牡蛎与牡蛎壳在水质净化中的应用综述

牡蛎是我国养殖范围甚广的海产生物,同时也是许多河口生态系统的重要组成部分。本文主要通过文献研究方式回顾了同牡蛎、牡蛎壳有关的污水净化技术应用的研究实践,阐述了牡蛎、牡蛎壳的生物特性,然后分析了各种方法的优点和局限性,最后提出了自己的见解和对未来发展趋势的展望。     

废弃牡蛎壳制备柠檬酸钙的工艺研究

牡蛎是闽东地区传统经济贝类,也是重要养殖海产品之一,行业快速发展的同时,也产生了大量牡蛎壳垃圾,造成沿海生态"贝壳污染".牡蛎壳含有丰富的碳酸钙,加酸提取柠檬酸钙是提高牡蛎壳生物质资源利用率的途径之一.将牡蛎壳废弃物预处理后研磨成牡蛎壳粉,与经丁酸、柠檬酸二步反应制取柠檬酸钙,探讨了钙酸比、反应时间和反应温度对柠檬酸钙...     

展望:2015年度航空航天民用技术前沿

随着航空科技发展,未来民用航空将会变得越来越复杂,民航客机将变得更高效节能,并与多样化的飞行器共享空域. 飞艇复兴 飞艇计划进入了周期性复兴时期.由英国混合航空器有限公司(HAV)研制的HAV304飞艇原型机计划于2015年初首飞.该重型飞艇长约98米,设计有效载荷达50吨.早在2012年,由HAV公司为美军“长航时侦查平台”项目所研制的HAV304已经完成试飞.然而该项目于2013年被取消,HAV公司开始重新组装这架飞艇.混合飞艇集合浮力、空气动力和矢量推力为一体,能有效提升效率、便于操作.HAV公司希望以首架HAV304原型机的客户反馈为基础,研发更为先进的AirLande50飞行器,并于2018～2019年实现首飞.     

微藻净化海水养殖废水研究进展

介绍了海水养殖废水的常规处理方式,包括化学方法和生物方法。然而这些方法存在效率低、二次污染、成本高等问题。基于微藻净化废水能够实现污染物去除和废水资源化利用的显著优势,阐述了微藻净化海水养殖废水的研究现状,并就目前的研究提出了微藻净化海水养殖废水存在的问题。针对这些问题,给出了解决微藻净化海水养殖废水难题的建议,为今后利用微藻提净化海水养殖废水提供了参考。     

牡蛎壳粉制备湿法磷酸复合除杂剂

湿法磷酸净化一直是磷酸工业的一大难题,制备成本低廉、操作简单并且净化效果好的除杂剂是化工行业的研究问题。本文采用牡蛎壳粉和碳酸钠制备复合除杂剂对湿法磷酸中镁离子和硫酸根离子同时进行净化,净化后硫酸根去除率为88.73%,镁离子去除率为51.74%,而磷酸损失率为2.33%,经过净化后的磷酸完全可以用于生产磷肥。     

碳纤维净化锦鲤养殖水体研究

为延长水产养殖水体使用寿命,将碳纤维用于净化锦鲤养殖水体进行实验研究。在不同养殖密度,溶解氧和材料投放密度条件下,将实验池与对比池的水质相比较,考察碳纤维对水产养殖水体的净化效果。结果表明,材料投放密度、养殖密度和溶解氧含量是影响材料净化水质效果的重要因素,在碳纤维投放密度0.3 kg/m~3、养殖密度50ind/m~3、溶解氧的质量浓度6 mg/L是优化养殖条件。在养殖锦鲤21 d内,COD、NH_4~+-N和TP去除率分别为71.96%、58.11%和44.41%,对于水产养殖水体具有良好的净化效果。镜检发现,碳纤维表面附着的生物膜上有大量的原、后生动物,可认为碳纤维具有良好的生物兼容性。     

甲肝和麻疹病毒混合感染人胚肺二倍体细胞病毒增殖动态及与细胞相互作用的研究

目的　探讨甲肝病毒 (HAV)和麻疹病毒 (MV)混合感染人胚肺二倍体细胞 2BS株 (2BS)病毒增殖动态及病毒与细胞相互作用的关系 ,为制备甲肝 -麻疹二联活疫苗提供基础资料。方法　将HAV和MV先后感染2BS ,应用细胞病理学、亲和素 生物素系统免疫组化技术和电镜技术检测HAV和MV在 2BS内增殖动态及 2种病毒与细胞的相互关系 ,观察HAV和MV在细胞内的超微结构。结果　HAV和MV能在同一种细胞基质中增殖 ,也能在同一个细胞中增殖 ,但 2种病毒与细胞的相互作用明显不同。结论　HAV对MV的再感染似乎无明显干扰现象     

人胚肺二倍体细胞2BS株的不同细胞系对甲肝病毒的敏感性

目的　筛选人胚肺二倍体细胞 2BS株中对HAV敏感的细胞系。方法　在相同条件下 ,用同一批HAV感染 2BS株的 4个细胞系细胞 ,采用免疫荧光法 (IFA)每周检测细胞中HAV的荧光强度 ,Ridit分析法计算各细胞系对HAV的敏感性系数 ,即Ridit值。结果　 4个细胞系对HAV敏感性不同 ,且差异有显著意义。结论　选择人胚肺二倍体细胞 2BS株中敏感的细胞系可提高HAV增殖强度     

抗甲型肝炎病毒卵黄免疫球蛋白的制备及应用

目的制备抗甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)卵黄免疫球蛋白(immunoglobulin of yolk,IgY),并建立双抗体夹心ELISA法,用于测定甲肝疫苗中的HAV抗原含量。方法用纯化的HAV免疫健康产蛋母鸡,制备抗HAV IgY,采用多步骤分离纯化IgY,紫外分光光度法测定纯化IgY的蛋白含量,还原型SDS-PAGE分析IgY的相对分子质量及纯度,间接ELISA法检测IgY的效价、特异性及其热稳定性和酸碱稳定性。以纯化的IgY作为包被抗体,HRP标记的抗HAV单克隆抗体作为二抗,建立双抗体夹心ELISA法,对疫苗生产过程中的HAV抗原含量进行测定,并与市售ELISA试剂盒的检测结果进行比较。结果亲和层析纯化后的抗HAV IgY浓度为3.67 mg/ml;重链和轻链的相对分子质量分别为66 000和27 000,纯度为96.78%;效价最高为1∶16 000;纯化的抗HAV IgY只与HAV呈阳性反应,与脊髓灰质炎病毒和肠道病毒71(enterovirus 71,EV71)均不反应;纯化的抗HAV IgY在25⁷0℃条件下处理15 min及经pH 3.070℃条件下处理15 min及经pH 3.0¹0.0的Tris-HCL缓冲液处理2 h,其抗体效价基本无影响。建立的双抗体夹心ELISA法HAV浓度在15.6210.0的Tris-HCL缓冲液处理2 h,其抗体效价基本无影响。建立的双抗体夹心ELISA法HAV浓度在15.62² 000.00 ng/ml范围内,HAV浓度的对数值与A450值之间呈线性相关,R2=0.935,最低检测量为7.81 ng/ml,与市售试剂盒检测结果具有良好的相关性,相关系数为0.952 7。结论制备的抗HAV IgY浓度、纯度、效价均较高,特异性较强,稳定性良好,建立的双抗体夹心ELISA法可用于检测甲肝疫苗生产过程中HAV的抗原含量。     

甲型肝炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及在贝类检测中的应用

目的建立甲型肝炎病毒(hepatitis A,HAV)荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测方法,用于贝类中HAV的检测。方法选择HAV高度保守的5’UTR区设计引物及探针,以HAV质粒为标准品,HAV活病毒为样本,建立HAV qRT-PCR检测方法;验证该方法的特异性、灵敏度、重复性、准确性及中间精密度;采用建立的方法检测HAV活病毒和贝类样本,并与我国贝类HAV检测国标方法(GB/T22287-2008法)进行比较。结果通过14对引物探针分别对HAV质粒(101~108拷贝/μL)检测结果的比较,选择灵敏度最优的Pan1引物,建立了HAV qRT-PCR检测方法(PAN法)。PAN法对CVA16、CVB3、EVA71、PV等11种RNA病毒均无阳性扩增;灵敏度达10 TCID50/mL;检测2.699~5.699 LgTCID50/mL各浓度HAV活病毒的回收率为82.9%~127.0%,单人和双人检测的变异系数分别为3.0%~7.0%和2.6%~8.4%。PAN法检测HAV活病毒的灵敏度(10 TCID50/mL)优于GB/T22287-2008法;两种方法对20份贝类样本的检测结果均为阴性,符合率为100%。结论建立的PAN法具有良好的特异性、灵敏度、准确性、重复性和中间精密度,可用于贝类样本中HAV的核酸定量快速检测。     

传染性喉气管炎病毒gD基因重组禽痘病毒的制备、纯化及初步鉴定

目的制备传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD基因重组禽痘病毒,并进行纯化及初步鉴定。方法将含有ILTV河南长葛株gD基因的禽痘病毒转移载体转染禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞,采用蓝色蚀斑筛选纯化重组禽痘病毒,并经PCR及间接免疫荧光试验(IFA)进行鉴定。结果经过5轮蚀斑筛选纯化,获得1株重组禽痘病毒rFPV-ILTV-gD,其PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,可见约1400bp的ILTVgD特异性条带。IFA检测显示重组禽痘病毒中的ILTVgD基因得到了表达。结论已成功制备并纯化了ILTVgD基因重组禽痘病毒,为预防ILT提供了新的途径。     

二价重组鸡痘病毒口蹄疫疫苗的豚鼠免疫试验

目的检测携带口蹄疫病毒(FMDV)Asia-1型P1-2A-IL18基因和O型P1-2A-3C基因的重组鸡痘病毒疫苗诱导豚鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫的能力。方法将重组鸡痘病毒vUTAL-P1-2A-IL18-P1-2A-3C、w-FPV和PBS分别经肌肉注射免疫豚鼠,检测豚鼠脾T淋巴细胞亚群数量、特异性CTL细胞杀伤活性和血清中抗FMDV特异性抗体水平。结果重组鸡痘病毒免疫豚鼠脾细胞中T淋巴细胞亚群数量和特异性CTL细胞杀伤活性均显著高于w-FPV和PBS对照组,且能产生抗O型和Asia-I型FMDV特异性抗体。结论二价重组鸡痘病毒口蹄疫疫苗能诱导豚鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫。     

DNA表达载体构建及HIV多表位核酸疫苗的设计与表达

目的利用塞姆利基森林病毒(SFV)复制子构建新型真核表达载体,并对含HIV-1中国流行株B亚型核心蛋白p24及多表位MEG嵌合基因的核酸疫苗进行表达与鉴定。方法将含SFV复制子的元件从pSFV-MCS中切下,连入含CMV启动子及增强子的pIRESneo载体中,构建新型真核表达载体pCS,再将含HIV-1 MEGp24基因插入至pCS载体中,构建重组核酸疫苗pCS-MEGp24。用脂质体法将重组质粒转染入BHK-21细胞,进行表达产物的检测。结果间接免疫荧光检测显示,重组质粒转染的BHK-21细胞能有效表达HIV-1 MEGp24,并与HIV阳性血清反应。结论所构建的核酸疫苗可在BHK-21细胞系内进行表达,且MEGp24基因的表达蛋白具有特异性,为构建新型HIV-1中国流行株核酸疫苗的可行性提供了重要实验依据。     

A Novel Prophylaxis Strategy Using Liposomal Vaccine Adjuvant CAF09b Protects against Influenza Virus Disease

The SARS-CoV-2 pandemic caused a massive health and societal crisis, although the fast development of effective vaccines reduced some of the impact. To prepare for future respiratory virus pandemics, a pan-viral prophylaxis could be used to control the initial virus outbreak in the period prior to vaccine approval. The liposomal vaccine adjuvant CAF^®09b contains the TLR3 agonist polyinosinic:polycytidylic acid, which induces a type I interferon (IFN-I) response and an antiviral state in the affected tissues. When testing CAF09b liposomes as a potential pan-viral prophylaxis, we observed that intranasal administration of CAF09b liposomes to mice resulted in an influx of innate immune cells into the nose and lungs and upregulation of IFN-I-related gene expression. When CAF09b liposomes were administered prior to challenge with mouse-adapted influenza A/Puerto Rico/8/1934 virus, it protected from severe disease, although the virus was still detectable in the lungs. However, when CAF09b liposomes were administered after influenza challenge, the mice had a similar disease course to controls. In conclusion, CAF09b may be a suitable candidate as a pan-viral prophylactic treatment for epidemic viruses, but must be administered prior to virus exposure to be effective.     

表达呼吸道合胞病毒F蛋白的新城疫重组病毒的构建及其免疫原性

目的利用新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)反向遗传系统构建表达呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)F蛋白的重组病毒,并以BALB/c小鼠为动物模型,评价其免疫原性。方法在已建立的NDV反向遗传系统的基础上,将RSV F基因插入NDV全长cDNA克隆中,构建并拯救获得表达RSV F蛋白的重组病毒rLS/RSV-F。采用间接免疫荧光(indirect immunoinfluscent assay,IFA)法鉴定RSV F蛋白的表达;以HA、病毒半数鸡胚感染量(50%infective dose,EID50)、半数组织感染量(50%tissue infectious dose,TCID50)及生长曲线等生物学指标对其生物学特性进行鉴定;将rLS/RSV-F滴鼻免疫BALB/c小鼠,于免疫后第49天经眼眶后静脉丛采血,分离血清,ELISA法检测IgG抗体效价,中和试验检测中和抗体效价。结果成功拯救表达RSV F蛋白的NDV重组病毒rLS/RSV-F,具有与亲本病毒相似的感染能力及生长动力学特性;rLS/RSV-F可刺激小鼠机体产生较高水平的针对RSV F蛋白的特异抗体及RSV中和抗体,与亲本病毒对照组相比,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论成功拯救了表达RSV F蛋白的NDV重组病毒,并通过动物实验证明重组病毒rLS/RSV-F具有较好的免疫原性,为RSV疫苗的研发提供了新思路。     

水痘-带状疱疹病毒VZV84-7株全基因序列测定及分析

目的分析我国自行分离的水痘-带状疱疹病毒疫苗株北京株(VZV84-7株)的全基因序列及特征。方法采用超速离心法获得纯化病毒颗粒,酚-氯仿法抽提病毒基因组DNA后超声破碎,回收1500～3000bp的片段,克隆至质粒pUC18中,构建病毒DNA文库,进行测序及序列分析,并与Dumas野毒株进行比较,绘制种系发育树,分析其与其他株VZV的同源性。结果VZV84-7株基因组全长125083bp,G+C含量为46.1%。基因组各区段长度及G+C含量分别为:UL:104746bp,G+C:44.3%;TRL和IRL:各89bp,G+C:69.7%;Us:5235bp,G+C:42.8%;TRS和IRS:各7462bp,G+C:59.3%。其R2可变区重复单位的拷贝数为7个,R4可变区为9个,R5可变区为1个。VZV84-7株共有71个ORFs,其中3个基因位于重复序列区,位于IRS的ORF69～71与位于TRS的ORF62～64序列完全一致。与Dumas株相比,共有248个核苷酸位置存在差异,大部分突变为单个核苷酸替换,另有部分插入或缺失性突变。其中碱基转换比碱基颠换更常见,发生率分别为66%和34%。种系发育分析结果显示,VZV84-7株与其他株VZV的同源性为95%以上。结论VZV84-7株具有其独特的基因特征,但与其他株VZV具有较高的同源性。     

甲型肝炎病毒与水痘病毒感染2BS细胞的超微结构变化

目的观察甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)、水痘带状孢疹病毒(Varicella zoster virus,VZV)分别感染与共同感染二倍体细胞2BS株时细胞超微结构的变化。方法电镜观察HAV单独感染21、23、25 d,VZV单独感染1、3、5 d及HAV感染21 d后再以VZV感染1、3、5、7 d的2BS细胞的超微结构。结果与正常对照2BS细胞相比,单独感染HAV的2BS细胞超微结构无明显变化;单独感染VZV的2BS细胞的超微结构主要出现核膜破坏;HAV与VZV共同感染的2BS细胞核内出现VZV包涵体,核膜缺失,胞浆中可见HAV与VZV形态,且细胞粗面内质网和滑面内质网膨胀,内质网小池内有致密颗粒。结论HAV与VZV共同感染的2BS细胞的超微结构与两种病毒单独感染的细胞的超微结构存在不同的变化规律和形态特征,先感染HAV后感染VZV的2BS细胞比单独感染VZV的2BS细胞受到的破坏程度轻。     

猪瘟和猪蓝耳病病毒多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

目的建立猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)和猪蓝耳病病毒(Porcine respiratory and reproductivesyndrome virus,PRRSV)多重RT-PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法根据GenBank中登录的CSFV和PRRSV疫苗株基因组序列,分别设计针对CSFV和PRRSV的两对引物,建立多重RT-PCR检测方法,并进行敏感性及特异性验证。用建立的多重RT-PCR法检测20份疑似猪瘟、猪蓝耳病或混合感染病料,并与市售RT-PCR试剂盒的检测结果进行比较;检测病料的部分PCR产物测序后,与9株具有代表性的CSFV毒株和10株具有代表性的PRRSV毒株进行核苷酸序列同源性比对。结果以CSFV和PRRSV混合引物扩增,分别可扩增出286和664 bp的特异性条带。建立的多重RT-PCR检测方法可检出100倍稀释的病毒RNA;该方法可检出CSFV、PRRSV及CSFV与PRRSV混合病毒,而猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Trans-missible gastro-enteritis virus,TGEV)、猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)和猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)的检测结果均为阴性;该方法检测20份疑似猪瘟、猪蓝耳病或混合感染病料的结果与市售RT-PCR试剂盒比较,灵敏度达100%;选取的两份CSFV扩增片段与9株具有代表性的CSFV毒株的核苷酸序列同源性在92.3%⁹8.2%之间,扩增的PRRSV与10株具有代表性的PRRSV毒株的核苷酸序列同源性在94.1%98.2%之间,扩增的PRRSV与10株具有代表性的PRRSV毒株的核苷酸序列同源性在94.1%⁹7.9%之间。结论成功建立了CSFV和PRRSV多重RT-PCR检测方法,为猪瘟和猪蓝耳病的早期诊断及流行病学调查奠定了基础。     

影响禽流感病毒(H3N2/H4N6)感染机制的生物信息学分析

目的通过生物信息学分析禽流感病毒WDK/ST/27/03(H3N2)和Dk/ST/472/03(H4N6)HA、NA氨基酸序列,进一步探讨影响禽流感病毒感染血液肿瘤细胞株K-562和HL-60的机制。方法 RT-PCR扩增WDK/ST/27/03(H3N2)和Dk/ST/472/03(H4N6)HA、NA基因,经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定,对纯化的PCR产物进行测序。在GenBank中选取登录的H3N2和H4N6序列,利用在线生物信息工具ClustalW2(http://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalw2/)对这些序列和WDK/ST/27/03(H3N2)和Dk/ST/472/03(H4N6)HA、NA氨基酸序列进行比对分析。结果 RT-PCR扩增产物的大小与预期相符。生物信息学分析显示,WDK/ST/27/03(H3N2)HA的裂解位点是QNR*GLFG,Dk/ST/472/03(H4N6)HA的裂解位点是KAAR*GLFG,此位置的氨基酸无变化。HA的226位氨基酸为Gln(Q),228位氨基酸为Gly(G),具有禽流感病毒HA受体结合位点的特征,影响受体结合的位点98Y、136S、152W、183H、190E、194L、222W、225G、227S未见变异。NA活性位点及影响酶活的位点均无变异,但WDK/ST/27/03(H3N2)NA在接近N-末端的茎部61⁷9位缺失19个氨基酸,致使NA茎部变短,且丢失2个潜在的糖基化位点。结论 WDK/ST/27/03(H3N2)的NA茎部缺失突变可能是造成其吸附、繁殖和复制能力低于Dk/ST/472/03(H4N6)的一个因素。     

戊肝疫苗临床研究的新进展

戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)可分为4个基因型,基因1型和2型仅在人体中存在,基因3型和4型为人畜共患型。戊型肝炎是由感染HEV导致的急性传染病,主要通过粪-口途径传播,人体普遍易感,各年龄段人群均有可能感染发病,主要感染15~40岁人群,是全球重要的公共卫生问题之一。戊型肝炎暂无有效治疗方法,接种疫苗是预防控制戊型肝炎的有效途径。本文对3种戊型肝炎疫苗[葛兰素史克公司的重组戊肝疫苗、中国长春生物制品研究所有限责任公司研发的HEV P179和厦门万泰沧海生物技术公司的HEV 239(Hecolin■)]的临床研究进展作一综述。