浙江省肉鸡源耐药大肠杆菌耐药表型及耐药基因型的分析

从湖州、嘉兴、绍兴3市12家肉鸡养殖场采集粪便、土壤、污水共720份样品，经16s rRNA测序鉴定，K-B法测定耐药表型，PCR法鉴定耐药基因型与整合子，并通过共现网络分析大肠杆菌耐药性传播风险。分离得到的234株大肠杆菌对头孢唑啉、阿奇霉素、四环素与磺胺类抗生素有较高的耐药率，且嘉兴市分离株对其中17种抗生素的耐药率均高于其他两市。基因型鉴定结果表明，234株大肠杆菌中，aadA1的检出率最高为88.89%，其次分别为tet(A)、sul1、blaTEM，而在29种耐药基因中，嘉兴市分离株中有18种基因的检出率高于其他两市。Ⅰ型整合酶3市分离株中的检出率分别为28.38%(湖州)，40.96%(嘉兴)，32.47%(绍兴)。结果表明:嘉兴市分离株有相对较高的耐药率与耐药基因检出率，共现网络分析显示在嘉兴市大肠杆菌中qnrB与mph(A)、fosA与blaTEM、fosA与sul1、sul2与aadA1有较高的共传播风险。本研究调查了浙江省湖州、嘉兴、绍兴3市肉鸡养殖环境的耐药情况与传播风险，为保障动物性食品安全与特定耐药基因的重点监测提供理论依据。     

海产源多重耐药共生菌的耐药表型及耐药基因分析

目的 对市售牡蛎和大黄鱼中分离的多重耐药共生菌进行耐药性分析、全基因组测序及耐药基因分析。方法 采用药敏纸片法进行耐药性分析,采用二代测序技术进行基因组框架图测序,通过与CARD数据库比对进行耐药基因分析。结果 菌株呈现高度的多重耐药性,对10种或10种以上药物耐药,多重耐药系数大于或等于0.48,所有菌株对头孢唑啉、萘啶酸、四环素、复方新诺明及氯霉素耐药。分离菌株为水产品中常见共生菌,基因组差异显著。菌株含有β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素类、磺胺类、氯霉素类、消毒剂类等药物的耐药基因,与耐药表型基本一致,部分菌含有对同一类药物具有不同耐药机制的多个基因。结论 牡蛎和大黄鱼中存在多重耐药共生菌,耐药基因丰富,如果耐药基因传播到致病菌会造成临床治疗失效,具有潜在的危害。     

沙门氏菌耐药谱及质粒耐药基因的筛查

目的:分析不同来源沙门氏菌耐药性及其质粒耐药基因携带情况,从而揭示质粒耐药基因与菌株耐药性的对应关系。方法:对226株食源性及医源性的沙门氏菌分离株用试卡法测试其耐药性,按2012年美国实验室标准委员会(CLSI)指导原则的标准计算细菌对抗菌药物的耐药率(R),中介率(I),和敏感率(S),并对具有耐药表型和中介表型的非敏感菌株进行质粒耐药基因的筛查。结果:针对青霉素类抗生素进行筛查,耐氨苄青霉素的菌株达到15.9%(36/226),耐舒巴坦/氨苄青霉素达到12.8%(29/226);针对氨基糖苷类抗生素,耐妥布霉素的菌株达到6.2%(14/226),耐庆大霉素5.8%(13/226);针对喹诺酮类抗生素,耐环丙沙星的菌株达到4.0%(9/226),耐左氧氟沙星1.8%(4/226);针对头孢菌素类抗生素,耐头孢唑啉4.4%(10/226),耐头孢他啶和头孢曲松分别为2.2%(5/226),耐头孢替坦0.9%(2/226)。针对碳青霉烯类和除青霉素类、头孢菌素类以外的β-内酰胺类的筛查结果均为敏感。β-内酰胺类抗生素非敏感菌株中,质粒上β-内酰胺类耐药基因携带率为59.5%(50/84),其中CMY基因携带率为10.7%(9/84),OXA基因携带率为27.3%(23/84),TEM基因携带率为39.2%(33/84),PSE基因携带率为1.2%(1/84)。喹诺酮类抗生素非敏感菌株中,质粒上喹诺酮类耐药基因携带率为14.7%(5/34),其中qnrA基因携带率为11.8%(4/34);qnrS基因携带率为2.9%(1/34)。对喹诺酮类和氨基糖苷类抗生素非敏感菌株中,质粒上acc(6’)-Ib-cr基因的携带率为17.1%(7/41)。仅CMY基因在食源性和医源性分离株中的分布具有统计学差异(χ2=5.480,P0.05)。结论:本研究涉及的沙门氏菌分离株中,对青霉素类抗生素耐药性较强,其次是氨基糖苷类、头孢菌素类和喹诺酮类。大多数耐β-内酰胺类抗生素的沙门氏菌菌株都携带相对应的质粒耐药基因,而耐喹诺酮类以及氨基糖苷类抗生素的沙门氏菌携带相对应的质粒耐药基因较少。     

食源性沙门氏菌耐药表型与耐药基因的研究

为了解食源性沙门氏菌（Salmonella）的耐药状况以及耐药基因与耐药表型的关系,从基因水平上探究Salmonella的耐药机制。本研究对215 株分离自1 093 份市售新鲜肉类中的Salmonella进行了耐药状况检测,设计了16 种引物对耐药基因进行聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增,并对扩增产物进行克隆测序。结果显示,分离株对磺胺异恶唑耐药率最高（71.7%）,其次为四环素（69.8%）、甲氧嘧啶（67.9%）和复方新诺明（52.8%）,分离株对环丙沙星、呋喃妥因和头孢类比较敏感。三重及以上耐药的菌株占60.5%,最多可以耐受13 种抗生素;PCR共扩增到10 种耐药基因,测序结果表明扩增到的序列与GenBank上相应参考序列的相似性均在99%以上;β-酰胺类以及四环素类的耐药基因检出情况与耐药表型具有很高的一致性,符合率均在90%以上,其次为磺胺类（81.6%）。说明本研究中的食源性Salmonella分离株的耐药率高,多重耐药情况较为严重,耐药表型与耐药基因检测结果基本一致。     

肉鸡屠宰生产链中沙门氏菌耐药基因检测与耐药相关性分析

目的:了解肉鸡屠宰生产链沙门氏菌耐药性与耐药基因的相关性。方法:采用纸片扩散法对肉鸡屠宰生产链分离鉴定的72株沙门氏菌进行10种抗生素敏感性实验;采用PCR方法检测耐药沙门氏菌相应的耐药基因。结果:72株肉鸡屠宰生产链中沙门氏菌对萘啶酸(100%)的耐药率最高;对氨苄西林、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、环丙沙星、四环素、庆大霉素耐药率分别为69.44%、54.17%、38.89%、34.72%、13.89%。72株沙门氏菌中有67株至少含有一种耐药基因,bla TEM、bla CMY-2、sul2、sul3、tet B和tet C耐药基因较为普遍,其耐药菌bla TEM、bla CMY-2、sul2、sul3、tet B和tet C基因检出率分别为96.08%、100%、94.87%、71.79%、78.38%和100%。结论:沙门氏菌对常见抗生素具有不同程度的耐药性,且耐药基因普遍存在于耐药菌株中,药敏实验结果与耐药基因检测结果有很高的一致性(≥75%)。     

一株多重耐药副溶血性弧菌的耐药分子机制研究

目的从养殖半滑舌鳎肠道分离到一株副溶血性弧菌Vp1107,对该菌株进行耐药性及耐药分子机制研究。方法通过K-B法进行药敏试验,PCR扩增及测序法对耐药基因及整合子进行检测与分析。结果 Vp1107菌株耐受氨苄西林、阿莫西林、头孢唑啉、四环素、土霉素和氯霉素,对头孢呋辛钠、链霉素、卡那霉素、萘啶酸、环丙沙星中度敏感,其多重耐药系数为0.33。菌株携带blaTEM、strA、strB、tetB、tetM、catⅢ、intI1耐药相关基因,1类整合子不含基因盒,gyrA和parC基因的喹诺酮类耐药决定区未发生点突变。结论副溶血性弧菌Vp1107耐药程度较为严重,其耐药性主要由耐药基因编码的耐药性酶类和外排泵作用引起,提示应加强对副溶血性弧菌耐药性的监控及渔用药物的管理。     

生猪肉加工厂食品接触面四环素耐药菌及其耐药基因的分布

耐药菌的传播会对食品安全与人类健康造成严重威胁。本研究通过对某大型生猪肉加工厂食品接触面污染微生物四环素耐药情况进行分析,探讨其对生猪肉制品质量与安全的潜在危害。从生猪加工厂食品接触面共采集样品100份,共分离到168株细菌。通过药敏试验,发现60.7%的污染细菌对四环素具有耐药性,包括85.7%的假单胞菌属、85.7%的葡萄球菌属、86.7%的沙雷氏菌属、80%的乳球菌属、80%的大肠杆菌、60.0%的不动杆菌属和55.0%的气单胞菌属。通过对分离株进行15种四环素耐药基因的筛查,发现生猪肉加工厂设备食品接触面存在9种四环素耐药基因,包括tet L、tet A、tet B、tet C、tet E、tet M、tet S、tet K和tet X,其检出率分别为7.7%、6.0%、4.8%、4.8%、3.6%、3.6%、3.6%、1.2%和0.6%。本研究结果表明,生猪肉加工厂食品接触面四环素耐药菌污染严重,可能交叉污染生猪肉制品,其携带的四环素耐药基因可能向不同细菌种属间转移,进而由食物链向人类传播,对人类健康造成潜在的威胁。     

武汉地区食源性沙门氏菌耐药特征分析

目的分析武汉市售肉类中分离的82株沙门氏菌的药物敏感性及耐药基因。方法根据美国临床和实验室标准协会(Clinical&Laboratory Standards Institute,CLSI)相应标准获得沙门氏菌耐药实验种类和浓度,定制药敏板,采用最低抑菌浓度法(minimum inhibitory concentration,MIC)进行药敏实验,并通过PCR方法检测耐药基因的携带情况。结果药物敏感性试验结果显示,82株沙门氏菌对四环素耐药率最高,有66株菌株对四环素耐药,耐药率高达79.52%,对复方磺胺和氨苄西林的耐药率较高,耐药率分别为49.40%和48.19%;对头孢类药物的耐药率较低,对亚胺培南未表现出耐药性。耐药基因检测结果显示,82株沙门氏菌中四环素耐药基因tetA的检出率最高,且有54株沙门氏菌携带多重耐药基因,头孢类药物耐药基因blaCTX检出率较低,仅为3.66%。结论武汉市食源性沙门氏菌耐药情况较为严重,部分常见抗生素耐药性较高,对临床用药治疗和食源性病菌预防造成巨大的影响。     

多重耐药维氏气单胞菌porin基因敲除的构建及其耐药特性研究

目的 研究微孔蛋白基因porin对维氏气单胞菌(Aeromonas veronii,A. veronii)耐药性的影响以解析A. veronii的耐药机制。方法 以多重耐药的A. veroniiWL-3为研究对象,采用同源重组双交换的方法构建Δporin敲除株,利用比浊法测定其生长曲线,通过药敏纸片法分析其耐药性。结果 以A. veronii WL-3基因组DNA为模板,利用overlap聚合酶链式反应技术扩增获得上下同源臂融合片段,并连接至自杀质粒pDM4中,重组成敲除质粒pDM4-Δporin。将pDM4-Δporin转化至感受态大肠杆菌SM10中,通过接合转移转入A. veronii WL-3中。通过同源重组双交换构建A. veronii WL-3Δporin敲除株。生长曲线显示与野生株相比,Δporin菌株的生长速度并无明显变化;抗生素耐药特征分析显示敲除porin基因会降低A. veronii对头孢氨苄、新霉素、四环素、环丙沙星等10种抗生素的敏感性,提高对多粘菌素B的敏感性。结论 基因porin不是A. veronii生长所必需的,但会影响A. veronii对部分抗生素的...     

肉鸡养殖场中环丙沙星和头孢噻肟双重耐药沙门菌耐药机制的研究

目的阐明养殖场肉鸡及其环境中环丙沙星和头孢噻肟耐药沙门菌的分布和耐药机制特点。方法对河南省4个不同地区肉鸡养殖场及环境中分离的沙门菌进行环丙沙星和头孢噻肟双重耐药菌株的筛选和鉴定,并对分离株进行药敏试验、喹诺酮类和超广谱β内酰胺酶耐药机制研究。结果从52株养殖场肉鸡肛拭子及环境中筛选出5株耐环丙沙星和头孢噻肟的沙门菌,均为印第安纳沙门菌,有AMP-CAZ-CHL-CIP-CTX-GEN(n=1)和AMP-CAZ-CHL-CIP-CTX-GEN-SXT-TET(n=4)两种耐药谱。喹诺酮耐药机制研究显示,5株菌的拓扑异构酶编码基因gyr A和par C均有点突变出现,均携带了质粒介导的喹诺酮耐药基因,包括oqx AB、aac(6')-Ib-cr基因,而qnr A、qnr B、qnr S、qnr C、qnr D和qep A基因则未检出。超广谱β-内酰胺酶耐药机制显示,5株菌均为blaCTX-M-65型。结论耐环丙沙星和头孢噻肟的菌株存在于肉鸡养殖环节及其环境中,并具有复杂的喹诺酮耐药机制和可传播的超广谱β内酰胺酶耐药机制。为阐明农场-餐桌-感染者传递链条中耐药关联性,为社区感染防控、临床抗生素用药提供科学依据,我国应该加强肉鸡等养殖业沙门菌多重耐药菌株的监测。     

抗肿瘤多药耐药的研究进展

肿瘤多药耐药是化疗失败的主要原因,其机制很多,如转运P糖蛋白与mdr- 1基因,谷胱甘肽(GSH)解毒酶系统,DNA拓扑异构酶含量或性质的改变,多药耐药相关蛋白(MRP) ,蛋白激酶(PK)等。有关药物有,针对P -gp/MDR1的逆转剂,针对蛋白激酶C的逆转剂,DNA修复相关酶的活性抑制剂,针对MPR的逆转剂,抑制GSH合成酶。现将MDR的耐药机制及目前可供临床治疗的MDR肿瘤的药物:MDR逆转剂和抗肿瘤MDR药物以及对MDR的基因治疗研究作一综述。     

抗损坏性蛋白导致真菌耐药

正最近,南京师范大学陆玲教授课题组的一项研究成果回答了病原真菌为何耐药,有望为抗真菌感染的新药筛选提供理论依据。该成果发表在最近一期美国微生物学会的专业顶级期刊mBio上。病原真菌耐药是世界性难题。世界卫生组织在2015年通过决议敦促各成员国重视微生物     

食品中耐药细菌风险评估的研究进展

近年来抗生素的使用和滥用是普遍存在的问题,食品中耐药细菌和耐药基因引起的人类疾病威胁已成为全球性关注的热点。因此,全面开展从农场到餐桌耐药细菌的风险评估研究具有十分重要的意义。本文根据国际食品法典委员会拟定的微生物风险评估原则和指导方针,从危害识别、释放评估、暴露评估、剂量-反应关系评估、风险评估5 个步骤进行阐述。通过分析国内外抗生素耐药细菌风险评估案例,综述了食品中耐药细菌风险评估的研究进展及其预防控制措施,以期为未来耐药细菌风险评估提供理论依据。     

产气荚膜梭菌耐药及防控研究进展

产气荚膜梭菌是一种能够引起人类食物中毒和动物坏死性肠炎的食源性病原,在动物产品生产过程中引发疾病并通过加工环节传播,威胁人类健康,同时给养殖行业带来巨大经济损失。随着耐药问题的日益严峻以及2020年"饲料端全面禁抗"的实施,利用生物防控技术进行产气荚膜梭菌防治将在养殖业中发挥巨大作用。本文针对目前产气荚膜梭菌的耐药特性,详述了产气荚膜梭菌的防控现状,总结了全面的综合防控策略,为产气荚膜梭菌的防控提供参考。     

广州市售鱼、虾、蛤蚌中四环素耐药菌及四环素耐药基因的研究

本文以广州市大型超市的鱼、虾、蛤蚌为研究对象,研究其四环素耐药菌的分布及四环素耐药基因的携带情况。采用平板涂布法分离四环素耐药菌并统计菌落数,计数结果在102~106 CFU/g之间,其中鱼肠中四环素耐药菌的数量达106 CFU/g。通过PCR对样本总DNA中四环素耐药基因的携带情况进行检测,发现每个样本均携带多个(3~7个)四环素耐药基因。9种四环素耐药基因中,tet(E)的检出率最高6.3%,其次分别为tet(S)(5.1%),tet(M)(3.1%),tet(C)(1.7%)和tet(G)(0.9%)。Southern杂交试验表明四环素抗性菌株Aeromonas spp.和Escherichia coli携带的耐药基因tet(E)存在于质粒上;在无四环素选择压力下对上述两种菌株进行连续传代,其耐药质粒仍稳定存在于菌株中。本研究表明广州市售鱼、虾、蛤蚌中分离得到的细菌对四环素耐药情况较为严重,应得到相关监管部门以及消费者的足够重视。     

科学家发现对抗耐药细菌的抗生素

<正>据外媒报道,美国科学杂志《细胞》刊登一项研究显示,美国、意大利科学家从泥土中发现一种能对抗耐药性细菌的新型抗生素。据报道,这种新的抗生素被称为"pseudouridimycin",由土壤中的微生物所产生。这种抗生素在实验过程中杀死了20种细菌,对于链球菌和葡萄球菌特别有效。链球菌和葡萄球菌对于多种抗生素都已产生了耐药性,而且治愈了老鼠的猩红热。     

动物源性食品中抗生素残留、耐药细菌的分布及耐药基因的水平传播

目的：调查动物源性食品中抗生素的残留、耐药细菌的分布及抗生素对耐药基因水平转移的影响。方法：利用盐析辅助液液萃取/高效液相色谱/串联质谱法对市售动物源性食品中18种抗生素的含量进行检测;对样品中的需氧菌进行分离鉴定,利用PCR技术调查耐药基因的分布,通过接合转移试验调查抗生素胁迫对耐药基因水平传播的影响。结果：50份动物源性食品中检出环丙沙星、恩诺沙星、土霉素、金霉素、磺胺嘧啶和磺胺二甲嘧啶。162株分离株中磺胺甲基异恶唑耐药基因sul1的检出率最高。在环丙沙星胁迫下,三株供体菌中耐药基因qnrS的接合转移率均高于对照组。结论：动物源性食品中喹诺酮类、磺胺类和四环素类抗生素均有不同程度的残留。亚抑菌浓度抗生素促进耐药基因的接合转移。     

不同来源副溶血性弧菌耐药情况比较

为了比较不同来源以及不同致病性副溶血性弧菌耐药性差异,通过改良K-B纸片法对44株副溶血性弧菌进行抗生素耐药性检测,应用PCR技术对其耐药基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)进行检测。结果表明:从海水虾和淡水虾分离的副溶血性弧菌菌株的耐药表型无明显差异,其耐药率分别为100%和95.5%;但是致病性菌株多重耐药性高达73.7%,显著高于非致病性菌株(其为16%);不同来源以及不同致病性菌株所含耐药基因种类和数量并无显著差异。本研究为副溶血性弧菌耐药多样性普查提供基础数据,并对进一步研究耐药菌风险评估提供相关的帮助。     

北京市顺义区腹泻病例分离沙门氏菌耐药特征分析

目的 对北京市顺义区腹泻病例分离的沙门氏菌进行耐药特征分析.方法 2个收集2013-2018年北京市顺义区腹泻病例粪便标本,对标本进行沙门氏菌分离培养、生化鉴定和血清分型,使用微量肉汤法对分离的沙门氏菌菌株进行26种抗菌药物的敏感性检测,开展耐药率、非敏感率、多重耐药率和耐药谱分析.结果 腹泻病例沙门氏菌检出率为5.4...