乳品中活性益生菌选择性检测方法的研究

研究了含活性益生菌乳品中嗜热乳链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌和干酪乳杆菌的选择性计数方法。结果表明：ST—琼脂培养基适合嗜热乳链球菌的计数；LC—琼脂培养基适合干酪乳杆菌的计数；MRS—NNLP琼脂培养基适合双歧杆菌的计数；MRS—pH5．2琼脂培养基适合保加利亚乳杆菌的计数；MRS—柳醇琼脂或MRS—山梨醇琼脂可用于嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌的计数；若产品中只含有嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌时，可先测其总数，再用LC—琼脂培养基选择计数干酪乳杆菌数，两者之差即为嗜酸乳杆菌数。     

中药黄芪有效成分对益生菌的促生作用

为了解黄芪对肠道内益生菌的促生作用,采用黄芪提取液对保加利亚乳酸杆菌、乳酸链球菌、三种混合菌(保加利亚乳酸杆菌、双歧杆菌和嗜热乳酸链球菌)进行体外实验,测定菌体在不同黄芪浓度的MRS液体培养基中的吸光度值(OD值)。结果表明,保加利亚乳酸杆菌、乳酸链球菌、三种混合菌(保加利亚乳酸杆菌,双歧杆菌和嗜热乳酸链球菌)的OD值随着添加黄芪浓度的增加而增大,到达8μg/mL以后,OD值基本不发生变化。一定浓度的黄芪提取液对乳酸菌的生长能起到促生作用。     

中药黄芪有效成分对益生菌的促生作用

为了解黄芪对肠道内益生菌的促生作用,采用黄芪提取液对保加利亚乳酸杆菌、乳酸链球菌、三种混合菌（保加利亚乳酸杆菌、双歧杆菌和嗜热乳酸链球菌）进行体外实验,测定菌体在不同黄芪浓度的MRS液体培养基中的吸光度值（OD值）.结果表明,保加利亚乳酸杆菌、乳酸链球菌、三种混合菌（保加利亚乳酸杆菌,双歧杆菌和嗜热乳酸链球菌）的OD值随着添加黄芪浓度的增加而增大,到达8 μg/mL以后, OD值基本不发生变化.一定浓度的黄芪提取液对乳酸菌的生长能起到促生作用.     

保加利亚乳杆菌的增菌培养基设计及生长动力学研究

对具有促进保加利亚乳杆菌生长的山楂多糖增殖培养基进行了优化,同时对保加利亚乳杆菌在发酵过程中的生长动力学进行了研究。保加利亚乳杆菌生长的最佳条件为山楂多糖2%,pH为6.5,温度为42℃。在优化后的山楂多糖培养基中的最大菌体浓度是正常MRS培养基的菌体浓度的1.13倍。应用MATLAB软件对Logistic方程进行最优参数估计和非线性拟合,得到了菌体生长动力学模型和模型参数,其相对误差较小,全局收敛性最小。     

氨基酸与牛乳复合对保加利亚乳杆菌生长的影响

将保加利亚乳杆菌接入添加特定氨基酸的牛乳培养基中培养,研究了不同氨基酸对保加利亚乳杆菌生长状况的影响．实验结果表明,添加丝氨酸、赖氨酸和亮氨酸培养保加利亚乳杆菌,活菌数均可达到109cfu／mL,较对照组提高了一个数量级．     

两株自选乳酸菌的益生特性

研究了两株自选乳酸菌的益生特性,为其应用于果蔬汁乳酸发酵的功能性饮料研制提供理论依据.以自选植物乳杆菌R23和干酪乳杆菌R35为目标菌,以德氏乳杆菌保加利亚亚种6045为对照菌,考察各菌对模拟胃液酸度和肠道胆盐的抗逆性以及凝集能力、表面疏水性等黏附性能,并评价其发酵液对超氧阴离子和羟基自由基的清除能力等体外抗氧化功能.结果表明:两菌株对酸度和胆盐的耐受能力均优于对照菌,植物乳杆菌R23的抗逆性最强,能耐受pH值2.5、胆盐质量浓度5 g.L-1.干酪乳杆菌R35的黏附能力强,而植物乳杆菌R23疏水性较强而凝集能力较弱.各菌株的胞外代谢产物均有抗氧化能力,以植物乳杆菌R23为最强,其培养24 h后的发酵液对超氧阴离子自由基和羟自由基的清除率达77.8%和80.94%,分别比对照菌高36.72%和5.81%.     

Plackett-Burman法筛选保加利亚乳杆菌发酵培养基氮源

研究了酸奶发酵菌种保加利亚乳杆菌的增菌培养基组成,考查了7种氮源对其生长的影响．以廉价易得的原料作为基础培养基,采用Plackett—Burman（PB）试验设计筛选了影响保加利亚乳杆菌生长的重要因素．结果表明：新生牛血清（p=0．0253）、酵母粉（p=0．0707）、酪蛋白水解物（p=0．0939）3种氮源对保加利亚乳杆菌的增殖效果比较明显,三者在大于90％的概率水平上差异显著,新生牛血清、酵母粉呈负效应,酪蛋白水解物成正效应．其他因素在大于90％的概率水平上差异不显著．因此,可选择该3种物质作为保加利亚乳杆菌的增殖因子．初步确定了3种氮源的添加量,为进一步优化确定培养基奠定了基础．     

复合酸奶中乳酸菌总菌数与嗜酸乳杆菌数的测定

在培养基中加入番茄汁和脱脂牛奶，可以缩短乳酸菌总菌数的测定时间，培养基中添加０．１－０．２％的胆酸盐，嗜酸直菌能够生长，保加利亚杆菌和嗜热链球菌不能生长，用这种办法可以专一地测出嗜酸杆菌数量。     

酸浆中嗜酸乳杆菌的生物学特性

从传统老豆腐酸浆中分离筛选得到一株产酸菌(编号AP117),初步鉴定为嗜酸乳杆菌,采用MRS培养基对菌株的生长曲线、耐酸、耐胆盐等生物学特性进行了研究。结果表明:嗜酸乳杆菌培养6 h后活菌浓度达到105cfu/m L,进入对数生长期,第14 h后活菌浓度超过1010cfu/m L,第22 h后,活菌数慢慢下降。该菌株能耐受较强的酸度,用p H=1.5的酸度处理2 h后存活率达到49.8%,能耐受0.1%~1.5%的猪胆盐,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有很强的抑制作用。     

大麦中抑制镰刀霉菌的乳酸菌筛选及其在制麦中的应用

大麦表面存在多种微生物,其中镰刀霉菌及其分泌的真菌毒素会对制麦过程及麦芽品质产生影响。为了消除镰刀霉菌带来的不利影响,利用MRS选择性培养基从大麦表面分离筛选出一株对镰刀霉菌有明显抑制作用的菌株。根据菌株的形态学观察、生理生化试验以及16S rDNA基因序列分析鉴定,确定该菌株为植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum),命名为BY66。在制麦过程中,添加0.5 mL/kg的BY66发酵液能使禾谷镰刀霉的生物量和呕吐毒素含量分别降低56.2%和79.1%。BY66发酵液能消除禾谷镰刀霉菌在大麦发芽和麦芽质量方面产生的负面影响,与侵染大麦相比,添加0.5 mL/kg BY66发酵液后的大麦发芽率提高了31%。     

来源于酸马奶的植物乳杆菌Bx6-2抑制甜瓜疫霉菌的研究

采用生长速率法测定植物乳杆菌Bx6．2的发酵液对甜瓜疫霉菌菌丝生长的影响,并对抑菌活性物质的理化性质进行了研究．结果表明,该菌的发酵液对甜瓜疫霉菌菌丝的生长有抑制作用．发酵液中的活性物质有较好的热稳定性,在pH6．0时抑菌效果较好,对酸性蛋白酶敏感,对中性蛋白酶不敏感,常温下10d的稳定性较好．通过调节pH、酶处理和加热处理实验,说明其抑菌活性物质不是乳酸,蛋白质类物质起了一定的抑菌作用,但其抑菌现象可能是与其他物质共同作用的结果．     

脲酶抑制剂nBPT对土壤微生物的影响

报道了实验研究脲酶抑制剂N-丁基硫代磷酰三胺N-(-nbutyl)thiophosphric triamide即nBPT对土壤三大微生物群体-细菌、放线菌、真菌的影响。结果表明:脲酶抑制剂nBPT能够促进土壤细菌、放线菌、真菌的生长,且nBPT浓度越高,其促进效果越明显,但当土壤中脲酶抑制剂与尿素的质量比高于500∶1时,nBPT不再会有附加的效果,因此U∶UI(500∶1)为最佳配比;在这三大微生物群体中,脲酶抑制剂nBPT对土壤细菌的生长的影响作用较小,对土壤真菌的影响较大,对放线菌的影响最大。     

正交法优化保加利亚乳杆菌冻干保护剂

通过单因素实验和正交试验设计,研究了乳糖、脱脂乳粉、蔗糖和抗坏血酸钠等4种物质对保加利亚乳杆菌的冻干存活率及菌粉活菌数的影响,确定了适合保加利亚乳杆菌的最佳冻干保护剂配方．结果表明,4种物质的保护效果依次为：蔗糖〉脱脂乳粉〉抗坏血酸钠〉乳糖;最佳保护剂的配方为：30％蔗糖＋209／6脱脂乳粉＋4．0％抗坏血酸钠＋20％乳糖．加入冻干保护剂后,保加利亚乳杆菌冻干后存活率可达94％,菌粉的活菌数达1．926×10^11 cfu／g．     

鼠李糖乳杆菌L7-13增菌培养基的优化

对分离到的鼠李糖乳杆菌L7-13进行增菌培养研究：采用单因素实验和正交试验的方法,通过对其吸光度和活菌数的测定来优化鼠李糖乳杆菌L7-13的培养基.结果表明：葡萄糖65 g/L、酵母粉15 g/L、牛肉粉28 g/L、大豆蛋白胨30 g/L、KH2PO43 g/L、无水乙酸钠3 g/L、柠檬酸铵2 g/L、Tween80 1.5 mL/L、MgSO4.7H2O 1.0 g/L、MnSO4.4H2O 0.5 g/L,培养28 h,所得鼠李糖乳杆菌L7-13的最大菌体密度约1010cfu/mL.此增殖优化培养基适于鼠李糖乳杆菌L7-13的生长繁殖.     

嗜酸乳杆菌AS1.1854亚油酸异构酶基因的克隆与序列分析

将GenBank中已报道的罗伊氏乳杆菌亚油酸异构酶基因对已公布的嗜酸乳杆菌NCFM基因组全序列做tblast,找到一个同源编码框.参照此编码框的核苷酸序列及pQE30质粒图谱特性设计上、下游引物,利用PCR法扩增嗜酸乳杆菌AS1.1854亚油酸异构酶基因,并克隆到pQE30质粒载体上进行测序.分析测序结果表明,扩增得到的目的DNA全长1 776 bp,G C含量为37.5%,共编码591个氨基酸,理论相对分子质量67.5kDa.用Signal P3.0对其N端前70个氨基酸序列进行分析,结果表明,第20~40位氨基酸有较强的疏水性.不过,N端前70个氨基酸的C值、S值和Y值并不高,最有可能的酶切位点位于第45位与第46位氨基酸之间,但预测其被切割的可能性概率低于1%.可以推断,在嗜酸乳杆菌AS1.1854亚油酸异构酶的N端氨基酸序列中不存在信号肽序列.     

发酵条件对短乳杆菌P-347生长和产细菌素的影响

采用单因素法,以MRS培养基为基础培养基,对短乳杆菌P-347产细菌素的适宜碳源和氮源的种类、氮源的浓度、起始pH和培养温度进行了初步探索。以金黄色葡萄球菌AS1.72为指示菌,采用牛津杯定量扩散法检测发酵上清液的抑菌活性。结果表明,短乳杆菌P-347以葡萄糖为碳源,以大豆蛋白胨为氮源,在起始pH 5.0、37℃培养24h,可获得最大菌体密度;以2%葡萄糖为碳源,以1%酪蛋白胨为氮源,在起始pH 6.5、30~37℃培养24h,发酵上清液的抑菌活性最大,抑菌圈直径为32.5mm。     

干酪乳杆菌IMAU10041抗甜瓜枯萎病菌的作用及理化性质

从60株乳酸菌中筛选出22株具有抗甜瓜枯萎病菌活性的乳酸菌菌株,其中9株具有较强抗甜瓜枯萎病菌活性.对这9株乳酸菌的抗植物致病真菌谱进行研究发现,9株菌对番茄早疫病菌（Alternaria solani）、甜瓜疫霉菌（Phytophthora drechsleri Tucker）、苹果炭疽病菌（Glomerella cingulate）、灰葡萄孢霉菌（Botrytis cinerea）的生长均有抑制作用.其中干酪乳杆菌IMAU10041对甜瓜枯萎病菌具有较强的抑制作用,并且对甜瓜疫霉和番茄早疫病菌有较高的抑菌活性.分别经过调节pH、加热、蛋白酶处理干酪乳杆菌IMAU10041的发酵滤液后,发现干酪乳杆菌IMAU10041发酵液具有一定的热稳定性;在pH 4.0时具有最大抑菌活性,在碱性条件下抑菌活性迅速失活;发酵液经胰蛋白酶、中性蛋白、蛋白酶K处理后失去部分抑菌活性,这表明干酪乳杆菌IMAU10041发酵液中可能含有一定的蛋白类抑菌物质.