东海海参多糖酶解提取工艺优化及其抗氧化活性

以东海海参（Acaudina leucoprocta）干品为原料,探究东海海参多糖的最佳提取工艺,并评价其基本组成及抗氧化活性。利用单因素试验考察木瓜蛋白酶的酶解温度、酶解时间、酶添加量、料液比对东海海参多糖提取率的影响,利用正交试验设计对工艺参数进行优化,利用红外光谱对得到的东海海参多糖进行鉴定,并检测东海海参多糖对DPPH·和·OH的清除率,考察东海海参多糖的抗氧化性。结果表明,各因素对多糖提取率的影响大小顺序为酶添加量>酶解时间>酶解温度,优化的最佳提取工艺为料液比1∶20(g/mL)、酶解温度55℃、酶解时间5 h、酶添加量1.0%,此条件下,东海海参多糖提取率为（11.85±0.27）%;东海海参多糖对DPPH·和·OH的清除效应随其浓度增加而提高。结果表明,东海海参多糖具有较强的抗氧化活性。     

海带快速液化工艺优化及其产物分析

以海带液化率为技术指标,利用生物酶解技术制备海带酶解液,并优化各酶解条件,包括海带粉颗粒度、料液比、反应温度、反应时间、pH,同时利用高效液相色谱法(HPLC)和高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)分别对海带酶解液中的单糖组成和寡糖聚合度进行分析。结果表明,海带快速液化最佳工艺条件为:原料粒度100目,料液比1:12(g/mL),pH 8.0,反应温度50℃,反应时间12h,在该条件下测得海带液化率为71%。经分析海带酶解液的干物质中非糖杂质含量为54.8%,寡糖含量为18.9%,中性单糖含量27.2%;寡糖中6糖以上的寡糖含量占比较大;单糖中甘露糖醛酸含量最高。该制备方法工艺简单、操作方便、效率高,同时能将大分子物质降解成小分子物质,更有利于动植物吸收,可拓展其利用领域。     

超声辅助酶法制备海参性腺ACE抑制肽及其模拟体内消化稳定性的研究

该研究利用超声波技术（0～500 W,0～35 min）辅助中性蛋白酶（0.5%～5%,1 h～6 h,1 500 U/g～7 500 U/g）水解海参性腺制备血管紧张素转化酶（angiotensin convert enzyme,ACE）抑制肽,再经过模拟体内消化试验分析海参性腺ACE抑制肽的消化稳定性。试验结果表明：随着超声功率、超声时间、底物浓度、酶解时间和酶添加量的增加,ACE抑制率先增加后降低。随超声功率、超声时间和底物浓度的增加,水解度具有相同的变化趋势;随着酶解时间和加酶量的增加,水解度逐渐上升后趋于平稳。根据水解度和ACE抑制率得出可以高效制备海参性腺ACE抑制肽的超声预处理和酶解反应条件：超声预处理功率200 W,时间15 min,底物浓度2%,酶添加量4 500 U/g,酶解时间2 h,海参性腺酶解液的水解度和ACE抑制率均较高,分别为7.81%和73.81%。此条件下制备的海参性腺ACE抑制肽经超滤后进行胃肠模拟消化试验,消化前后海参性腺ACE抑制肽的活性无显著性差异（P＞0.05）,表明其在体内能够表现出良好的稳定性,具有稳定的降血压功效。     

纤维素酶法制备壳寡糖工艺的研究

以虾壳壳聚糖为原料,纤维素酶为催化剂制备壳寡糖,探讨了纤维素酶添加量、酶解温度、溶液pH值及酶解时间对壳寡糖得率的影响。通过单因素和正交实验确定酶解最优条件为:纤维素酶添加量1.2g/dL、酶解温度50℃、溶液pH值4.5、酶解时间10h,此条件下壳寡糖得率达到32.15μg/mL;各因素对壳寡糖得率的影响依次为酶解温度>酶解时间>溶液pH值>纤维素酶添加量。     

富含褐藻酸寡聚糖酸奶的研制

目的研制富含褐藻酸寡聚糖的酸奶。方法用黑曲霉制得的含褐藻酸酶复合酶酶解海带汁,将其中的褐藻胶降解成褐藻酸寡糖,再将其应用于酸奶的发酵过程。结果将粗海带汁用褐藻酸降解酶降解的实验条件是:100g干海带加入粗酶的量为1.50g,作用温度为30℃,作用时间1h。酸奶中加入的酶解后海带汁为6%。结论将富含褐藻酸寡糖的海带汁应用于酸奶发酵中,能改善酸奶的口味,赋予酸奶新的保健功能。     

酶法提取海带成分分析

为了提高水提法得到的海带汁营养成分含量,添加褐藻胶裂解酶进行降解并破壁提取,并对酶解与非酶解海带汁营养成分进行分析。结果显示,寡糖含量由0.159 mg/mL增加到3.235 mg/mL,褐藻寡糖分子质量均在1000 u以下,DP为2～5。总酚由0.021 mg/mL增加到0.109 mg/mL,蛋白质和甘露醇含量也显著提高(P0.05),总碘含量无变化;总氨基酸、必需氨基酸和呈味氨基酸含量分别增加了7.15%、4.05%和3.40%;矿质元素中的常量元素Ca、微量元素Mn和Zn含量分别增加了2.2倍、5.5倍和2倍。另外,酶解后的海带汁对羟自由基和超氧阴离子的清除率分别提高了20.0%和44.6%,说明成分的变化导致其抗氧化活性随之增加。总之,酶解后的海带汁营养成分含量和活性都有明显改善,为新型海带饮品的加工和开发提供了技术基础。     

海参肽对大鼠乙酸性胃溃疡愈合的促进作用

通过建立大鼠切除型皮肤伤口模型,测定伤口的愈合率,观察海参肽是否能够促进大鼠伤口愈合。建立乙酸诱导的大鼠胃溃疡模型,并以不同剂量的海参肽（0.5 mg/g和2 mg/g）灌胃干预,以氧化应激、炎症因子和防御因子相关生化指标来评价其对大鼠胃溃疡的愈合是否有促进作用以及可能的机制。结果表明：涂抹海参肽的大鼠伤口愈合率自造模后第2天起显著高于对照组,第12天时完全愈合。与模型组相比,海参肽2个剂量组的溃疡面积均显著降低,溃疡抑制率分别达41.45%和60.41%;形态学结果显示黏膜再生、炎性细胞浸润减少,预后良好;胃组织中抗氧化相关的超氧化物歧化酶（SOD）活力和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力分别增加3.80%,4.85%和12.59%,23.54%,丙二醛（MDA）含量分别降低了59.40%,45.24%;炎症相关的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平分别降低12.37%,19.63%和8.64%,23.43%;防御因子相关的前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮（NO）和表皮生长因子（EGF）水平分别增加12.80%,16.95%;14.06%,27.44%和2...     

内外源酶制备海参肽的组成及抗氧化性质研究

为了对比不同方法制备海参肽的组成和抗氧化性质差异,采用内源酶（海参自溶）方法制备海参肽,并与外源酶（中性蛋白酶,碱性蛋白酶和胰蛋白酶）酶解制备的海参肽相比较。结果表明,自溶方法制备的海参粗肽水解度从高到低依次为自溶8 h>自溶4 h>自溶2 h,外源酶制备的海参粗肽水解度从高到低依次为胰蛋白酶酶解>碱性蛋白酶酶解>中性蛋白酶酶解;自溶2、4和8 h 产生的海参肽94%以上分子量小于314 Da,酶解制备的海参肽分子量主要分布在1~8.5 kDa;随着自溶时间的增加,自溶制备海参肽的氨基酸种类逐渐增多,且自溶8 h时呈味氨基酸含量较高;自溶2、4和8 h制备的海参肽比酶解法制备的海参肽具有更好的羟基自由基清除能力、DPPH自由基清除能力以及Fe3+还原能力,在浓度10 mg/mL时,自溶8 h羟基自由基清除率为93.4%,DPPH自由基清除率为85.8%,Fe3+还原力为0.740。综上,自溶方法制备的海参肽具有自身独特的优势,本研究可为海参肽的制备提供理论支撑。     

富含褐藻酸寡聚糖海带饮料的研制

用黑曲霉制得了含有褐藻酸酶的复合酶酶解海带汁，再通过调配研制出了富含褐藻酸寡糖的海带饮料。     

不同蛋白酶海参酶解液的制备及其体外免疫调节活性

以海参体壁为原料,采用5种商业用酶（中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶）对其进行酶解,测定酶解液的水解度和分子量分布,并重点分析分子量小于3 kDa超滤组分的氨基酸组成、结构特性及其对巨噬细胞的免疫调节活性。结果表明：中性蛋白酶对海参体壁的水解能力最高,反应300 min水解度达17.18% ;中性蛋白酶酶解液中小于3 kDa超滤组分（SCH-N-I）占96.33% ,必需氨基酸高达89.52 mg/g,高于其余4种蛋白酶酶解液。紫外光谱和荧光光谱结果显示,中性蛋白酶酶解液超滤组分SCH-N-I较其它酶解液超滤组分具有较高的表面疏水性、紫外吸光度和内源荧光强度,且最大紫外吸收波长和最大荧光峰向高波长方向偏移,表明其可能具有更高的免疫生物活性。RAW264.7巨噬细胞免疫活性实验结果显示,当SCH-N-I浓度为200 μg/mL时,巨噬细胞表现出良好的存活率[（121.79±4.98）% ]及较高的吞噬力（0.107 7±0.001 0）和NO释放量[（15.39±0.33）μmol/L];SCH-N-I的免疫活性高于其他4种蛋白酶酶解液超滤组分。     

大型海藻的降血压活性研究进展

1960年以来,我国因患高血压而死亡的人数逐年增加,而且高血压疾病也越来越低龄化,同时高血压更是很多高危疾病的并发症,较难治愈,逐渐成为威胁人类健康的一大杀手。海洋中的大型海藻种类丰富且有很高的降血压活性,该文综述大型海藻的种类、降血压作用机制及测定方法、大型海藻在降血压方面的研究现状及展望,以期为海洋降血压药物和保健品的开发提供借鉴。     

Identifying the geographical origin of protected sea cucumbers (<Emphasis Type="Italic">Apostichopus japonicus</Emphasis>) in China using random amplified polymorphic DNA polymerase chain reaction (RAPD-PCR)

Dalian sea cucumber, Yantai sea cucumber, and Weihai sea cucumber, which belong to Apostichopus japonicus, are protected as geographical indications in China based on their high nutritional values and medical propertys. The 26 samples, including Dalian sea cucumbers (9 samples) in Liaoning province, Yantai sea cucumbers (9 samples), and Weihai sea cucumbers (8 samples) in Shandong province, were individually collected from the designated geographical sea areas and the genetic relationships and DNA polymorphisms were evaluated by random amplified polymorphic DNA technology and gene segments sequencing. The RAPD dendrogram showed that the genetic diversity of the three types of sea cucumbers was rich. The neighbor-joining tree shows that the genetic relationship of the samples from the adjacent sea areas is closer. It demonstrates that the gene characteristics of sea cucumbers from different sea areas were obvious and the genetic diversity analysis by RAPD-PCR can be used as a rapid method for geographical discrimination.     

补加碳源对采油菌株ZY-1生长及发酵液表面活性的影响

该试验选取一株分离自辽河油田原油的菌株ZY-1,分别补加培养基碳源（木糖、淀粉、葡萄糖）,于60 ℃静置培养7 d,通过测定发酵液的菌体密度、表面张力、乳化活性以及石蜡的残留量,考察菌株ZY-1利用上述碳源的生长以及发酵液表面活性情况。结果表明,菌株ZY-1可利用木糖生长,并代谢产生物表面活性剂。补加木糖能明显促进细胞生长,减慢对石蜡的利用,使发酵液表面张力降至49.5 mN/m,发酵液的乳化活性提高至61.3%。补加葡萄糖或淀粉虽不能明显促进细胞生长,但能明显减少石蜡消耗,都能将发酵液表面活性提高至63.3%。木糖、葡萄糖和淀粉都能减少石蜡的消耗,木糖效果更明显。     

糖化搅拌频率对精酿啤酒性质的影响研究

以精酿啤酒原浆为对象,研究糖化工艺中搅拌频率对其理化、感官、微生物多样性三方面性质的影响。分别设定搅拌频率为10min1次、15min1次、30min1次,其余工艺和参数不变,对3种搅拌频率下酿造出来的精酿啤酒原浆分别进行总酸含量、双乙酰含量、实际发酵度及酒精度的测定;参考GB/T4927-2008《啤酒》浓色啤酒感官要求,结合双盲法对啤酒的感官品质进行评价;采用HiSeq2500高通量测序的方法测定样品中微生物群落的多样性的不同。结果表明,搅拌频率对啤酒原浆的理化性质有一定的影响,但是每隔10min搅拌一次和每隔15min搅拌一次,差异不显著。3种搅拌频率下的精酿啤酒原浆的感官品质都较好,无显著差异。3种样品微生物种类上没有差异,微生物物种含量有差异,但占比排名一致。膜璞毕赤酵母(Pichiamembranifaciens)所占比例均为最大,其次依次为酿酒酵母(Saccharomycescerebisiae)、海洋嗜杀酵母(Wickerhamomycesanomalus)等。糖化搅拌频率对原浆理化性质有影响,对感官性质和微生物多样性影响不显著,因此生产中可以将搅拌频率设置为每隔15min搅拌一次。     

响应面优化水酶法提取红树莓籽油工艺

以红树莓籽为原料,在单因素试验基础上,以红树莓籽油提取得率为指标,通过响应面分析建立水酶法提取红树莓籽油工艺模型。结果表明,红树莓籽油最佳提取条件为:料液比1∶5.5(g/mL)、酶添加量1.9%、酶解时间3.9 h、p H 7.3,此条件下进行3次平行验证试验,所得红树莓籽油提取得率为6.25%,与预测值基本相符。     

复方海藻粥对便秘模型小鼠通便功能的作用研究

探究一种复方海藻粥的润肠通便作用。根据药食同源的原则,将芋头、海带、无花果、低聚果糖、大枣、牛磺酸等原料按照一定比例配制成复方海藻粥。实验中小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、便秘模型对照组、高剂量实验组、中剂量实验组和低剂量实验组。连续给药7d后,测量小鼠的首粒黑便时间、6h内排便粒数、6h内排便质量及粪便含水量和小肠碳墨推进率。结果显示高、中剂量实验组与便秘模型组相比,6h内排便粒数、6h内排便质量及粪便含水量均显著增加(p<0.05),首粒黑便时间明显缩短(p<0.05)。高、中、低剂量实验组均明显提高了小鼠的小肠推进率(p<0.01),分别为16%、10%、6%。与阳性对照组相比,高剂量组首粒黑便时间、6h内排便粒数、6h内排便质量及粪便含水量无显著性差异。由此可知复方海藻粥可以促进胃肠道的蠕动,具有较为明显的润肠通便功能。     

国产薄型聚酯纺粘非织造布生产线的特点

介绍了大连华阳化纤工程技术公司开发的聚酯纺粘非织造布生产线的设备配置情况及其特点。该公司从2000年开始至今在国内建成了三条薄型聚酯纺粘热轧非织造布生产线,并且在山东肥城新泰鹏纺织有限公司的项目中全部设备实现国产化。     

褐藻胶降解酶产生菌的筛选与鉴定

为了丰富褐藻胶降解酶产生菌的来源,该研究以褐藻胶为唯一碳源,从长兴岛采集的腐烂海带中筛选能够高效降解褐藻胶 的菌株,并通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定。结果表明,经筛选和鉴定获得一株能够高效降解褐藻胶的 水莱茵海默氏菌（Rheinheimera aquimaris）,编号为E-10,其产褐藻胶降解酶活力为14U/L。     

一株海洋低温葡萄糖氧化酶担子菌的诱变育种及其酶学性质研究

利用紫外诱变、化学诱变及紫外-化学复合诱变技术对一株海洋来源的产低温葡萄糖氧化酶（GOD）担子菌（Basidioascus sp.） WYQ 23进行诱变育种,并对其遗传稳定性及所产酶酶学性质进行研究。 结果表明,获得一株高产低温葡萄糖氧化酶的突变菌株 Basidioascus sp. WYQ 23-3-4。 该突变菌株GOD酶活为2.33 U/mL,是原始菌株的1.40倍。 经8代传代培养实验表明,突变菌株WYQ 23-3-4产葡萄糖氧化酶能力稳定。 该酶最适温度为20 ℃,在10～30 ℃可保持较高酶活;最适pH值为5.6,在pH5.0～6.0可保持较高酶活; 金属离子Ag+、Zn2+、Fe2+对酶活抑制作用较强,Mg2+、K+对酶有激活作用。 综上,通过复合诱变可明显提高担子菌产低温葡萄糖氧化酶 的能力,为该酶的工业化生产提供了潜在的优良的菌种资源。     

响应面法优化西藏黄牛源产纤维素酶菌株发酵条件

在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman试验得出麸皮添加量、蛋白胨添加量及发酵温度是影响菌株产酶的3个最重要的 因素。利用Box-Behnken试验设计对类芽孢杆菌（Paenibacillus）N30发酵生产纤维素酶的产酶条件进行响应面优化。 结果表明,单因 素试验优化结果为麸皮添加量2.5%、蛋白胨添加量0.5%、初始pH值为7.0、发酵温度37℃、接种量1.5%、转速150r/min、装液量 125mL/250mL、种龄32h、KH2PO4 0.2%;响应面优化后发酵条件为麸皮添加量2.8%,蛋白胨添加量0.5%,发酵温度38℃。 在此优化条 件下,纤维素酶酶活为42.5U/mL,是优化前酶活（12.1 U/mL）的3.5倍。