基于氧化石墨烯和酶辅助信号循环放大的Ag~+快速检测方法

基于氧化石墨烯(GO)和酶辅助循环信号放大的作用,构建了一种检测Ag~+的方法。确定了最适反应条件,并评价了该方法的灵敏度和选择性。结果表明,该方法具有良好的定量能力和操作性能,灵敏度高、特异性强,可满足现实的需求。     

氧化石墨烯放大荧光各向异性检测法的研究进展

荧光各向异性检测法是一种均相、重现性高的检测方法,它不受荧光强度影响。该方法已经被广泛的用于核酸、蛋白质、金属离子等的分析检测。本文归纳了近年来氧化石墨烯放大荧光各向异性在分析检测中的运用,同时简述了其在疾病诊断和治疗上的应用前景。     

近红外荧光探针检测碱性磷酸酶的研究进展

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)是重要的水解酶之一,与多种疾病的发生发展有关,是一种应用广泛的生物标志物。生物体中ALP的荧光成像对于生物学研究具有重要的意义。然而现在对体内碱性磷酸酶的检测仍面临着巨大的挑战,目前,近红外(Near Infrared,NIR)荧光探针因其光毒性低、生物分子自发荧光干扰小、光散射低、组织穿透能力强、稳定性好,可达到近红外发光并且可以实现活体动物肿瘤组织成像等优点成为检测体内小分子物质的新型手段。本文将对近年来碱性磷酸酶的主要检测方法尤其是荧光探针检测法及近红外荧光探针检测法进行详细的综述。     

荧光检测碱性磷酸酶活力方法的建立

以4-甲基伞形酮磷酸酯为底物,利用动力学模式,建立了一种检测碱性磷酸酶活力的荧光法.确定了荧光检测的最佳条件为:激发波长为365 nm,发射波长为449 nm,作用时间为第2～6 min,pH值为9,底物体积为100 μL,底物缓冲溶液浓度为0.1 mol·L-1.该法操作简便、快速.     

基于检测碱性磷酸酶的荧光探针的合成及其生物评价

目的:本实验利用磷酸酯为碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)的反应位点,DCM类染料为荧光发色团,构建能特异性检测ALP的荧光诊断试剂。方法:以2-甲基-6-叔丁基-4H-吡喃酮为起始原料,经过缩合、取代反应得到目标化合物探针X。采用紫外光谱法与荧光光谱法,在化学体系中对其吸收、发射波长进行测定;MTT实验验证其细胞毒性,细胞成像实验检测活细胞中的碱性磷酸酶。结果:所得产物经核磁共振氢谱和碳谱、高分辨质谱鉴定了结构。细胞成像实验结果表明探针X可用于检测活细胞中的碱性磷酸酶。     

基于氧化石墨烯的AIE荧光探针对肝素的检测

合成了一种新的聚集诱导发光物质,将其负载于氧化石墨烯上制备成新型荧光探针对肝素进行检测。通过改进的维蒂希反应(Wittig reaction)合成3种二苯乙烯类化合物,分别为含有羟基、卤素基团(溴)烷基链和氨基正离子侧链的有机物,并进行核磁表征,结果表明,经过提纯后均得到了纯净的产品。通过荧光发射光谱进行表征,确定了这3种化合物的聚集诱导发光特性。将其中含有氨基正离子侧链的化合物负载于氧化石墨烯,利用这种荧光探针对肝素进行检测。结果表明,氧化石墨烯具有荧光淬灭作用,与带有正电荷的聚集诱导发光物质通过静电作用复合,使其表面修饰正电,荧光淬灭。当加入肝素钠后,由于肝素钠电负性更强,使得两者脱离,荧光显著增强,从而可通过此方法对肝素进行检测。     

酸性磷酸酶检测底物DCAP-P合成新方法的研究

研究了合成酸性磷酸酶(ACP)检测底物2,6-二氯-4-乙酰基苯基磷酸(DCAP-P)的新方法。以2,6-二氯苯酚为原料,经酰化反应、AlCl3催化F-C重排先制得2,6-二氯-4-乙酰基苯酚(DCAP),然后在低温下向含有DCAP和三氯氧磷的甲苯溶液中滴加吡啶将其磷脂化,再经水解就得到了目标产物DCAP-P,其结构经元素分析、1HNMR和IR得到确证。研究表明该方法具有步骤较少、操作简便、产物易分离纯化和收率良好等优点。     

微弱信号检测与锁定放大电路

介绍了一种微弱信号的检测与锁定放大方法。通过模拟锁相环工作锁定待检微弱信号的频率,利用控制器测量该锁相环的输出频率,并根据该频率值控制直接数字合成电路产生同频信号,该信号作为相关检测所需的参考信号。系统采用乘法器和积分电路实现相关检测,通过步进调整参考信号的相位,使互相关值最大,获得与被测信号同频同相的再生信号,从而实现微弱信号的检测与放大。该方法能够实现频率检测及幅度检测等功能。经实验测试表明:在低信噪比条件下,该方法仍具有较好的线性测量特性和较高的准确度,可实现任意波形的微弱信号自动检测和再生放大。     

检测碱性磷酸酶用对乙酰基苯基磷酸二钠盐的合成

对乙酰基苯酚在吡啶存在下与三氯氧磷反应,在碱性条件下水解,得到了一种能提高碱性磷酸酶测量准确度的底物——对乙酰基苯基磷酸二钠盐,产品结构经红外光谱、核磁共振谱及元素分析确证。由于采用340 nm作为测量波长,免除了使用波长400 nm时血清中胆红素和血红蛋白的干扰,提高了碱性磷酸酶测量的准确性。     

噬菌体单链抗体碱性磷酸酶细胞ELISA检测方法的建立

目的建立噬菌体单链抗体碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)细胞ELISA检测方法,以期排除外周血中白细胞的干扰,将筛选到的噬菌体抗体用于临床样本的检测。方法从大容量噬菌体抗体库中筛选与食管癌细胞结合的噬菌体单链抗体,制备食管癌细胞KYSE-170和EC109鉴定板及白细胞鉴定板,采用ALP细胞ELISA法分析筛选到的噬菌体抗体与两种食管癌细胞及白细胞的结合活性,同时与辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)细胞ELISA法进行比较,以抗卵清蛋白(ovalbumin,OA)为阴性对照。结果经ALP细胞ELISA法检测,筛选到的噬菌体抗体1、2、3均可与KYSE-170和EC109细胞结合,A405值在检测范围内;3个噬菌体抗体与不同食管癌细胞系的结合活性差异有统计学意义(P<0.001);抗OA抗体与两种食管癌细胞的结合活性明显低于3个噬菌体抗体,且差异有统计学意义(P<0.001);3个噬菌体抗体与白细胞结合的A405值在检测范围内,与食管癌细胞系的结合活性相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ALP细胞ELISA法可鉴定噬菌体单链抗体,并可排除白细胞的干扰,有望应用于临床样本的检测。     

氧化石墨烯负载吡啶基碱性离子液体催化合成碳酸二甲酯的研究

以氧化石墨烯(GO)为载体,采用缩合与阴离子交换2步反应制备负载吡啶基碱性离子液体催化剂GO-[SPy]OH。通过FT-IR、TGA、XPS等手段对催化剂组成和结构进行表征,并考察了催化剂质量、醇酯摩尔比、反应时间、反应温度等工艺参数对酯交换合成碳酸二甲酯(DMC)反应的影响。结果表明,在催化剂质量为0.05 g、反应温度为90℃、甲醇/碳酸乙烯酯摩尔比为12∶1、反应时间为3 h的优化条件下,DMC的收率达到92%,选择性为100%。催化剂重复使用4次后仍能保持良好的催化活性。     

基于氢碘酸还原氧化石墨烯的研究

在石墨烯的多种制备方法中,我们选用氧化-还原法制备以保留石墨烯上的某些官能团,获得较高的电导率。我们采用改进Hummers法,以高锰酸钾与石墨粉质量比9∶1为原料,浓硫酸为溶剂更安全高效地制备氧化石墨烯(GO),避免高温氧化时大量破坏石墨的面内共轭结构。采用氢碘酸法、氢碘酸乙醇法、氢碘酸乙酸法三种途径来制备还原氧化石墨烯(r GO),比较发现氢碘酸乙酸还原法是温和高效的还原策略,即在一定量乙酸及55%的氢碘酸的混合液中,氧化石墨烯粉末在40℃下还原2d,其电导率达14600S/m,高于其它两法。通过改进氧化还原条件,制备了仅边缘修饰,面内共轭结构几乎无破坏的石墨烯。制备的r GO在邻二氯苯中能够很好地分散,其后用含溴修饰剂对其进行了边缘修饰,引入了可作为反应位点的溴原子。     

纳米银氧化石墨烯复合修饰电极检测环丙沙星

利用浸渍法结合电化学还原法制备了纳米银石墨烯复合修饰电极(AgNPs/RGO/GCE),利用扫描电镜(SEM)观察了AgNPs/RGO/GCE的表面结构,采用循环伏安法(CV)表征了修饰电极的电化学性能,研究了盐酸环丙沙星(CIP)在AgNPs/RGO/GCE上的电化学行为,并在此基础上选用微分脉冲伏安法(DPV)探讨了AgNPs/RGO/GCE检测CIP的可行性。结果表明,AgNPs/RGO/GCE对CIP的电化学氧化具有非常明显的催化作用,在最优实验条件下,该方法灵敏度高、重复性和稳定性好,对模拟水样检测的回收率在96. 34%～107. 2%之间,RSD为2. 015%～3. 342%。     

结核分枝杆菌杂交信号放大检测方法的建立

目的建立结核分枝杆菌杂交信号放大检测方法。方法构建纳米颗粒信号放大载体,建立杂交信号放大方法,检测标本中结核分枝杆菌特异性的插入序列IS6110。应用该方法检测124份临床结核患者标本,并与细菌培养和生化鉴定法的检测结果进行比较,确定该方法的灵敏度和特异性。结果杂交信号放大方法检测临床标本的灵敏度为87.7%,特异性为92.2%,假阳性率为7.8%,假阴性率为12.3%。结论已建立具有较高灵敏度和特异性的杂交信号放大检测方法,该方法操作简便、快速,可作为结核分枝杆菌临床标本的检测方法。     

氧化石墨烯插层膨润土复合材料高效吸附碱性紫3染料

通过超声途径,利用氧化石墨烯（GO）插层膨润土（Bent）制备复合材料（BGO）,并评估对碱性紫3的吸附效果。采用XRD、FTIR、BET、SEM、XPS等检测手段表征了复合材料的结构特征,通过Langmuir、Freundlich模型和伪一级、伪二级模型拟合了等温吸附数据和动力学吸附数据,范特霍夫方程研究热力学过程。结果表明：GO成功插入Bent层间,XRD图谱显示膨润土层间距从1.35nm（Bent）扩大至1.6nm（BGO）,BGO比表面积有大幅提升;吸附数据符合Langmuir等温线模型和伪二级动力学模型,在30℃、250mg/L初始浓度下,BGO最高吸附容量可达420.17mg/g,与Bent相比,BGO显示更强的吸附能力,吸附过程展现快速动态;热力学研究表明吸附过程是自发且吸热的。机理分析表明,高比表面积GO及所带含氧基团与Bent之间的协同作用共同决定BGO具有高吸附能力。     

基于氧化石墨烯材料的结构力学性能研究

为解决公路建设中道路材料抗开裂性及耐久性较差的问题，向其中掺入一定量的氧化石墨烯，可以在一定程度上增强道路材料的力学性能。本文主要研究掺加氧化石墨烯路面材料的抗压强度，内容包括原材料的性能分析和成型试块试验。结果表明：随着氧化石墨烯掺量的增加，抗压强度逐渐增大，当氧化石墨烯掺量为0.06%时，改性路面材料的力学性能最佳。从养护龄期对试件的强度影响分析发现，随着养护龄期的增长，试件强度增长率逐渐降低。     

电还原氧化石墨烯修饰电极检测苯二酚异构体

基于氧化石墨烯修饰电极,通过简单的恒电位还原方式制备电还原氧化石墨烯修饰电极(r GO/GCE),采用循环伏安法(CV)和微分脉冲伏安法(DPV)研究了对苯二酚(HQ)、邻苯二酚(CT)、间苯二酚(RS)3种苯二酚异构体混合物在该电极上的电化学响应,并将检测条件逐步优化。结果表明,r GO/GCE可用于同时检测苯二酚的3种同分异构体,HQ、CT在r GO/GCE上的电位差为141.29 m V,CT、RS间的电位差为323.81 m V,线性范围分别为5.00×10~(-5)~2.00×10~(-3)、5.00×10~(-5)~2.00×10~(-3)、7.00×10~(-5)~3.00×10~(-3)mol/L,检出限分别达到3.57×10~(-7)、3.62×10~(-7)、3.55×10~(-6)mol/L。并将所制备电极应用于模拟水样,获得满意结果。     

石墨烯及氧化石墨烯在荧光测定方法的研究进展

石墨烯作为一种新型的纳米材料,具有比表面积大、化学稳定性好、光学、电学性能良好等一些独特的物理和化学性质,在诸多领域被广泛应用。主要介绍了石墨烯及氧化石墨烯在金属离子、药物、环境污染物等化合物荧光测定方法的研究开发,同时展望了其在测定领域的应用前景。