终极腐霉生产EPA发酵条件的初步研究

对终极腐霉生产EPA的发酵条件进行了初步研究。结果表明,终极腐霉生产EPA的最佳发酵条件为:接种量10%,培养时间7 d,培养温度28℃,装液量200 mL/1 000 mL,碳源为蔗糖,有机氮源为酵母粉,无机氮源为硝酸钾,磷酸盐为磷酸氢二钠,无机盐为硫酸镁,大豆油作前体。收集发酵后的菌丝4℃冬化10 d,菌丝EPA产量为456.39 mg/L,比优化前的233.89 mg/L提高了95.1%。     

高山被孢霉生产ARA发酵条件的优化研究

对ARA产生菌高山被孢霉的培养条件进行了研究,通过摇瓶实验考察了碳源、碳氮比、初始pH值、接种量和微量元素等对ARA的影响。结果发现在培养基中使用葡萄糖为碳源,碳氮比维持在40:1~50:1之间,初始pH6,接种量10%,添加VB1 100 mg/L、VB12 0.5 mg/L、生物素0.5mg/L、泛酸钙120 mg/L和谷氨酸1 g/L是较优配方(优化培养基A)。实验同时对比了使用单一氮源及混合氮源对高山被孢霉发酵产ARA的影响,结果发现使用混合氮源更有利于高山被孢霉发酵产ARA,混合氮源得到的ARA产量是使用单一氮源的2倍,且其含量占总油脂的44.5%,在此基础上获得优化培养基B。     

用豆制品废水发酵生产花生四烯酸和二十碳五烯酸

为探讨用豆制品废水生产花生四烯酸(AA)和二十碳五烯酸(EPA),研究了不同培养时间、碳源浓度、氮源浓度和黄泔水稀释倍数对轮梗霉产这两种脂肪酸的影响.研究结果表明,有利于EPA高产的条件为:黄泔水稀释6倍、添加30g/L碳源、2g/L氮源、培养8 d.有利于AA高产的条件为:黄泔水稀释5倍、添加10g/L碳源、1g/L氮源、培养4 d.最大生物量获得条件和产脂肪酸最佳条件不一致.进一步优化条件,有希望通过豆制品废水获得低成本的EPA和AA产品.     

高产蛋白酶菌株的筛选及产酶条件优化

从山西临汾汾河滩涂的表层土壤中分离到22株产蛋白酶菌株,用检测蛋白酶产生水解圈和蛋白酶活性测定相结合的方法,从中筛选出一株高产蛋白酶菌株P5,并通过正交试验对其产酶条件进行了研究。结果表明,影响P5菌株发酵产酶因素的主次顺序为培养温度、接种量、培养时间;影响P5菌株发酵培养基组成因素的主次顺序为氮源含量、起始pH值、碳源含量;确定的P5菌株的最佳产酶条件为,在以30 g/L葡萄糖为碳源,50 g/L蛋白胨为氮源,起始pH7.0的最适产酶培养基中,培养温度35℃,接种量为8%的条件下发酵培养48 h,具有最大产酶量,其蛋白酶活力可达129.2 U/mL。     

1株高产EPS嗜热链球菌的筛选及培养条件优化

为了研究乳酸菌高产EPS的条件,以产EPS量为指标,从8种复合菌株中筛选出1株嗜热链球菌,通过单因素和正交试验对该菌EPS合成培养基中的碳源、氮源、培养条件进行了研究。结果显示:该菌在优化的培养基中EPS生成量可达到145.48mg/L;合成胞外多糖最适培养条件为:接种量2%,初始pH6.5,发酵温度34℃,发酵时间36h。在此条件下EPS生产量可高达270mg/L,提高了116%。因此氮源组合和pH值为影响EPS合成的显著因素(p<0.05)。在恒定pH值条件下发酵培养可以提高EPS的生成量,即474mg/L,又提高了72%。     

正红菇液体发酵培养基和发酵条件的研究

研究了正红菇(Russulavinosa)在发酵过程中菌丝体及胞外多糖产量的变化趋势,碳源、氮源、无机盐以及发酵温度、pH值、时间和装液量等因素对正红菇液体深层发酵菌丝产量的影响。结果表明,蔗糖为最佳碳源,酵母膏为最佳氮源,优化培养基配方为蔗糖40g/L,酵母膏9g/L,KH2PO42g/L,MgSO41g/L;最适菌丝体生长的液体发酵条件:培养温度28℃￣30℃,初始pH值为5.5￣6.5,250mL三角瓶装液量为50mL￣60mL,发酵时间为5d。通过优化培养基和发酵条件,胞外多糖产量达到4.96g/L,菌丝体生物量达到22.34g/L。     

木霉T6木聚糖酶液态发酵生产研究

研究了野生型木霉T6菌木聚糖酶的液态发酵条件 ,碳源以质量浓度为 30 g/L的天然材料麦秸为最好 ,以质量浓度为 1g/L的尿素作为氮源有利于木聚糖酶的合成。起始 pH、培养温度及接种量等都对T6菌木聚糖酶的合成有影响。在一定条件下 ,30℃培养 4 5d后木聚糖酶的活力达到 91IU/mL     

烟曲霉素5 L罐发酵条件优化及中试

以烟曲霉（Aspergillus fumigatus）CEA-1701为生产菌株,通过高效液相色谱（HPLC）法测定发酵液中烟曲霉素的含量,考察碳源、pH值、搅拌速度、发酵温度和接种量对5 L发酵罐中烟曲霉素产量的影响,优化了5 L罐的发酵工艺条件。结果表明,甘油作为唯一的碳源,发酵温度30 ℃,搅拌速度800 r/min,接种量为3%,自然pH条件下,通气量0.5 m3/h,烟曲霉CEA-1701产烟曲霉素效果理想,发酵168 h烟曲霉素产量达到97.76 mg/L。将优化后的工艺进行20 L罐的放大试验,0.5%接种量发酵252 h时烟曲霉素获得最高产量达到130.57 mg/L,中试放大效果良好。     

轮梗霉融合菌株D-A1富集硒的培养条件研究

采用轮梗霉融合株D-A1作为富硒的载体,进行轮梗霉富硒条件优化。通过单因素试验研究不同的碳源、氮源、碳源浓度、温度、转速、pH值、接种量和装液量对轮梗霉富硒的影响。并选取对轮梗霉富硒影响较大的碳源、氮源、温度和转速进行正交试验。结果表明,发酵培养基中亚硒酸钠浓度为90μg/ml时,轮梗霉在优化的发酵条件下：麦芽糖100g/L、酵母膏10g/L、温度18℃、摇床转速120r/min,菌体硒含量最终可达3266.79μg/g,细胞富集的有机态硒占总富硒量的85.08%。以不加硒处理为对照,富硒轮梗霉的不饱和脂肪酸含量提高,亚油酸的含量是对照的1.20倍,花生四烯酸含量是对照的1.24倍,二十碳五烯酸(EPA)含量是对照的1.71倍。     

红曲霉9901液态发酵产莫纳可林K的发酵条件

对红曲霉 990 1产莫纳可林K的液态发酵培养基的组成和发酵条件进行了研究 ,确定出以甘油为碳源 ,大豆水解液为氮源 ,C/N比为 1 0 /1的最佳培养基组成 ,得出 990 1液态法产莫纳可林K的最适 pH为 4 5 ,温度 2 6℃ ,接种量为 5 %(体积分数 ) ,发酵时间 1 4d。通过实验 ,摇瓶发酵的莫纳可林K含量可以达到 1 60 0mg/L ,在 1 5L小型发酵罐实验中 ,莫纳可林K含量可达到888 9mg/L。     

Effects of varying extracellular amino acid profile on intracellular free amino acid concentrations and cell signaling in primary mammary epithelial cells

Extracellular amino acid profiles affect intracellular AA concentrations and profile as well as signaling proteins that regulate protein translation rates. The objective of this study was to assess whether various extracellular AA profiles and varied ratios of Lys to Met would increase the phosphorylation of signaling proteins related to protein metabolism. Six AA profiles, reflecting Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM), blood meal (BM), corn gluten meal (CGM), casein (CAS), plasma of lactating cows (PLA), and a negative control (NEG) represented the first factor (F1), and the ratio of Lys to Met (unaltered or set to 3:1) was the second factor (F2). Treatments were arranged in a 6 × 2 factorial manner, resulting in 12 treatments that were replicated 4 times. The total AA masses for all treatments were set to 659 mg/L (63% of DMEM) except NEG (0 mg/L). Confluent mammary epithelial cells were exposed to treatment media for 80 min (SD = 7.4). Intracellular concentrations of 17 AA were changed according to F1. The Met and Leu percent of total intracellular AA mass, as an example, varied from 0.58 (PLA) to 6.94 (NEG, +F2) for Met and 0.05 (NEG, ?F2) to 4.63 (CGM, +F2) for Leu. Overall, balancing for Lys and Met at a 3:1 ratio increased intracellular concentrations of Lys and Met by 54 and 71%, respectively. Within the mechanistic target of rapamycin (mTOR) pathway, phosphorylation of mTOR (Ser2448), ribosomal protein S6 (Ser235/236), and eukaryotic initiation factor 4E binding protein 1 (Thr37/46) (4EBP1) were increased by all 5 AA profiles compared with the NEG control. We found no differences in phosphorylation state among the 5 AA profiles, indicating lack of sensitivity to various AA profiles. This lack of sensitivity between AA profiles might also be due to assay imprecision or other experimental limitations. Only phosphorylation of 4EBP1 was increased for F2. Phosphorylation of eukaryotic initiation factor 2 α subunit (Ser51) was unaffected by either F1 or F2 factors. Regression analyses indicated that intracellular concentrations of Met, Thr, Ile, and Leu predicted phosphorylation of mTOR-related proteins with adequate precision and accuracy, suggesting that multiple EAA dictate regulation, regardless of AA ratios. Changes in extracellular AA profiles translated to modified intracellular AA profiles, and no single profile uniquely stimulated phosphorylation of the mTOR pathway-related proteins.     

二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸(AA)在婴幼儿配方奶粉中的测定

建立了气相色谱法同时测定婴幼儿奶粉中的DHA,EPA,亚油酸,亚麻酸和花生四烯酸AA含量的方法。采用色谱柱为脂肪酸型色谱柱DB-23,氢火焰离子化检测器（FID）,优化了色谱条件。结果表明,DHA,EPA,亚油酸,亚麻酸和花生四烯酸AA分离效果很好。DHA的最低检出限为0.02g/L,回收率为99.8%,变异系数为0.88%;EPA的最低检出限为0.01g/L,回收率为94.9%,变异系数为1.01%;亚油酸的最低检出限为0.02g/L,回收率为97.7%,变异系数为0.80%;亚麻酸的最低检出限为0.01g/L,回收率为99.9%,变异系数为0.95%;AA的最低检出限为0.01g/L,回收率为98.9%,变异系数为0.93%。     

婴幼儿配方食品和乳粉中DHA、EPA、亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸(AA)的测定

建立了气相色谱法同时测定乳制品中DHA，EPA，亚油酸，亚麻酸和花生四烯酸AA含量的方法。采用色谱柱为脂肪酸型色谱柱DB-23，氢火焰离子化检测器。优化了色谱条件。结果表明，DHA，EPA，亚油酸，亚麻酸和花生四烯酸AA分离效果很好。DHA的最低检出限为0．02g／L，回收率为100．1％，变异系数（CV）为0．82％；EPA的最低检出限为0．01g／L，回收率为99．8％，变异系数为1．04％；亚油酸的最低检出限为0.01g／L，回收率为99．7％，变异系数为0．82％；亚麻酸的最低检出限为0．01g／L，回收率为99．7％，变异系数为0．96％；AA的最低检出限为0．01g／L，回收率为99．9％，变异系数为0．96％。     

二十碳五烯酸高产菌株的诱变选育及柠檬酸对其油脂合成的影响

利用UV-LiCl复合诱变腐霉出发菌株,通过低温培养和苏丹Ⅱ染色镜检初筛、摇瓶发酵复筛,获得1株二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,EPA)高产菌株腐霉H6,经20℃-15℃二阶段培养168 h,所得生物量、油脂含量和EPA含量分别为23.50 g/L、17.54%和15.36%,EPA产量为633.17 mg/L,较出发菌株(263.80 mg/L)提高了140.02%,且产量、性状稳定。添加不同浓度柠檬酸对腐霉H6油脂合成调控的研究表明,发酵中期添加1.5 g/L柠檬酸可显著增加葡萄糖的利用率,提高油脂含量和EPA含量,EPA产量达890.49 mg/L,与对照相比提高40.64%。发酵实验表明腐霉H6极有潜力开发成为工业化生产菌种。     

多价不饱和脂肪酸发醇条件的初步研究

研究被孢霉SD－95的摇瓶发酵特性，选出最优培养基配方。摇瓶发酵结果为，菌体得率28．5％，油脂得率12．4％，油脂含量43．6％，碘值122．8。油脂中多价不饱和脂肪酸组成为，亚油酸17．2％，r-亚麻酸7．7％，花生四烯酸0．5％，多价不饱和脂肪酸总量为25．3％；菌丝体经过冬化处理后，其多价不饱和脂肪酸组成为，亚油酸18．6％，r-亚麻酸8．1％，花生四烯酸0．7％，二十碳五烯酸50．4mg／1009油脂，多价不饱和脂肪酸总量27．5％。     

食品中16种邻苯二甲酸酯类塑化剂的GC-MS检测方法研究

建立了同时测定不同类别食品中16种邻苯二甲酸酯类塑化剂的气相色谱-质谱(GC-MS)分析方法。对各种类别的食品采取不同的分离、净化方法;含油类样品经正己烷提取后,提取液用GPC凝胶色谱仪进行净化;采用GC EI/MS的选择离子检测方式(SIM)进行定性和定量分析。16种邻苯二甲酸酯的质量浓度在0.02~5 mg/L范围内呈良好线性,相关系数不低于0.999,检出限(S/N=3)为0.02 mg/kg。在0.4~2 mg/kg加标水平下的该方法回收率为75%~115%,相对标准偏差(RSD,n=3)为1.00%~10%。     

灵芝-小麦发酵物开发利用的研究

对利用灵芝菌丝固体发酵培养小麦的发酵物 (即灵芝 -小麦发酵物 )进行了有效成分 -灵芝酸、氨基酸和矿物元素含量的测定 ,检测出 4种灵芝酸 ,灵芝酸总量为 0 .0 6 6 mg/ g,其中灵芝酸 E含量最高 ,为 0 .0 42 mg/ g;检测出 18种常见氨基酸 ,总量为 140 .5 m g / g ,其人体必须氨基酸占 30 % ,对矿物元素的检测结果表明 ,磷 3.0 35 mg/ g、钾3.888mg/ g、镁 1.44 3mg/ g、锶 1.6 2 6 mg/ g、铁 0 .1485 mg/ g、钙 0 .7495 mg/ g、锌 37.8μ g/ g等 2 1种的矿物元素。同时测定了灵芝子实体、小麦中氨基酸和矿物元素的含量     

泌乳期母乳脂肪酸变化及其多不饱和脂肪酸影响因素

采用气相色谱-质谱联用技术测定不同泌乳期母乳中脂肪酸的动态变化,并分析乳母血型、生育年龄、孕周、孕前身体质量指数（body mass index,BMI）、分娩方式和婴儿性别、胎次对成熟母乳中与婴儿生长发育直接相关的重要多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid,PUFA）,亚油酸（linoleic acid,LA）、α-亚麻酸（α-linolenic acid,ALA）、花生四烯酸（arachidonic acid,AA）,二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）、二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）相对含量的影响。结果显示,饱和脂肪酸（saturated fatty acid,SFA）含量在初乳和成熟乳间差异显著（P＜0.05）,单不饱和脂肪酸（monounsaturated fatty acid,MUFA）含量随着泌乳期的延长逐渐降低,但差异不显著（P＞0.05）,PUFA含量在各泌乳期无显著差异（P＞0.05）,AA、DHA含量随着泌乳期的延长逐渐降低,在初乳、过渡乳中含量差异均不显著（P＞0.05）,但均显著高于成熟乳中含量（P＜0.05）;母乳中LA含量与婴儿性别有关,ALA含量与乳母孕前BMI有关,母乳中AA、EPA含量与乳母血型有关,DHA含量与乳母孕前BMI、乳母血型有关,均具有统计学意义（P＜0.05）。     

气相色谱法测定鱼油中的二十碳五烯酸、 二十二碳六烯酸和二十二碳五烯酸

目的通过优化鱼油中二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid,DPA)的测定条件,建立鱼油中EPA、DHA和DPA气相色谱定量检测分析方法。方法采用正己烷处理样品,经色谱柱(Agilent,Elite-WAX,30 m×0.25 mm,0.25μm)分离鱼油中的EPA、DHA、DPA甲酯标准品,并进行定量检测。结果 EPA浓度在0.36~3.6 mg/m L、DHA浓度在0.37~3.7 mg/m L、DPA浓度在0.16~1.62 mg/m L的范围内与峰面积的线性良好,相关系数r0.999。在80%、100%、120%添加水平下,EPA、DHA和DPA的检出限分别为0.01%、0.03%、0.009%,EPA、DHA和DPA的回收率分别为96.2%、96.4%、95.7%。结论气相色谱法灵敏度高、准确、重现性好,适用于鱼油中EPA、DHA和DPA的含量测定。