土壤中产碱性蛋白酶细菌的筛选及产酶条件优化

为筛选碱性蛋白酶的高产菌株，利用酪蛋白水解圈作为筛选模型，从沈阳化工学院附近农田土壤中筛选得到了产碱性蛋白酶能力较高的细菌B1．对其产酶条件进行优化，最终得到培养基中最佳碳源为质量浓度60g／L葡萄糖，最佳氮源为质量浓度40g／L NaNO3，最适初始pH值为9．0，最适溶氧量为50mL摇瓶装20mL培养基，最适接种量为质量浓度200g／L，且培养基中添加质量浓度为0．5g／L的K^＋有利于菌株B1产碱性蛋白酶．该方法简便、直观，很适合大量、快速筛选．     

产脱落酸真菌的筛选及其发酵条件研究

利用马丁-孟加拉红培养基由20份土壤样品和2份植物病叶样品中分离出57株真菌，分别对其进行液体培养．通过各菌株发酵液抑制莴苣种子发芽的方法筛选得到-株脱落酸产生菌NX-53，通过L9（3^4）正交实验对其产酸条件进行优化，得到该菌株产脱落酸的培养基配方和培养条件：葡萄糖25g／L，维生素B1 1．25mg／L，谷氨酸单钠盐3．0g／L，MgSO4·7H2O 0．2g／L，KCl 0．5g／L，CaCO3 5g／L，KH2PO4 0．8g／L，FeSO4·7H2O 0．5mg／L，ZnSO4·7H2O 2．5mg／L，CuSO4·5H2O 4mg／L，250mL摇瓶装液量50mL，28℃、150r／min培养7d．优化条件下菌株NX-53的脱落酸产量可达276mg／L．     

聚γ-谷氨酸高产突变株的选育及摇瓶发酵条件

对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)进行亚硝基胍和^60Co诱变，获得一株)γ-PGA的高产菌株C9．γ-PGA质量浓度由9．44g／L提高到19．76g／L，提高了109％．突变株传代10次，质量浓度保持基本稳定．通过正交试验和单因素试验对发酵培养基及发酵条件进行了优化．当发酵培养基中含柠檬酸12g／L、甘油80g／L、L-谷氨酸23g／L、氯化铵7g／L，pH7．0，装液量为50mL／250mL三角瓶。接种体积分数为5％时。37℃摇瓶发酵72h。γ-PGA达到23．32g／L。     

重组大肠杆菌生产hEGF发酵条件的研究

在摇瓶条件下,研究了发酵条件对重组大肠杆菌JLU菌株hEGF表达的影响．研究表明,最适的发酵条件是温度在32℃、pH6．6～7．3、初始葡萄浓度5g／L、装液量30mL／250mL三角瓶,并发现在发酵培养基中用0．5g／L甘油代替5g／L葡萄糖作为发酵碳源会进一步提高hEGF的表达水平,提高幅度可达15．5％．     

表皮葡萄球菌高产蛋白酶培养基的构建

对表皮葡萄球菌C8菌株产蛋白酶用培养基的组分进行了优化研究，结果经逐因子试验、Plackett-Burman设计筛选出3个主效因子即KH2PO4、CaCl2和牛肉膏，运用响应面法得到的优化浓度依次为2．24g／L．0．34g／L、8．86g／L，在此基础上构建了专用产酶培养基，并使蛋白酶活力达到31．05U／mL。     

重组人生长激素在毕赤酵母中的表达研究

通过单因素分析和正交实验法优化高密度发酵培养基和诱导条件,根据优化结果指导发酵罐发酵．得到改良BSM培养基的最佳配比为甘油30g／L、酵母粉14g／L、K2SO4 13g／L、MgSO4·7H2O11g／L、CaSO4 0．3g／L、PTM14．4mL、0．1mol／L磷酸盐缓冲液（pH=6．5）;得到摇瓶培养最佳诱导条件为种龄24h,诱导时间30h,甲醇浓度2％,pH6．3～6．9．瑞士Bioengineering公司L1523型发酵罐发酵结果显示,细胞光密度（OD600）达到294,rHGH表达量最高达到0．54g／L．     

产耐温漆酶菌的筛选及培养基优化

采用愈创木酚CPDA平板法对由广州地区多个不同场所采集的土样进行了菌种分离纯化,筛选出1株产耐温漆酶的菌株Tr0702,通过形态学观察初步判断该菌为木霉属．该菌所产漆酶的最适反应温度为65℃,在70℃下保温60min后残余酶活保留60％以上;发酵培养基经响应面法优化后关键参数如下：可溶性淀粉44．40g／L、吐温（80）9．00g／L、愈创木酚15．04mmol／L,以此优化培养基发酵酶活可达50．15U／mL     

酪酸梭状芽孢杆菌发酵培养基的优化

验证了高层半固体琼脂试管法比固体琼脂平板法更具有良好的厌氧性能,能准确地对酪酸梭状芽孢杆菌进行活菌计数．通过对发酵培养基中不同碳源、氮源、生长因子进行单因素研究,L9（3^3）正交实验进一步优化得到最佳培养基组成为（g／L）：胰蛋白胨10,葡萄糖8,酵母膏4．用此培养基在37℃培养24h,活菌数可达4．1×10^8mL^-1．培养基中添加K2HPO45g／L、MgSO4-7H2O0．2g／L、MnSO4·H2O0．2g／L、CaCO31g／L培养32h时,酪酸梭状芽孢杆菌芽孢转化率可达95％．     

尖孢镰刀菌拮抗细菌的筛选

报道从土壤中分离到1株对棉花枯萎病致病菌尖孢镰刀菌（Fusrium oxysporum）的菌丝生长及孢子萌发均具有较强拮抗作用的革兰氏阴性细菌J4。并对该菌株进行了形态及部分生理生化鉴定试验。16srRNA序列分析结果表明，该菌株与国际上已报道的溶杆菌属（Lysobacter）中的L．antibioticus细菌的16srRNA序列同源性达到99％。J4菌的培养条件实验结果表明，最佳培养基配方为：葡萄糖10．6g／L，尿素3g／L，NaCl0．5g／L，MgSO4 0．5g／L。在该培养基中J4菌发酵液的抑菌活性最大，J4菌所产生的抗性化合物耐热性较差。     

响应面法优化高选择性羰基还原酶产生菌Saccharomyces cerevisiae B5的培养基组成

借助于SAS软件,采用部分因子实验设计（FFD）和响应面分析法（RSM）,对能够产生高选择性羰基还原酶的菌株Saccharomyces cerevisiae B5进行发酵培养基的优化．部分因子实验设计结果表明葡萄糖、硫酸铵、硫酸镁及磷酸氢二钾为影响Saccharomyces cerevisiae B5产生高选择性羰基还原酶的四个显著性因素．通过响应面分析法,得到最优发酵培养基组成为：葡萄糖29．7g／L,酵母粉3g／L,硫酸铵4.784g／L,无水硫酸镁0.2672g／L,K2HP04·3H2O 1.026g／L,KH2PO4 1g／L．在优化的培养基条件下,羰基还原酶活力最高可迭1498．2U／g。     

混菌完整细胞生物合成共轭亚油酸的营养条件

以MRS作为基础培养基,采用单因素及正交试验对植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的完整细胞共同合成共轭亚油酸的营养条件进行了研究。通过试验得到混菌完整细胞生物合成共轭亚油酸的最佳营养条件:MRS培养基,葡萄糖20g/L,蛋白胨15g/L,牛肉膏5g/L,酵母膏5g/L,无水乙酸钠7.5g/L,吐温-80 1.5g/L,柠檬酸二铵3g/L,K2HPO43.93g/L,MgSO40.58g/L,MnSO40.3g/L。在此条件下,共轭亚油酸的合成量为81.38μg/mL,比使用基础培养基时的合成量增加了11.34μg/mL。     

Production and characterization of biosurfactant from Bacillus subtilis CCTCC AB93108

The production and properties of the biosurfactant synthesized by Bacillus subtilis CCTCC AB93108 were studied. The maximum concentration of the surfactant is 1.64 g/L when the bacteria grow in a medium supplemented with glucose as carbon sources. The isolated biosurfactant is a complex of protein and polysaccharide without lipids. It reduces the surface tension of distilled water to 45.9 mN/m, and its critical micelle concentration (CMC) is 2.96 g/L. It can stabilize emulsions of several aromatic and aliphatic hydrocarbons, such as benzene, xylene, n-pentane, n-nonane, gasoline and diesel oil. It presents high emulsification activity and stability in a wide range of temperature (4-100℃) and a long period of duration.     

腈水合酶耐底物突变株的筛选及产酶条件优化

采用紫外诱变和梯度平板法筛选出耐底物的突变株,通过单因素实验考察发酵液起始pH值、装液量、发酵周期、接种量对产酶的影响,确定最佳的发酵条件;采用均匀设计实验优化发酵培养基。筛选出．株能耐受4％丙烯腈的腈水合酶产生菌,在最佳产酶条件下,耐底物突变株的腈水合酶酶活达到11．5MU／mL,与优化前相比,酶活提高了49．35％。腈水合酶耐底物突变株的最佳发酵条件为：初始pH7．0、装液量16％、发酵周期58h、接种量10％。最佳发酵培养基配方为：ρ（葡萄糖）=26g／L,ρ（酵母膏）=2g／L,ρ（尿素）=4g／L,ρ（谷氨酸钠）=0．5g／L,ρ（K2HP04）=0．2g／L,ρ（KH2P04）=0．2g,／L,ρ（MgS04）=0．05g／L,φ（DXL）=0．5mL／L。     

姬松茸茵丝体深层液体发酵条件的优化

主要研究了姬松茸深层液体发酵培养条件对菌丝生物量和胞内多糖产量的影响．确定了最佳培养条件为：培养基中玉米粉加量3％,豆饼粉0．3％,250mL摇瓶装液量45mL,发酵温度25℃．在此培养条件下,胞内多糖产量达到7．26g／L．并通过培养基中添加8种中草药提取液,发现生地黄对姬松茸多糖产量有一定的提高作用,多糖产量可达7．83g／L．     

水产养殖益生菌CW9的鉴定及发酵条件优化

海水养殖益生菌CW9是一株分离自连云港甲壳类动物养殖水体的益生菌。通过16SrDNA测定和生理生化反应对该菌进行了鉴定,确定为节杆菌属,故该菌命名为Arthrobacter sp.CW9。对培养基配方和培养条件进行优化后的结果为:葡萄糖8g/L,蛋白胨5g/L,酵母膏3g/L,NaCl 10g/L,pH 7.5,温度26℃,接种量为2%以及摇床转速为200r/min,培养21h后,获得最大的细胞浓度达6.90×1010 cfu/mL。与出发条件相比,细胞浓度提升显著,为该菌株的工业化应用奠定了基础。     

鼠李糖乳杆菌L7-13增菌培养基的优化

对分离到的鼠李糖乳杆菌L7-13进行增菌培养研究：采用单因素实验和正交试验的方法,通过对其吸光度和活菌数的测定来优化鼠李糖乳杆菌L7-13的培养基.结果表明：葡萄糖65 g/L、酵母粉15 g/L、牛肉粉28 g/L、大豆蛋白胨30 g/L、KH2PO43 g/L、无水乙酸钠3 g/L、柠檬酸铵2 g/L、Tween80 1.5 mL/L、MgSO4.7H2O 1.0 g/L、MnSO4.4H2O 0.5 g/L,培养28 h,所得鼠李糖乳杆菌L7-13的最大菌体密度约1010cfu/mL.此增殖优化培养基适于鼠李糖乳杆菌L7-13的生长繁殖.     

一株产蓝色素放线菌的筛选及发酵研究

从土壤中筛选到1株蓝色素产量较高的放线菌,命名为Cya-5.对蓝色素发酵条件进行研究,结果显示发酵培养基的配方为甘油20 g/L、KNO31 g/L,K2HPO40.5 g/L,MgSO4.7H2O 0.5 g/L,FeSO4.7H2O 0.01 g/L,NaCl 0.5 g/L,pH=8.5,装液量为100 mL/250 mL三角瓶、30℃发酵96 h,发酵液的A590总值达到12.02.利用碱沉法提取发酵液中的色素物质,粗提物色价可达到45.8.     

高效表达AIM工程菌的发酵培养基及发酵条件优化

为了进一步提高工程菌的载脂蛋白AI米兰突变体（AIM）的表达量,降低发酵成本,通过碳氮源优化实验并结合正交实验筛选出该工程菌产A1M的最适培养基为（g／L）：蔗糖10,酵母粉10,硫酸铵6和NaCl10;最适发酵条件为：装液量30mL,接种量8％,诱导时机A600 1．0,诱导剂浓度0．8mmol／L,诱导时间6h．在此优化的条件下,A1M的表达量为2．26g/L,是未优化条件下的1．58倍．     

产海藻糖酵母的培养条件优化研究

对产海藻糖酿酒酵母进行培养条件优化,得到的最适条件为:每升发酵液中葡萄糖10 g,酵母膏7.5 g,尿素7.5 g,KH2PO42.5 g,Na2HPO42.5 g,微量元素液7.5 mL,发酵初始pH为7.0,对数生长期培养温度选择30℃,稳定期培养温度37℃,装液体积分数40%。摇瓶优化后海藻糖质量比为152 mg/g,约为优化前的2.3倍。选用最优条件在5 L发酵罐中进行培养,培养过程中两次补料,确定最佳培养时间为52 h,在该时间海藻糖产量为1 072 mg/L,比摇瓶中培养的最高值831mg/L高出241 mg/L。