以蔗糖为原料明串珠菌发酵生产甘露醇

肠膜明串珠菌CGMCC 1.10327为发酵菌株,质量浓度为2%的蔗糖为底物,采用分批发酵,研究甘露醇的生成。为了优化甘露醇的生成,分别考察了添加5 g/L的葡萄糖、3种盐(K2HPO4、乙酸钠、柠檬酸铵)、不同的初始pH和加入0.2%的CaCO3对产甘露醇的影响。结果表明,葡萄糖的加入有助于提高甘露醇的产量。3种盐(K2HPO4、乙酸钠、柠檬酸铵)对甘露醇的生成有明显的影响,当分别为2 g/L、5 g/L和2 g/L时,甘露醇的产量最高。最佳的初始pH=6。向培养基中加入0.2%的CaCO3,甘露醇的产量明显的降低。     

在明串珠菌构建高产甘露醇的细胞工厂

甘露醇是一种具有多种功效的六糖醇,被广泛应用于医药、食品、化工和电子等行业。为构建高产甘露醇的明串珠菌,建立了将底盘细胞转化为高产目标产物菌株的理论：细胞工厂的“源-库”学说。通过2次同源重组,打破染色体中基因的操纵子和重叠基因模式,并将甘露醇外排泵蛋白(mannitol efflux pump, MEP)基因序列和再生NADH的酶(甲酸脱氢酶)基因序列定点插入到染色体上。蔗糖为90 g/L时,打破mep基因的操纵子和重叠基因模式的菌株甘露醇产量比原始菌株(CGMCC1.10327)提高了9.5%。原始菌株染色体上敲入一个拷贝mep基因序列的菌株,底物蔗糖能添加到120 g/L,甘露醇产量也达到55.18 g/L。CCTCC M2020762菌株染色体上敲入一个拷贝甲酸脱氢酶基因序列的菌株,底物蔗糖能添加到145 g/L,甘露醇产量也达到101.6 g/L。使细胞工厂具备更强的“源”能(NADH再生等)和更大的“库”容(提高MEP活性),实现目标产物的超高产。     

肠膜明串珠菌发酵糙米乳研究

利用肠膜明串珠菌进行糙米乳乳酸发酵,研究其生长特性;结果表明,该菌株能在糙米乳中发酵产乳酸,在接菌量为5%、发酵温度为30℃、培养22 h后发酵产乳酸水平可达到最佳。     

在明串珠菌中构建葡萄糖到甘露醇的转化体系

为了进一步提高甘露醇产量,在明串珠菌构建了葡萄糖到甘露醇的转化体系。通过2次同源重组,将mt1d-m1p表达盒串联体定点插入到染色体上。以90 g/L蔗糖为底物时,野生型菌株的甘露醇产量为31. 48 g/L,Δaldh::(mt1d-m1p)为42. 63 g/L,Δaldh::(mt1d-m1p)Δdts::amy为43. 47 g/L,Δaldh::(mt1d-m1p)Δdts::(mt1d-m1p)为45. 74 g/L,Δdts1ΔD-ldhΔpat::mdhΔstpk::mdhΔfk::mdhΔaldh::(mt1d-m1p)为47. 26 g/L。增加甘露醇的合成途径是增产的手段之一。     

明串珠菌筛选与分类的研究进展

明串珠菌存在于蔬菜、饲料和多种发酵食品等各种植物材料中,在各种乳制品中有应用,因此近年来国内对它的研究开始活跃。文中论述了明串珠菌的生存环境、筛选方法、鉴定手段和分类,为分类学研究提供参考。     

柠檬明串珠菌接种发酵竹笋过程中的化学成分变化

为探索不同发酵类型乳酸菌接种发酵的差异,将柠檬明串珠菌与植物乳杆菌分别接种发酵竹笋,测定竹笋发酵过程中总酸、pH值、乳酸菌总数、有机酸、游离糖和亚硝酸盐含量的变化.结果 表明:接种柠檬明串珠菌可以快速启动发酵,在24 h乳酸菌总数达到9.44 lg cfu/mL,迅速降低pH值,抑制腐败菌的生长,植物乳杆菌能够形成更低...     

明串珠菌的碳代谢调控研究进展

明串珠菌是韩国泡菜、德国泡菜和腌菜等发酵蔬菜中的优势细菌,保持产品的质量中起着重要作用,在各种乳制品中也有它的应用,因此近年来在内地对其的研究开始活跃.为明串珠菌的碳代谢调控研究提供第一手资料,该文综述了明串珠菌的碳代谢途径、发酵调控和基因表达调控.     

明串珠菌的基因研究进展

明串珠菌是韩国泡菜、德国泡菜和腌菜等发酵蔬菜中的优势细菌,保持产品的质量中起着重要作用,在各种乳制品中也有其的应用,因此近年来在内地对它的研究开始活跃。该文论述明串珠菌的有用蛋白质基因的克隆与异源表达、对明串珠菌的遗传转化和染色体改造、基因组等方面的研究进展,为今后的明串珠菌基因研究提供借鉴。     

明串珠菌电转化的优化

为了构建食品级基因工程受体菌,课题对明串珠菌的电转化条件进行了优化.以大肠杆菌-明串珠菌穿梭质粒pCW4为载体,以明串珠菌为受体,文章优化了细胞壁处理方式、电击参数、复苏时间等与电转化相关的因素.结果表明:用氨苄浓度0.7μg/mL的MRS培养基培养明串珠菌至OD600为0.5左右,以PBS作缓冲液,收获制成感受态细胞,与1μg DNA混合,在电场强度12 kV/cm、电阻200 Ω、电容25μF下电击转化,以含80 mmol/L MgCl2的MRS培养基复苏培养3h,得到最高的转化效率为1.75×105 cfu/μg DNA.     

肠膜明串珠菌在苹果酒苹果酸乳酸发酵中的应用探讨

通过在苹果酒中添加肠膜明串珠菌启动苹果酸乳酸发酵,研究了温度、pH和酒精度等因子对苹果酸-乳酸发酵的影响表明,肠膜明串珠菌能够启动苹果酸-乳酸发酵,其中温度、pH和酒精度均对苹果酒的柔和指数和感官评价有显著影响,不同发酵条件下酿造的苹果酒柔和指数在1.33～7.94之间,感官评分在73.7～91.3之间.添加肠膜明串珠菌后,苹果酸的浓度变化在322.45mg/L～692.44mg/L之间,pH值提高了约0.06～0.11,苹果酒的口感变得柔和,风味得到明显改善.     

产甘露醇菌株的育种研究进展

甘露醇又称D-甘露糖醇,其作为一种功能性糖醇被广泛应用于医药、食品行业中。同时也应用于涂料、纺织和日化工业等方面。近几年,微生物发酵法成为制备甘露醇的研究热点。利用微生物发酵法制备甘露醇需要有适宜的菌株,本文从自然选育,诱变育种以及基因工程改造菌株三个方面对制备产甘露醇的菌株育种研究进行了综述,并对其前景进行了展望。      

假肠膜明串珠菌甘露醇脱氢酶基因的克隆及表达

利用聚合酶链式反应从假肠膜明串珠菌中扩增出甘露醇脱氢酶（mannitol dehydrogenase,MDA）基因的结构基因,克隆入表达载体pETDuet-1,构建了甘露醇脱氢酶表达质粒pETDuet-1-mdh,将其转化进入大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达。假肠膜明串珠菌甘露醇脱氢酶结构基因长度为1 017 bp,重组甘露醇脱氢酶基因在大肠杆菌内成功表达,其蛋白质分子质量为36.0 kD;重组甘露醇脱氢酶活力为0.15 U/mg pro,高于假肠膜明串珠菌中甘露醇脱氢酶活力0.03 U/mg pro。     

明串珠菌SK24.002发酵制备水溶性多糖的初步研究

利用明串珠菌SK24.002发酵制备水溶性多糖,研究了该水溶性多糖的分子量分布及影响菌体生长和多糖合成的主要条件。结果表明,该水溶性多糖相对分子量为2.4×106,分子量分布集中,蔗糖浓度对其分子量分布影响不大。确定了影响水溶性多糖的主要因素:蔗糖140g/L、酵母粉3.75g/L、胰蛋白胨3.75g/L、接种量5%、初始pH7.5、温度30℃、装液量100mL/250mL。在此条件下发酵20h时,水溶性多糖含量达到最大,为51.40g/L。      

发酵法产丁醇的研究进展

近年来,由于国际市场油价大幅上升和供应不稳定,并且环境污染问题日益突出,利用可再生原料发酵产丁醇受到广泛关注,丁醇作为一种清洁可持续的燃料用于能源工业具有诱人的潜力和前景。但目前丁醇生产成本较高,主要表现在原料成本高和产物浓度低两个方面。该文从非粮生物质原料的选择、选育或构建高产丁醇的菌株、发酵丁醇的分离及新工艺的选择等方面综述生物发酵生产丁醇的现状,旨在为降低丁醇生产成本提供参考,进而推动生物法丁醇产业的发展。     

近平滑假丝酵母补糖发酵及糖氮代谢对产甘露醇的影响

为了探究近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)生长及代谢过程中对碳源和氮源的需求,本文对发酵各阶段的碳源和氮源变化利用情况进行检测,并设定一个空白对照组和四个不同时期的补糖实验组进行研究,分别观测各实验组各时期生物量和甘露醇产量。结果表明,在72 h时进行补糖为最佳时期,甘露醇产量达到最大值为60.28 g/L,相比于空白对照组高出19.82%。通过补糖工艺的研究,在氮源和碳源耗尽时,补糖可以促进甘露醇的产生。本文为以后的工业化生产提供了理论依据。     

微生物发酵生产高品质番茄红素的研究进展

番茄红素是一种良好的抗氧剂,能减小活性氧自由基对细胞的氧化损伤、预防癌症、降低血液中胆固醇水平、预防心脑血管疾病,已被广泛应用于食品添加剂、化妆品和医药领域,市场前景良好。该文综述了用重组大肠杆菌和三孢布拉霉菌体发酵生产天然高品质番茄红素的研究现状,并对用微生物发酵生产番茄红素的前景作出展望。