肺炎克雷伯菌黏附因子相关研究进展

肺炎克雷伯菌为机会性致病菌,是导致医院获得性尿道感染、肺炎、败血症和伤口感染的重要致病菌。黏附于宿主细胞表面是致病菌感染的第一步,也是关键的一步。本文就肺炎克雷伯菌黏附因子相关研究进展及其前景作一综述。     

肺炎克雷伯氏菌培养工艺的研究

本文研究了肺炎克雷伯氏菌的培养工艺，得到了实验范围内最佳的培养基组成和培养条件；葡萄糖1％（质量分数，下同），大豆胨1．5％，牛肉浸膏0．2％，酵母粉0．2％，蛋白胨0．5％，氯化钠0．5％，K2HPO4 0．35％，KH2PO4 0．15％。2％接种量，转速160r/min和20％的摇瓶装填量是适宜的。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性分析

目的分析临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布情况及耐药性。方法收集吉林大学中日联谊医院临床标本中分离的221株大肠埃希菌和152株肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法检测抗菌素的敏感性;双纸片协同试验和纸片表型确证试验筛选并确证产超广谱β-内酰胺酶的菌株;按照美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)2005年版的标准判断结果。结果大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南的敏感性最高,均达100%;对头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦和头孢西丁的敏感性也较高,均大于70%,而对氨苄西林的耐药性均大于90%。共检出产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌118株,检出率为53.4%;肺炎克雷伯菌21株,检出率为13.8%;产超广谱β-内酰胺酶的两种菌株与非产超广谱β-内酰胺酶的同种菌株相比,对抗菌素的耐药性均明显增加。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌仍是产超广谱的β-内酰胺酶的主要菌株,且对常用抗菌素产生了较高的耐药性。     

肺炎克雷伯杆菌肺炎耐药临床分析

目的探讨肺炎克雷伯杆菌肺炎耐药情况。方法肺炎患儿在入院后使用抗生素前采用一次性吸痰管吸取痰液进行细菌培养,采用法国梅里公司VITEK-32型全自动微生物分析仪进行细菌鉴定,并测定药敏及超广谱β-内酰胺酶。结果62例均行ESBLS测定,其中18例(29%)ESBLS阳性。结论肺炎克雷伯杆菌是产ESBLs的典型细菌,其耐药机制为质粒介导携带ESBL基因的质粒常同时携带对其他抗生素耐药基因而形成多重耐[2]。     

肺炎克雷伯氏菌生物合成1,3-丙二醇的副产物调控研究

以肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)ATCC 25955为原始菌株,利用代谢工程手段对K.pneumoniae生物合成1,3-丙二醇(1,3-PD)的副产物进行调控.通过敲除副产物合成途径关键酶编码基因,在分批补料发酵条件下,1,3-PD的产量达到83.8 g·L-1,生产强度提至2.79 g...     

重组肺炎克雷伯菌发酵联产3-羟基丙酸和1,3-丙二醇

对表达了高效醛脱氢酶的重组肺炎克雷伯氏菌以甘油为底物生产3-羟基丙酸和1,3-丙二醇的过程进行优化,将发酵过程中补料阶段甘油浓度分别控制为0~10, 10~20, 20~30 g/L,并分3次间歇性补加甘油. 结果表明,发酵过程中补料阶段控制甘油浓度在20~30 g/L,发酵26 h得到47.20 g/L 3-羟基丙酸和43.90 g/L 1,3-丙二醇;而间歇性补加甘油产物得率最高,发酵26 h时3-羟基丙酸和1,3-丙二醇相对甘油的得率分别为0.35和0.38 mol/mol. 3-羟基丙酸和1,3-丙二醇联产可实现辅因子烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的再生平衡,从而提高碳回收率.     

有机酸对肺炎克雷伯杆菌厌氧代谢甘油的影响

在肺炎克雷伯杆菌厌氧发酵甘油生产1,3-丙二醇的过程中,大量的副产物,特别是乳酸和乙醇等副产物的生成,导致1,3-丙二醇的浓度和得率下降.为了进一步了解有机酸加入后菌体的代谢情况,在菌体生长期同时加入柠檬酸、琥珀酸和延胡索酸三种有机酸的混合液,使其浓度达到3.8 mmol.L-1·5L罐发酵结果显示,产物的生成发生显著...     

Rcs信号系统对克雷伯氏肺炎杆菌荚膜合成的影响

克雷伯氏肺炎杆菌是一种重要工业微生物,菌细胞表面具有荚膜结构,荚膜对于菌株的生理特性和工业应用具有重要的影响.Rcs磷酸化信号系统是一种对菌株荚膜合成具有调控作用的信号系统.利用Red同源重组技术,分别构建了基因rcsA,rcsB缺失的菌株,还构建了基因rcsA,rcsB单独过表达的菌株.这些菌株的生理特性的研究结果表...     

肺孢子菌肺炎相关细胞因子的研究进展

肺孢子菌(Pneumocystis carinii/jiroveci,PC为大鼠源,PJ为人源,目前国内外文献通称为PC)是重要的机会性致病菌,其感染可引起卡氏肺孢子菌肺炎(Pneumocystis carinii pneumonia,PCP),常见于免疫缺陷患者。在PCP发病过程中,白介素-10(interleukin-10,IL-10)、干扰素γ(interferonγ,IFNγ)、IL-8、IL-23和IL-33均发挥重要作用,且各细胞因子间可相互作用,协同或拮抗,影响机体炎症的发生及组织损伤。本文对PCP相关细胞因子的研究进展作一综述。     

Red重组系统在克雷伯氏肺炎杆菌中的应用研究

通过改造pKD46与pCP20质粒为含四环素抗性标记的pKD46-Tc与pCP20-Tc重组质粒,初步建立了一套能在K.pneumoniae菌株中运用的Red重组系统.以荚膜基因中的高保守基因wzi为敲除对象,导入同源臂为250 bp的打靶片段△wzi::FK,转化后得到6个重组子,初步确定敲除了K.pneumonia...     

有氧条件下Klebsiella pneumoniae发酵生产1,3-丙二醇的研究

探讨了有氧条件下利用Klebsiella pneumoniae发酵生产1,3-丙二醇的可能性,研究了通气量、初始底物浓度、pH和3-羟基丙醛等因素对发酵过程的影响.当空气通量为0.25vvm时,1,3-丙二醇的得率和生产强度与厌氧时相近.有氧条件下,当初始甘油质量浓度大于50g/L时,发酵中后期出现3-羟基丙醛的长期积累,甘油不能消耗完全.控制pH为7.75～8.00可以促进3-羟基丙醛的转化使甘油完全消耗.     

Antibiotic Heteroresistance in Klebsiella pneumoniae

Klebsiella pneumoniae is one of the most common pathogens responsible for infections, including pneumonia, urinary tract infections, and bacteremias. The increasing prevalence of multidrug-resistant K. pneumoniae was recognized in 2017 by the World Health Organization as a critical public health threat. Heteroresistance, defined as the presence of a subpopulation of cells with a higher MIC than the dominant population, is a frequent phenotype in many pathogens. Numerous reports on heteroresistant K. pneumoniae isolates have been published in the last few years. Heteroresistance is difficult to detect and study due to its phenotypic and genetic instability. Recent findings provide strong evidence that heteroresistance may be associated with an increased risk of recurrent infections and antibiotic treatment failure. This review focuses on antibiotic heteroresistance mechanisms in K. pneumoniae and potential therapeutic strategies against antibiotic heteroresistant isolates.     

葡萄糖作辅助碳源对klebsiella pneumoniae发酵生产1,3-丙二醇的影响

在Klebsiella pneumoniae发酵甘油生产1,3 丙二醇的种子培养及发酵实验中,考察了葡萄糖作辅助碳源对菌体生长及1,3 丙二醇生成的影响. 结果表明,在种子培养期,以葡萄糖和甘油为混合碳源可缩短种子培养周期;在批次发酵和流加发酵中,葡萄糖作辅助碳源可使1,3 丙二醇产率及得率明显提高,但不同的葡萄糖加入方式对产率及得率促进的效果不同. 在初始发酵培养基中添加5 g/L葡萄糖、并在4 40 h进行葡萄糖与甘油混合液连续流加的条件下,1,3 丙二醇浓度、产率及得率较单一甘油为底物的流加发酵结果分别提高41.2 , 38.6 和8.3 .     

1,3-丙二醇分批发酵动力学模型

在分批发酵中，研究了Klebsiella pneumoniae的生长、底物甘油消耗及1,3-丙二醇的产生特性. 基于Logistic方程和Luedeking-Piret方程，得到了描述1,3-丙二醇分批发酵过程的动力学模型及模型参数，该组模型能很好地拟合发酵过程，并在初始甘油浓度变化较大的范围内表现出很好的适用性. 同时，所建立的模型也基本反映了Klebsiella pneumoniae分批发酵过程的动力学特征. 基于分批发酵动力学模型，提出了以甘油为单一碳源时的底物流加策略，通过与其他流加策略条件下的发酵对比实验表明，通过基于动力学模型的流加策略可获得更高的1,3-丙二醇浓度及生产强度.     

A Simple DNAzyme-Based Fluorescent Assay for Klebsiella pneumoniae

Pathogenic bacteria pose a serious threat to public health, and the rapid and cost-effective detection of such bacteria remains a major challenge. Herein, we present a DNAzyme-based fluorescent paper sensor for Klebsiella pneumoniae. The DNAzyme was generated by an in vitro selection technique to cleave a fluorogenic DNA–RNA chimeric substrate in the presence of K. pneumoniae. The DNAzyme was printed on a paper substrate in a 96-well format to serve as mix-and-read fluorescent assay that exhibits a limit of detection (LOD) 10⁵ CFUs mL⁻¹. Evaluated with 20 strains of clinical bacterial isolates, the DNAzyme produced the desired fluorescence signal with the samples of K. pneumoniae, regardless of their source or drug resistance. The assay is simple to use, rapid, inexpensive, and avoids the complex procedures of sample preparation and equipment. We believe that this DNAzyme-based fluorescent assay has potential for practical applications to identify K. pneumoniae.     

氧对Klebsiella pneumoniae产1,3-丙二醇代谢的影响

考察了氧对Klebsiella pneumoniae发酵产1,3-丙二醇(PDO)代谢的影响. 研究结果表明,在厌氧或供氧条件下,K. pneumoniae都能利用甘油产PDO. 起始甘油浓度20 g/L,发酵时间4 h,在充分供氧条件下,PDO产量仅为1.1 mmol/L;但在微量供氧条件下,PDO产量为16 mmol/L,是厌氧发酵时的1.28倍. 在微量供氧条件下,调控PDO合成的关键酶甘油脱氢酶、甘油脱水酶及1,3-丙二醇氧化还原酶的活性分别为7.28, 1.14, 0.52 U/mg,高于厌氧或充分供氧条件下的相应酶活性. 氧对细胞内NADH的合成也有影响,厌氧及微量供氧条件下菌体内NADH含量分别为3.78及3.72 μmol/g (DCW),高于充分供氧发酵时的0.85 μmol/g (DCW).     

重组甲酸脱氢酶对合成1,3-丙二醇的促进作用

在甘油厌氧发酵生产1,3-丙二醇的过程中,需要消耗还原当量NADH,NADH的有效供给决定了1,3-丙二醇的产量。本文从Candida boidinii基因组DNA中克隆了甲酸脱氢酶基因fdh,利用表达质粒pMAL TM-p2X-fdh转化到1,3-丙二醇生产菌 Klebsiella pneumoniae YMU2中,构建了具有NADH再生系统的重组菌Klebsiella pneumoniae F-1。在5 L发酵罐培养中,F-1合成1,3-丙二醇浓度和产率分别达到了78. 6 g·L-1 和1. 33 g·L-1·h-1,分别比YMU2提高了12. 5% 和41. 2%。根据F-1和YMU2菌株的主要代谢产物的生成情况比较了二者的代谢流分布。