终极腐霉生产EPA发酵条件的初步研究

对终极腐霉生产EPA的发酵条件进行了初步研究。结果表明,终极腐霉生产EPA的最佳发酵条件为:接种量10%,培养时间7 d,培养温度28℃,装液量200 mL/1 000 mL,碳源为蔗糖,有机氮源为酵母粉,无机氮源为硝酸钾,磷酸盐为磷酸氢二钠,无机盐为硫酸镁,大豆油作前体。收集发酵后的菌丝4℃冬化10 d,菌丝EPA产量为456.39 mg/L,比优化前的233.89 mg/L提高了95.1%。     

被孢霉发酵生产花生四烯酸的研究进展

微生物特别是被孢霉发酵生产花生四烯酸是国内外研究热点，该文对被孢霉产生菌的选育发酵菌种的代谢调控、花生四烯酸的分离、检测方法等进行了综述。     

高山被孢霉发酵生产多不饱和脂肪酸的初步研究

高山被孢霉具有很强的脂肪合成能力,并可积累多种多不饱和脂肪酸,为进一步提高高山被孢霉多不饱和脂肪酸产量,对碳源、氮源等对高山被孢霉菌体生长和多不饱和脂肪酸(PUFA)生产的影响进行分析。研究结果表明:甘油可以作为葡萄糖的替代物用于高山被孢霉工业化发酵生产多不饱和脂肪酸;当脱脂豆粉与硝酸钾的比例为2∶1时,此时菌体形态最利于脂肪酸生产,脂肪酸和花生四烯酸的产量分别为11.20g/L和5.89g/L,花生四烯酸的产量提高了4.0倍。      

高山被孢霉发酵生产花生四烯酸发酵条件优化

通过对一株高山被孢霉菌株（Mortierella alpina）发酵生产花生四烯酸（ARA）的摇瓶培养研究,以菌体干质量、出油率和ARA含量为标准,确定了其最佳发酵工艺条件。摇床实验确定的最佳培养条件为摇床转速180 r/min,培养基碳氮比为3.0,发酵温度为26 ℃,pH 值为6.2,发酵周期为5 d。在此发酵条件下,在10 L自动发酵罐进行放大发酵试验,菌体干质量、出油率和ARA含量分别高达45.4 g/L、24.1 g/L和49.6%。     

高山被孢霉生产ARA发酵条件的优化研究

对ARA产生菌高山被孢霉的培养条件进行了研究,通过摇瓶实验考察了碳源、碳氮比、初始pH值、接种量和微量元素等对ARA的影响。结果发现在培养基中使用葡萄糖为碳源,碳氮比维持在40:1~50:1之间,初始pH6,接种量10%,添加VB1 100 mg/L、VB12 0.5 mg/L、生物素0.5mg/L、泛酸钙120 mg/L和谷氨酸1 g/L是较优配方(优化培养基A)。实验同时对比了使用单一氮源及混合氮源对高山被孢霉发酵产ARA的影响,结果发现使用混合氮源更有利于高山被孢霉发酵产ARA,混合氮源得到的ARA产量是使用单一氮源的2倍,且其含量占总油脂的44.5%,在此基础上获得优化培养基B。     

用豆制品废水发酵生产花生四烯酸和二十碳五烯酸

为探讨用豆制品废水生产花生四烯酸(AA)和二十碳五烯酸(EPA),研究了不同培养时间、碳源浓度、氮源浓度和黄泔水稀释倍数对轮梗霉产这两种脂肪酸的影响.研究结果表明,有利于EPA高产的条件为:黄泔水稀释6倍、添加30g/L碳源、2g/L氮源、培养8 d.有利于AA高产的条件为:黄泔水稀释5倍、添加10g/L碳源、1g/L氮源、培养4 d.最大生物量获得条件和产脂肪酸最佳条件不一致.进一步优化条件,有希望通过豆制品废水获得低成本的EPA和AA产品.     

响应面法优化深黄被孢霉发酵生产花生四烯酸的培养基条件

为了降低深黄被孢霉YZ-124生产花生四烯酸的成本,研究了不同添加量的玉米黄浆水对发酵的影响,与葡萄糖培养基相比,在发酵培养基中添加一定量的玉米黄浆水对发酵产量无显著影响.在单因素实验的基础上,利用Design Expert设计了响应面实验,研究了葡萄糖浓度、不同添加量的玉米黄浆水和初始pH对花生四烯酸产量的影响.结果表明,最佳的培养基条件是葡萄糖浓度为90g/L、添加体积分数为25％的玉米黄浆水、初始pH6时,花生四烯酸(ARA)产量达到最大,为3.11g/L.     

响应面法优化深黄被孢霉发酵生产花生四烯酸的培养基条件

为了降低深黄被孢霉YZ-124生产花生四烯酸的成本,研究了不同添加量的玉米黄浆水对发酵的影响,与葡萄糖培养基相比,在发酵培养基中添加一定量的玉米黄浆水对发酵产量无显著影响。在单因素实验的基础上,利用Design Expert设计了响应面实验,研究了葡萄糖浓度、不同添加量的玉米黄浆水和初始pH对花生四烯酸产量的影响。结果表明,最佳的培养基条件是葡萄糖浓度为90g/L、添加体积分数为25%的玉米黄浆水、初始pH6时,花生四烯酸（ARA）产量达到最大,为3.11g/L。      

利用被孢霉发酵生产花生四烯酸工艺配方优化研究

利用高山被孢霉Mortierella alpina I49-N18发酵生产花生四烯酸。优化筛选出最适于高山被孢霉斜面培养、种子摇瓶培养以及摇瓶发酵培养的配方,稳定的培养基配方为后续发酵生产提供保障。通过培养基配方单因子试验分别对碳源、氮源、无机盐、氨基酸、植物油等原料的合适添加量进行初步确定,然后设计正交实验进行验证。考察初始葡萄糖浓度在高山被孢霉发酵生产花生四烯酸过程中对脂肪酸组分的影响,分析脂肪酸主要组分在发酵过程中的变化趋势。考察结果显示发酵培养基中补充添加800 1000mg/kg磷酸盐,添加600 1000mg/kg谷氨酸钠盐、添加0.04%0.12%植物油可以有效提高发酵生产花生四烯酸的产量。通过发酵工艺放大,在200m3发酵罐规模的发酵生产中得到应用,发酵产量得到大幅度提升,培养7d发酵生产花生四烯酸(ARA)的产量达到10g/L以上。     

根霉产凝乳酶发酵条件的研究

对根霉经发酵产凝乳酶的发酵条件进行研究。结果表明,发酵培养基的最佳组成为4.5%的米粉麸皮（按2：3的比例）水解液、4.0%的黄豆粉水解液、0.3%的CaCl2、0.5%的KCl。摇瓶培养中培养基起始pH值为4.5,培养时间、温度分别为60h、34℃时,所产凝乳酶活力达161.14SU/mL且凝乳酶活力与蛋白酶活力的比值最大为27.88。     

轮梗霉高产花生四烯酸的诱变育种研究

利用紫外线作为诱变剂,分别通过15℃的低温和0.09mg/ml乙酰水杨酸的筛选作用,筛选到两株花生四烯酸产量有较大提高的菌株,分别为LT1.12菌株(花生四烯酸产量提高46.41%)和A1.13菌株(花生四烯酸产量提高53.15%)。通过对脂肪酸组分的分析,确定乙酰水杨酸为更加具有针对性的筛选条件。并对用乙酰水杨酸筛选到的A1.13菌株进行了传代稳定性实验,证实A1.13菌株花生四烯酸产量提高这一性状是可以稳定遗传的。     

轮梗霉融合菌株D-A1富集硒的培养条件研究

采用轮梗霉融合株D-A1作为富硒的载体,进行轮梗霉富硒条件优化。通过单因素试验研究不同的碳源、氮源、碳源浓度、温度、转速、pH值、接种量和装液量对轮梗霉富硒的影响。并选取对轮梗霉富硒影响较大的碳源、氮源、温度和转速进行正交试验。结果表明,发酵培养基中亚硒酸钠浓度为90μg/ml时,轮梗霉在优化的发酵条件下：麦芽糖100g/L、酵母膏10g/L、温度18℃、摇床转速120r/min,菌体硒含量最终可达3266.79μg/g,细胞富集的有机态硒占总富硒量的85.08%。以不加硒处理为对照,富硒轮梗霉的不饱和脂肪酸含量提高,亚油酸的含量是对照的1.20倍,花生四烯酸含量是对照的1.24倍,二十碳五烯酸(EPA)含量是对照的1.71倍。     

六种金属离子对轮梗霉生长及产花生四烯酸的影响

研究工业发酵中常见的Ca2 、Zn2 、Mn2 、Fe3 、Cu2 及Co2 对轮梗霉生长及产花生四烯酸的影响。结果表明:Ca2 浓度在10-4～10-2mol/L范围内促进菌体生长,但抑制AA产量。Mn2 浓度为5×10-4mol/L时AA产量达到最大,但对菌体生长都有抑制作用。Zn2 在3×10-6mol/L浓度时AA产量达最大,而生物量的变化不大。Fe3 浓度为5×10-5mol/L时,生物量达最大,而AA产量受其抑制,Cu2 浓度为5×10-6mol/L时菌体生物量和AA产量同时达到最大。Co2 在10-7mol/L浓度时生物量及AA产量同时达最大。     

花生四烯酸高产菌株的诱变和筛选研究

目的:选育生产性能比出发菌株显著提高的突变株。方法:用微波和化学诱变剂硫酸二乙酯(DES)对由轮梗霉制备的原生质体进行诱变育种,然后采用抗失水苹果酰肼与抗低温(15℃)相结合的方法,通过花生四烯酸产量的对比进行筛选。结果:得到一目的菌株,通过摇瓶发酵,结果生物量、油脂产量和花生四烯酸产量分别达到12.252、4.307g/L和257.557mg/L,分别比对照提高了24.96%、56.39%和193.924%。结论:通过突变株的脂肪酸组分分析,认为多轮诱变对于脂肪酸生产菌是有效的育种手段。     

微生物发酵法生产EPA及DHA的研究进展

EPA和DHA是两种人体必需多不饱和脂肪酸,对人体健康有重要意义,微生物发酵法生产EPA和DHA具有稳定性好、易于分离纯化和工业化等优点,是近年来研究的热点。从微生物利用葡萄糖合成多不饱和脂肪酸的代谢途径和影响微生物合成多不饱和脂肪酸的因素出发,论述了微生物发酵法生产EPA和DHA的研究现状和最新进展。     

降烟碱节杆菌发酵条件研究

在12种发酵培养基、不同温度、pH和培养时间条件下,对细菌生长能力和降烟碱能力进行测定,初步筛选出适宜4#菌株生长的为11号培养基,在5号、7号、9号培养基中4#菌株降烟碱能力强;适宜9#菌株生长的为8号培养基,在7号、9号、11号、12号培养基中9#菌株的降烟碱能力较强。适宜4#和9#的培养条件分别为30℃、pH6.5、48h和35℃、pH6.5、56h。     

高产花生四烯酸菌的原生质体诱变育种研究

以轮梗霉紫外诱变突变株A1.13为出发菌株,制备其原生质体并连续采用紫外线、微波及硫酸二乙酯作为诱变剂进行多轮诱变,通过15℃低温和0.12g/ml乙酰水杨酸初筛及摇瓶发酵复筛,得到花生四烯酸稳定提高的突变株MW40 DES20 Ⅱ-4,其花生四烯酸占总脂肪酸的含量从出发株的8.034%提高到15.098%.采用5L全自动发酵罐发酵,其生物量、油脂产量和花生四烯酸产量分别达到12.252、4.307g/L和604.557mg/L,分别比对照提高了24.96%、56.39%和193.924%.通过突变株的脂肪酸组分分析,认为多轮诱变对于脂肪酸生产菌是有效的育种手段.     

产黄原胶酶菌种的选育及发酵条件的研究

从自然界中采集土壤样品,经筛选获得了1株产高活性黄原胶酶的菌种,经形态特征、培养特征、生理生化分析等试验,初步鉴定为鞘氨醇单胞菌属Sphingomonassp.。摇瓶发酵产酶实验表明,培养基适宜初始pH值为7.0;适宜培养温度为30℃;适宜底物浓度为1%;葡萄糖和硝酸铵分别是适宜的碳源和氮源;用250 mL三角瓶以30 mL装液量进行发酵,酶活力较高。适宜菌龄为16~24 h,接种量对发酵影响不大。在上述条件下黄原胶酶的酶活力最高可达466 IU/L。     

菌种储藏温度及菌种活化对头孢霉脂肪酸组分的影响

为了获得高含量的二十二碳六烯酸(DHA)，对不同储藏温度对头孢霉脂肪酸组分的影响进行研究。将菌种储藏在20℃。4℃和-20℃三种温度下。比较不同储藏时间及菌种活化对菌丝脂肪酸组分的影响。结果表明菌种储藏温度、时间及发酵前菌种是否活化都影响脂肪酸组分。发酵前活化菌种。DHA含量均在10d达到最大：不活化菌种。20℃储藏菌种，DHA在20d可以达到最大：4℃，在25d可以达到最大：-20℃，在5d可以达到最大。除4℃外，其它两种温度下多不饱和脂肪酸变化和DHA变化趋势均一致。20℃，脂肪酸不饱和指数和18：3，18：2的变化与DHA变化一致。-20℃储藏菌种。如发酵前不活化菌种，其DHA，脂肪酸不饱和指数和多不饱和脂肪酸变化幅度均为六组最小。可能在这种温度下，菌丝调节脂肪酸变化的能力受到损伤。本研究可以为发酵生产多不饱和脂肪酸提供理论参考。