的速度方程为r=0.243CS/0.0282+CS,反应速度与氢离子浓度的关系为r=lgCH++3.14013/0.19759+0.05484(lgCH++3.14013)+(lgCH++3.14013)2。该蛋白酶在50℃下的失活规律符合双指数模型,相对酶活力与时间的关系为a=0.82531e(-0.02169t)+0.17469e(-0.41914t)。在4～50℃的范围内,蛋白酶水解反应的活化能Ea为30.67kJ。还研究了不同化学组分对蛋白酶活力的影响,发现10mmol/L的H3BO3和Mg2+对该蛋白酶有一定的激活作用,而EDTA、SDS、Zn2+、Mn2+和Sn2+对蛋白酶有明显的抑制作用,10mmol/L的H2O2对该蛋白酶的抑制作用不明显。     

菌源性弹性蛋白酶特性的研究

试验通过硫酸铵对发酵液的分段盐析得到粗酶，并对粗酶的基本性质进行了一定的研究。结果表明：酶反应的最适温度为50℃，最适pH为7．4；酶在37℃以下热稳定性良好；重金属对酶活性有不同程度的抑制作用；弹性蛋白对弹性蛋白酶具有较强的亲和吸附作用，弹性蛋白酶有优先水解弹性蛋白的能力。     

微生物产弹性蛋白酶制取方法的探讨

目的探讨微生物产弹性蛋白酶的制取方法。方法将产弹性蛋白酶的枯草芽孢杆菌接种到发酵培养基中,摇床发酵培养后,离心收集发酵液,并经过硫酸铵盐析、DEAE-Sephadex A-25阴离子交换层析、SephadexG-75凝胶过滤层析等步骤纯化弹性蛋白酶。结果经过上述纯化步骤,弹性蛋白酶纯化倍数达到了33倍,回收率达到12%,酶蛋白比活达到了528 U/mg。结论此纯化工艺较为理想,获得了较纯的酶蛋白。     

微生物产弹性蛋白酶制取方法的探讨

目的探讨微生物产弹性蛋白酶的制取方法。方法将产弹性蛋白酶的枯草芽孢杆菌接种到发酵培养基中，摇床发酵培养后，离心收集发酵液，并经过硫酸铵盐析、DEAE—SephadexA-25阴离子交换层析、SephadexG-75凝胶过滤层析等步骤纯化弹性蛋白酶。结果经过上述纯化步骤，弹性蛋白酶纯化倍数达到了33倍，回收率达到12％，酶蛋白比活达到了528U／mg。结论此纯化工艺较为理想，获得了较纯的酶蛋白。     

碱性蛋白酶水解米糠蛋白动力学特性研究

研究蛋白酶水解制备生物活性多肽反应机制与动力学行为,基于经典的米氏方程理论,应用数学推导结合试验研究的方法,以米糠蛋白为原料,对米糠蛋白-碱性蛋白酶体系进行酶解动力学研究.考虑蛋白质单底物水解、蛋白酶失活的机理模型,构建动力学模型R=aexp[-b(DH)],其中对参数a值和b值进行确定.利用Origin 8.0软件,对推导出的公式进行拟合得到水解速率动力学模型为R=(94.754e0-0.0597s0)exp[-0.157(DH)],水解度-水解时间的动力学模型:DH =6.37ln[1+(14.88e0/s0-0.009)t].对于米糠蛋白-碱性蛋白酶模型体系,经试验拟合,并求得该体系动力学常数:酶失活常数K4为16.144 min-1,酶解反应速率常数k2为94.754 min-1.     

肉类嫩化酶弹性蛋白酶优良微生物菌种筛选研究

应用微生物菌种分离筛选技术,在25种动物副产品牛肚(牛瓣胃)中分离筛选得到了生长速度快,产弹性蛋白酶稳定,且酶活力较高的菌株.系统地研究了菌株的形态学特征、生长特性及其生理生化性质,研究结果表明,该菌为红色的革兰氏阴性杆菌,在显微镜下观察,该菌体中等大小,菌体长为2.53um,宽为0.64um,两端钝园,无芽孢,单个排列无规律;在蛋白胨培养基上生长良好,菌落黄色,圆形,凸起;在弹性蛋白平板上生长形成明显的蛋白水解透明圈,经鉴定该菌株为假单胞杆菌(Pseudomonas sp SWU).     

毛霉蛋白酶的制备及催化特性的研究

该文研究了毛霉蛋白酶的催化特性以及影响其活力的一些因素,包括温度、pH值以及金属离子等。结果表明,毛霉蛋白酶有2个较为合适的作用pH值,分别为pH7.5和pH10.0,在60℃有最大催化活力;在pH6.0和40℃以下毛霉蛋白酶有很好的稳定性。SPI水解试验表明,毛霉蛋白酶是一种适于水解大豆蛋白的酶种,在大豆多肽制备方面有较好的前景。     

脱墨污泥催化热解特性及动力学研究

利用热重分析法,对不同升温速率和催化剂条件下脱墨污泥的热解特性进行了研究,采用Coats-Redfern法对得到的热失重曲线进行模拟并建立动力学模型,计算了脱墨污泥热解的动力学参数。结果表明,脱墨污泥的热解反应为一级三段反应;在脱墨污泥催化热解的低温段(220～370℃),催化剂的催化作用由大到小的次序为：MgCl2＞CaCl2＞ZnCl2＞NaCl,MgCl2、CaCl2和ZnCl2的添加降低了低温段的活化能和最大失重速率;在高温段(600～750℃),4种催化剂的催化效果差别不大,均可使脱墨污泥热解曲线向低温区域移动,且最大失重速率明显降低。与未加催化剂的脱墨污泥相比,添加催化剂后脱墨污泥的低温段和高温段热解的活化能均有所降低,其中高温段的活化能降低50%以上。     

庚烷中微生物脂肪酶催化酯化反应动力学的研究

对国产解脂假丝酵母脂肪酶Ｃａｎｄｉｄａｌｉｐｏｌｙｔｉｃａｌｌｉｐａｓｅ在庚烷中催化丁醇与月桂酸酯化反应的动力学进行了研究。结果发现反应不存在扩散限制，仅为动力学控制，符合米氏方程。虽然存在丁醇抑制现象，但底物浓度对反应速率的影响符合Ｐｉｎｇ－Ｐｏｎｇ反应机理，由此推导了反应动力学模型并由实验数据求得了各模型参数。     

海沃德猕猴桃巯基蛋白酶的催化特性与稳定性

对以海沃德猕猴桃残次果提取的巯基蛋白酶进行了动力学研究,考察了一些外加剂对酶活的影响,同时初步探讨了酶液的稳定性。结果表明:以酪蛋白为底物的猕猴桃巯基蛋白酶的Km值为6.56×10-3mmol,Vmax为163.93mg·mL-1·min-1;在其底物浓度为1.0g/L时,该酶的最适温度和pH分别为55℃和5.5;L-半胱氨酸、2-巯基乙醇、硫代硫酸钠、EDTA以及葡萄糖等外加剂对酶具有明显的激活效果,且EDTA的激活作用最强;抗坏血酸、碘乙酸和过氧化氢等外加剂对酶则具有抑制作用。在最适酶促反应条件下,于4℃温度存放的酶液活性随时间延长呈急剧的降低,并以pH为3.5存放条件下的降低最少,约可保存80%的酶活性。      

海沃德猕猴桃巯基蛋白酶的催化特性与稳定性

对以海沃德猕猴桃残次果提取的巯基蛋白酶进行了动力学研究,考察了一些外加剂对酶活的影响,同时初步探讨了酶液的稳定性。结果表明:以酪蛋白为底物的猕猴桃巯基蛋白酶的Km值为6.56×10-3mmol,Vmax为163.93mg·mL-1·min-1;在其底物浓度为1.0g/L时,该酶的最适温度和pH分别为55℃和5.5;L-半胱氨酸、2-巯基乙醇、硫代硫酸钠、EDTA以及葡萄糖等外加剂对酶具有明显的激活效果,且EDTA的激活作用最强;抗坏血酸、碘乙酸和过氧化氢等外加剂对酶则具有抑制作用。在最适酶促反应条件下,于4℃温度存放的酶液活性随时间延长呈急剧的降低,并以pH为3.5存放条件下的降低最少,约可保存80%的酶活性。     

毛霉蛋白酶特性研究

研究了翻曲、不同的培养时间及NaCl对分离得到的毛霉的蛋白酶活力的影响，探讨了不同的毛霉蛋白酶提取方法，并对比了福林酚法测定蛋白酶活力时的最佳吸收波长。结果表明：该株毛霉麸曲固态培养72h时蛋白酶活力最高；培养24h后翻曲1次能显著提高酶活力；用盐水麸曲制曲培养时，用蒸馏水提取可获得较高活力的复合蛋白酶；测定蛋白酶活力时，最佳吸收波长为690nm。     

弹性蛋白酶的研究进展

本文概述了弹性蛋白酶的来源、分布及弹性蛋白酶的发酵研究进展 ,并综述了弹性蛋白酶在医药、食品和日用化工等方面上的应用和发展前景。     

污泥与生物质催化共热解特性及动力学研究

采用热重分析仪对污泥、松木屑及其混合物进行催化共热解特性分析及动力学研究。使用Coats-Redfern法对热失重曲线进行模拟并建立动力学模型,计算了污泥与松木屑催化共热解的动力学参数。结果表明:添加催化剂能够有效促进污泥与松木屑高温段有机物的降解;增加松木屑质量分数可有效减少固体残渣量,且松木屑质量分数为40%时,共热解的协同效应最佳;添加催化剂能够有效降低热解初始温度、最终温度并缩短反应时间;通过对热解特征值分析,添加CaO在城市污泥中质量分数为80%时使热解特征值D增大至10.94×10-7;添加催化剂使城市污泥与松木屑的低温段热解活化能有所降低。     

有机溶剂稳定性蛋白酶发酵动力学研究

利用分批发酵研究海洋细菌Bacillus aquaemaris DS1分泌有机溶剂稳定性蛋白酶的代谢特性,结果表明蛋白酶合成和菌体生长呈部分生长关联型。据分批发酵实验结果采用Logistic方程、Luedeking-Piret方程建立了描述菌株生长、产酶以及底物消耗分批发酵动力学模型。动力学模型计算值与实验值拟合良好,相对误差小于10%。     

酱油酶制剂蛋白酶动力学的研究

在生物学迅猛发展的条件下,作为一门独立学科的生物工程形成了。它是生物工程学中工程性更强的一部分。今后工业微生物学成就以及与微生物工业相近的工业领域的成就,将在更大程度上取决于生物工程的成果。如果能具有装有计算机在内的有一套信息传送装置的现代化发酵罐,而且在微生物群体发育、生物量的数量与组成、生长和产物合成的动力学指标、细胞能量供给(ATP)、蛋白     

微生物碱性蛋白酶研究进展

本文综述了微生物碱性蛋白酶研究现状、高产菌株的选育、基因结构及功能，并根据当前研究状况对微生物碱性蛋白酶在今后的发展进行了展望。     

微生物碱性蛋白酶研究进展

本文主要综述了微生物碱性蛋白酶在国内外的应用研究和现状,对微生物碱性蛋白酶的产生菌,碱性蛋白酶的应用、基因结构及性质,高产工程茵的选育技术等方面的研究进展进行了概述,并根据当前应用研究状况对微生物碱性蛋白酶在今后的发展进行了展望.