铁棍山药多糖纯化及抗氧化活性

对铁棍山药粗多糖进行纯化分离获得单体组分,并对其抗氧化活性进行评价。利用AB-8大孔树脂对铁棍山药多糖进行富集纯化,再利用DEAE-52纤维素层析柱和Sephadex G-100层析柱分离多糖粗品,利用DPPH自由基清除实验、ABTS自由基清除实验和总还原能力测定评价分离得到的3种铁棍山药多糖组分的抗氧化活性。结果显示,AB-8大孔树脂可纯化铁棍山药粗多糖,使其纯度从53.13%提高到82.57%,获得多糖粗品,洗脱参数为:上样浓度为1.12 g/L,上样体积为4000 mL,上样流速为500 mL/h,洗脱液速度为750 mL/h,洗脱液体积为1000 mL,解吸率可达到95.62%。经过DEAE-52纤维素层析柱和Sephadex G-100层析柱分离得到3种铁棍山药多糖组分DOTP1、DOTP2和DOTP3,得率分别为0.34%、0.42%和0.36%,纯度分别为93.11%、91.22%和92.75%。DPPH自由基清除实验、ABTS自由基清除实验和总还原能力测定结果显示,铁棍山药多糖DOTP1的抗氧化活性优于DOTP2和DOTP3,而3种多糖组分的抗氧化活性都略优于阳性对照VE。研究所用纯化分离方案可实现铁棍山药多糖的分离纯化,得到的3种多糖组分具有较好的抗氧化活性。     

紫芝胞外多糖分离纯化及抗氧化性的研究

目的:探讨紫芝(Ganoderma Sinense)胞外多糖的分离纯化及抗氧化活性.方法:采用乙醇沉淀法、聚酰胺脱蛋白法,DEAE-52阴离子交换色谱柱法分离纯化紫芝胞外多糖;通过对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除能力的测定确定抗氧化活性.结果:粗多糖经DEAE-52柱层析纯化得到三种多糖组分GSP1、GSP2和GSP3,均具有抗氧化活性.其中GSP2的抗氧化活性尤为明显,在1.6mg/mL时DPPH自由基清除率达到76.3％;在5mg/mL时羟自由基的清除率达到81.5％.结论:三种紫芝胞外多糖组分具有较强的抗氧化活性,其中GSP2最为明显.     

鹿茸多糖分离纯化及抗氧化活性研究

采用DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶排阻层析对鹿茸粗多糖进行分离纯化,并通过对DPPH自由基、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力和还原能力的测定,研究了粗多糖及纯化后多糖的抗氧化能力。结果表明:DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶排阻层析对鹿茸多糖分离效果较好,可以分离纯化得到一种单一多糖;粗多糖和纯化后多糖对DPPH·、·OH、O2-·均有清除作用,且具有一定的还原能力,纯化后多糖抗氧化活性和还原能力均大于粗多糖。     

商洛绿茶多糖的分离纯化及体外抗氧化和抗肿瘤活性研究

为研究商洛绿茶多糖体外抗氧化和抗肿瘤活性,采用DEAE-52纤维素柱色谱法对水提醇沉法制备的茶多糖进行纯化,继而在体外抗氧化体系上测定其对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基、超氧阴离子的清除能力,同时检测其对乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用。结果表明,经DEAE-52纤维素柱层析纯化后得到SGTPs-1,SGTPs-2,SGTPs-3三个组分,多糖含量分别为83.5%,76.8%,89.7%,这3个组分对不同的自由基清除能力均呈现良好的量效关系,其中SGTPs-3的作用最强,其次为SGTPs-1,SGTPs-2最弱;SGTPs三个组分对MCF-7细胞均有一定的生长抑制作用,并且抑制率与浓度呈正相关。商洛绿茶多糖具有较好的体外抗氧化和抗肿瘤活性。     

不同纯化方法对花生多糖抗氧化活性的影响

以冷榨花生饼为原料,经提取得到花生多糖粗液,分别采用双酶水解和DEAE-52纤维素柱层析的方法进行纯化得到花生多糖PPS-a、PPS-2组分,并研究二者的抗氧化能力。研究表明:两个组分具有一定的清除羟基自由基、超氧阴离子、DPPH、还原力和抗脂质过氧化能力,且其清除效果随着浓度增加而增加,其中PPS-a的抗氧化活性较PPS-2强。与VC相比,PPS-a和PPS-2的浓度大于5 mg/mL时,两种多糖对羟基自由基清除能力均高于VC;从清除超氧阴离子和DPPH自由基及抗脂质过氧化方面来看,其抗氧化能力均低于VC;两种多糖的还原力最差,仅达到VC的16%左右。     

灵芝子实体和孢子粉纯化多糖体外抗氧化活性研究

为研究同源灵芝子实体和灵芝孢子粉纯化多糖的体外抗氧化活性,利用DEAE-650离子交换树脂,对提取获得灵芝子实体粗多糖(GLP)和灵芝孢子粉粗多糖(GLSP)进行分离纯化,GLP水洗脱得到GLP-1,0.2 mol/L NaCl洗脱得到GLP-2,GLSP水洗脱得到GLSP-1,0.2 mol/L NaCl洗脱得到GLSP-2。分别考察了4种纯化多糖的ABTS+自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力和还原能力,结果表明,不同灵芝纯化多糖的抗氧化能力不同,GLP-2的4种抗氧化活性均最高,四种抗氧化能力最高,分别为98.09%、75.88%、81.55%和0.728。     

苦荞茶多糖的体外抗氧化活性及其分离纯化

对苦荞茶多糖(tartary buckwheat tea polysaccharide,TBTP)进行分离纯化和活性分析,为苦荞的进一步推广和应用提供理论依据。采用水提醇沉法获得TBTP,利用苯酚-硫酸法测定粗多糖中的糖含量,通过体外抗氧化评价体系研究TBTP对DPPH自由基、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的清除活性以及TBTP的总还原能力,并利用DEAE-52纤维素和G-150葡聚糖凝胶柱对获得的粗多糖进行纯化、分组。结果表明:TBTP的多糖含量为58.75%;在质量浓度为8.0 mg/m L时,对DPPH·的清除率为94.16%,对·OH的清除率为82.25%;在质量浓度为4.0 mg/m L时,对O2-·的清除率为98.05%。同时经DEAE-52纤维素和G-150葡聚糖凝胶柱对TBTP进行分离纯化后,将TBTP分为3个成分均一的组分,分别为TBTP-1、TBTP-2、TBTP-3。苦荞茶作为食源性物质,其多糖有明显的抗氧化活性。DEAE-52纤维素和G-150葡聚糖凝胶柱对该多糖有很好的分离、纯化效果。     

云南铜色牛肝菌多糖分离纯化及抗氧化活性研究

通过对铜色牛肝菌多糖进行分离纯化和活性分析,为野生铜色牛肝菌的进一步推广和应用提供理论依据。本研究采用热水浸提法提取的粗多糖为原料,并利用DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-100柱层析对所获得的粗多糖进行纯化,得到两种单一多糖PB-1A、PB-2A,比旋光度和紫外扫描方法鉴定多糖的纯度。通过体外抗氧化实验评价体系研究,比较铜色牛肝菌粗多糖及纯化后的多糖PB-1A、PB-2A对羟基自由基、DPPH自由基的清除活性以及总还原能力。结果表明:铜色牛肝菌多纯化糖前后的对羟基自由基、DPPH自由基的清除活性以及总还原能力呈现一定效量关系,且均为PB-2APB-1A铜色牛肝菌粗多糖。     

壶瓶碎米荠多糖的提取、分离及抗氧化活性研究

研究壶瓶碎米荠多糖的提取、分离纯化方法,并分析其体外抗氧化活性。试验结果表明,通过超声波、酶辅助提取壶瓶碎米荠多糖的最佳工艺条件:液料比30 ∶ 1,超声时间25 min,纤维素酶添加量2%,提取温度90 ℃,提取时间120 min,测得实际值为48.53 mg/g。采用Svage法脱蛋白7次,多糖的损耗率较小。经DEAE-52纤维素层析得到4种组分多糖。体外抗氧化活性分析表明,壶瓶碎米荠粗多糖具有一定的还原能力,对ABTS自由基、羟基自由基的清除能力较强。     

板栗多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

从板栗中分离纯化得到多糖并研究其抗氧化活性.采用沸水提取、Sevag法除蛋白、80%乙醇沉淀的方法从板栗中提取得到板栗多糖CPS.CPS经DEAE-纤维素柱分离纯化后,于蒸馏水洗脱液中得到一个纯化多糖组分CPS1.以VC为对照,试验了CPS与CPS1对羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的清除能力及还原能力.结果表明,CPS与CPS1均具有一定的清除羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的能力及还原能力,而且与多糖的浓度成正相关性.其中,CPS对过氧化氢的清除作用效果与VC相当.另外,经纯化精制后的CPS1对羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的清除作用及还原能力均低于CPS.     

广林9号桉叶多酚抗氧化活性研究

采用不同极性有机溶剂对广林9号桉叶提取物进行系统萃取分离,用福林-酚法测定各组分的总酚含量,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2＇-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)、还原能力3种体外抗氧化活性方法测定了桉叶各组分的抗氧化活性。结果表明,不同萃取组分中,乙酸乙酯组分总酚含量最高,达到502.67mg/g;其对DPPH自由基和ABTS＋·的清除能力和还原能力也最强,优于阳性对照物茶多酚,其清除两种自由基的IC50分别为0.097mg/mL 和0.034mg/mL;通过总酚含量与抗氧化活性比较发现,其抗氧化活性与总酚含量成正相关,由此判断桉叶提取物的抗氧化活性成分主要为多酚类物质;桉叶粗提物中多酚含量达到30%以上,与茶叶粗提物中多酚含量相当,具有开发意义。     

银杏果多糖的物化性质及抗氧化活性研究

以银杏果为原料,采用水提醇沉法提取,Sevag法除蛋白,大孔树脂法脱色制备多糖,利用紫外光谱（UV）、高效液相色谱（HPLC）、红外光谱（IR）并对多糖的结构进行了分析;通过对DPPH自由基、超氧自由基和羟基自由基的清除作用,研究银杏果多糖体外抗氧化活性;用银杏果多糖对高脂小鼠进行干预后,测定血清和肝脏中SOD、GSH-PX、MAD和CAT含量,以此评定体内抗氧化活性。结果表明,银杏果多糖中不含蛋白质和花色苷等物质,主要是由葡萄糖、半乳糖和木糖三种单糖组成,其摩尔比为2.26：19.60：4.29,是一种含有α-糖苷键的吡喃糖;银杏果多糖对DPPH自由基、超氧自由基和羟基自由基的清除效果显著,其IC50分别为0.15 mg/L、0.30 mg/L、0.47 mg/mL;体内实验显示,银杏果多糖能显著提高血清和肝脏中SOD、GSH-Px和CAT的含量、降低血清和肝脏中MDA的含量。因此可知,银杏果多糖有显著的抗氧化功能。     

双孢菇蛋白粉废料中多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

目的:分析双孢菇蛋白粉废料中多糖组分及抗氧化活性。方法:以双孢菇子实体提蛋白后残渣为材料,采用超声波热水浸提,Sevage法去蛋白,D101大孔树脂除色素和醇沉的方法制备粗多糖,通过DEAE-52层析柱对粗多糖进行分离纯化。通过扫描电镜(SEM)、红外光谱(IR)等方法对纯化后多糖进行理化特性鉴定;采用清除DPPH、超氧阴离子、ABTS自由基实验,以及对H₂O₂处理的酵母细胞的保护作用实验评价其抗氧化活性,并对H₂O₂氧化损伤的酵母细胞上清液中的T-SOD、MDA、GSH-Px三种酶活性进行检测。结果:从双孢菇粗多糖中分离纯化到三种组分,分别命名为ABPS-Ⅰ、ABPS-Ⅱ和ABPS-Ⅲ。研究显示,ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基能力最强。ABPS-Ⅲ多糖的含量为89.12%,SEM特征呈现六面体结构,IR分析结果显示其具有明显的糖类化合物的特征。ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基的EC₅₀值分别为1.85、1.48、1.30 mg/mL。对氧化损伤酵母细胞保护实验结果显示,ABPS-Ⅲ可显著提高氧化损伤酵母细胞的存活率,在浓度为25 mg/mL时,保护率达到了42.58%;酶活性检测结果显示,添加ABPS-Ⅲ后,与氧化损伤组相比,酵母细胞上清液中T-SOD和GSH-Px的活力分别显著提高了337%和102%(p<0.01),MDA含量则显著降低了35.17%(p<0.05)。结论:双孢菇多糖ABPS-Ⅲ具有较强的抗氧化活性。     

丰年虫水溶性蛋白的分离纯化及体外抗氧化性研究

目的:对丰年虫水溶性蛋白进行分离纯化,获得体外抗氧化活性最好的水溶性蛋白组分,并测定其分子质量。方法:丰年虫水溶性粗蛋白经硫酸铵沉淀、透析、DEAE-Sepharose FF离子交换层析和Sephadex G-100凝胶层析分离纯化,对纯化后的蛋白质进行体外抗氧化活性的研究,利用SDS-PAGE电泳测定蛋白质分子质量。结果:丰年虫水溶性蛋白经DEAE-Sepharose FF离子交换层析,梯度洗脱得到4个洗脱峰(峰1～4),峰2的体外抗氧化活性最强。峰2经Sephadex G-100凝胶层析分离纯化得到3个洗脱峰(峰2-1～2-3),峰2-1的体外抗氧化活性最强。利用SDS-PAGE对峰2-1进行鉴定,得到单一蛋白条带,纯度较高,蛋白分子质量为82.47kD。体外抗氧化活性比较,峰2-1远远强于水溶性粗蛋白。结论:蛋白组分峰2-1体外抗氧化活性最强,为单一蛋白组分,其分子质量为82.47kD。     

桑黄菌胞内多糖的理化性质和体外抗氧化活性

研究液体发酵桑黄菌胞内多糖的理化性质和体外抗氧化活性。结果表明：经DEAE-52纤维素离子交换柱层析分离分级得到多个级分,以较大分子质量的中性多糖为主。凝胶渗透色谱分析表明桑黄菌胞内多糖的重均分子质量范围为5.7×103～6.1×106D,由葡萄糖、甘露糖和半乳糖组成,其分子物质的量比为15:4:1,多糖含量为41%,特性黏度为12mL/g。通过体外抗氧化模型,发现桑黄菌胞内多糖均能较好的清除 ·OH、O2－ ·和螯合Fe2+,且对O2－ ·具有明显的清除作用。     

不同分子量铁皮石斛多糖体外抗氧化活性研究

采用分步醇沉法对铁皮石斛总多糖(DSP)进行分离,得到乙醇终浓度为40%(DSP3)、70%(DSP2)和90%(DSP1)的多糖。进一步对4 种铁皮石斛多糖的抗氧化活性进行测定,结果显示：DSP1 对DPPH·的清除作用、总抗氧化能力、抑制H2O2 诱导红细胞氧化溶血和抑制Fe2+-VC 诱导的小鼠肝匀浆脂质过氧化作用效果最佳,DSP 和DSP3次之,DSP2 相对较弱;对·OH 的清除率大小依次为DSP ＞ DSP3 ＞ DSP1 ＞ DSP2;且不同相对分子质量的铁皮石斛多糖均可显著抑制羟基自由基介导的DNA 氧化断裂。结果提示：不同相对分子质量铁皮石斛多糖均有抗氧化作用,且抗氧化能力与其相对分子质量大小有关。     

绿球藻多糖分离纯化及抗氧化活性研究

天然多糖具有良好的生物活性和功能,而微藻具有生长速度快、适应性强、在人工培养下能够大量繁殖、占地面积小、生产成本低等特性。为深入挖掘更多的微藻多糖资源,采用传统热水浸提方法对绿球藻(Chlorococcum sp.GD)多糖进行分离,并采用DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-150柱层析对所获得的粗多糖进行纯化,并研究其抗氧化活性。结果表明:1)粗多糖提取率为6.07%,通过分级纯化,得到4个组分CPP-Ⅰ、CPP-Ⅱ、CPP-Ⅲ和CPP-Ⅳ,且纯度较高;2)绿球藻纯化多糖对DPPH自由基和羟基自由基具有明显的清除效果,清除率分别超过90%和70%,且纯化组分CPP-Ⅳ的效果优于粗多糖;3)绿球藻纯化多糖对超氧阴离子和ABTS+自由基也具有一定的清除效果,清除率分别超过50%和27%,且还原力为0.404。研究结果虽然低于VC的清除率,但仍然表明绿球藻多糖纯化后具有较好的抗氧化活性,并且清除率随多糖的浓度增大而增加。     

黄花菜粗多糖梯度乙醇提取工艺及其抗氧化活性研究

研究了黄花菜粗多糖的乙醇梯度提取工艺技术和其抗氧化活性,结果发现,乙醇浓度在30%—80%的范围内,黄花菜粗多糖的吸光度逐渐上升,样品的还原能力随浓度的增加而增大,即反应体系中黄花菜粗多糖浓度也随之增加,其对H2O2和·OH自由基的清除作用也明显增加,同时S5（80%）乙醇沉淀的多糖抗氧化程度比其它醇提物活性更大。     

Antioxidant activity of sulphated polysaccharide conjugates from abalone (Haliotis discus hannai Ino)

The water-soluble sulphated polysaccharide conjugates were obtained from abalone viscera (Haliotis discus hannai Ino) by alkaline protease extraction followed by ethanol precipitation. Their antioxidant activities were evaluated in vitro by hydroxyl radicals scavenging activity, reducing power and metal chelating activity. Those various antioxidant activities were compared to standard antioxidants ascorbic acid and EDTA. The experimental results indicated that the crude extract having notable hydroxyl free radicals scavenging activity and moderate reducing power and chelating potency. The crude sulphated polysaccharide conjugates was enzymatically hydrolyzed by five commercially available proteases (trypsin, vernase, neutrase, pepsin and papain), and the resultant digests were tested for their antioxidant activities. Those proteolytic hydrolysates, although improving the hydroxyl radical scavenging activity in all cases except one, had lower reducing power and 3–15 times lower chelating ability than the native extract. Product derived from pepsin hydrolysate was fractionated by gel-filtration chromatography with sephadex G-100, giving two fractions containing sulphated polysaccharide conjugates termed ACP I and ACP II. The neutral monosaccharide composition of ACP I is rhamnose, fucose, xylose, mannose, galactose and glucose in a molar ratio of 1.00:45.14:4.00:5.36:33.18:2.15, with an average molecular weight of about 271 kDa. The neutral monosaccharide composition of ACP II is rhamnose, fucose, xylose, mannose, galactose and glucose in a molar ratio of 1.00:12.51:1.33:4.98:16.08:1.46, with an average molecular weight of about 6 kDa.