化学和酶促兼用的方法研制5''''-[α-~(32)P]脱氧三磷酸腺苷

本文采用化学和酶促合成兼用的方法,使用无载体~(32)P-正磷酸(或盐)标记5’-[α-~(32)P]脱氧三磷酸腺苷。产物的比活度达到20—160 Ci/m M,实际收率21—40%,放化纯度94—97%,化学合成中生成的~(32)P-脱氧单磷酸腺苷占总放射性量的69—86.7%。反应所需的二种激酶采用高速离心的方法除去抑制酶反应的硫酸铵。本工作还对影响化学合成的因素进行了一些研究。     

稀水溶液中氧化还原酶辐射失活和后失活及保护效应的研究Ⅱ.——稀水溶液中过氧化氢酶辐射后失活及保护效应

报道了稀水溶液中过氧化氢酶在辐射后的放置期间,其生物活性仍随放置时间不断下降的后失活作用。研究了剂量,初始酶浓度、辐照气氛、温度对过氧化氢酶辐射后失活的影响以及添加剂对酶辐射后失活的抑制作用,发现乙醇、甲酸钠和络合剂EDTA均可有效地抑制酶的辐射后失活。样品在辐照和辐照后放置过程中氧的存在与否是辐射后失活现象的关键,而水辐解的分子产物H_2O_2对诱发这一后失活现象起有重要作用。     

稀水溶液中氧化还原酶辐射失活和后失活及保护效应的研究Ⅰ.——稀水溶液中过氧化氢酶辐射失活及保护效应

研究了稀水溶液中过氧化氢酶的辐射失活,给出了过氧化氢酶生物活性与吸收剂量的关系以及辐射气氛、温度和溶液中酶的初始浓度对酶活性的影响。结果表明,低温、较高的酶初始浓度和体系中的氧对过氧比氢酶的辐射失活有不同程度的抑制作用。发现添加剂CH_3CH_2OH、HCOONa和EDTA对稀水溶液中过氧化氢酶的辐射失活有明显的保护作用。同时讨论了失活机理和添加剂保护机理。     

夏天无总碱对血小板内cAMP、cGMP含量的影响

夏天无总碱(COAMTA)系从伏生紫堇之块茎中分离出的有效成分。动物实验表明,COAMTA具有明显抑制血小板聚集、抑制血栓形成等作用。本文观察了COAMTA对家兔血小板内cAMP和cGMP含量的影响。结果0.08—0.16mg/ml PRP的COAMTA可明显提高血小板内cAMP含量;剂量为0.16mg/ml PRP还可使cGMP含量升高,但cAMP/cGMP的比值增加更为明显,提示COAMTA主要是通过影响cAMP含量而发挥抑制血小板功能的作用。     

[35S]-甲硫氨酸掺入法测定某些补益药活性成分对 Aβ分泌速率的影响

[35S]-甲硫氨酸掺入法测定细胞Aβ分泌速率,观察知母活性成分ZMS和黄芪活性成分AST和HT,及两药合用对Aβ生成速率的影响.用[35S]-甲硫氨酸标记转染APP695基因的细胞,所获细胞上清以Aβ22-35单克隆抗体进行免疫共沉淀,结合Western印迹法,以配对对照(加载体)的Aβ条带灰度值为l,计算各用药组灰度的相对强度.本方法能稳定地测到细胞在24-72 h内分泌的Aβ量,同一受试样品在不同批实验中的变异(CV)在17%-32%之间.在培养液中中药活性成分的浓度为1×l0-5mo1/L时,受试物质中AST及ZMs AST合用对Aβ的分泌速率有明显抑制作用(P＜0.01).另两种受试物则无作用.黄芪活性成分AsT有抑制Aβ分泌的作用,ZMs与AST两药合用作用更为显著.     

腺苷A_(2A)受体显像剂~(11)C-KW6002的合成与初步生物学评价

腺苷A_(2A)受体与中枢神经退行性疾病密切相关,正电子核素标记的腺苷A_(2A)受体显像剂可用于帕金森病(PD)的诊断与疗效评价。本研究采用碳-11标记[(E)-1,3-二乙基-8-(3,4-二甲氧基苯乙烯)-7-甲基-3,7-双氢-1H-嘌呤-2,6-二酮](KW6002)制备~(11)C-KW6002,并进行正常鼠与PD模型鼠microPET显像。结果显示,以去甲基KW6002为标记前体,在NaOH条件下与三氟甲基磺酰基碳-11甲烷(~(11)CH_3-Trifcate)反应,标记率达56%(衰变校正,n=3)。经制备HPLC分离和固相萃取,产品放化纯度99.5%,比活度为1.5×10~(14)Bq/g。~(11)C-KW6002的microPET显像结果显示,正常大鼠双侧纹状体呈对称显像,PD模型鼠中毁损侧纹状体放射性较对侧明显增加,而同一模型的~(11)C-CFT显像为毁损侧纹状体放射性缺失。表明~(11)C-KW6002为具有临床应用的潜在腺苷A_(2A)受体显像剂。     

某些中药中黄酮化合物强心作用机制的研究

本文实验表明:黄酮的强心作用性质与ISO有所不同,并证实其作用与心肌β受体关系不大,所试十种黄酮对心肌PDE都有抑制作用,但它们对cAMP-PDE抑制作用比cGMP-PDE要强,也证明檞皮素能提高心肌细胞内cAMP水平,而对cGMP含量无影响。因此黄酮强心作用可能是通过抑制心肌细胞内cAMP-PDE活性的结果。     

白细胞介素4对受照小鼠小肠粘膜免疫功能的促恢复作用

采用光镜、免疫酶联吸附实验、免疫组化、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)等方法，观察了小鼠受8Gy^60Co γ射线全身1次性照射后，肠道粘膜免疫功能损伤机理及其调控的措施。结果表明，射线可直接损伤肠道淋巴细胞，导致肠道固有层中分泌免疫球蛋白A的浆细胞数量减少。同时，射线还能抑制肠道淋巴组织中调控免疫球蛋白M型B淋巴细胞向免疫球蛋白A型B淋巴细胞转化的白细胞介素-4基因表达，使分泌免疫球蛋白A的细胞进一步减少，从而使小肠粘液中分泌性免疫球蛋白A含量明显减少。用重组人白细胞介素4调控后，肠道固有层中浆细胞的数量明显增加，提高粘液中分泌性免疫球蛋白A的含量，对放射损伤后肠道粘膜免疫功能的恢复有一定防治作用。     

超重环境下微波辐射对大鼠肝细胞超微结构的影响及林蛙油营养液的保护作用

为了解超重环境下微波辐射对大鼠肝组织超微结构的影响及林蛙油营养液的保护作用,采用离心机模拟6G超重环境,微波照射(微波源统一由大功率微波雷达发射机改装而成的微波发射机所发射,200mW/cm2,照射5min),用以长白山特产林蛙油为主要成分制成的林蛙油营养液于不同时间给予大鼠,分别观察各组(A组为空白对照,B组为林蛙油营养液,C组为超重+辐射,D组为超重+辐射+林蛙油营养液,E组为林蛙油营养液+超重+辐射,F组为林蛙油营养液+超重+辐射+林蛙油营养液)大鼠肝的超微结构变化,检测大鼠血清己糖激酶活性。结果表明,各组大鼠肝脏超微结构的损伤从轻到重的排列是依次为F、B、A、D≌E、C;A、B和F组大鼠血清己糖激酶活性高于C、D和E组(p0.05),A、B、F组之间,C、D、E组之间无显著差异(p0.05)。说明林蛙油营养液对在超重和微波辐射环境下的大鼠肝脏有一定的保护作用,林蛙油营养液使用时间越长,作用越明显。     

沼泽红假单胞菌砷(Ⅲ)S-腺苷甲基转移酶的初步晶体学分析

含砷化合物有高毒性,一直是全球性的公共卫生难题。许多微生物能利用S-腺苷甲基转移酶(ArsM酶)催化有剧毒的无机As(Ⅲ)发生甲基化而解毒。为揭示酶促反应的真实机制,我们将来源于沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonas palustris)的ArsM酶(RpArsM)重组表达、纯化及结晶。在上海光源BL17U1线站收集蛋白晶体衍射数据,初步晶体学分析表明,RpArsM酶的晶体属于P212121空间群,晶胞参数分别是a=45.92,b=66.58,c=147.82,α=β=γ=90°,衍射分辨率达2.0。     

~(60)Co-γ辐射处理稻种对萌发早期过氧化氢酶活力的影响

用~(60)Co辐照源γ射线在不同剂量下辐照风干稻种(桂朝2号)。辐照后进行萌发。观察了萌发时的一些酶(过氧化氢酶、过氧化物酶、α-淀粉酶和磷酸酶)的水平。被考察的酶之中,过氧化氨酸与低剂量的γ辐照呈现明显的相关性(辐照剂量率750rad/min,剂量为0、250、750、1500和3000rad)。当幼苗用低浓度(约30 mM)的外源H_2O_2处理时,刺激了对照幼苗的过氧化氢酶活力。     

SOD对肿瘤细胞凋亡影响和抗氧化损伤的研究:Ⅳ.SOD对荷瘤小鼠正常组织氧化损伤的保护效应

探讨超氧化物歧化酶(SOD)对电离辐射和肿瘤化疗药物对荷瘤机体正常组织损伤的保护效应及机制,测定荷瘤鼠肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺、脑和骨髓组织的活性氧(ROS)、氧化产物丙二醛(MDA)水平和谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,并观察SOD对荷瘤小鼠肝脏超微结构的影响。结果表明,荷瘤小鼠受照射和化疗药物后其骨髓、肝脏、肾脏、脾脏、组织匀浆中ROS、MDA含量明显升高,而GSH-Px和CAT活性明显降低,其机制是电离辐射和化疗药物造成抗氧化酶的损伤及机体内ROS含量上升。加入SOD与对照组相比,显著降低荷瘤小鼠骨髓、肝脏、脾脏组织匀浆中ROS、MDA含量,略微升高GSH-Px和CAT活性,而对肾脏组织匀浆中ROS、MDA含量和GSH-Px和CAT活性无明显影响,同时SOD可明显减轻电离辐射对荷瘤小鼠肝细胞超微结构破坏,SOD通过直接清除自由基和保护抗氧化酶的损伤起辐射保护作用。     

视黄酸调节Smad3表达阻抑放射诱导的肺损伤

为了探讨信号蛋白Smad3于不同时间段,在放射性肺损伤大鼠肺组织中的表达变化,以及视黄酸对其表达的影响,以6MV-X线对健康雄性Wistar大鼠进行15Gy全胸野照射,建立大鼠放射性肺损伤模型,并用视黄酸进行干预。实验分为正常对照组(A组)、单纯给药组(B组)、单纯照射组(C组)和照射加给药组(D组)。于照射后第1、2、4、8周后取肺组织作HE和Masson染色、并以免疫组化方法检测Smad3。结果表明,照射后1周,发现肺泡腔有炎性细胞渗出,继而间质水肿,4及8周出现肺泡腔变小、结构破坏,肺间质出现胶原纤维;B组与A组比,各时间段的病理无明显差别,但D组与C组相比,大鼠肺炎和肺水肿减轻,肺组织胶原纤维量减少。Smad3免疫组化学标记显示:A组与B组相比,检测的4个时间点均无差别;C组和D组与A组比,在放疗后的第1、2、4、8周时间段Smad3表达均明显增强(p0.0001),以C组增强更明显;D组与C组比,Smad3表达减弱,以第4、8周表达减弱更明显。由此可见,放射性肺损伤肺组织Smad3表达明显增强,视黄酸对大鼠正常肺组织的Smad3表达无影响,但它能从蛋白质水平上有效抑制放射诱导的Smad3表达,对放射性肺损伤有防治作用,为临床用其治疗放射性肺损伤提供了实验依据。     

一种新的铀矿物的发现

根据法国《矿物学杂志》1981年第5卷104期报道,在扎伊尔的基伍省(Kivu)科博科博(koboko-bo)矿床发现了一种新的铀矿物。国际矿物学协会在1980年12月份把这种矿物命名为 Mundite(磷铝铀矿Ⅳ),这是为了纪念在放射化学方面卓有成效的卢万大学老教授沃尔特蒙特(Mund)先生。在该矿床发现的铝铀酰磷酸盐矿物共有七种,当时命名为矿物 A,B,C,D,E,F,G。关于磷铝矿物Ⅰ(相当于 A,后边以此类推)(phuralumite),磷铝矿物Ⅱ(upalite),磷铝矿物Ⅲ(ranunculite),已经进行过详细描述。     

基于DNA酶的铀酰离子传感方法

铀在核能发展中扮演着十分重要的角色,铀污染的防治是一个必须解决的问题,因此对铀酰离子(UO_2~(2+))的检测方法研究,成为了人们关注的热点。DNA酶具有高度的特异性识别能力,是一种理想的生物探针。本文简要介绍了DNA酶的结构特征,概述了近期发展的基于DNA酶的UO_2~(2+)传感方法,包括比色法、荧光法、表面增强拉曼光谱法、共振光散射法和电化学法等,主要介绍了杂交链反应和目标催化发卡组装两种无酶放大技术。DNA酶的使用使得传感器对UO_2~(2+)的检测能力基本上在纳摩尔量级,展现出很高的灵敏度,结合生物无酶放大技术后,传感器的性能得到数量级的提高。在未来传感技术简单、快速、灵敏和便携的趋势下,基于DNA酶的传感器具有非常广阔的应用前景。     

~(60)Coγ射线对伴刀豆球蛋白(Con A)和脂多糖(LPS)诱导的淋巴细胞的效应

应用~3H-TdR掺入法研先Con A和LPS诱导后的淋巴细胞亚群的辐射效应及其相互关系。体外实验说明Con A细胞具有激活LPS对B细胞的诱导作用。当Con A细胞受10Gy照射后~3H—TdR掺入明显下降,并失去激活作用。LPS细胞受照不能被正常Con A细胞所激活。两种细胞受照后混合培养出现Con A细胞对LPS细胞的抑制作用。应用琼脂扩散盒培养法反映辐射对两种细胞的效应更明显。 8例鼻咽癌病人接受一个疗程的~(60)Co γ线治疗后,其Con A细胞的掺入显著下降,失去激活B细胞的作用。LPS细胞不能被正常Con A细胞所激活。本实验提示Con A细胞的辐射敏感性比LPS细胞高。     

在MM-2磁镜上对热电子环的实验观测

通过注入15kW、15GHz的微波进行电子回旋共振加热,在MM-2简单磁镜中建立了热电子环。电子环半径约为4～5cm。实验观察到了电子环对低频扰动的抑制作用。从低频扰动的再次爆发可推测在微波关断以后热电子环仍可存在10～15ms,而表征热电子存在的X射线辐射可延续50～70ms。微波启动的头2ms的主要作用是电离工作气体,在15kW、9ms微波注入 的实验条件下,建立热电子环的最佳充氢气压为1.2×10~(-3)Pa。     

低剂量γ射线对丝裂霉素C损伤小鼠脾细胞的影响

探讨低剂量辐射诱导哺乳动物抗丝裂霉素C(Mitomycin C,MMC)损伤的免疫适应性反应。小鼠接受低剂量γ射线作用后6h,再给予损伤剂量的MMC,然后通过脾细胞计数、流式细胞术、Con A和LPS刺激的小鼠脾淋巴细胞转化观察小鼠脾细胞数、细胞周期和DNA含量的变化。1mg/kg的MMC(B)组小鼠脾细胞数明显低于正常对照(A)组,50-100mGy照射加MMC(C、D、E)组小鼠脾细胞数明显高于B组。Con A刺激的小鼠脾淋巴细胞转化细胞周期分析表明,D组、E组G0/G1期和S期细胞相对百分率分别显著低于和高于B组。而LPS刺激组,除E组G0/G1期外,D组、E组G0/G1期和S期细胞相对百分率也分别明显低于和高于B组。低剂量γ射线可以诱导MMC损伤小鼠脾细胞数和细胞周期进程的适应性反应。     

TG Ab酶联免疫分析试剂盒的研制

固相包被TG,TG与辣根过氧化物酶偶联制备TG酶标记物,以四甲基联苯胺(TMB)为底物,采用二步法,建立了TG Ah酶联免疫分析(ELISA)试剂盒制备方法。本方法的灵敏度为0.4μg/L,批内变异因数<10.0％,批间变异因数<15.0％,特异性鉴定显示与TM无明显交叉反应。正常参考值<50.0IU/mL(n=100)。该方法具有简便、快速和定量准确的特点,适用于临床检测和科研应用。     

白细胞介素-6对荷瘤小鼠正常组织的辐射保护效应

以受全身照射的S180肉瘤荷瘤小鼠为研究对象,利用化学比色法测定荷瘤鼠肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺、脑和骨髓组织的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平和谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,探讨白细胞介素-6(IL-6)对荷瘤机体正常组织辐射防护效应及机理。结果显示：荷瘤鼠受照射后其肝脏、肾脏、脾脏、骨髓、脑、肺组织匀浆中ROS、MDA含量明显升高,而GSH-Px和CAT活性明显降低,其机制是电离辐射造成抗氧化酶的损伤及机体内自由基含量上升。IL-6能够显著降低受照射荷瘤小鼠肝脏、脾脏、骨髓、脑组织匀浆中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平,提高谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性。对肾脏、肺组织匀浆中ROS、MDA含量和GSH-Px、CAT活性无明显影响。本实验提示IL-6通过清除ROS和保护抗氧化酶的损伤起辐射保护作用,IL-6对不同组织细胞辐射保护作用程度不同。是由于机体细胞中IL-6R的数量、亲和力及IL-6信号传导途径存在差异。