采用免疫亲和柱高效液相色谱法检测稻米中的黄曲霉毒素B1

采用免疫亲和柱净化高效液相色谱法检测稻米中的黄曲霉毒素B1(AFB1)。稻米样品经甲醇/水(80/20, V/V)粗提取,再经免疫亲和柱净化和三氟乙酸衍生化,最后经高效液相色谱法测定。经检测,AFB1含量在0.01~2.50 ng范围内,所得到的AFB1标准曲线呈良好的线性关系,回归方程为Y=60.355x +0.054 3,相关系数为0.999 7。该方法检出限为0.1 μg/kg,加标回收率为89.26%~99.45%,SD为2.48%~3.74%。由于该方法操作的选择性高、灵敏度高、检测效果好,因此适于较大批量粮油作物中黄曲霉毒素的检测,便于示范推广。       

基于核酸适体检测黄曲霉毒素B_1的方法与高效液相色谱法的对比研究

对基于核酸适体酶联核酸适配体法(酶联适体法)、核酸适配体结构转换荧光法(适体转换荧光法)和高效液相色谱法(HPLC)检测黄曲霉毒素B_1进行对比研究。结果表明:当花生加标量为5、20、60μg/kg时,酶联适体法测得4.27、18.24、56.66μg/kg,适体转换荧光法测得4.95、21.05、65.00μg/kg,高效液相色谱法测得4.62、16.90、48.00μg/kg;当玉米加标量为5、20、60μg/kg时,酶联适体法测得4.05、17.34、50.79μg/kg,适体转换荧光法测得4.05、17.11、50.77μg/kg,高效液相色谱法测得5.10、16.33、44.98μg/kg。统计学分析结果显示,两种基于核酸适体的方法与高效液相色谱法两两之间无显著性差异(P0.05),且酶联适体法的检测结果具有可视化,核酸适体结构转换荧光法更为直观快捷,为探索黄曲霉毒素B_1的快速检测方法奠定了基础。     

液相色谱质谱联用法测定粮食中6种真菌毒素

为了克服现有粮食中真菌毒素检测方法存在检测时间长、效率低、成本较高的缺点,开发了一种成本相对较低,能够同时检测多种真菌毒素的方法。采用复合免疫亲和柱净化、液相色谱质谱联用同时测定粮食中黄曲霉毒素B1(AFB1)、赭曲霉毒素A(OTA)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、呕吐毒素(DON)、伏马毒素B1(FB1)、伏马毒素B2(FB2)6种真菌毒素的方法。选择V乙腈∶V乙酸∶V水=80∶1∶19和V甲醇∶V水=80∶20的混合溶液对粮食中的真菌毒素进行两次提取,复合免疫亲和柱对提取液进行净化,去除提取液中的色素、脂类、蛋白等杂质,降低基质对毒素离子化效率的影响,用甲醇作为流动相A,0.1%甲酸和1 mmol/L乙酸铵的混合水溶液为流动相B,梯度洗脱20 min内液相色谱对6种毒素能够实现良好的分离。6种真菌毒素的线性关系良好,相关系数R20.995;6种毒素加标回收率为75.6%~102.6%。批内相对标准偏差为3.8%~9.6%,符合《GB/T 27404—2008实验室质量控制规范食品理化检测》要求。该方法定量准确、快速、灵敏度高,适用于大米、小麦等粮食中真菌毒素的测定。     

响应面法优化花生中黄曲霉毒素的提取及其在快检评价中的应用

采用超声辅助响应面法对花生中黄曲霉毒素(Aflatoxin B1/B2/G1/G2,AFTS)的提取工艺进行优化,得到最佳提取工艺为65%甲醇溶液、超声时间15 min、超声功率206 W、料液比1:4(g:mL),利用该工艺,AFTS的提取量可达18.06 μg/kg. 在此最优工艺条件下提取AFTS,并结合高效液相色谱(HPLC)—光化学柱后衍生法作为参考方法,对市场上主流的8家黄曲霉毒素B1定性试剂盒及2家黄曲霉毒素B1定量试剂盒进行质量评价方法的验证,结果表明定性试剂盒检测结果灵敏度为100%,特异性98%,假阴性率0,假阳性率2%; 定量试剂盒准确度及精密度较高,线性拟合度均>0.99,可满足检测需求.     

基于TMR磁传感器的黄曲霉毒素B_1定量检测方法研究

针对现有黄曲霉毒素B_1(AFB_1)定量检测操作复杂、用时较长等问题,提出一种基于TMR磁传感器和磁性层析试纸的AFB_1定量检测方法。在垂直匀强磁场中,使用TMR磁传感器检测磁性层析试纸测试线(T线)与质控线(C线)上超顺纳米磁珠的响应信号,分析T/C值随AFB_1质量浓度变化的趋势,绘制标准曲线,最终实现AFB_1定量检测。结果表明:磁珠响应信号检测结果与线磁偶极子模型仿真结果基本一致,在毒素含量0.01～10 ng/m L范围内线性相关性良好,测量一次时间为40 s,可用于即时现场检测。     

黄曲霉毒素B_1降解菌的筛选鉴定

黄曲霉毒素的化学结构与香豆素十分类似,具有极强的毒性、致癌性,被认为是饲料和食品中不可避免的污染物。对黄曲霉毒素污染的控制亟须一种安全、高效、环保的脱毒方法。以香豆素作为唯一碳源的培养基筛选黄曲霉毒素B_1降解菌,最终筛选出1株对AFB_1降解率可达到91.86%的菌株(HH-1),对其进行了16S rDNA基因序列测定,系统发育进化法显示其为地衣芽孢杆菌。将地衣芽孢杆菌发酵液分为上清液和菌悬液,验证各组分对黄曲霉毒素的降解效率。结果表明:地衣芽孢杆菌的上清液降解活性最高,确定有效活性成分存在于上清液中;对上清液进行高温和蛋白酶K变性处理后,降解活性显著降低,初步判定降解黄曲霉毒素B_1的有效活性成分是一种胞外酶。进一步利用高效液色谱对黄曲霉毒素B_1的降解产物进行了研究,并检测到降解产物P1和P2。     

胶体金免疫层析法快速诊断禽流感

建立了一种简便、快速、准确检测动物禽流感病毒(AIV)的胶体金免疫层析法(GICA).具体内容包括制备胶体金标记抗AIV单克隆抗体和羊抗AIV抗体,结合垫和样品垫的处理,组装免疫层析试纸条.检测动物AIV,进行敏感性和特异性评定.结果表明:测试条灵敏度可达10 ng/ml.与进口禽流感胶体金免疫层析试剂条比较,符合率达100%.本方法具有特异性强、灵敏度高、简便快速的特点,可用于禽流感的早期诊断.     

固相萃取-高效液相色谱法测定玉米中伏马毒素B1

研究了固相萃取-高效液相色谱法测定玉米中伏马毒素B1的方法.玉米样品经乙腈-0.1 mol/ml磷酸二氢钠(1+1)提取,提取液通过固相萃取柱净化,净化液经柱前衍生,Shimadzu STRODS色谱柱分离,荧光检测器检测,外标法定量.对添加不同含量水平的伏马毒素B1,5次重复实验的平均回收率为82.1%～87.8%,变异系数(CV)为4.7%～7.8%,检测低限为0.020 mg/kg.     

基于弱磁信号的赭曲霉毒素A定量检测方法研究

针对目前赭曲霉毒素A(OTA)的检测方法流程烦琐、耗时长等问题,提出一种基于弱磁检测和免疫技术结合的新型OTA定量检测方法.通过在纳米磁珠(MNPs)表面修饰OTA抗体,获得具有免疫活性的磁珠抗体复合物,在亥姆霍兹线圈产生的匀强磁场下,使用磁力计对磁性层析试纸条检测线(T线)和质控线(C线)上MNPs的弱磁信号进行检测...     

固相萃取-高效液相色谱法测定玉米中伏马毒素B_1

研究了固相萃取 高效液相色谱法测定玉米中伏马毒素B1的方法。玉米样品经乙腈 0.1mol/ml磷酸二氢钠(1+1)提取,提取液通过固相萃取柱净化,净化液经柱前衍生,ShimadzuSTRODS色谱柱分离,荧光检测器检测,外标法定量。对添加不同含量水平的伏马毒素B1,5次重复实验的平均回收率为82.1%～87.8%,变异系数(CV)为4.7%～7.8%,检测低限为0.020mg/kg。     

小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定及方法研究

利用免疫亲和柱对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的特异吸附性,使用高效液相色谱法对样品进行测定.研究了提取方式、样品粒度、样品溶液稳定性、振荡提取时间等因素对检测结果的影响.当标准曲线在0～2.0 μg/mL之间,线性关系良好,相关系数达到0.999 1.检测结果RSD小于8.0％,不同水平的加标回收率处于92.0％～107.4％之间,通过回收率试验和标准物质试验验证了方法的可靠性和准确性.     

1-乙酰氨基蒽醌的合成研究

本文以１氨基蒽醌和乙酐为原料,乙酸作溶剂,合成了１乙酰氨基蒽醌。测试了１乙酰氨基蒽醌的红外光谱和高压液相色谱。研究表明,该合成方法操作简便,产品收率可达９９％,纯度为９６％。     

化妆品中限用防腐剂咪唑烷基脲和DMDM乙内酰脲的检测方法综述

简述化妆品中甲醛缓释体类防腐剂咪唑烷基脲、DMDM乙内酰脲的理化性质及安全性评价。介绍了检测化妆品中DMDM乙内酰脲和咪唑烷基脲的各种已报道方法,包括荧光分光光度法、高效液相色谱法、凯氏定氮法、薄层色谱层析法、核磁共振法。阐述了各种检测方法原理、所用设备仪器及检测结果,比较了各种方法的优缺点。     

谷物中的吡哆醇和吡哆醇葡萄糖甙

选取硬质小麦、软质小麦、大麦、小米、玉米、黑麦和高粱共４８个不同品种谷物，用偏磷酸溶液进行抽提，然后用高效液相色谱方法定量分析各种形式维生素Ｂ６的含量，比较不同种类谷物中维生素Ｂ６的存在形式及其含量的差异。结果表明：各种谷物中维生素Ｂ６的主要形式是吡哆醇和吡哆葡萄糖甙，几乎没有其他形式存在。不同谷物中吡哆醇和吡哆醇葡萄糖甙的含量差别较大，两种形式的比例也不相同。还根据两种形式维生素Ｂ６在人体内的分子生物利用率对各种谷物维生素Ｂ６的有效含量进行计算和评估。     

稻米中赤霉酸的HPLC测定方法研究

为高效、准确地对稻米中赤霉酸进行检测, 本文通过实验建立了利用高效液相色谱法测定赤霉酸的具体方法。样品经粉碎、提取和净化后, 用高效液相色谱仪分析以确定检测波长、流动相、柱温等。结果表明, 本方法具有良好的线性关系(R2=0.999 96), 最低检出限为2.0 mg/kg, 回收率为91.7%~98.7%, 相对标准偏差为3.2%。     

高效液相色谱法检查醋酸胍那苄中2,6—二氯苯甲醛的限量

本文报导了用高效液相法测定醋酸胍那苄中2,6一二氯苯甲醛的限量。     

空气中VOC检测方法的现状及研究方向

对空气中挥发性有机物(VOC)的检测方法进行了分析,比较了气相色谱法、高效液相色谱法、膜技术处理、化学法和在线检测试验舱等检测方法的差异性,并对未来挥发性有机物检测发展的趋势作了展望.     

阿维菌素-β-环糊精包合物制备及工艺优化

研究用β-环糊精包合阿维菌素。分别用水搅拌法、超声法和研磨法制得包合物,并采用DSC验证了包合物的生成。以高效液相色谱法测定了3种方法的包合率,对比后选择用水搅拌法包合.通过单因素实验,确定正交试验的因素水平.正交试验结果表明,最佳包合条件为主客分子投料质量比10∶1.0、包合温度35℃、包合时间8h.此条件下的包合率、收率分别为43.8%和80.4%.