高F值玉米低聚肽生产工艺条件的研究

本文研究了从玉米蛋白中酶解生产高F值低聚肽的生产工艺，确定了玉米蛋白预处理、酶解、精制等工艺条件，对得到的样品进行高压液相色谱和氨基酸组成分析可知，本实验条件下肽的分子量在200-1500道尔顿之间，游离氨基酸含量4．8％，F值为21．4，低聚肽含量大于70％。     

紫苏高F值低聚肽的制备研究

以紫苏粕为原料通过酶法水解制备紫苏高F值低聚肽,探讨Alcalase蛋白酶对紫苏粕中蛋白质水解的进程曲线。结果显示其最适条件为底物质量浓度5%(g/100ml)、pH8.5、温度60℃、酶添加浓度5ml/100g底物、时间240min,此水解液进一步用木瓜蛋白酶水解,水解条件为pH7.0、温度55℃、加酶量1%、时间4h,然后用活性炭吸附去除低聚肽中的芳香族氨基酸,吸附条件为pH4.0、温度40℃、活性炭用量7%(m/V)、时间3h,最后得到F值可达79.25的紫苏低聚肽。     

玉米高F值低聚肽的生理功能及其制备工艺

阐述了玉米高F值低聚肽的生理功能、制备工艺及其应用。玉米高F值低聚肽具有高含量支链氨基酸低含量芳香族氨基酸的特点,有抗疲劳、辅助治疗肝性脑病、改善病人的蛋白质营养状况等功能,其制备工艺主要包括:玉米蛋白粉经脱脂脱杂、酶解、去芳香族氨基酸、脱盐纯化得到生物活性寡肽。     

肝性脑病防治肽-高F值低聚肽的研究

支链氨基酸与芳香族氨基酸摩尔数之比称为F值（Fischer ratio）。作叙述了已报道的高F值制品经注射或口服均可改善肝性脑病病人血液氨基酸的功效,并对其药理及临床实效进行了简介。本研究以玉米黄粉为原料,经过二次选择性酶解,制成低聚肽混合物,并以活性炭选择性地分除芳香族氨基酸或肽,从而制得F值＞20的高F值功能低聚肽混合物,其得率（产品含氮量：黄粉含氮量）为15％左右,无苦味.研究以大鼠进行的动物试验证实了所得产品具有防治肝性脑病的功效,其效果等于（或微优于）市售相应的晶体氨基酸的配制品。预计本研究所得产品的成本将远低于市售。     

活性炭色谱法分离芳香族氨基酸制备高F值蛋清低聚肽混合物的研究

研究了18种活性炭的吸附能力,选出对芳香族氨基酸具有较强吸附能力的活性炭品种,研究了其吸附条件和洗脱条件。测定了高F值蛋清低聚肽的氨基酸组成,计算出其F值为20,凝胶过滤层析法测其分子量分布在300～600之间。     

活性炭色谱法分离芳香族氨基酸制备高F值蛋清低聚肽混合物的研究

研究了18种活性炭的吸附能力,选出对芳香族氨基酸具有较强吸附能力的活性炭品种,研究了其吸附条件和洗脱条件。测定了高F值蛋清低聚肽的氨基酸组成,计算出其F值为20,凝胶过滤层析法测其分子量分布在300～600之间。      

榆耳高F值低聚肽的制备及氨基酸组成分析

以榆耳为原料,提取榆耳中蛋白质,NH4Cl盐析,胰凝乳蛋白酶水解,羧肽酶去除芳香族氨基酸,收集10.6ku～2.0ku超滤膜截留范围的低聚肽,测其氨基酸组成及F值.结果表明,榆耳低聚肽的F值为22.67,支链氨基酸组成为是缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸,含量为34.8％.     

茶蛋白制备高F值低聚肽的定向酶切工艺研究

研究了以茶蛋白为原料制备高F值低聚肽过程中的酶解工艺,采用两步定向酶切的方式,探讨合适的蛋白酶种类,并通过单因素试验考察相关工艺条件对酶切效果的影响。结果表明:碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶联用对茶蛋白的水解效果较好;一级定向酶切的最适工艺条件为:底物浓度5%、加酶量(E/S)4%、反应液pH 9.0、反应温度50℃、反应时间3h,此条件下茶蛋白的水解度达到36.02%;二级定向酶切的最适工艺条件为:加酶量(w/v)0.2%、反应液pH值6.5、反应温度55℃、反应时间2h,此条件下水解液的OD220/OD260值达到2.53。该试验为后续水解液分离纯化制备高F值低聚肽产品奠定了基础。     

活性炭吸附法制备高F值寡肽混合物的初步研究

采用活性炭吸附法吸附芳香族氨基酸制备高F值寡肽,从6种活性炭中筛选出1种吸附效果最好的活性炭,并通过单因素试验和正交试验优化活性炭吸附条件,经氨基酸自动分析仪测定,F值由原来的3.32到29.8。     

食源性高F值寡肽的制备及护肝功效研究进展

高F值寡肽广泛存在于自然界动植物中,是一种来源丰富、天然环保、无副作用的优质肽源,具有抗疲劳、抗氧化、醒酒、辅助治疗肝病及苯丙酮尿症等多种生物活性。高F值寡肽因其支链氨基酸含量较高,能够逆转肝病患者体内支链氨基酸与芳香族氨基酸比例失衡现象,在辅助治疗慢性肝病及其多种并发症方面起到了重要作用。主要对食源性高F值寡肽的蛋白原料、制备与分离纯化方法、护肝功效及相关作用机制进行了综述,重点介绍植物蛋白、动物蛋白中的水产品蛋白和乳源性蛋白几种原料蛋白,酶解法和微生物发酵法两种高F值寡肽的制备方法,膜分离法、活性炭吸附法和色谱分离法几种分离纯化方法,以及高F值寡肽的护肝功效和发挥护肝功效的三种途径,旨在为提高食源性高F值寡肽开发及其在食品医药领域中的应用提供参考。     

食物源蛋白高F值寡肽的制备及应用研究进展

寡肽一般由3～9 个氨基酸残基组成,高F值寡肽是指寡肽混合物中支链氨基酸（亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸）与芳香族氨基酸（苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸）的物质的量比值（F值）大于20的肽,研究表明高F值寡肽具有多种生理活性。本文综述了食物源蛋白高F值寡肽制备原料选择、主要制备工艺及其生理活性研究进展,并对其未来研究趋势进行展望。     

活性碳色谱法分离制备高F值寡肽混合物

比较了１８种颗粒及粉状活性碳吸附和解脱芳香族氨基酸的能力。找出了较适宜的活性碳品种、吸附条件和解脱溶液。显示了活性碳色谱法分离制备高Ｆ值寡肽混合物的有效性。测定了高Ｆ值寡肽混合物的氨基酸组成，计算出Ｆ值＞２０。并用ＨＰＬＣ测定了相对分子质量分布。     

肽酶体系生成高F值寡肽机制的探讨

高F值寡肽是一种由高支链氨基酸含量与低芳香族氨基酸含量组成的小肽体系。因为它独特的氨基酸组成,使其具有独特的生理功能。本文概述了高F值寡肽的生产现状及通过酶法生成高F值寡肽的机制。针对目前酶法生产高F值寡肽制品存在的问题,就内、外肽酶等肽酶体系实现高效生成高F值寡肽的机制进行了探讨。     

马氏珠母贝高F值寡肽在Caco-2细胞中吸收的初步研究

采用Caco-2单层细胞模型体外模拟马氏珠母贝高F值寡肽(PHFP)小肠吸收,研究结果显示:无论是AP面→BL面还是BL面→AP面,PHFP的吸收量均呈增加趋势。添加P-糖蛋白的专属抑制剂维拉帕米后,AP→BL的渗透系数由原来的6.83×10-7cm/min提高到8.16×10-7cm/min,而BL→AP渗透系数由8.84×10-7cm/min降低到2.20 10-7cm/min,说明PHFP溶液在Caco-2细胞中的转运存在外排泵的作用。并且,PHFP在Caco-2细胞转运过程中被细胞中所存在的代谢酶所代谢,而添加维拉帕米后,PHFP的代谢量有所降低。     

马氏珠母贝高F值寡肽初步分离纯化及氨基酸组成分析

采用胰酶酶解马氏珠母贝肉蛋白,并利用活性炭吸附结合凝胶过滤层析得到高F值寡肽制品(PHFP)。进一步采用RP-HPLC对马氏珠母贝高F值寡肽制品进行初步分离分析,并且测定了各分离组分的氨基酸组成。研究结果显示,PHFP分子量分布主要集中在15～1 000 u。分离得到3个组成部分中PHFPb和PHFPc的支链氨基酸含量分别提高到30.2%和29.5%。PHFPa、PHFPb和PHFPc分别占PHFP的41.3%、38.8%和19.7%。     

不同分子特性玉米蛋白高F值活性肽的制备及其模拟消化吸收

以玉米黄粉为原料,通过碱性蛋白酶和风味蛋白酶复合酶解制备玉米蛋白高F值活性肽(High Fischer ratio peptide,HFRP),同时根据分子量、电荷性和疏水性差异将HFRP进行分离纯化,并对其吸收特性和耐胃肠消化特性进行探究。结果表明:通过复合酶解法对玉米黄粉进行水解,得到HFRP(F值=26.29)。将HFRP分别按照分子量、电荷性和疏水性进行分离、收集,得到12种组分。通过构建Caco-2细胞体外吸收模型,研究不同分子特性组分的吸收状况,采用质谱扫描鉴定出质荷比(m/z)分别为203.1409、229.2980、226.9517、284.2966的高吸收短肽LA、IP、PL、HQ;通过研究不同分子特性组分的胃肠消化状况,采用质谱扫描鉴定出质荷比(m/z)分别为226.9517、284.2966的耐消化短肽PL和HQ。短肽PL和HQ分子量小,疏水性高,在溶液中带有正电荷,具有优先吸收和耐胃肠消化的特点。本研究为玉米蛋白高F值活性肽的开发提供了理论依据。     

Changes in tissue abundance and activity of enzymes related to branched-chain amino acid catabolism in dairy cows during early lactation

Branched-chain α-keto acid dehydrogenase (BCKDH) complex catalyzes the irreversible oxidative decarboxylation of branched-chain α-keto acids. This reaction is considered as the rate-limiting step in the overall branched-chain amino acid (BCAA) catabolic pathway in mammals. For characterizing the potential enzymatic involvement of liver, skeletal muscle, adipose tissue (AT), and mammary gland (MG) in BCAA metabolism during early lactation, tissue and blood samples were examined on d 1, 42, and 105 after parturition from 25 primiparous Holstein cows. Serum BCAA profiles were analyzed and the mRNA and protein abundance as well as the activity in the different tissues were assessed for the BCAA catabolic enzymes, partly for the branched-chain aminotransferase and completely for BCKDH. Total BCAA concentration in serum was lowest on d 1 after parturition and increased thereafter to a steady level for the duration of the experiment. Pronounced differences between the tissues were observed at all molecular levels. The mRNA abundance of the mitochondrial isoform of branched-chain aminotransferase (BCATm) was greatest in AT as compared with the other tissues studied, indicating that AT might be an important contributor in the initiation of BCAA catabolism in dairy cows. From the different subunits of the BCKDH E1 component, only the mRNA for the β polypeptide (BCKDHB), not for the α polypeptide (BCKDHA), was elevated in liver. The BCKDHA mRNA abundance was similar across all tissues except muscle, which tended to lower values. Highest BCKDHA protein abundance was observed in both liver and MG, whereas BCKDHB protein was detectable in these tissues but could not be quantified. Adipose tissue and muscle only displayed abundance of the α subunit, with muscle having the lowest BCKDHA protein of all tissues. We found similarities in protein abundance for both BCKDH E1 subunits in liver and MG; however, the corresponding overall BCKDH enzyme activity was 7-fold greater in liver compared with MG, allowing for hepatic oxidation of BCAA transamination products. Reduced BCKDH activity in MG associated with no measurable activity in AT and muscle may favor sparing of BCAA for the synthesis of the different milk components, including nonessential AA. Deviating from previously published data on BCAA net fluxes and isotopic tracer studies in ruminants, our observed results might in part be due to complex counter-regulatory mechanisms during early lactation.     

寡肽研究进展

肽是由氨基酸组成蛋白质结构与功能片段,肽链上氨基酸残基数在10个以内的称之寡肽,寡肽具有重要生理功能。该文介绍寡肽在生物体内吸收机制及特点,综述寡肽营养作用,并对高F值寡肽和大豆寡肽研究进展进行阐述。     

高固液比体系中酶催化合成Z-Phe-Leu-OMe的研究

以模型二肽Z—Phe—Leu—OMe的合成为对象讨论了高固液比条件下酶催化体系的性质。研究了固液比高低对二肽产率的影响，测定了高固液比条件下随着反应进行体系pH的变化，尝试提出该类体系pH变化的机理，并采用KHCO3和CaCO3调节该体系的pH来提高催化效率。