共振瑞利散射测定痕量甲胎蛋白研究

磷钼杂多酸与甲胎蛋白(AFP)结合,会引起共振瑞利散射(RRS),最大RRS峰均位于480 nm,在一定浓度范围内,AFP浓度与散射强度成正比。本文对该反应体系的适宜反应条件、主要影响因素、散射强度与AFP浓度的关系、方法的灵敏度等进行了比较研究。发现不同的杂多酸对于甲胎蛋白的检出限(3σ)在5.2-78 ng/mL之间,其中以磷锑钼酸体系灵敏度最高,对于甲胎蛋白(AFP)的检出限为2.5 ng/mL。该方法具有操作简便、灵敏度高、线性范围宽等优点。考察了共存物质的干扰影响,获得了满意的结果。     

基于普鲁士蓝/聚多巴胺/纳米金纳米粒子构建的电流型免疫传感器

首先制备普鲁士蓝纳米粒子(PB),通过利用多巴胺(DA)自氧化聚合形成聚多巴胺膜(Dopa)的特性,在PB纳米粒子表面包覆成膜,有效增加PB的稳定性,并在氯金酸溶液中原位还原沉积金纳米粒子,利用纳米金固定化甲胎蛋白抗体(anti-AFP),制得灵敏度高和稳定性好的无标记免疫传感器。采用透射电子显微镜(TEM)对纳米粒子进行表征,采用循环伏安法(CV)和交流阻抗法(EIS)考察修饰电极的电化学特性,实验结果表明,PB-Dopa-Au纳米粒子修饰的电极在实验过程中呈现出良好的氧化还原活性,对甲胎蛋白的检测范围为0.02~80 ng/mL检出限为0.01ng/mL。     

基于CS-Au NPs@GO/GCE构建电化学免疫传感器对甲胎蛋白的检测

利用氧化石墨烯(GO)较大的比表面积可以,采用电化学方法在其表面电沉积壳聚糖(CS)-金纳米粒子(Au NPs),制备CS-Au NPs@ GO复合材料。利用Au NPs对蛋白质的吸附作用及CS分子的-OH与蛋白质分子的-NH_2和-COOH结合作用,构建电化学免疫传感器,用于甲胎蛋白(AFP)的检测。在最优的条件下,运用电化学交流阻抗(EIS)和差分脉冲伏安法(DPV)等对传感器进行电化学表征。结果表明,构建的传感器表现出低的检测限和良好的抗干扰性,可以较好地用于AFP的快速检测。     

抗甲胎蛋白聚苯乙烯磁珠的制备

在磁流体存在下,进行苯乙烯-丙烯酸-马来酸酐-二乙烯基苯的共聚合,合成出粒径介于500～625nm、表面光滑、单分散的球形聚苯乙烯磁珠;磁珠耐酸碱,在浓度为1mol/L盐酸或氢氧化钠及氯化钠溶液中不凝集;控制丙烯酸用量可使磁珠表面羧基量达4 5mg/g。物理吸附法致敏磁珠的最佳条件为:包被用甲胎蛋白(AFP)抗体最适稀释度为:V(AFP抗体)∶V(磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液)=1∶200,最适pH=7 0,温度37℃,作用时间1h。     

应用木瓜酶消化抗甲胎蛋白单克隆抗体制备F(ab′)_2片断

用胃酶消化抗甲胎蛋白单克隆抗体（简称AFPMcAb）制备F（ab′）2片断，反应时间长，且F（ab′）2产量低。改用半胱氨酸活化的木瓜酶，在没有半胱氨酸存在的条件下消化AFPMcAb。反应4小时后．SDS－PAGE电泳结果显示，90％以上的AFPMcAb被降解为F（ab′）2片断、经S－200层析柱纯化后，F（ab′）2片断的回收率为理论值的48％。用双抗体夹心竞争抑制ELISA法测定经S－200纯化的AFPMcAbF（ab′）2片断的活性。其活性与完整的AFPMcAb相同。抑制效价均为1：6400。     

电化学免疫传感器在肿瘤标志物检测中的应用

肿瘤是严重威胁人类健康的疾病之一,降低恶性肿瘤死亡率的主要途径是早期诊断和治疗,肿瘤标志物在肿瘤早期诊断中具有重要的临床应用价值。随着纳米技术的迅猛发展,基于纳米材料构建的电化学传感器可实现对肿瘤标志物的检测,且具有检测灵敏度高、选择性好等优点。本文重点综述了碳纳米材料、贵金属纳米材料、氧化物纳米材料、量子点纳米材料等新型纳米材料电化学免疫传感器的构建原理及其在甲胎蛋白、前列腺抗原、癌胚抗原等肿瘤标志物检测中的应用,分析总结了基于不同纳米材料构建的电化学传感器在各种肿瘤标志物检测中的优缺点,并展望了电化学传感器的发展趋势,提出未来电化学免疫传感器应以微型化、高通量化和商业化为研究重点,并实现对肿瘤标志物的快速、在线、实时检测。     

基于银纳米颗粒免疫比色法检测甲胎蛋白

甲胎蛋白(AFP)是临床诊断肝细胞癌(HCC)最广泛使用的血清标志物，可用于HCC的诊断、治疗评估、预后预测和复发监测。基于银纳米颗粒(AgNPs)比色法是癌蛋白检测的一种崭新技术方案，具有操作简便、响应速度快、成本低的优点。实验中，将AgNPs标记抗体作为AFP检测的探针，当AFP存在时，AgNPs-抗体探针与目标蛋白发生免疫识别，形成纳米颗粒二聚体或多聚体等，导致AgNPs的颜色发生变化，可用肉眼或紫外光谱观察到。结果表明，随着AFP浓度的增大，AgNPs的颜色逐渐从黄色变为无色，且其最大紫外吸收峰值降低；在5～1 000 ng/mL范围内，吸光度和AFP浓度的对数之间存在较好的线性关系，检出限为7.4 ng/mL,并对AFP的检测表现出较强的选择性。     

第二批甲胎蛋白国家标准品的建立

甲胎蛋白（AFP）是一种与肝癌相关的抗原，在肝癌患者血清和4～6个月胎儿心血中含量较高。AFP对诊断原发性肝癌具有专一性，随着单克隆抗体技术的发展，目前我国已有几家生产单位正在研制AFP酶标诊断试剂盒，因此有必要建立AFP国家标准品。取30人份脐带血分离血清，用酶联法测定HBsAg和抗-HCV。选HBsAg和抗-HCV皆为阴性的血清29份混合后分装、冻干。冻干前随机抽5支安瓶，AFP湿重平均为0．505222g，分装误差上0.47％。冻干后充氮封口。8支安瓶干粉量平均为0。0346975g，水分平均含量为1．49％。国际AFP标准品批号72／225，每安…     

应用斑点免疫结合试验检测末梢血甲胎蛋白

早期肝癌病人的发现，其中最重要的手段是靠人群普查和对慢性肝炎患者血清甲胎蛋白（AFP）的定期检测，但目前检测AFP的方法还仅能检测血清的AFP，不利于人群的普查。而末梢血采集方便，成本低，人们能普遍接受，对早期发现病人有利，为此我们建立了检测末梢血（全血）AFP的斑点免疫结合试验（DIBA）方法并进行了现场普查验证。DIBA方法：采用大鼠抗人AFP单抗（HRASOZ）包被于硝酸纤维素膜（NC）上，用小滤纸直接蘸取末梢血（全血）后，将小滤纸紧贴到检测孔上，室温孵育正0而n，夹去纸片，加大鼠抗人A＊P单抗（HRA864）酶标…     

甲胎蛋白单抗修饰的载核心蛋白聚糖基因聚乳酸-羟基乙酸靶向纳米粒在H22荷瘤小鼠体内诱导的自噬作用

目的探讨甲胎蛋白(alpha fetal protein,AFP)单抗修饰的载核心蛋白聚糖(decorin,DCN)基因聚乳酸-羟基乙酸[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]靶向纳米粒对小鼠肝癌移植瘤生长的影响及与自噬的关系。方法建立小鼠肝癌移植瘤模型,将AFP单抗修饰的纳米粒AFPmAb-PLGA-rhDCN注入肿瘤中央及基底部,并以非特异Ig G-PLGArhDCN纳米粒、PLGA-空质粒及PBS缓冲液作为对照组。测量肿瘤体积及瘤重,免疫组化及Western blot法检测肿瘤组织中自噬相关基因Beclin1蛋白含量的变化。结果与3个对照组相比,AFPmAb-PLGA-rhDCN纳米粒组小鼠肿瘤生长缓慢,肿瘤体积和瘤重均明显减小(P0.05),肿瘤组织中Beclin1蛋白的表达均明显降低(P0.05)。结论AFP单抗修饰的载DCN基因纳米粒可抑制小鼠肝癌移植瘤的生长,其机制可能与抑制肿瘤细胞自噬作用有关。     

肝癌血清甲胎蛋白免疫磁珠酶联免疫法的建立

采用戊二醛两步交联法将辣根过氧化物酶(HRP)结合于甲胎蛋白(AFP)抗体上制成酶标AFP抗体,质量鉴定结果表明其比活性为200 U/mg,抗体效价为1∶256,满足酶联免疫吸附测定法(ELISA)要求;通过滴定法确定酶标AFP抗体的最适工作稀释度为V(酶标抗体)∶V(磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液)=1∶160;血清用量及孵育时间的影响实验表明:血清100μL、孵育时间2 h为最佳测定条件。建立了肝癌患者血清AFP免疫磁珠ELISA法的规范化检测程序。初步应用实验显示:免疫磁珠ELISA法测定受试健康组血清AFP值平均为3.9 ng/mL,肝癌组血清AFP值平均为316.7 ng/mL,对肝癌诊断阳性率为72.0%。批内及批间CV值分别为5.05%和8.20%。该项技术有较高的灵敏度和很好的特异性,操作简便、分离快速,适用于肝癌的初期快速诊断。     

AFPmAb-PLGA-rhDCN纳米粒对HepG2细胞迁移、侵袭的影响

目的探讨甲胎蛋白单抗修饰的荷载人重组核心蛋白聚糖质粒的聚乳酸-羟基乙酸[alpha-fetoprotein monoclonal antibody-poly(lactic-co-glycolic acid)-recombinant human decorin,AFPm Ab-PLGA-rhDCN]纳米粒对肝癌细胞株HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响。方法将HepG2细胞分为未处理组、用含空质粒的PLGA纳米粒处理的空白组及低、中、高浓度AFPmAb-PLGA-rhDCN纳米粒处理的实验组,采用划痕试验和Transwell小室试验检测纳米粒对细胞迁移和侵袭的影响,RT-PCR法检测RhoC基因mRNA转录水平,ELISA和Western blot法检测RhoC蛋白的表达水平。结果低、中、高浓度实验组细胞划痕宽度值及穿透膜的细胞数与未处理组及空白组相比,差异均有统计学意义(P均0.05);低、中、高浓度实验组细胞RhoC基因mRNA灰度值及蛋白浓度均低于未处理组及空白组,差异均有统计学意义(P均0.05)。结论 AFPm Ab-PLGA-rhDCN纳米粒对HepG2细胞的迁移和侵袭能力具有抑制作用,该抑制作用与下调RhoC分子的表达有关。     

大鼠骨髓间充质干细胞向肝样细胞的定向诱导分化

目的 探讨肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)和碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growthfactor,bFGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)分化为肝样细胞的可行性。方法取SD大鼠股骨骨髓,直接贴壁法分离纯化BM-MSCs,并体外传代,流式细胞术和成骨诱导对其进行鉴定。取第3代BM-MSCs,分为2组:实验组用HGF(20 ng/ml)和bFGF(10 ng/ml)进行诱导,阴性对照组不加诱导剂,倒置显微镜下观察细胞形态变化;RT-PCR法检测诱导后细胞甲胎蛋白(Alpha fetoprotein,AFP)和白蛋白(Albumin,ALB)基因mRNA的转录水平;免疫细胞化学染色法检测诱导后细胞的AFP和ALB蛋白的表达。结果第3代BM-MSCs表型标志和功能特性均符合MSCs的特点。BM-MSCs经HGF和bFGF诱导后呈肝样细胞形态。实验组细胞可检测出AFP和ALB基因mRNA的表达。实验组细胞诱导后第7天,AFP蛋白开始表达,第14天时表达降低,第21天时不表达;ALB于诱导后第14天出现表达,并随诱导时间的延长表达逐渐增加。结论 HGF和bFGF具有体外诱导BM-MSCs向肝样细胞分化的作用。     

脱氧核糖核酸酶1类似物3基因表达与肝癌临床病理特征及预后的相关性

目的探讨脱氧核糖核酸酶1类似物3(deoxyribonuclease 1 like 3,DNASE1L3)基因表达与肝癌临床病理特征及预后的相关性。方法收集NCBI(National Center for Biotechnology Information)GEO(Gene Expression Omnibus)公共数据库的225份肝癌组织样本基因表达谱数据集,将探针信号强度以2为底的对数值作为DNASE1L3的相对表达量,≥5为高表达组,5为低表达组。对样本的基因表达谱数据及对应的患者临床数据进行病理指标的回顾性分析和预后情况分析;通过基因集富集方法分析DNASE1L3表达相关的肿瘤基因集。结果与DNASE1L3高表达组比较,低表达组样本中甲胎蛋白(AFP)含量较高(P=0.001),肿瘤体积较大(P=0.009),美国癌症联合委员会(AJCC)和国际抗癌联盟(UICC)共同建立的肿瘤分期体系(TNM)分期(P0.001)、巴塞罗那临床肝癌评分系统(BCLC)分期(P=0.043)、意大利肝癌小组评分体系(CLIP)分期(P=0.010)均较差,且更易发生转移(P0.001);DNASE1L3低表达组患者的预后明显差于高表达组(P=0.007,HR:1.807,95%CI:1.175~2.779);DNASE1L3低表达组可富集到组蛋白结合、微管运动、组蛋白激酶活性等多个肿瘤相关基因集,但高表达组未富集到肿瘤相关基因集。结论 DNASE1L3基因表达与肝癌临床病理特征及预后相关,其低表达是肝癌的危险因素之一。     

权威人士热评"加息"

自去年下半年以来。关于中国加息的传闻时起时落．每一次都牵动着海内外市场的神经。然而。今年2004年10月29日中国人民银行宣布利塞调整的消息传来，仍然令市场为之震动。加息之后，各方人士观点见诸媒体报端。现本刊整理部分权威人士的观点看法．以飨读者。     

炭黑与导电性材料

本发明与炭黑及其填充的导电性材料有关。该导电性材料的体积电阻率受温度的影响较小。导电橡胶、导电塑料等导电性材料具有多种用途。近年来，由于电子整机的精密化，对这类导电性材料的需要正在迅速增加。其用途之一有电子复印机、激光打印机和传真机等办公设备。这些办公设备的成像方式主流是电子照像。     

烧品——最拉风的摄影及周边器材点评和打分!——背带能当摄影包 Miggo跨界产品多用途相机背带

这款产品看上去和它的logo——背带上的红色标示一样拉风．Miggo多用途背带不仅外观赚足了回头率。实用指数也非常高!产品末端可以安装相机．可直接通过相机底部的螺口连接．非常结实。拉开中间的拉链。这就是一条宽大舒适的相机背带．使用者可以将相机挂在脖子或者肩膀上。都非常舒服。拉起中间的拉链。将产品卷起来。然后再将顶端的“绳套”套在镜头上。Miggo就变成了一款相机软包（右上图）,用来保护相机。     

国外混凝土用玻璃钢筋开发概况

混凝土是应用最广的建筑材料。混凝土通常采用钢筋来增加强度。在压力荷载下,钢筋混凝土性能卓越,但在拉伸荷载下它有变脆的趋势。混凝土养护时的拉伸应力易导致裂纹。裂纹会让水分进入,最终引起钢筋腐蚀。     

三月三 有祭奠

春节最早的雏形,来源于周人祭祀祖先和神灵的"腊祭"。因此,千百年来,祭祀成为过年最重要的习俗。通过祭祀以祈求来年风调雨顺,平安吉样。祭祖杭州建德大慈岩镇新叶村农历三月三经过《爸爸去哪儿》的"金手指",新叶村明显比从前热闹了许多。只是眼下初春,江南阴冷,游客并不多。天还未亮,我们便起床,赶着去南塘。因为塘边的有序堂是宗祠,也是全村的中心,盛大的三月三祭祖活动便是从这里开始。2015年是十年一遇的"大年",由崇义派执掌。祭祖活动比往年隆重许多。     

芦永方陶瓷艺术作品

芦永方中国高级工艺美术师,陶瓷工艺美术师。中国工艺美术学会会员,景德镇陶瓷美术家协会会员。自由陶艺家。1970年生于景德镇。自幼酷爱绘画。1990年毕业于景德镇市陶瓷职工大学。2000年创办"听松阁"陶艺工作室。精通釉上粉彩、青花、雕刻等多种综合装饰。其作品以抓实的传统功底与现代陶瓷艺术工艺相结合。创造出自然古朴、意味深远的意境,一直深受国内外知名人士的青睐,并具有较高的收藏价值。