腊肠中植物成分实时荧光PCR定性检测方法

食品中掺假掺杂是当前食品检验工作的一个重要方面。本文通过应用实时荧光PCR技术,建立了鉴别腊肠中植物成分的方法,和常规PCR比特异性强,简便快速,同时实验采用完全闭管检测,降低了污染机会,为腊肠中植物成分的检测提供了新方法。     

杏仁产品杏仁成分的PCR检测方法研究

建立了应用PCR技术鉴别杏仁产品中的杏仁成分的方法.杏仁产品经前处理后,用酚仿抽提DNA,提取时间为2h左右,提取所得的DNA浓度和A260/A280均达到了PCR的要求.该方法快速简便,不仅可以检测杏仁产品的DNA,且可检测到杏仁产品中0.1%的其它植物成分.     

牛奶中植物成分的PCR检测方法研究

建立了应用PCR技术鉴别牛奶饮料中植物成分的方法.将酚仿抽提DNA的方法与前处理相结合,得到了一种快速简便的从牛奶中提取DNA的方法,整个DNA提取的过程时间为2h左右.分析发现提取的牛奶饮料DNA完全可以进行PCR检测,并且该方法可检测到牛奶中掺入的植物成分低至O.1%.     

食用植物油中动物源性成分PCR检测方法的建立

本文建立了应用PCR技术快速鉴别食用植物油中动物源性成分的方法。以食用植物油中掺入的动物源性基因为靶标,自行设计16S rRNA基因通用引物,同时选用动物物种特异性引物进行PCR扩增,分别得到相应的目的片段。通过三对16S rRNA基因通用引物,建立了从食用植物油中快速检测是否含有动物源性成分的方法;利用所选的动物物种特异性引物,进一步建立了从食用植物油中鉴定猪、牛、羊、鸡、鱼5种动物源性成分的方法,此方法能检测出含有0.1%(m/m)动物源性成分的植物油。     

可降解亚硝酸盐植物乳杆菌在广式腊肠发酵中的应用

目的:以可降解亚硝酸盐的植物乳杆菌为发酵剂,分析探讨广式腊肠制作中使用该发酵剂的产品特征。方法:研究两株植物乳杆菌分别对2%氯化钠和300mg/kg亚硝酸钠的耐受性,以及在MRS培养基中降解亚硝酸盐的能力。并以其中一株植物乳杆菌为发酵剂加入广式腊肠中,测定不同发酵时间产品的pH值、水活度以及乳酸菌、霉菌和大肠菌的生长情况,与对照组进行比较,研究该发酵剂对发酵腊肠产品特征的影响。结论:将具有良好耐盐和耐亚硝酸盐能力,同时对亚硝酸盐具有较强降解能力的H1菌作为发酵剂加入腊肠后,降低了腊肠的pH值,同时对有害菌有明显的抑制效果,说明所选植物乳杆菌具有较好的环境适应性并显示出强大的酸化潜力,能通过抑制肠杆菌科的生长,提高微生物的安全性。因此,H1菌有望成为一种具有生物安全性的本土发酵剂。     

食品中若干植物源性成分的PCR检测

采用CTAB法提取豆奶粉、马铃薯、玉米、番茄及其制品样品中的总DNA,通过PCR方法检测大豆lectin、马铃薯patatin、玉米IVR、番茄PG等特异性内源基因,判断食品中是否含有大豆、马铃薯、玉米、番茄等植物源性成分。同时还进行了这些内源基因分别与核糖体18SrDNA或叶绿体rbcL基因之间的二重PCR分析。结果表明单PCR与二重PCR分析方法可靠稳定,可应用于食品中的植物源性成分的鉴定。     

天然皮革定性PCR检测方法的研究

采用改进的DNA提取方法,从经过鞣制的皮革中提取DNA,大量粗提取后纯化,使DNA在质和量上都达到做PCR的要求。利用PCR技术、DNA探针和实时荧光定量PCR等技术,对常见的几种皮革进行定性分析。对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,通过对比阳性样品、空白对照以及Marker的电泳条带位置,定性判断皮革的种类。     

双重PCR检测食品中的动物源性成分

建立了一种检测肉制品中动物源性成分的双重PCR技术,针对五种不同动物线粒体DNA中所含有的特异性基因分别设计引物,同时对脊椎动物所共有的保守基因进行引物设计,并将其作为体系中的内参照。用此技术可同时检测出肉制品中5种动物源性成分,检测灵敏度达到1%,能够适应市场化检测的需要。      

PCR法检测大豆加工食品中的转基因成分

通过分子生物学手段,以聚合酶链式反应(PCR)技术为基础,建立了检测大豆加工食品中转基因成分的方法。实验分别采用CTAB法和试剂盒(Kit)法对大豆锅巴、豆浆、豆奶粉、豆腐、豆腐丝等五种大豆加工食品中的DNA进行了提取,用内标基因Lectin对此两种方法的提取效果进行了比较,并以提取的DNA为模板,利用不同的引物分别对目标基因35S和NOS进行了PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明:Kit法的DNA提取效果优于改良CTAB法,上述五种大豆加工食品中均检测出35S启动子和NOS终止子,且均含有转基因成分。     

双重PCR检测食品中的动物源性成分

建立了一种检测肉制品中动物源性成分的双重PCR技术,针对五种不同动物线粒体DNA中所含有的特异性基因分别设计引物,同时对脊椎动物所共有的保守基因进行引物设计,并将其作为体系中的内参照.用此技术可同时检测出肉制品中5种动物源性成分,检测灵敏度达到1%,能够适应市场化检测的需要.     

Development and Use of Quantitative Competitive PCR Assay for Detection of Poultry DNA in Sausage

This study focused on the development and evaluation of a quantitative competitive polymerase chain reaction (QC-PCR) for detection and quantification of poultry DNA in sausage. PCR is well known to be quantitative if internal DNA standards are co-amplified together with the target DNA. A DNA competitor differing by 83 bp in length from the poultry target sequence was constructed and used for PCR together with the target DNA. Specificity of the new primers was evaluated with DNA from cattle and sheep. The results of QC-PCR showed that the percentage of contamination was in the range of 23.87–52.06%.     

水产品及其制品中大西洋鲑鱼实时荧光PCR检测方法建立

目的:三文鱼营养丰富,含有ω-3不饱和脂肪酸,深受大众喜爱,但存在产品标签标示错误、掺伪掺假、以次充好的现象.目前采用检测标准SN/T 3589.7-2013《出口食品中常见鱼类及其制品的鉴伪方法第七部》对鲑鱼成分检测,无法区分大西洋鲑鱼和其他种类的三文鱼.因此有必要建立一种用于区分上述几种三文鱼的快速检测方法.方法:...     

沙门氏菌多重PCR检测方法的建立

采用CTAB/NaCl法提取沙门氏菌及对照菌株的基因组DNA。对引物浓度、TaqDNA聚合酶用量进行优化,建立了沙门氏菌属特异基因-hut基因(495bp)、hilA基因(490bp)、invA基因(284bp)和hns基因(152bp)间的多重PCR检测方法,并进行了灵敏度测试。结果表明,建立的多重PCR检测结果与预期一致,二重PCR的检测灵敏度与单一PCR的一致,三重PCR检测灵敏度有所下降。     

基于Real-time PCR法检测乳粉中牛源性成分定量研究

基于Real-timePCR建立了乳粉中牛源性成分相对定量检测方法,并对牛的特异性引物与探针进行了特异性、灵敏度和稳定性测试。通过模拟不同浓度牛乳粉与马乳粉混合样本,根据其△Ct值的函数关系进行线性拟合进而绘制标准曲线,建立乳粉中牛源性成分的相对定量检测。结果显示,该方法的最低检测限为0.000 01 mg/mL,回收率为91.11%～119.2%,组间变异系数≤0.58%、组内变异系数≤1.44%。说明该方法在特异性与稳定性上适用于乳粉中牛源性成分及含量的掺假检测。