海参酶解液的体外抗氧化活性研究

分别选用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶和菠萝蛋白酶水解海参体壁,以DPPH·清除能力、O2-·清除能力、Fe2+螯合力和还原力为抗氧化指标,研究不同海参酶解液体外抗氧化活性的差异。结果表明,随着水解时间的增加,5种酶解液基本上均表现出酶解液的抗氧化能力先增加后下降的趋势。菠萝蛋白酶和碱性蛋白酶酶解液的DPPH·清除能力和O2-·清除能力较强;胰蛋白酶酶解液的Fe2+螯合能力最强;而木瓜蛋白酶酶解液的还原力最大。从清除自由基角度上,菠萝蛋白酶和碱性蛋白酶可作为开发海参抗氧化肽的优选工具酶。      

海参肠胶原蛋白酶解工艺及抗氧化性研究

目的 研究木瓜蛋白酶加酶量、pH值、酶解时间、温度对海参肠胶原蛋白水解度的影响。 方法 分别探讨4种蛋白酶对海参肠胶原蛋白水解能力, 确定以木瓜蛋白酶为最佳用酶。采用木瓜蛋白酶对海参肠进行酶解, 通过分析酶解液对Fe3 还原力、清除羟自由基及DPPH能力来研究其抗氧化活性。结果 酶解的最佳条件: 木瓜蛋白酶添加量1.0%、pH 7.0、时间4.0 h、温度65 ℃, 水解度达42.20%。结论 酶解液对Fe3 有较好的还原作用, 对羟自由基和DPPH都有很好的清除作用。     

海参内脏酶解产物抗氧化和抗疲劳活性

以海参内脏为原料,通过中性蛋白酶水解,结合超滤和冷冻干燥工艺制备海参内脏酶解产物,利用高效液相色谱法测定酶解产物的分子质量。结果表明,海参内脏酶解产物中蛋白质含量为73.02%,以分子质量分布在187~998 D的小分子肽为主,该部分峰面积占总面积的77.9%。酶解产物具有一定的抗氧化活性,不同剂量(200、400、800 mg/(kg·d))的酶解产物均能降低小鼠肝脏的丙二醛含量,增加超氧化物歧化酶活力和还原型谷胱甘肽含量,且与模型对照组相比,差异均达到极显著水平(P0.01),说明海参内脏酶解产物能有效恢复氧化损伤机体抗氧化指标。海参内脏酶解产物具有一定的抗疲劳功效,3个剂量组均能极显著延长小鼠的力竭游泳时间和提高运动小鼠的肝糖原含量,降低其血清乳酸和血清尿素氮含量(P0.01)。     

海参酶解产物的分离及其体外抗氧化作用的研究

从海参酶解产物中分离制备海参肽.并研究其体外抗氧化作用。采用超滤、冷冻干燥方法分离不同分子质量范围的海参肽;采用二苯代苦味酰基自由基(DPPH),研究海参肽的抗氧化活性;经Sephadex G-25和反相高效液相色谱对抗氧化海参肽进行进一步分离。结果表明,分子质量在1000～3000u的海参肽表现出很强的抗氧化作用,对DPPH自由基的清除能力强于V_E,其再经Sephadex G-25分离得到海参肽Ⅰ的抗氧化活性最强,对DPPH自由基的清除率达56.3%(1mg/mL),海参肽Ⅰ经反相高效液相色谱将分离得到2个海参多肽组分.     

不同蛋白酶海参酶解液的制备及其体外免疫调节活性

以海参体壁为原料,采用5种商业用酶（中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶）对其进行酶解,测定酶解液的水解度和分子量分布,并重点分析分子量小于3 kDa超滤组分的氨基酸组成、结构特性及其对巨噬细胞的免疫调节活性。结果表明：中性蛋白酶对海参体壁的水解能力最高,反应300 min水解度达17.18% ;中性蛋白酶酶解液中小于3 kDa超滤组分（SCH-N-I）占96.33% ,必需氨基酸高达89.52 mg/g,高于其余4种蛋白酶酶解液。紫外光谱和荧光光谱结果显示,中性蛋白酶酶解液超滤组分SCH-N-I较其它酶解液超滤组分具有较高的表面疏水性、紫外吸光度和内源荧光强度,且最大紫外吸收波长和最大荧光峰向高波长方向偏移,表明其可能具有更高的免疫生物活性。RAW264.7巨噬细胞免疫活性实验结果显示,当SCH-N-I浓度为200 μg/mL时,巨噬细胞表现出良好的存活率[（121.79±4.98）% ]及较高的吞噬力（0.107 7±0.001 0）和NO释放量[（15.39±0.33）μmol/L];SCH-N-I的免疫活性高于其他4种蛋白酶酶解液超滤组分。     

酶解海带饮料的制作及其抗肿瘤和免疫调节作用的研究

酶解海带提取液经倍比稀释、调兑成含海带多糖分别为０．８、０．４、０．２、０．１ｍｇ／ｍｌ的系列饮料Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ。小鼠用四种饮料灌胃,发现饮料Ｂ、Ｃ明显提高正常小鼠碳粒廓清实验吞噬指数,促进正常和荷Ｓ－１８０肿瘤小鼠ＰφＳ的吞噬中性红能力和过氧化物酶活性;显著抑制Ｓ－１８０移植肿瘤生长,抑制率分别为４４．１％和３７．７％。     

酶解海参肠口服液的研究

以海参加工废弃物--海参肠为原料,研究了不同的酶及酶组合水解工艺.其中,先采用A.S1398中性蛋白酶和木瓜蛋白酶(木瓜蛋白酶:A.S1398中性蛋白酶=1:1,酶活力比)双酶水解,再用Flavourzyme进行分段水解海参肠蛋白质,水解效果最佳,正交试验结果表明.Flavourzyme二阶段酶水解的最适工艺条件为酶添加量150U/g原料,时间1.5h,温度55℃,pH7.0,蛋白质水解度达88.08%;水解液再经过浓缩、调配、包装可制成营养丰富的保健品口服液.     

海带下脚料中多糖的提取及其对小鼠机体免疫功能影响的研究

论文以海带加工下脚料为原料提取多糖。浸提液以酒精分离，得到三种多糖组分。小鼠机体免疫功能实验发现，其中的一种多糖组分对小鼠机体免疫功能有较大影响。急性毒性实验证明该组分为实现无毒物质。     

东海海参胶原蛋白酶解工艺研究

主要研究从东海海参中提取胶原蛋白的工艺以及胶原蛋白酶解的条件优化.以干东海海参为原料,采用酸碱溶液浸泡除去东海海参表面的钙质及非胶原物质,然后在酸性条件下用1%胃蛋白酶进行水解,提取胶原蛋白;分别探讨木瓜蛋白酶、风味蛋白酶和胰蛋白酶酶解胶原蛋白的最佳条件.结果表明:木瓜蛋白酶最适条件:底物含量30 g/g酶.温度40℃,pH 7.5;风味蛋白酶最适条件:底物含量40 g/g酶,温度40℃,pH 7.5;胰蛋白酶最适条件:底物含量40 g/g酶,温度55℃,pH 9.0.复合酶水解的最佳工艺:风味蛋白酶与木瓜蛋白酶的质量比1:1,木瓜蛋白酶与胰蛋白酶的质量比3:1,风味蛋白酶与胰蛋白酶的质量比1:1.     

海参皂苷Echinoside A的酶解及其产物结构鉴定与溶血毒性

利用商业酶将海参皂苷Echinoside A(EA)酶解成低溶血毒性的次级苷。为了得到溶血毒性更低的稀有次级海参皂苷,以海参皂苷Echinoside A为底物,选用5种商品糖苷酶,对其进行酶解。利用TLC、高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)和电喷雾串联质谱法(ESI-MS/MS)筛选出具有能将海参皂苷EA降解生成新物质的商品糖苷酶,并进行其酶解产物结构鉴定和溶血毒性研究。结果表明,果胶酶、果胶酶Ultra SP-L和纤维素酶有酶解效果,其中果胶酶酶解生成二糖基次级海参皂苷(化合物1)和一糖基次级海参皂苷(化合物2);果胶酶Ultra SP-L和纤维素酶酶解生成化合物1,其他两种酶对海参皂苷EA没有酶解作用。溶血实验证明酶解产物的溶血毒性相对于海参皂苷EA的溶血毒性有明显地降低,其中化合物2的溶血毒性降低到30%以下,效果显著。     

海参酶解物促SD大鼠皮肤创面愈合效果的研究

目的:为探究海参酶解物(sea cucumber enzymatic hydrolysate,SCH)对SD大鼠皮肤创面愈合的影响,为SCH应用于创面愈合提供理论依据.方法:设立模型组、3个SCH剂量组和阳性组,建立大鼠全层皮肤切除模型,于术后第4、8和12天分批处死.通过计算创面愈合率、进行组织切片伊红染色(hema...     

海带渣中岩藻黄素的酶法提取工艺研究

岩藻黄素是海洋藻类特有的一种叶黄素物质,具有强抗氧化活性,在缓解视疲劳、抗衰老、预防心血管疾病等方面具有巨大的开发利用价值。本文以海带加工企业提取海藻胶后的海带渣为原料,以纤维素酶、果胶酶及其组成的复合酶（纤维素酶+果胶酶）为工具酶,采用生物酶法破壁技术,研究加酶量、p H、时间、温度等因素对岩藻黄素提取的影响。结果表明:与传统提取方法相比（得率为0.034%）,经酶法破壁处理,纤维素酶处理组的岩藻黄素得率为0.046%,果胶酶处理组得率为0.124%,复合酶处理组得率为0.137%。最终选定果胶酶法为岩藻黄素提取的最佳方法,工艺条件为:果胶酶加酶量20000U·kg-1,酶解p H5.0,酶解温度60℃,酶解时间90min,得率为0.124%。该提取方法具有得率高、绿色环保等优势,为利用海藻岩藻黄素开发高附加值药物、功能食品提供了技术支持。      

海参肠酶解液美拉德反应增香工艺研究

目的优化影响海参肠酶解液美拉德反应的因素,以达到脱腥增香的效果。方法以感官评价,反应后的pH值和美拉德反应产物吸光值为指标,通过优化美拉德反应的条件(还原糖种类和用量、氨基酸种类和用量、反应温度、时间、pH值),获得最佳反应条件。结果最佳条件为:葡萄糖:木糖=1:1,添加量为8%,赖氨酸:精氨酸=2:1,添加量为3%,反应体系的pH=8.5,反应的温度为120℃,反应的时间为32 min。此条件下得到的海参肠美拉德反应产物有明显的焦香味,无腥臭气味。结论本研究提高了海参肠的利用价值,可以进一步开发可食用产品及配料,极大地提高了海肠的利用价值。     

海带岩藻多糖的抗脂质过氧化作用研究

用稀酸浸提和乙醇沉淀的方法提取海带岩藻多糖(Laminaria japonica fucoidan,LJF).采用体外实验研究LJF-2对H2O2诱导红细胞氧化溶血的抑制作用以及对小鼠肝匀浆脂质过氧化的保护作用,以此来评价LJF-2的抗脂质过氧化作用效果;结果表明,LJF-2对H2O2诱导的小鼠红细胞氧化溶血以及小鼠肝匀浆脂质过氧化具有明显的保护作用,且与浓度呈一定的量效关系.当浓度为0.54g/L时,对H2O2诱导红细胞氧化溶血的抑制率为50.32％,对小鼠肝匀浆脂质自发性过氧化的抑制率为28.24％.表明LJF-2具有显著的体外抗氧化活性.     

我国海带的加工利用和开发

对海带的性质、功能、提取、加工利用、开发现状以及前景作一综述。     

海带膳食纤维提取工艺的研究

以海带为原料,研究了酶与化学结合法提取膳食纤维的工艺技术。结果表明,提取膳食纤维的最佳工艺条件为在50℃条件下用20:1的蛋白酶与纤维素酶酶解1h,再用30倍1%NaCO3溶液在65℃提取2h,膳食纤维的产率可达24.7%,颜色为近白色。膳食纤维干基含量达74.5%,膨胀力为54mL/g,持水力为3201%。     

温度与海带挥发性成分量效关系的解析

探讨不同温度处理的海带挥发性成分的差异。电子鼻分别检测不同加热温度（100、115、135、150℃）的条件下海带和生鲜海带间气味的变化,对所获得的数据进行主成分分析。采用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用仪检测并分析生鲜、100℃加热以及150℃加热条件下海带的挥发性风味成分。电子鼻对不同条件下处理的海带样品的定性分析快速灵敏。运用GC-MS技术鉴定出生鲜海带、100℃和150℃加热海带中分别含有30种、43种、64种挥发性风味成分,主要包括一些烃类化合物、醛类化合物、醇类化合物以及酮类化合物。它们的协同作用构成了海带的特殊风味。己醛、辛醛、壬醛、反-2-辛烯醛和1-辛烯-3-醇是生鲜海带的主要挥发性风味物质。经过100℃加热的海带中风味的形成主要是十五烷、己醛、辛醛、反-2-辛烯醛、壬醛、癸醛、反-2-庚烯醛、2,4-癸二烯醛、醛类物质以及2-戊基呋喃的共同作用;150℃加热以后除了壬醛、2,4-壬二烯醛、己醛、辛醛和十五烷以外,出现了8-十七烯、糠醛、5-甲基糠醛等物质,它们对其风味的形成起主要作用。      

海带岩藻多糖的水提制备及其抗氧化活性研究

以热水浸提后乙醇沉淀的方法从海带中提取制备岩藻多糖。通过单因素试验和正交优化试验确定最佳提取工艺,可获得岩藻多糖最大提取率为4.99%,硫酸- 苯酚法测定多糖的含量为96.9%。多糖提取物对羟自由基、超氧阴离子自由基的清除作用,还原力测定以及在模拟胃液条件下对NO2 的清除实验结果表明,海带中岩藻多糖提取物具有较强的体外抗氧化性能,且随着多糖质量浓度的增大,其抗氧化活性整体呈逐渐增强趋势。     

海带多糖纯化及清除自由基活性研究

海带多糖经S-300凝胶层析分离后得到纯化组分WPS-1-1。采用高效液相色谱、红外光谱对WPS-1-1结构进行解析,结果表明,WPS-1-1分子量为112ku,主要由岩藻糖、木糖、半乳糖和甘露糖构成,其摩尔比为6.9∶3.3∶1.5∶1。WPS-1-1含有β-吡喃糖苷键和硫酸基。体外自由基清除实验结果表明,WPS-1-1具有超氧阴离子自由基和羟自由基清除活性,其IC50分别为0.35、1.0mg/mL,可作为天然的功能性自由基高效清除剂。