反相高效液相色谱法测定蛹虫草中虫草素的含量

建立了反相高效液相色谱法定量分析蛹虫草中虫草素(cordycepin)的方法。实验方法:色谱柱为Waters NOVAPAK C183.9mm×300mm,颗粒直径4μm;流动相为KH2PO4-K2HPO4缓冲液(0.01mol／L,PH=6.86)+1％四氢呋喃;流速为1.0mL／min,检测波长为260nm。在该实验条件下,虫草素的线性范围为3.23μg/mL-129.0μg／mL(r=0.9999),最小检出限为0.25ng。虫草素回收率平均值为97.5％,RSD为0.887％。该方法灵敏、快速、准确,适用于人工培植虫草中活性成分虫草素的检测。     

麦芽汁培养基中蛹虫草液体发酵的研究

以菌丝体干重和pH值为指标,从6种菌种中筛选出适于麦芽汁为培养基的蛹虫草CS菌种。通过均匀实验方法确定最佳培养条件为：20℃、175r/min;用高效液相色谱法检测发酵液中的腺苷,含量达2.72mg/L。     

高效液相色谱法测定虫草黄酒中虫草素的研究

采用高效液相色谱法建立了虫草黄酒中虫草素含量的测定方法,探讨了虫草素提取条件,分析了流动相组成、柱温、波长对检测结果的影响.研究表明：色谱柱为Waters Symmetry C18柱,流动相为甲醇∶水=15∶85,流速为1mL/min;检测波长为288nm,柱温为40℃时分离、检测效果最好;方法检出限为0.05ng.该测定方法在黄酒质量控制方面具有应用价值.     

豆虫草活性成分测定

以豆虫为寄主接种蛹虫草菌种,培育出豆虫草,比较了豆虫草与蚕蛹虫草、冬虫夏草的主要活性成分.结果表明：豆虫草的虫草素是冬虫夏草的35倍,虫草及其菌核的腺苷含量与冬虫夏草的相当,豆虫草SOD酶活性是冬虫夏草的1.5倍,豆虫草所含有的多糖是普通蚕蛹虫草的2倍.豆虫草是一种有良好前景的虫草新资源.     

柞蚕肾虫草的形态及其发酵液中多糖的含量

论述了人工培养的蛹虫草的形态、性状和液体发酵技术。接种在柞蚕蛹上的蛹虫草多部位丛生,长８．５ｃｍ左右。在３０Ｌ液体深层培养器中连续发酵,获得蛹虫草总多糖（０．３８￣０．６７）ｇ／１００ｇ和虫草素（０．２￣０．３）ｍｇ／１００ｇ。     

柞蚕蛹虫草的形态及其发酵液中多糖的含量

论述了人工培养的蛹虫草的形态、性状和液体发酵技术。接种在柞蚕蛹上的蛹虫草多部位丛生 ,长 8.5cm左右。在 30L液体深层培养器中连续发酵 ,获得蛹虫草总多糖( 0 .38～ 0 .67) g/10 0g和虫草素 ( 0 .2～ 0 .3)mg/10 0g。     

杂粮蛹虫草菌丝共生体中虫草酸的优化提取及含量测定

在单因素试验基础上,采用响应面分析法优化杂粮蛹虫草菌丝共生体中虫草酸的水浴提取工艺条件,并使用酶标仪-分光光度法测定虫草酸含量。结果表明:最佳提取条件为液料比28∶1,浸提时间3 h,浸提温度35℃,虫草酸的含量为28.178 5 mg/g,RSD为0.81%。本研究表明该工艺条件可靠,测定方法可行。     

蛹虫草菌产腺苷的培养基优化

以蛹虫草菌丝体中腺苷含量为指标,进行发酵培养,优化液体发酵培养基。通过单因素实验结果,选出最适宜的碳源是玉米淀粉,氮源是玉米浆粉和NH4Cl,金属离子是ZnSO4;然后采用9因素2水平Plackett-Burman设计实验得出对蛹虫草发酵水平影响显著的因素,分别为玉米淀粉、玉米浆粉和MgSO4;最后运用响应面分析方法对3个因素3个水平进行优化,获得最优组合浓度为玉米淀粉13.35g/L、玉米浆粉45.74g/L、MgSO4为0.40g/L,此时菌体腺苷含量为4 751μg/g。验证结果表明蛹虫草腺苷含量提高了210%,优化效果极为显著。     

黄栀护肝片的薄层色谱鉴别及含量测定研究

用薄层色谱法对处方中的黄连、栀子、五味子、羌活进行定性鉴别,用高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷的含量,色谱条件为：色谱柱为Diamonsil C18（4.6 mm×200 mm,5μm）;流动相为甲醇体积∶水体积∶冰醋酸体积（50∶50∶1）;流速为1 mL.min-1;柱温为35℃;检测波长为274 nm。薄层色谱能检出黄连、栀子、五味子、羌活的特征斑点,黄芩苷在0.354～3.54μg范围内呈良好线性关系,r=0.999 8,平均回收率为99.77%,RSD值为0.32%,5批样品黄芩苷含量平均值为3.92 mg.g-1。结论：本试验建立的方法专属性强,可作为黄栀护肝片的定性定量检测方法。     

蛹虫草利用玉米芯发酵生产虫草素

考察了葡萄糖和木糖对蛹虫草深层液体发酵的影响,并研究了蛹虫草利用玉米芯发酵生产虫草素的可行性.结果表明,当以葡萄糖或木糖为唯一碳源时,最适碳源为30 g/L葡萄糖或20 g/L木糖,虫草素产量分别达到(144.63±19.48)mg/L和(50.61±0.66)mg/L.建立了葡萄糖-木糖两阶段发酵,虫草素生产强度达到...     

蛹虫草无性型原生质体制备条件的研究

以蛹虫草无性型为材料,通过液体培养获得菌丝体,经不同浓度的蜗牛酶、纤维素酶在不同条件下酶解处理菌丝体获得原生质体．实验结果表明：以培养6d的蛹虫草菌丝体为材料,0．5mol／L甘露醇溶液为稳渗剂,蜗牛酶浓度为1％,纤维素酶浓度为0．5％,两种酶混合的体积比为1：2,pH6．5,35℃条件下酶解3h,可得原生质体产量最高为1．36×10^8个／mL．这一研究结果为蛹虫草通过原生质体技术进行菌株的遗传改良提供了重要的理论依据．     

北虫草液体培养基的研究

为选取北虫草的最适液体培养基,以三因素三水平的正交试验设计培养北虫草的液体培养条件,北虫草菌种的接种量为5%(体积分数)。培养条件为18℃,pH为6.5,转速为120r/min,培养时间为72h。通过对培养所得的北虫草菌丝体干质量的测定分析可以得出培养北虫草的碳源最优水平为葡萄糖,氮源最优水平为NH4NO3,无机离子最优水平为K2HPO4。从而得到该菌种的最适液体培养基的配方(质量浓度)葡萄糖,NH4NO3,K2HPO4分别为20,1,1g/L。根据数据分析的R值和F值均可以确定:碳源为最重要的因素,应将其控制在最优水平,所以培养北虫草应该选取最优葡萄糖水平。实验结果为进一步大规模培养北虫草提供了重要的依据。     

温度对蛹虫草生长发育的影响

蛹虫草是一种珍贵的药、食同源大型真菌,其市场需求量日益增加．为了实现蛹虫草的工业化生产,用3种不同的蛹虫草菌株CM1、CM2、CDM-003,研究揭示了温度对蛹虫草菌丝萌发、茵丝转色、子座分化、子座生长及产量的影响规律．结果表明,蛹虫草茵丝萌发、转色、子座分化的最佳环境温度为20℃;在人工栽培时,适宜的子座生长温度为20-24℃．该研究结果为蛹虫草规模化生产的环境控制提供了依据．     

蛹虫草胞外多糖的提取和纯化

对蛹虫草液体深层发酵液的胞外多糖提取进行研究,确定了提取的工艺条件,并对所提取的粗多糖进行分子筛分,对主要多糖组分的糖成分进行测定。其结果为：蛹虫草液体深层发液的胞外粗多糖的提取率为10.0g／L;其粗多糖主要由4种蛹虫草多糖组成;而第4个组分占总粗多糖的32.14%,由葡萄糖构成。     

冬虫夏草液体发酵产胞外多糖的实验条件

为提高虫草多糖产率,优化了冬虫夏草液体发酵条件。最佳发酵条件为:葡萄糖30 g/L,豆粕20 g/L,MgSO42 g/L,KH2PO44 g/L,pH值为7.0,接种量10%,培养温度24℃,摇床转速140 r/min。在此条件下,胞外多糖的最高产量为3.928 g/L。利用液体发酵生产胞外多糖,可有效地缩短生产周期。     

富锗蛹虫草无性型乙醇分级多糖抗氧化能力研究

为了探讨不同浓度乙醇分级蛹虫草富锗多糖的抗氧化能力,以蛹虫草为材料通过液态深层发酵获得发酵液和菌丝体,以不同浓度的乙醇沉淀来获得蛹虫草胞外多糖,测定了不同浓度的乙醇分级蛹虫草胞外多糖的抗氧化能力.实验结果表明,30%醇沉富锗胞外多糖清除羟基自由基和DPPH的能力最强,其IC50分别为59.82mg/L和260.92mg/L;70%醇沉富锗胞外多糖清除氧自由基能力最强,其IC50为112.66mg/L.蛹虫草富锗胞外多糖具有显著清除自由基的能力.     

冬虫夏草液体发酵产胞外多糖的实验条件

为提高虫草多糖产率,优化了冬虫夏草液体发酵条件。最佳发酵条件为:葡萄糖30 g/L,豆粕20 g/L,MgSO42 g/L,KH2PO44 g/L,pH值为7.0,接种量10%,培养温度24℃,摇床转速140 r/min。在此条件下,胞外多糖的最高产量为3.928 g/L。利用液体发酵生产胞外多糖,可有效地缩短生产周期。     

无性型虫草菌株qsun-1的生长特性

利用组织分离法,从青藏高原野外采集的新鲜的冬虫夏草子座中分离得到无性型虫草菌株qsun-1,并研究了该菌株的菌落形态及显微结构.确定无性型虫草菌株qsun-1最佳培养条件为:生长温度15～18℃;培养基的构成为蔗糖2％,蛋白胨2％,MgSO4 0.1％,KH2 PO4 0.2％.     

无性型虫草菌株qsun-1的生长特性

利用组织分离法,从青藏高原野外采集的新鲜的冬虫夏草子座中分离得到无性型虫草菌株qsun-1,并研究了该菌株的菌落形态及显微结构。确定无性型虫草菌株qsun-1最佳培养条件为:生长温度15～18℃;培养基的构成为蔗糖2%,蛋白胨2%,MgSO40.1%,KH2PO40.2%。