固态发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽及其抗氧化活性研究

以罗非鱼鱼皮为原料,利用枯草芽孢杆菌固态发酵(solid-state fermentation,SSF)制备胶原蛋白肽。以胶原酶酶活力为评价指标,优化产酶发酵条件,并对发酵产物进行氨基酸组成分析、超滤分离及体外抗氧化活性的研究。结果表明,最佳发酵条件为培养基初始pH值为7,种子液菌龄为14 h,加水量为10 mL,发酵温度为35℃,发酵时间为24 h,在此条件下胶原酶酶活力为90.05 U/mL,水解度高达41.73%。经超滤分离得到3种不同分子质量(molecular weight,MW)范围的胶原蛋白肽组分:TSCP-a(M_W> 10 kDa)、TSCP-b(M_W5 k～10 kDa)、TSCP-c(M_W<5 kDa)。其中TSCP-c的抗氧化活性最高,其羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O₂^-)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazy,DPPH)自由基清除率的半抑制浓度(half inhhibitory co...     

罗非鱼皮胶原蛋白肽亚铁螯合修饰及螯合物性质的研究

以罗非鱼皮为原料制备胶原蛋白肽(TSGP),胶原蛋白肽与亚铁盐进行螯合反应,对TSGP亚铁螯合物的理化性质及功能特性进行研究。实验优化得出最佳螯合反应条件是m多肽∶mFeCl2·4H2O=500∶1,pH为6.0,反应时间50min,温度35℃。通过荧光光谱、紫外光谱和红外光谱测定发现Fe2+与TSGP的羧基与氨基均可发生配位反应。抗氧化活性测定实验表明,螯合物具有较强的清除DPPH自由基和ABTS+自由基的能力。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽在润肤霜中的应用及性能评价

本研究采用酶解法从罗非鱼皮中提取胶原蛋白肽,并对其基本成分、分子量分布、抗氧化活性、保湿性以及紫外吸收性能进行考察和分析,同时将提取到的罗非鱼皮肽与羧甲基壳聚糖按不同比例进行复配,应用到润肤霜中并进行性能评价。结果表明:酶解法所提取的罗非鱼皮肽蛋白质含量为94.75%,罗非鱼皮肽中分子量小于1000 Da的组分高达82.27%,平均分子量为614 Da,对OH^-、DPPH·、O₂^-·、清除率的IC₅₀值分别为5.34、5.03、7.63 mg/mL,且具有良好的保湿效果,并对UBC和UVB波段的紫外线有吸收;所制备的润肤霜具有良好的保水和体外抗氧化活性以及防晒功效,其感官和理化指标符合国家润肤霜产品质量标准规定,其中RFS-4的综合效果最佳。通过裸鼠在体皮肤刺激性实验和抗皮肤光老化实验,对比不同组别裸鼠皮肤表征情况,结果表明:自制润肤霜安全无刺激并具有较好的抗皮肤光老化作用。本研究为罗非鱼皮肽在抗光老化日化产品的开发利用提供科学的理论基础。     

大孔树脂对罗非鱼皮胶原蛋白抗氧化肽脱盐作用的研究

为了探索罗非鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的最佳脱盐工艺,本文采用DA201-C大孔吸附树脂对抗氧化肽进行脱盐试验。结果表明:DA201-C大孔吸附树脂对抗氧化肽的静态吸附率和吸附量分别为82.56%和54 mg/g;动态吸附和解吸最佳的上样浓度为60mg/mL,最佳上样流速为1 mL/min,解吸剂为75%乙醇。抗氧化肽经过DA201-C大孔吸附树脂处理后脱盐率为97.13%,回收率为81.16%,质量浓度为0.245 mg/mL时对ABTS自由基的清除率提高至39.58%。采用DA201-C大孔吸附树脂对罗非鱼皮胶原蛋白抗氧化肽进行脱盐处理是一种简便有效的方法。     

泥鳅皮胶原蛋白肽的制备及其抗氧化性能的研究

试验主要以泥鳅皮为原料,采用酶法提取胶原蛋白,制备胶原蛋白肽,并且研究泥鳅皮胶原蛋白肽的抗氧化活性。通过在不同温度、pH以及提取时间等条件下,经过反复试验对比,确定最佳工艺:酶解温度45℃,提取酸度pH 9,用碱性蛋白酶提取4 h。在上述条件下,制得的胶原蛋白肽为白色粉末。对所得的胶原蛋白肽成品进行抗氧化性能的测定,在DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、还原能力、抗脂质过氧化能力和金属离子的螯合能力等方面的结果表明,泥鳅皮胶原蛋白肽表现出良好的抗氧化活性。     

鳝鱼皮胶原蛋白肽的制备及其抗氧化性能的研究

以新鲜鳝鱼皮为原料,将鳝鱼皮处理成干燥的粉末,采用酶解法提取胶原蛋白肽。在考察酶的种类、pH、酶解温度和酶解时间4个因素提取效果的基础上,进行了实验。优化实验分析结果表明,从鳝鱼皮中提取胶原蛋白肽的最佳工艺条件为:选用碱性蛋白酶,提取酸度为pH=9,提取时间为4h,提取温度为45℃。在上述条件下,冷冻干燥制得的胶原蛋白肽成品为白色粉末,胶原蛋白含量为77.70%。在对胶原蛋白肽的提取工艺进行优化的同时,也对所得的胶原蛋白肽成品进行抗氧化性能的测定,在DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、还原能力、抗脂质过氧化能力和金属离子的螯合能力等方面的实验结果表明,鳝鱼皮胶原蛋白肽表现出良好的抗氧化活性。     

罗非鱼鳞胶原蛋白肽锌螯合物制备工艺优化

为了获得罗非鱼鳞胶原蛋白肽锌螯合物的最佳制备工艺,采用响应面法进行优化其制备工艺,建立了肽锌螯合率与pH、肽锌质量比、时间和温度的数学模型。得到最佳制备工艺参数为:pH 5.0、肽锌质量比2.5∶1、时间35 min和温度54℃,肽锌螯合率的预测值为92.79%,验证试验值为91.96%,与预测值无显著性差异。     

三酶法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽及活性研究

为了探索制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的最佳工艺,在碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解的基础上,以酶解温度、酶解时间、酶解pH值和酶与底物质量比([E]/[S])为试验因素,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,采用响应面分析法优化Orientase 20A酶的酶解条件。结果表明:最优工艺参数为:酶解温度为41.74℃、pH3.97、酶解时间为6h、[E]/[S]为1.5%,酶解液水解度和DPPH自由基清除率的预测值分别为9.42%和35.01%,验证值分别为9.57%和35.21%。响应面对酶解法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的酶解条件的优化是可行的,可以用于实际预测。抗氧化活性实验表明,酶解肽具有较强的清除DPPH自由基和ABTS+.能力,其IC50值分别为10.78mg/mL和8.26mg/mL。     

罗非鱼皮胶原蛋白多肽的体外抗氧化活性

以Vc和水溶性VE(Trolox)为对照品,测定罗非鱼皮胶原蛋白多肽对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、ABTS自由基的清除能力,研究罗非鱼皮胶原蛋白肽的抗氧化活性。结果表明:罗非鱼皮胶原蛋白多肽对4种自由基均具有一定的清除能力,对羟基自由基和ABTS自由基表现出较强的清除作用,罗非鱼皮胶原蛋白多肽对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、ABTS自由基的IC_(50)分别为56.31、5.19、49.10、2.51 mg/mL。罗非鱼皮胶原蛋白多肽具有较好的抗氧化能力,为其在抗氧化活性方面的应用提供理论依据。     

罗非鱼鳞胶原肽螯合锌抗氧化及抑菌活性研究

以罗非鱼鳞为原料,制备了胶原肽及胶原肽螯合锌,研究并比较了其体外抗氧化及抑菌活性。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱图表明了罗非鱼鳞胶原肽螯合锌的生成。氨基酸分析显示,罗非鱼鳞胶原肽富含羟脯氨酸、甘氨酸以及天冬氨酸,与锌离子螯合后,氨基酸的组成与比例有所变化,其中天冬氨酸与谷氨酸占总氨基酸的比例分别由19.72%和8.79%增加到22.73%和9.71%。体外抗氧化实验表明,罗非鱼鳞胶原肽螯合锌对DPPH自由基、羟自由基的清除率IC₅₀值分别为3.69和6.59 g/L,并且具有较强的Fe³⁺还原能力,螯合锌的抗氧化活性明显优于胶原肽。抑菌实验显示罗非鱼鳞胶原肽螯合锌对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色假丝酵母等4种指示菌均表现出明显的抑制作用,而罗非鱼鳞胶原肽无抑菌效果。由此可见,罗非鱼鳞胶原肽螯合锌有望作为一种潜在的抗氧化、抑菌剂。     

鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽的抗氧化活性

选取铁离子还原体系和3 种自由基体系为指标,研究鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽体外清除自由基效果和抗氧化作用。采用超滤膜分离鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽组分,筛选出体外清除•OH活性最好的组分,再建立小鼠衰老模型,将分离得到活性最好的组分采用灌胃法,测定小鼠皮肤中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）及丙二醛（malondialdehyde,MDA）和羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）的含量,研究鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽体内抗氧化和清除自由基作用。结果表明：鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽具有较强的还原能力且对O－2•、DPPH自由基、•OH具有清除效果,质量浓度为10 mg/mL时对•OH、DPPH自由基、O－2•的清除率和对Fe3+ 的还原能力分别为70.48%、68.78%、42.53%和0.676;分子质量小于2 000 D的鮟鱇皮胶原蛋白肽组分对•OH具有较好的清除效果,IC50为15.7 mg/mL;剂量为100 mg/（kg•d）时,显著提高了皮肤中SOD、GSH-Px、CAT的活性,较模型组分别增加20.9%、41.3%和58.1%,且显著抑制MDA的形成。     

罗非鱼皮胶原蛋白肽制备的工艺优化

以罗非鱼鱼皮为原料,研究利用酶法制备胶原蛋白肽制品。测定了罗非鱼皮的基木组成成分,利用低温连续相变萃取技术进行脱脂处理;以水解度、水解产物分子量和感官评定为指标,研究蛋白酶种类对酶解的影响;以水解度为指标,研究酶解条件对水解度的影响,并采用响应面试验对鱼皮胶原肽制备工艺进行优化;用凝胶过滤色谱法测定酶解液分子质量分布。结果表明:采用碱性蛋白酶水解鱼皮效果最好,酶解的最佳工艺条件为:时间7 h、加酶量7%、温度60℃、pH值10.38,在此条件下碱性蛋白酶水解罗非鱼皮的水解度最高可达23.01%。由本法所得胶原肽是以分子质量180~1000 u之间的寡肽(约2~8个氨基酸残基)为主的物质,具有较好的生理活性,可作为功能因子广泛应用于保健食品、化妆品、医药等各个行业当中。     

罗非鱼鳞胶原蛋白复合凝胶的防辐射作用及理化性质研究

为了研究罗非鱼鱼鳞胶原蛋白复合凝胶抗紫外辐射作用及理化性质的变化。本文采用三种促凝剂分别与鱼鳞胶原蛋白形成复合凝胶,研究促凝剂对其抗紫外辐射作用及理化性质的影响。结果表明:凝胶的吸光值随可得然胶质量的增加而减小;在紫外灯照射300s后,胶原蛋白和明胶、琼脂、可得然胶复合凝胶保护下的大肠杆菌存活率分别为0、46.43%±0.75%、33.28%±0.75%、62.06%±0.75%。因此,可得然胶复合凝胶抗紫外辐射效果最好;促凝剂的种类和质量对胶原蛋白的硬度、黏性和回弹性有明显影响;扫描电镜观察发现可得然胶与胶原蛋白有效结合,形成结构较稳定的复配物;通过流变学方法确定胶原凝胶的黏弹性发现,可得然胶形成的凝胶弹性模量G'和黏性模量G"较大,且时间和温度的变化对其影响较小。研究结果为罗非鱼鱼鳞胶原蛋白复合凝胶材料防辐射作用的研究提供了可以借鉴的科学依据。     

罗非鱼鳞抗氧化肽乳液的氧化稳定性

油脂氧化是使食品乳液变质的主要原因之一,控制乳液油脂氧化以保持食品营养和物理特性,延长货架期具有非常重要的意义。抗氧化肽具有良好的抗氧化性和乳化活性,是一种非常有前途的天然功能性食品添加剂。利用罗非鱼鳞抗氧化肽制备了水包油乳液,研究了乳液的微结构、抗氧化肽在油水相界面的分数、乳液的物理稳定性和氧化稳定性。结果表明:抗氧化肽单独作为乳化剂制备的乳液油滴较大,倾向于聚集,而添加吐温20乳液的油滴较小,分散性较好;抗氧化肽在油水界面分数较少,但随着抗氧化肽浓度的增加而显著增加,抗氧化肽浓度为5、10mg/mL时在油水相的分布更加均匀;抗氧化肽乳液具有较好的物理稳定性,增加抗氧化肽浓度能提高乳液的浊度,能有效抑制乳液中油脂的氧化。     

罗非鱼皮胶原肽的制备及抗氧化活性研究

采用酶法从罗非鱼皮中制取胶原肽,选用动物蛋白水解酶,当酶的添加量为0.5%,61℃,pH 6.7下水解3 h时,蛋白质的回收率为92.97%,水解度为9.37%.水解产物90%以上相对分子质量低于10 kD的胶原肽.胶原肽对由Fe^2＋引发的卵磷脂脂质体过氧化有一定抑制作用,同时对·OH具备一定的清除作用.     

发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽的工艺的研究

目的:研究利用枯草芽孢杆菌进行发酵法生产罗非鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺。方法:以罗非鱼皮和水为原料,接入枯草芽孢杆菌进行发酵,对罗非鱼鱼皮浓度、装液量、接种时间、接种量、发酵时间进行了考察,通过单因子实验和正交实验优化确定了最佳发酵工艺。结果:最佳发酵工艺为:罗非鱼鱼皮含量为3%,装液量为90mL/250mL,接种量为5%,接种时间为14h,发酵时间为52h。并且在此发酵工艺下,罗非鱼鱼皮蛋白的水解度高达36.88%。结论:采用枯草芽孢杆菌发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽,工艺简单、成本低、不污染环境、水解度高,是值得推广的制备胶原蛋白肽的方法。     

鳕鱼皮胶原蛋白肽的功能特性及抗氧化活性

以鳕鱼皮胶原蛋白肽为实验材料,研究其吸水性、保水性、乳化性等功能特性,并且进行了体外抗氧化实验。结果表明鳕鱼皮胶原蛋白肽具有较好的吸水性、保水性、吸油性和起泡性,具有一定的乳化性和较弱的泡沫稳定性。体外抗氧化实验结果显示,鳕鱼皮胶原蛋白肽对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除效果,且清除率与样品溶液的浓度存在剂量依赖关系;浓度为30mg/mL时,胶原蛋白肽对DPPH·、·OH和O2-·的抑制率分别可达到73.84%、85.76%、64.09%。分级后,分子量1ku以下的胶原蛋白肽对DPPH·和·OH的清除能力最强,30mg/mL时清除率达到84%和90.97%;分子量5ku以上的胶原蛋白肽对O2-·清除能力最强,30mg/mL时清除率达到74.02%。      

鳕鱼皮胶原蛋白肽的功能特性及抗氧化活性

以鳕鱼皮胶原蛋白肽为实验材料,研究其吸水性、保水性、乳化性等功能特性,并且进行了体外抗氧化实验。结果表明鳕鱼皮胶原蛋白肽具有较好的吸水性、保水性、吸油性和起泡性,具有一定的乳化性和较弱的泡沫稳定性。体外抗氧化实验结果显示,鳕鱼皮胶原蛋白肽对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除效果,且清除率与样品溶液的浓度存在剂量依赖关系;浓度为30mg/mL时,胶原蛋白肽对DPPH·、·OH和O2-·的抑制率分别可达到73.84%、85.76%、64.09%。分级后,分子量1ku以下的胶原蛋白肽对DPPH·和·OH的清除能力最强,30mg/mL时清除率达到84%和90.97%;分子量5ku以上的胶原蛋白肽对O2-·清除能力最强,30mg/mL时清除率达到74.02%。     

酶解大鲵皮胶原蛋白制备抗氧化肽工艺研究

为有效利用大鲵加工副产物大鲵皮,研究了大鲵皮胶原蛋白制备抗氧化肽的工艺条件。采用化学发光法,以羟自由基清除率为评价指标,通过单因素试验法,分别研究了酶的种类、酶添加量、酶解pH、温度和时间对大鲵皮胶原蛋白肽抗氧化活性的影响。在单因素试验的基础上,通过正交试验进一步优化了大鲵皮胶原蛋白制备抗氧化肽的工艺,确定了最适工艺条件:即酶添加量7000U/g,pH 8.5,温度55℃,时间4h,在此工艺条件下,大鲵皮胶原蛋白抗氧化肽清除羟自由基的清除率为83.15%。     

大口黑鲈鱼皮胶原蛋白肽的制备及抗氧化活性研究

目的：探究酶种类对胶原蛋白肽抗氧化活性的影响。方法：从大口黑鲈(Micropterus salmoides)鱼皮中提取胶原蛋白,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶酶解胶原蛋白,得到碱性蛋白酶酶解胶原蛋白肽(APP)、中性蛋白酶酶解胶原蛋白肽(NPP)、木瓜蛋白酶酶解胶原蛋白肽(PP)、胰蛋白酶酶解胶原蛋白肽(TP),比较其总抗氧化活性、还原活性、对DPPH·、·OH 和O-2·清除能力以及亚铁离子螯合能力和脂质氧化抑制活性。结果：4种蛋白酶酶解胶原蛋白肽都具有抗氧化活性,且抗氧化能力与胶原蛋白肽浓度呈正相关,其中APP的抗氧化活性最佳,总抗氧化活性和还原活性分别为1.725和0.958,对DPPH·和O-2·清除率分别为56.35%和38.41%。结论：碱性蛋白酶酶解的胶原蛋白肽抗氧化活性更佳。