双酶法水解鲣鱼头的工艺条件探讨

确定中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味酶两两组合双酶水解鲣鱼头的最佳组合,利用正交试验探讨了加水量、酶浓度、温度、水解时间对双酶水解效果的影响,确定了适宜的水解条件。结果表明:木瓜蛋白酶和风味酶双酶同时水解效果最好,最适水解条件为:温度60℃、加水比1∶4、酶浓度2600IU/g原料(木瓜蛋白酶∶风味酶为1∶1)、水解时间2h,蛋白质的水解率为23.4%,氮利用率为57%。氨基酸分析表明,水解液的氨基酸总量为2.46g/100mL。其中必需氨基酸占35.79%,游离氨基酸为0.37g/100mL,占氨基酸总量的15.01%。     

酶法水解牛胎盘下脚料

以牛胎盘下脚料为原料，试验5种蛋白酶对其进行水解，根据水解液综合效果确定中性蛋白酶为最适单酶，其最佳水解条件为温度40℃，pH7．5，酶添加量4000u／g，料水比1：3，水解时间4h；响应面分析方法知，中性蛋白酶与胰蛋白酶混合水解牛胎盘下脚料的最佳水解条件为：温度46．4℃，pH值为8．17，酶比1：1(酶量为4000u／g)，料水比为1：3。氨基酸分析结果表明：混合酶水解液的游离氨基酸2483.6mg／L，而中性酶水解液的游离氨基酸493.8mg／L。     

黄鳍金枪鱼头蛋白酶解条件的研究

确定了中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味酶两两组合双酶水解金枪鱼头蛋白的最佳组合,利用正交试验探讨了酶浓度、温度、水解时间对双酶水解效果的影响,确定了最佳的水解条件。结果表明:木瓜蛋白酶和中性蛋白酶双酶同时水解金枪鱼头蛋白的效果最好;最佳水解条件下水解液的氨基酸态氮含量为126.53mg/100mL,氮回收率为80.2%;水解液氨基酸分析表明,水解液的氨基酸总量为4.12g/100mL,其中必需氨基酸占36.04%,游离氨基酸为0.81g/100mL。     

蜗牛水解液的制备及其乳酸发酵饮料的研究

用碱性蛋白酶对白玉蜗牛肉进行水解,探讨了水解温度、pH值、加酶量及固液比对蜗牛肉水解液水解得率的影响,通过正交试验确定了蜗牛肉水解的较佳条件,并以水解液为原料进行乳酸菌发酵,获得较佳的饮料制备工艺.结果表明：以碱性蛋白酶为水解酶,水解工艺条件为,温度50℃,pH 10.5,料液比1：5,加酶量6 000 U/g,水解3...     

白鲢鱼头蛋白酶解工艺研究

以白鲢鱼下脚料中最为重要的鱼头为原料,以水解液中氨基氮含量为指标,比较了木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶5种酶的水解效果,从中选出最佳水解酶,在单因素实验基础上对其水解工艺进行正交实验优化,并对其水解产物中游离氨基酸组成进行分析。结果表明:胰蛋白酶对鱼头蛋白的水解效果最佳,最佳工艺条件为水解温度55℃,pH8.0,料水比1∶3(g/m L),加酶量80 U/g,在此条件下水解液中游离氨基氮含量为63.69 mg,水解液中游离氨基酸含量较高。     

牡蛎肉双酶复合水解和酸水解工艺

以牡蛎肉为原料,采用中性蛋白酶和菠萝蛋白酶同时水解技术和酸水解的方法,对牡蛎肉进行水解,通过对水解条件的研究确定双酶酶解的条件为:在料水比1∶8(g/mL)、pH7.0、温度50℃的条件下,先用中性蛋白酶(每克原料)2.3×10-5Kat水解4 h;然后依次用菠萝蛋白酶(每克原料)1.7×10-4Kat连续水解4 h。氨基酸分析结果表明:牡蛎肉中含有17种氨基酸,其中包括人体必需的7种氨基酸。     

黑麦草叶蛋白酶解工艺的研究

以水解度为指标,比较了碱性蛋白酶Ⅰ、胰酶、复合风味蛋白酶和碱性蛋白酶Ⅱ对黑麦草叶蛋白的水解能力,结果表明碱性蛋白酶Ⅰ水解黑麦草叶蛋白的能力最强,其最佳工艺参数为:pH10.5,温度45℃,E/S=1750 u/g,反应时间10 h.高效液相色谱分析表明最佳工艺条件下制得的水解液含有7个肽段组分,其相对分子质量分布在102～14502之间.氨基酸分析表明酶解液中游离氨基酸总量为3.233 g/100 mL,其中必需氨基酸占30.776%,药效氨基酸占75.286%,鲜味氨基酸占38.324%.     

双酶法制备豌豆肽及其抗氧化活性

研究豌豆蛋白双酶水解的最佳工艺条件及产物的抗氧化活性。以豌豆蛋白粉为原料,通过单因素试验和正交试验优化出双酶分段水解豌豆蛋白的工艺条件,并初步研究豌豆肽的抗氧化活性。结果表明,双酶法制备豌豆肽的最佳工艺条件为:底物浓度10%,复合蛋白酶加酶量3.0%,pH 9.0,温度55℃,酶解3.5 h;用碱性蛋白酶酶解,加酶量3.0%,pH 9.5,温度50℃,酶解4.0 h。由此酶解得到水解物的水解度为39.61%。水解液蛋白浓度0.125 mg/mL时,其对Fe2+螯合能力为83.22%。试验表明和单酶水解相比,双酶水解工艺可提高豌豆蛋白的水解度和抗氧化活性。     

鳀鱼蛋白质自水解的条件优化

鳀鱼含有丰富的内源蛋白酶,可以将鳀鱼蛋白水解为小分子的肽和游离氨基酸等成分。采用正交试验和响应面分析法研究并优化鳀鱼中蛋白质成分被内源蛋白酶水解的工艺条件,得到最佳工艺条件：温度为57.05℃,加水量为80%,初始pH值为9.00。最佳工艺条件的验证结果表明,水解液中的氨基氮含量(0.4259g/100ml)和回归方程的预测值(0.4377g/100ml)具有较好的拟和性,水解液中的氨基氮含量比优化前的最大值(0.3814g/100ml)提高11.67%。     

酶法制备花椒籽蛋白铁结合肽的工艺优化

采用不同的蛋白酶水解花椒籽蛋白,以花椒籽蛋白质铁结合肽水解度和铁结合能力为指标,筛选出制备花椒籽蛋白铁结合肽的最佳蛋白酶,并利用最佳蛋白酶酶解花椒籽蛋白制备铁结合肽。在单因素试验的基础上,应用BoxBehnken方法进行四因素三水平的试验设计,考察底物浓度、酶添加量、pH值、酶解温度和酶解时间对铁结合能力的影响,优化花椒籽蛋白制备铁结合肽工艺。结果表明:最佳蛋白酶为碱性蛋白酶,最佳工艺条件为:底物浓度27.70 mg/mL、酶添加量0.09mg/mL、酶解pH 10.47、酶解温度65℃、酶解时间2.5h,该条件下酶解产生水解液的水解度为7.23%,铁结合能力为585.66mg EDTA/g·蛋白质。     

草鱼蛋白酶解及脱腥脱苦工艺研究

研究以草鱼为原料,选用动物蛋白水解酶和风味蛋白酶混合同时酶解,然后选用活性碳为脱腥脱苦试剂,通过正交试验对酶解液脱腥脱苦工艺条件进行了探讨.结果表明:双酶的最佳酶解条件为蛋白酶(动物蛋白水解酶∶风味蛋白酶)用量比2 ∶ 1(W ∶ W),酶解温度55℃,pH值7.5,料液比1∶2,酶解时间6h,水解度达到33.64％,氨基氮含量为317.35mg/dL;活性碳最佳脱腥脱苦工艺条件:活性碳添加量0.6％(W ∶ V),时间1.5h,温度50℃.此条件下得到的水解液腥苦味能得到很好的去除,并且酶解液颜色较浅具有良好的风味.     

文蛤肉复合酶分步酶解工艺的研究

本实验探讨了中性蛋白酶和胰蛋白酶的复合酶与风味蛋白酶分步酶解文蛤肉的技术。 通过q检验法确定中性蛋白酶和胰蛋白酶最佳的复合比例,再通过正交试验探讨复合酶与风味蛋白酶二段酶解的最佳工艺参数,并以水解度、水解得率及风味评分值为指标对分步酶解工艺的最佳条件进行比较验证。结果表明,胰蛋白酶与中性蛋白酶的最佳复合比例为3:1,风味蛋白酶二段酶解的最优工艺参数为水解温度55℃、水解时间5.0h、加酶量1000 U/g(原料)、pH值(5.00±0.05),所得文蛤肉水解液中水解度、水解得率及风味评分值分别为55.97%、87.14%及230.98。     

酶解南美白对虾下脚料制备抗氧化酶解液的研究

以南美白对虾加工下脚料(虾头虾壳)为原料,采用内源酶、中性蛋白酶,通过控制pH、水料比、酶解温度、酶解时间和酶用量等条件进行酶解,从而制取抗氧化酶解液,以还原能力、清除羟基自由基能力为指标选择最优的酶解条件。结果表明,内源酶最佳酶解条件为:pH为6,水料比为2∶1,酶解温度为40℃、酶解时间为6h,此时还原力为0.668,·OH清除率为67.24%;中性蛋白酶的最佳酶解条件为:酶用量为60U/g原料,pH为6,水料比为2∶1,酶解温度为60℃、酶解时间为5h,此时还原力为0.672,·OH清除率为68.43%。在最佳酶解条件下,两种酶解液的还原力与·OH清除率大小排列为:中性蛋白酶>内源酶,但两者相差不大,从经济能源的综合因素考虑,选用内源酶较合适。     

不同蛋白酶制备鹅肉呈味肽的对比分析

以鹅肉为原料,采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶制备呈味肽,对比分析4 种酶解液中的水解度、寡肽含量,采用氨基酸自动分析仪对酶解液游离氨基酸组成进行测定,并利用电子舌和感官评定方法对酶解液的鲜味等味道进行滋味评定。结果表明：45 ℃恒温水浴酶解6.5 h,加酶量1 200 U/g、pH 7.0、固液比1∶3（g/mL）的条件下,木瓜蛋白酶酶解液水解度最大且寡肽质量分数最高,其次是中性蛋白酶,鹅肉蛋白水解度达到29.69%,寡肽质量分数达到0.18%。此外,中性蛋白酶酶解液的风味最好。中性蛋白酶酶解后产生的游离氨基酸类型丰富,谷氨酸和丙氨酸的含量高,最终酶解液整体鲜味浓郁,并伴有酸味。因此,确定酶解鹅肉蛋白的最佳用酶为中性蛋白酶。     

玉米黄粉预处理工艺优化及其蛋白水解成分分析

以玉米黄粉为原料,利用α-淀粉酶和纤维素酶进行预处理去除淀粉、纤维素杂质,通过单因素法和正交试验对预处理工艺条件进行优化,以蛋白质回收率为考察指标确定最佳水解工艺。预处理后所得的玉米浓缩蛋白粉用8%的亚硫酸钠热变性处理,利用四种不同蛋白酶对玉米蛋白进行水解,以玉米蛋白水解度、溶解度、发泡高度和失水率为考察指标优选出水解玉米蛋白的蛋白酶种类,通过高效液相色谱分析玉米蛋白水解物的组成成分。结果表明,预处理的最适条件为:先用纤维素酶处理后用α-淀粉酶处理;纤维素酶最适温度50 ℃、pH5.0、酶用量1.0%、时间2.5 h、料水比1:3 g/mL;α-淀粉酶最适温度65 ℃、pH6.5、酶用量1.0%、水解时间0.5 h、料水比1:4 g/mL,此时蛋白质回收率为96.1%、蛋白质含量为89.9%。碱性蛋白酶为水解玉米蛋白最佳蛋白酶,此时玉米蛋白水解产物的水解度为14.2%,溶解度为68.6%,发泡高度为64 mm,失水率为16%。水解物中氨基酸含量为35.72%,多肽含量为64.28%。     

鮰鱼皮明胶的水解工艺

采用碱性蛋白酶对鮰鱼皮明胶进行水解,先确定水解度的测定方法,并通过单因素试验和正交试验对碱性蛋白酶水解鮰鱼明胶的工艺条件进行优化。结果显示：利用改进的紫外分光光度法测定鮰鱼皮明胶水解液的水解度,此方法操作简单、结果较准确,可快速测定明胶的水解度。碱性蛋白酶水解明胶的最佳工艺条件为加酶量4000U/mL、酶解温度50℃、pH9.5、酶解时间3h,此时明胶的水解度达到35.12%。     

蛋白酶水解鸡枞菌制备酶解液工艺优化及抗氧化活性

以鸡枞菌为原料,以DPPH·、ABTS^+·、O2^-·清除率及水解度为指标,采用蛋白酶对鸡枞菌进行水解,制备酶解液。以碱性蛋白酶为水解酶,以DPPH·清除率和水解度为参考值,采用单因素和正交试验分析法研究料液比、加酶量、pH、温度、时间对酶解效果的影响。结果表明:应用碱性蛋白酶制备的鸡枞菌酶解液抗氧化效果最佳,酶解条件为料液比1∶25(g/mL),加酶量3500 U/g,pH 7,酶解温度45℃,酶解时间2.5 h。此条件下所得酶解液的DPPH·清除率为73.23%,水解度为44.6%,酶解液对DPPH·、ABTS^+·和O2^-·3种自由基均有清除作用,其IC50分别为0.25,0.39,1.09 mg/mL,但清除能力明显低于同浓度Vc的清除能力。     

鸡肉蛋白酶解条件及产物降解规律

采用木瓜蛋白酶水解鸡肉蛋白,通过单因素实验和正交实验确定水解鸡肉蛋白的最适条件,并在此水解条件下酶解24 h,研究水解过程中酶解液中游离氨基酸含量和肽分子质量分布的变化规律。结果表明,最佳的酶解条件为:温度45℃,pH6.5,酶用量6.0%,固液比1∶2,水解时间6 h;酶解产物中游离氨基酸种类齐全且含量较高,水解过程中,游离氨基酸总量变化呈增长的趋势,16 h后变化不大;酶解液的肽分子质量都集中在3 000Da以下,酶解过程中大分子质量肽不断减少,小分子质量肽不断增加;酶解24 h后,分子质量小于1 000 Da的小分子肽和氨基酸含量可达97.19%。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

多宝鱼不同水解物肽段组成及体外抗氧化活性比较

为研究熟化、模拟消化和酶解对多宝鱼肉水解物抗氧化活性的影响,本研究分别采用碱性蛋白酶和胃蛋白酶-胰蛋白酶水解多宝鱼生肉和熟肉,制备生肉碱性蛋白酶水解物、熟肉碱性蛋白酶水解物、生肉体外模拟消化产物和熟肉模拟消化产物,并评价其水解度、相对分子质量分布、氨基酸组成、肽段组成和体外抗氧化活性的差异。结果表明:生肉碱性蛋白酶水解物的水解度最高,为20.18%;4种水解物的分子质量分布差异明显,共有肽段仅有1条,但氨基酸组成没有显著性差异;碱性蛋白酶水解物以肽段小于1000 Da的组分为主,2～4肽的含量达64.57%～51.73%,而模拟消化产物中1000～3000 Da的组分占比超过50%,以多肽(>10)为主,熟化过程会减少小肽(<6)的比例;体外抗氧化活性分析显示,碱性蛋白酶水解物的抗氧化活性均高于模拟消化样品,熟化会降低生肉碱性蛋白酶水解物的抗氧化能力,生肉碱性蛋白酶水解物具有最高的超氧阴离子和羟基自由基清除能力,以及最佳的铁离子还原能力。因此,碱性蛋白酶是优于模拟消化的多宝鱼蛋白水解方式,鱼肉的熟化总体上会降低水解物的抗氧化能力。