不同途径和剂量环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型的对比研究

目的 比较4种不同剂量和不同方式给予环磷酰胺诱导正常小鼠免疫抑制的4种方法,选择合适的免疫抑制动物模型以评价受试物的免疫毒性.方法 选择雌性BALB/c小鼠,设1个对照组(每日灌胃蒸馏水)和4个环磷酰胺组(灌胃组每天40 mg/kg BW;腹腔注射1组每天40 mg/kg BW;腹腔注射2组,先连续注射3d,后每周注射一次,注射剂量为80 mg/kg BW;腹腔注射3组,试验结束前24 h一次性注射200 mg/kg BW),试验周期为30 d.观察不同剂量及不同途径给予环磷酰胺后对小鼠免疫病理学、体液免疫、细胞免疫、非特异性免疫等各项免疫指标的影响.结果 4个环磷酰胺组的小鼠免疫器官重量、外周血白细胞计数及其淋巴细胞百分比、血清免疫球蛋白水平、外周血B淋巴细胞百分比、脾空斑形成细胞数、24 h小鼠足跖厚度变化、脾T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖能力较对照组均有不同程度下降,全血中性粒细胞百分比均高于对照组.环磷酰胺灌胃组和注射l组可刺激全血NK细胞百分比较对照组明显升高,而注射2组和3组的Th细胞百分比和CD4+/CD8+值均高于对照组,其差异分别具有统计学意义(P＜0.05).此外,环磷酰胺灌胃组和注射1组还可引起动物体重下降、肝脏相对重量降低、血清谷丙转氨酶、血糖、甘油三酯的改变.对于试验所测定的大部分指标,注射2组和注射3组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 环磷酰胺的4种给予方式均可诱导动物免疫抑制,但于试验结束前24 h一次性腹腔注射200 mg/kg BW环磷酰胺为最合适的免疫抑制动物模型造模方法.     

喹诺酮类药物对中华绒螯蟹血清酶的影响

以中华绒螯蟹为材料,研究诺氟沙星、氧氟沙星和恩诺沙星3种喹诺酮类药物对中华绒螯蟹血清免疫酶指标的影响。以5mg/kg体重注射中华绒螯蟹,定期测定血清酚氧化酶(PO)、过氧化物酶(POD)、碱性磷酸酶(ALP)、溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶酶(ALT)的活力。结果表明:注射药物后,PO、POD、ALP、LSZ、SOD活力均显著提高(P0.05),其中恩诺沙星试验组影响极为显著(P0.01),随后逐渐下降,至96h与对照组基本相同;AST和ALT活力在试验期间均显著降低(P0.05)。上述结果表明喹诺酮类药物以5mg/kg体重剂量注射对中华绒螯蟹血清免疫酶无明显不良影响,对脏器无损害,此浓度的喹诺酮类药物对中华绒螯蟹有免疫促进作用。     

黄精多糖的提取及其对小鼠免疫活性的影响

目的:提取黄精多糖,观察黄精多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响,为其开发应用提供试验依据。方法:采用水溶剂煎煮提取、乙醇沉淀及Sevage法去蛋白制备黄精多糖。腹腔注射环磷酰胺,建立小鼠免疫抑制模型,测定低、高(200、600mg/kgbw)剂量黄精多糖(灌胃给药)对模型小鼠的免疫器官质量、血清溶血素和腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果:黄精多糖的提取率为(9.20±0.15)%,纯度为(84.65±1.31)%。与模型对照组比较,黄精多糖可提高免疫抑制小鼠的脾脏、胸腺指数,显著促进溶血素的形成(P<0.05),显著提高腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数(P<0.05)。结论:黄精的多糖含量高。黄精多糖可明显改善环磷酰胺致免疫抑制小鼠的免疫功能,提示黄精多糖具有开发价值。     

酵母细胞壁免疫多糖对草鱼免疫功能的影响

探讨饲料中添加酵母细胞壁免疫多糖后对混养池塘中草鱼的免疫功能增强的影响,以商品混养饲料作为对照组,在此商品饲料中添加0.5%酵母细胞壁免疫多糖作为试验组。52天的试验结果表明:试验组抽样草鱼的肝体指数、脾脏指数与对照组相比均无显著性差异;试验组草鱼血清和肝脏匀浆液中谷丙转氨酶的活性分别为(4.50±0.71)、(1.535±0.568)U/mg,显著低于对照组;试验组草鱼脾脏匀浆液总蛋白质含量为(11.04±0.905)mg/ml,免疫球蛋白的含量为(0.42±0.028)mg/dl,均显著高于对照组,血清、肝脏匀浆液中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶活性略高于对照组;而试验组草鱼血清和肝脏匀浆液谷草转氨酶略低于对照组,但均无显著差异。     

姬菇多糖对酒精所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究热水浸提法从姬菇中提取姬菇多糖(PCNP)对酒精所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:小鼠被随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(150mg/(kg.d))、多糖各剂量组(100、200、400mg/(kg.d)),连续灌胃30d后,除空白对照组外,给予50%体积分数的乙醇溶液建立小鼠急性肝损伤模型。12h后,小鼠脱臼处死后取血液和肝脏测定各项抗氧化指标,并观察肝组织病理学变化。结果:与模型组相比,多糖各剂量组能降低血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性和肝脏丙二醛(MDA)含量,提高肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽(GSH)含量。结论:PCNP能明显改善肝组织病理损伤程度,对酒精所致小鼠急性肝损伤具有明显保护作用。     

桔梗多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节

研究桔梗多糖(PPS80)对环磷酰胺(CTX)所致免疫抑制小鼠的免疫调节作用。将60只雄性KM小鼠随机分为正常组、模型组、桔梗多糖低、中、高剂量治疗组(100,200,400mg/(kg.d))和盐酸左旋咪唑(LMS)阳性组。连续3d腹腔注射环磷酰胺80mg/(kg.d)建立免疫抑制小鼠模型,于给药治疗1周后利用称重法检测胸腺指数和脾脏指数,ELISA法测定血清白介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果表明,桔梗多糖能明显增加环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的胸腺指数和脾脏指数,显著提高血清中IL-2和TNF-α的含量并呈剂量依赖性。桔梗多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠具有免疫增强调节作用。     

姬菇多糖对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：研究热水浸提法从姬菇中提取姬菇多糖(PCNP)对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：小鼠被随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(联苯双酯组,150mg/(kg ·d))、处理组(400mg/(kg ·d)),连续灌胃30d后,给予CCl4(80mg/kg)建立动物急性肝损伤模型。动物处死后取血液和肝脏测定各项抗氧化指标,以及观察肝组织病理学变化。结果：与模型组相比,处理组能降低血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)活性和肝脏丙二醛(MDA)含量,提高肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量。结论：PCNP能明显改善肝组织病理损伤程度,对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤具有明显保护作用。     

姜黄素在育肥猪中应用效果的研究

研究了姜黄素在育肥猪中的应用效果。选取64头体重约70 kg的杜×长×大三元杂交猪,将其分为4组,每组16头猪。在基粮中加50 mg/kg喹烯酮后,喂第1组(对照组)猪;在基粮中分别加200、300、400 mg/kg姜黄素后,相应地喂第2、3、4组猪,饲养试验期40 d。试验结果如下:1)第3、4组猪平均日增重比对照组分别提高12.32%(P0.01)、9.35%(P0.05);第3、4组猪对饲料转化率分别比对照组提高12.69%(P0.05)、9.92%(P0.05)。2)第2和第4组猪血清谷丙转氨酶活性有显著的差异(P0.05);第3、4组猪血清谷草转氨酶活性分别比对照组降低13.38%、21.75%(P0.05),但第2组猪血清谷草转氨酶活性高于对照组(P0.05);第4组猪血清总蛋白比对照组提高6.10%(P0.05);第4组猪血清葡萄糖比对照组提高12.28%(P0.05);与对照组比较,第2、3、4组猪血清丙二醛含量不同程度地降低。3)猪肌肉pH值随姜黄素在饲粮中添加量的增加而有下降的趋势;第3、4组猪肌肉滴水损失量分别与第2组有显著的差异(P0.05)。4)第4组猪瘟血清抗体比对照组提高7.74%(P0.05);第3、4组猪O型口蹄疫血清抗体显著高于第1、2组(P0.05);第3、4组猪蓝耳病血清抗体不同程度地升高,分别比对照组提高6.15%、8.46%。这些结果表明:姜黄素对猪体健康有增进作用;能改善肉质;不同程度地提高猪的日增重、饲料转化率和血清葡萄糖、总蛋白浓度、病原抗体效价;谷草、谷丙转氨酶活性和丙二醛含量不同程度地降低。根据生产性能,育肥猪饲粮中姜黄素的适宜添加量是300 mg/kg;而按血清生化指标,则为400 mg/kg。     

枸杞多糖防治化学性肝损伤的药理作用研究

目的:评价枸杞多糖保肝作用。方法:以雄性Wistar大鼠为研究对象,建立CCl_4肝损伤模型,分别灌胃:枸杞多糖50、100、200 mg/kg·d,护肝片900 mg/kg,水飞蓟宾30 mg/kg,对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水。每天灌胃给药1次,连续灌胃30 d后,测定其体重、肝脏病理学变化、肝脏脏器系数、血液生化指标等。结果:大鼠在CCl_4后,出现不同程度的精神萎靡,肝脏脏器指数显著增加,血清白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)均显著降低,血清转氨酶活性显著增加,肝脏病理出现显著的病理改变,与对照组比较具有统计学差异。枸杞多糖中、高剂量均显著升高CCl_4大鼠ALB和TP水平,显著降低其谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)的活力,显著改善CCl_4大鼠肝脏病理组织结构,与模型组比较差异具有统计学意义。结论:枸杞多糖对CCl_4所致的化学性肝损伤具有良好的修复和保护效应,具有良好的开发前景。     

大鲵低聚糖肽对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

研究大鲵低聚糖肽(GSGPs)对小鼠CCl4急性肝损伤的保护作用.经腹腔注射CCl4制备小鼠急性肝损伤模型,分别灌胃三种不同浓度的GSGPs,以联苯双酯(200mg/(kg·d))作为阳性对照.检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性,肝组织中丙二醛(MDA)含量,超氧化物岐化酶(SOD)活性,观察小鼠肝组织形态学变化.结果表明:GSGPs中(400mg/(kg·d))、高(800mg/(kg·d))剂量组可显著抑制小鼠肝脏组织中由CCl4造成的血清中AST、ALT活性的升高,明显降低肝组织MDA含量,并且提高肝组织中SOD活性.光镜检查结果表明,CCl4模型组肝细胞明显肿胀变形,肝细胞索紊乱,伴有炎症细胞侵润.GSGPs各剂量组的肝细胞索排列整齐、肝细胞排列规则,较模型组肝组织损伤明显减轻.说明GSGPs具有保护CCl4急性肝损伤的作用.     

连翘叶多糖对小鼠免疫功能影响的研究

研究连翘叶多糖对环磷酰胺(CTX)所致免疫低下模型小鼠的免疫调节功能。采用腹腔注射环磷酰胺制造免疫抑制小鼠模型,考察不同剂量连翘叶多糖对免疫抑制小鼠脏器指数、巨噬细胞吞噬功能、淋巴细胞增殖活性、血清IL-2和IL-4水平、溶血素水平和溶血空斑形成数量的影响。连翘叶多糖能明显提高环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的胸腺指数、脾脏指数、巨噬细胞吞噬能力、脾淋巴细胞的增殖能力、血清中IL-2和IL-4水平、溶血素含量和溶血空斑形成数量。连翘叶多糖具有良好的免疫增强活性,在药品与功能食品的开发中具有较高的应用价值。     

瓜蒌多糖的体内免疫活性研究

研究瓜蒌多糖对免疫抑制小鼠的免疫促进作用。通过腹腔注射环磷酰胺制备免疫抑制小鼠模型,考察不同剂量瓜蒌多糖对免疫抑制小鼠脏器指数、巨噬细胞吞噬能力和淋巴细胞增殖能力的影响。瓜蒌多糖可显著提高免疫抑制小鼠脏器指数、巨噬细胞吞噬能力和淋巴细胞增殖能力。瓜蒌多糖具有良好的免疫增强活性,具有较高的研究与开发价值。     

鼎湖鳞伞多糖的提取工艺及体内免疫调节活性的研究

采用三因素三水平正交实验方法,研究了液料比、提取温度、提取时间这三个因素对鼎湖鳞伞多糖(Polysaccharide from Pholiota dinghuensis Bi,PFPD)提取工艺的影响.以雌性小白鼠作为模型实验,对其免疫器官指数、耳肿胀度、血清溶血素、血清和脾脏中溶菌酶的活性进行了研究.结果表明:PFPD最佳的提取工艺条件为:提取温度为90℃,提取时间为6h,液料比为20mL/g,PFPD的得率为8.95％.小鼠腹腔注射PFPD能使因环磷酰胺诱导产生的脾脏指数下降得以恢复,在一定程度上提高了机体的免疫力,三组不同剂量的PFPD可以显著地提高脾脏指数、迟发型超敏反应的右耳肿胀度、血清溶血素水平、脾脏和血清中溶菌酶的活性,且这种变化与鼎湖鳞伞粗多糖呈现剂量依赖关系.本实验表明鼎湖鳞伞多糖具有一定的体内免疫调节活性.     

大鳞副泥鳅蛋白制备ACE抑制肽的酶解方式研究

为开发大鳞副泥鳅蛋白血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽,使用高效液相色谱法测定大鳞副泥鳅蛋白的氨基酸组成,考察泥鳅蛋白的单一酶解方式和复合酶解方式对产生ACE抑制肽的影响,并使用N-三(羟甲基)甲基甘氨酸十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳进一步证实不同酶解方式对泥鳅蛋白的水解效果。结果表明,大鳞副泥鳅蛋白富含疏水性氨基酸(39.823%)、支链氨基酸(18.102%)以及芳香族氨基酸(8.216%),是制备ACE抑制肽的良好来源。脯氨酸蛋白酶、α-胰凝乳蛋白酶和碱性蛋白酶单一酶解泥鳅蛋白,酶解产物的最高ACE抑制率分别是81.01%、64.91%和87.84%,最高水解度分别为1.48%、9.04%和28.29%。使用碱性蛋白酶与脯氨酸蛋白酶对大鳞副泥鳅蛋白进行分步酶解与同步酶解,同步酶解方式可以产生更高活性的ACE抑制肽,最高的ACE抑制率为90.14%,IC50为0.491 mg/mL。     

密蒙花黄酮对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

研究70%的乙醇浸提的密蒙花黄酮提取物对四氯化碳(CCl_4)所致小鼠肝损伤的保护作用。密蒙花黄酮50、100 mg/(kg·d)剂量能显著抑制CCl_4所致肝损伤小鼠肝脏指数、脾脏指数,可以使CCl_4诱导的肝损伤小鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、胆碱酯酶(CHE)、总胆红素(TBIL)含量下降,同时,密蒙花黄酮能提高肝脏抗氧化酶SOD的活性和GSH含量,并降低肝组织中MDA的含量,且50 mg/(kg·d)浓度密蒙花黄酮的效果更显著,接近阳性对照药物水飞蓟的作用。组织病理切片证明密蒙花黄酮可以减轻CCl_4对肝组织的破坏,改善肝脏组织的病理损伤。其保护机制可能与清除自由基、抑制脂质过氧化有关。     

美味牛肝菌多糖对急性肝损伤小鼠的保肝作用

用不同剂量的美味牛肝菌多糖(Boletus edulis polysaccharides,BEP)给予小鼠灌胃连续30d后,按10mL/kg剂量腹腔注射含体积分数0.2%CCl4的花生油溶液,建立CCl4诱导小鼠肝损伤模型。测定肝脏指数、肝脏重量、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),以及肝组织中超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及还原型谷胱甘肽(GSH)水平,并进一步观察肝脏组织病理学变化。结果表明:BEP能显著抑制CCl4急性肝损伤小鼠肝脏指数、血清ALT、AST水平以及肝脏MDA含量的升高,提高肝脏GSH-Px、SOD及GSH活性,其中800 mg/(kg BW獉d)剂量水平效果最佳,BEP对CCl4急性肝损伤小鼠有一定的保护作用。     

秀珍菇多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的保护作用

研究秀珍菇子实体多糖(polysaccharide from the fruiting body of Pleurotus geesteranus,PFP)对D-半乳糖致衰老小鼠的保护作用。通过腹腔注射60 mg/(kg·d)D-半乳糖建立衰老小鼠模型,同时灌胃50、100、200 mg/(kg·d)不同剂量的PFP,42 d后,采用试剂盒测定小鼠肝、脑组织中过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;同时,对小鼠血清谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatas,ALP)活力以及脾脏指数、胸腺指数进行测定;苏木精-伊红染色观察肝、脑组织。结果表明,PFP能拮抗D-半乳糖引起的小鼠衰老,使小鼠肝、脑组织中的CAT、SOD、GSH-Px活力升高,MDA含量降低。与模型组相比,中、高剂量组PFP显著降低小鼠血清的AST、ALP、ALT活力(P0.05,P0.01),极显著提高脾脏指数和胸腺指数(P0.01);组织切片显示PFP对小鼠肝、脑损伤具有保护作用。因此PFP具有良好的抗衰老作用,其机制可能与其提高机体的抗氧化能力、增强机体的免疫功能有关。     

葛仙米多糖体内抑瘤及对免疫的影响

实验采用50、100、200mg/kg bw·d的葛仙米水溶性多糖对接种S180的昆明雌性小白鼠进行了10d的注射给药,并以20mg/kg bw·d环磷酰胺为对照,测定了瘤重、胸腺指数、脾淋巴细胞转化、细胞活性和迟发超敏反应(DTH)及体内抗氧化指标,以探讨葛仙米多糖的抑瘤效果和对肿瘤所致免疫力下降的作用.结果表明:葛仙米多糖显著抑制小鼠肿瘤的生长,且抑瘤率呈剂量效应,其高中低剂量抑瘤率分别为64.08%、38.24%和29.91%,对肿瘤所致小鼠细胞免疫力包括脾淋巴细胞转化、NK细胞活性、迟发型变态反应(DTH)下降有显著抑制作用,但是对小鼠血液和肝脏的氧化指标无显著影响.     

黄芪多糖和益生菌对雏鸡免疫机能的影响

研究黄芪多糖和益生菌对雏鸡肠道组织形态学的影响.试鸡按体重随机分为4个组,1组为对照组,饲喂玉米-豆粕型基础饲粮;2～4组为试验组,饲粮是在基础日粮基础上分别添加黄芪多糖(220 mg/kg)、益生菌剂(4×107 cfu/g)以及"黄芪多糖(220 mg/kg) 益生菌剂(4×107 cfu/g)"(合生元).试验测定了ANAE阳性细胞率和血清红细胞免疫调节因子活性,结果发现合生元组雏鸡ANAE阳性细胞率均较对照组和黄芪多糖组提高显著(P＜0.05);试验组雏鸡红细胞C3b受体花环促进率均较对照组提高显著(P＜0.05),红细胞C3b受体花环抑制率均降低,但仅42日龄时合生元组差异显著(P＜0.05).结果表明,黄芪多糖和益生菌组成合生元,极大地增强了机体的细胞免疫功能,特别是T淋巴细胞的作用,显著增强了红细胞CR1的免疫活性,说明该合生元能协同作用,提高机体免疫水平.     

蝇蛆粉和L-肉碱对青鱼生长、免疫与抗氧化指标及抗病力的影响

研究蝇蛆粉和L-肉碱对青鱼(Mylopharyngodon piceus)生长、非特异性免疫和抗氧化能力的影响。选取初始体重(72.23±1.81)g的健康青鱼270尾,随机分成3组,分别饲喂3种等氮等能的饲料,其中对照组投喂基础日粮,另外2组分别投喂添加25 g/kg蝇蛆粉或150 mg/kg L-肉碱的试验饲料。连续投喂60d后,测定鱼体生长指标、肌肉成分、血液和肝脏的生化指标,并统计青鱼感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hy-drophi1a)后的死亡率和相对保护率。结果表明,与对照组相比,蝇蛆粉和L-肉碱组显著提高鱼体增重率和特定生长率,血清总蛋白(TP)、溶菌酶(LSZ)、补体C3和C4、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平,以及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、GSH-Px和过氧化氢酶(CAT)的活性,降低饲料系数,血清和肝脏丙二醛(MDA)的含量(P﹤0.05)。此外,蝇蛆粉组还较对照组显著提高青鱼血清碱性磷酸酶(AKP)、SOD和CAT的活性(P<0.05),而L-肉碱组的相应指标与对照组的差异不显著(P>0.05);其他一些指标如血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)、成活率、鱼体形体指标以及肌肉组成成分等各组间差异均不显著(P>0.05)。攻毒试验也表明,蝇蛆粉和L-肉碱组均降低青鱼的死亡率。因此,在饲料中添加蝇蛆粉25 g/kg或L-肉碱150mg/kg可促进青鱼的生长,提高鱼体的免疫力和抗氧化能力,增强鱼体的抗病力。