γ-聚谷氨酸的发酵优化及其对辣椒生长的影响

采用实验室分离的一株高产 γ-聚谷氨酸（γ-PGA）枯草芽孢杆菌发酵生产 γ-聚谷氨酸。利用单因素优化实验选择最佳碳源、氮源及发酵前体，响应面分析法Box-Behnken。实验结果表明最佳发酵培养基配方为蔗糖60.39 g /L、硫酸铵6.00 g /L、谷氨酸钠93.27 g /L，γ-PGA产量达到70.285 g/L。将发酵提纯后获得的产品与尿素混合制备成叶面肥对辣椒进行喷施，辣椒的株高、茎粗、挂果数、果重以及叶绿素含量等显著增加，喷施10 g/L 尿素 + 0.6 g/L γ-PGA增产效果最佳，γ-PGA复合肥料的生物可降解性、环境友好性和保肥增效特性有利于农业的可持续发展。     

中性纤维素酶高产菌株的诱变选育及产酶条件

通过紫外线和γ射线交替诱变，筛选得到一株高产纤维素酶的突变茵株BE40-39．与出发株相比，其产酶能力提高1．3倍，发酵性状与出发菌株也有明显的差异．突变菌株发酵试验发现，Avicel是突变菌株产酶最合适的纤维素质碳源．通过对发酵培养条件的试验，得出最佳培养条件是：Avicel质量浓度为0．1g／dL，胰蛋白胨质量浓度为0．3g／dL，最适发酵温度为30℃，最佳培养基初始pH4．2，发酵5d达到产酶高峰．     

Ochrobactrum intermedium DN2发酵培养基优化研究烟碱降解酶

研究工作中筛选得到一株有较强烟碱降解能力的新型烟碱降解细菌Ochrobactrum intermediu mDN2，对其产烟碱降解酶的发酵培养基进行了优化。采用Plackett-Burman设计法，对影响Ochrobactrum intermediumDN2产烟碱降解酶的15个因子进行了筛选。结果表明，影响该茵发酵产酶的显著因子为：烟碱、酵母膏、葡萄糖、tween-80的质量浓度和培养基初始pH。在此基础上，采用响应曲面法对以上5个显著因子进行了优化。得到各因子最佳水平为：烟碱2．183g／L，葡萄糖0．823g／L，酵母膏0．844g／L，Tween-800．976g／L，初始pH6．9。在此优化条件下获得实际酶活为7943U／L，与预测值8060U／L相近，比优化前提高了52％。     

重组大肠杆菌生产hEGF发酵条件的研究

在摇瓶条件下,研究了发酵条件对重组大肠杆菌JLU菌株hEGF表达的影响．研究表明,最适的发酵条件是温度在32℃、pH6．6～7．3、初始葡萄浓度5g／L、装液量30mL／250mL三角瓶,并发现在发酵培养基中用0．5g／L甘油代替5g／L葡萄糖作为发酵碳源会进一步提高hEGF的表达水平,提高幅度可达15．5％．     

腈水合酶耐底物突变株的筛选及产酶条件优化

采用紫外诱变和梯度平板法筛选出耐底物的突变株,通过单因素实验考察发酵液起始pH值、装液量、发酵周期、接种量对产酶的影响,确定最佳的发酵条件;采用均匀设计实验优化发酵培养基。筛选出．株能耐受4％丙烯腈的腈水合酶产生菌,在最佳产酶条件下,耐底物突变株的腈水合酶酶活达到11．5MU／mL,与优化前相比,酶活提高了49．35％。腈水合酶耐底物突变株的最佳发酵条件为：初始pH7．0、装液量16％、发酵周期58h、接种量10％。最佳发酵培养基配方为：ρ（葡萄糖）=26g／L,ρ（酵母膏）=2g／L,ρ（尿素）=4g／L,ρ（谷氨酸钠）=0．5g／L,ρ（K2HP04）=0．2g／L,ρ（KH2P04）=0．2g,／L,ρ（MgS04）=0．05g／L,φ（DXL）=0．5mL／L。     

产生物表面活性剂细菌的筛选及发酵条件优化

利用变色圈法、排油圈法从土壤和污泥等样品中分离筛选出1株产生物表面活性剂的细菌菌株WB,并通过单因素实验及L9（3^4）正交实验对该菌株的培养基配方及培养条件进行优化．结果表明：在葡萄糖10g／L,麸皮25g／L,酵母粉0．9g／L,培养基初始pH值为7．2,250mL摇瓶装液量为50mL,发酵时间为72h的条件下,菌株WB的表面活性剂的产量可达3．6g／L．     

姬松茸液态发酵的研究

通过2次L27(3^13)正交实验对姬松茸液态发酵的碳源、氮源、生长因子的种类和浓度、培养基的酸碱度、接种量、通气量、培养温度和培养时间等影响因子进行全面实验研究、经极差分析和方差分析，得到姬松茸液态发酵的培养基配方(g／dL)：玉米淀粉3，豆粕0．8，麸皮0．15；发酵条件：pH5，接种量10％，摇瓶装量50mL培养基／250mL三角瓶，培养温度30℃，培养时间7d，在此培养条件下，姬松茸液体培养的生物量可达15．6g／L。     

土壤中产碱性蛋白酶细菌的筛选及产酶条件优化

为筛选碱性蛋白酶的高产菌株，利用酪蛋白水解圈作为筛选模型，从沈阳化工学院附近农田土壤中筛选得到了产碱性蛋白酶能力较高的细菌B1．对其产酶条件进行优化，最终得到培养基中最佳碳源为质量浓度60g／L葡萄糖，最佳氮源为质量浓度40g／L NaNO3，最适初始pH值为9．0，最适溶氧量为50mL摇瓶装20mL培养基，最适接种量为质量浓度200g／L，且培养基中添加质量浓度为0．5g／L的K^＋有利于菌株B1产碱性蛋白酶．该方法简便、直观，很适合大量、快速筛选．     

重组人生长激素在毕赤酵母中的表达研究

通过单因素分析和正交实验法优化高密度发酵培养基和诱导条件,根据优化结果指导发酵罐发酵．得到改良BSM培养基的最佳配比为甘油30g／L、酵母粉14g／L、K2SO4 13g／L、MgSO4·7H2O11g／L、CaSO4 0．3g／L、PTM14．4mL、0．1mol／L磷酸盐缓冲液（pH=6．5）;得到摇瓶培养最佳诱导条件为种龄24h,诱导时间30h,甲醇浓度2％,pH6．3～6．9．瑞士Bioengineering公司L1523型发酵罐发酵结果显示,细胞光密度（OD600）达到294,rHGH表达量最高达到0．54g／L．     

耐酸性运动发酵单胞菌的筛选和酒精发酵条件的优化

通过酸性平板筛选，在作者所在实验室保藏的运动发酵单胞菌中，得到一株能在pH4．5时进行酒精发酵的菌株，其酒精产量为66．7g／L，与原菌株在pH6．5时的相同．通过单因素实验和正交实验，对该菌在酸性条件下的酒精发酵条件进行了优化．结果表明，在发酵温度为30～35℃，pH4．5，初糖质量浓度150g／L，酵母膏质量浓度4g／L，蛋白胨质量浓度为2g／L时，该菌的酒精产量达到最大，为71．7g／L．     

姬松茸茵丝体深层液体发酵条件的优化

主要研究了姬松茸深层液体发酵培养条件对菌丝生物量和胞内多糖产量的影响．确定了最佳培养条件为：培养基中玉米粉加量3％,豆饼粉0．3％,250mL摇瓶装液量45mL,发酵温度25℃．在此培养条件下,胞内多糖产量达到7．26g／L．并通过培养基中添加8种中草药提取液,发现生地黄对姬松茸多糖产量有一定的提高作用,多糖产量可达7．83g／L．     

Zn^2＋对轮枝链霉菌SK4．001生长及转谷氨酰胺酶合成的影响

研究了Zn^2 在SK4．001发酵生产转谷氨酰胺酶中的作用．在发酵培养基中加入不同质量浓度的Zn^2 ，检测菌体量、PH、残余甘油及转谷氨酰胺酶(TGase)酶活的变化，发现Zn^2 在SK4．001发酵生产转谷氨酰胺酶中除满足菌体生长需要外，还具有提高转谷氨酰胺酶酶活的作用．发酵培养基中含有3．15μg／mLzn^2 时，菌体生长正常，菌体量较高；当zn^2 质量浓度增加到8．15μg／mL时，菌体量改变不明显，但转谷氨酰胺酶酶活迅速上升，达到4．723U／mL，是Zn^2 质量浓度为3．15μg／mL时的2．06倍。     

高产S-腺-苷蛋氨酸啤酒酵母诱变选育及其培养条件

为了筛选高产S-腺-苷蛋氨酸（SAM）啤酒酵母突变株，采用不同剂量^60Coγ射线对出发啤酒酵母菌悬液进行反复辐射处理，最终得到SAM高产突变株S—W55，并研究了其最优培养条件。结果表明最优化培养基为（％）：葡萄糖4、L-蛋氨酸0．03、酵母浸粉0．4、CaCl2 0．01、KH2PO4 0．4、NaH2PO4 0．1、MgSO4 0.1，此条件下摇瓶发酵突变株S-W55的生物量和SAM产量分别达到12.15g/L和1．88g／L，分别比未优化前提高了27．1％和19．7％。10L发酵罐放大培养表明酵母突变株S—W55最适培养温度和pH值分别为28℃和5.0，发酵罐中其生物量、SAM产量比摇瓶发酵有了进一步的提高。     

红曲霉液态发酵产洛伐他汀条件的研究

对红曲霉GM026产洛伐他汀的液态发酵培养基成分和发酵条件进行了研究．结果表明。最佳培养基组成：甘油9％,大豆粉0．75％,NANO30．2％,MgSO4·7H2O0．05％。KH2PO40．15％;最佳发酵条件：培养温度26℃,初始pH=5．0,接种量7％,250mL三角瓶装液量为50mL,摇床转速170rad／min。在上述条件下。发酵培养14d,洛伐他汀产量达到375．853mg／L．     

L-亮氨酸产生菌TK0303的摇瓶发酵条件优化

对L-亮氨酸产生茵黄色短杆菌TK0303(Met^- 2-TA^r α-AB^r β-HL^r SG^r Rif^r800μg／mL)的摇瓶发酵条件进行了研究，经种子培养条件及培养基、发酵培养基的优化后，采用该最佳条件，L-亮氨酸产量由19．2g／L提高至25．2g／L．     

产脱落酸真菌的筛选及其发酵条件研究

利用马丁-孟加拉红培养基由20份土壤样品和2份植物病叶样品中分离出57株真菌，分别对其进行液体培养．通过各菌株发酵液抑制莴苣种子发芽的方法筛选得到-株脱落酸产生菌NX-53，通过L9（3^4）正交实验对其产酸条件进行优化，得到该菌株产脱落酸的培养基配方和培养条件：葡萄糖25g／L，维生素B1 1．25mg／L，谷氨酸单钠盐3．0g／L，MgSO4·7H2O 0．2g／L，KCl 0．5g／L，CaCO3 5g／L，KH2PO4 0．8g／L，FeSO4·7H2O 0．5mg／L，ZnSO4·7H2O 2．5mg／L，CuSO4·5H2O 4mg／L，250mL摇瓶装液量50mL，28℃、150r／min培养7d．优化条件下菌株NX-53的脱落酸产量可达276mg／L．     

产耐温漆酶菌的筛选及培养基优化

采用愈创木酚CPDA平板法对由广州地区多个不同场所采集的土样进行了菌种分离纯化,筛选出1株产耐温漆酶的菌株Tr0702,通过形态学观察初步判断该菌为木霉属．该菌所产漆酶的最适反应温度为65℃,在70℃下保温60min后残余酶活保留60％以上;发酵培养基经响应面法优化后关键参数如下：可溶性淀粉44．40g／L、吐温（80）9．00g／L、愈创木酚15．04mmol／L,以此优化培养基发酵酶活可达50．15U／mL     

细菌BK2产壳聚糖酶的发酵条件及壳寡糖的制备

优化了菌株BK2发酵产壳聚糖酶的条件：葡萄糖20g／L，壳聚糖0．3g／L，硝酸铵15g／L．接种量1，5％（10^7 cell／mL），发酵起始pH6．0．发酵温度30℃．培养时间48h．BK2发酵液中的壳聚糖酶活力可达到1．29U／mL．用酶液降解壳聚糖，分离提取粗产品，采用薄板层析法进行组分分析．分析结果表明．壳聚糖已被降解成含有不同分子质量的壳寡糖混合物，     

L—乳酸高产突变株——米根霉NAF—032

运用正交试验理论,对L－乳酸高产突变株NAF－032的优化摇瓶发酵条件作了初步研究,确定了优化的发酵培养基和发酵条件,优化发酵培养基为（g／L）：葡萄糖140,氯化铵1,KH2PO40．3,MgSO4.7H2O0.25,ZnSO4.7H2O0.08;优化培养条件为：34℃,摇床转移200r/min,装液量50mL（250mL容积三角瓶）,一次性添加CaCO380g/L调节pH值,米根霉NAF－032的摇瓶发酵L－乳酸积累量可达94．28g/L。     

苏云金芽胞杆菌不同发酵阶段的补糖发酵

通过苏云金芽胞杆菌工程茵BMB005发酵不同阶段补加葡萄糖发酵试验，研究了补糖对苏云金芽胞杆菌发酵的影响．结果表明：对数生长期补加葡萄糖可以提高生物量，进而使发酵液中杀虫晶体蛋白的质量分数提高33．1％，而稳定期补加葡萄糖则是通过提高茵体合成晶体蛋白的能力而使发酵液中晶体蛋白的质量分数提高18．1％．30L发酵罐补糖实验结果表明：在起始碳源质量浓度为3．0g／dL的情况下，对数生长期补加1．0g／dL葡萄糖可以将发酵液中杀虫晶体蛋白的质量分数和生物效价分别提高37％和51％；稳定期补加1．0g／dL葡萄糖可以将发酵液中杀虫晶体蛋白的质量分数和生物效价分别提高33．7％和75．1％；而且稳定期补加比对数生长期补加葡萄糖更有利于增效因子的合成．