超高效液相色谱-串联质谱法测定酱卤肉制品中1-甲基咪唑、2-甲基咪唑及4-甲基咪唑

建立了酱卤肉制品中同时测定1-甲基咪唑（1-methylimidazole,1-MEI）、2-甲基咪唑（2-methylimidazole,2-MEI）和4-甲基咪唑（4-methylimidazole,4-MEI）的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）的分析方法。样品经水提取,强阳离子交换固相萃取柱（Waters Oasis MCX）富集净化,氮吹复溶后,Agilent Zorbax HILIC（2.1 mm×100 mm,3.5 μm）色谱柱分离,以乙腈和5 mmol/L乙酸铵溶液为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子电离多反应监测模式（MRM）测定,同位素内标法定量。结果表明,1-MEI、2-MEI和4-MEI在30～400 ng/mL范围内,线性关系良好,相关系数均大于0.9997;方法检出限和定量限分别为10、30 μg/kg;在30、60、300 μg/kg加标水平下的平均回收率为92.0%～116.3%,相对标准偏差（n=6）为0.70%～3.96%。采用该方法对市售的36批次酱卤肉制品进行检测,1-MEI均未检出;2-MEI检出率为5.5%,含量为21.4～23.6 μg/kg;4-MEI检出率为100%,含量为3.1～306.6 μg/kg。该方法灵敏、快速、准确,适用于酱卤肉制品中1-MEI、2-MEI和4-MEI的定性定量测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定客家娘酒中的2-甲基咪唑、4-甲基咪唑及5-羟甲基糠醛

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定客家娘酒中的2-甲基咪唑(2-methylimidazole, 2-MEI)、4-甲基咪唑(4-methylimidazole, 4-MEI)和5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural, 5-HMF)的分析方法。方法 样品经过直接稀释法和标准加入法分别进行前处理, 使用ACQUITY UPLC BEH HILIC (100 mm× 2.1 mm, 1.7 μm)色谱柱进行样品分离, 以甲醇-5 mmol/L氨水为流动相进行梯度洗脱, 采用电喷雾离子源正离子模式和多反应监测模式进行检测。结果 在优化条件下, 2-MEI和4-MEI在1~500 ng/mL范围内线性关系良好, 相关系数(r2)为0.9998和0.9998, 5-HMF在50~8000 ng/mL线性范围内r2为0.9970。2-MEI、4-MEI和5-HMF在低、中、高3个浓度添加水平下的回收率范围分别为88.7%~108%、77.5%~102%和95.7%~98.4%, 相对标准偏差分别为4.16%~10.50%、2.04%~5.49%和3.10%~6.62%。2-MEI、4-MEI和5-HMF的检出限分别为3、3和17 ng/mL, 定量限分别为10、10和50 ng/mL。结论 本方法操作简便、线性关系良好、回收率高, 适用于客家娘酒中2-MEI、4-MEI和5-HMF的检测。     

酱油中内源性苯甲酸本底含量调查与溯源分析

对酱油中内源性苯甲酸的本底值进行调查及溯源分析。所有生产跟踪样品均采自生产企业,其中酱油原油以及零添加酱油中苯甲酸检出率为100%,含量范围为7.52～17.09 mg/kg,均值为12.72 mg/kg;零添加酱油预售品和零添加酱油中苯甲酸含量均值分别为13.15 mg/kg和13.31 mg/kg。对酱油生产过程中苯甲酸含量以及苯甲酸δ13C值跟踪分析表明,酱油中苯甲酸主要来源于原料带入,由于苯丙氨酸降解所致,货架期期间苯甲酸含量呈增加趋势,平均年增加率为14.26%、年增加量为1.80 mg/kg。市售不同厂家的常规酱油和零添加酱油中苯甲酸含量差异较大,零添加酱油中苯甲酸含量均值为13.38 mg/kg,与生产跟踪结果一致。本研究阐明了酱油中内源性苯甲酸本底值与生成途径,将为零添加酱油的市场监管提供基础数据。     

食品中桔霉素含量的测定

桔霉素为红曲霉的次级代谢产物,对肾脏具有显著毒性。实验选取了米醋、黄酒、米酒、果汁、酱油、腐乳等食品,通过高效液相荧光检测其桔霉素含量,采用岛津VP-ODS C18柱,柱温30℃,流动相:乙腈∶超纯水(pH 2.5)为30∶70,流速0.8mL/min,检测波长λex=331nm,λem=500nm。结果发现一些腐乳、酱油、黄酒、米醋的桔霉素含量均在0.2mg/kg以上,超过了国外食品中桔霉素限量。具体为:红方腐乳6.0301mg/kg,白方腐乳0.6324~0.6613mg/kg,酱油1.1624~3.2513mg/L,米醋0.2521~0.6710mg/L,黄酒0.1425~1.1102mg/L。香糟卤的桔霉素含量是0.1282mg/kg,臭豆腐腐乳的桔霉素含量超过0.0811mg/kg。果汁、米酒等食品的桔霉素含量都低于0.05mg/kg。     

HPLC-MS/MS快速测定常见食品中羧甲基赖氨酸含量

采用高效液相色谱串联质谱联用技术(HPLC-MS/MS)测定了几种高蛋白食品中羧甲基赖氨酸(CML)的含量,包括:液态牛奶,奶粉,饼干,面包和蛋白类发酵食品——酱油。对样品进行还原、沉淀、水解以及除杂后上样检测,对固相萃取柱及洗脱液进行了优化,采用外标法定量,HPLC-MS/MS的分析时间为25 min。其中酱油和饼干中CML的含量最高达到(385.59±7.73)mg/kg蛋白和(491.75±3.13)mg/kg蛋白,奶粉中CML的含量是最低的(45.66±2.89)mg/kg蛋白。     

酱油中胱氨酸的高效液相色谱-串联质谱法测定

采用高效液相色谱-串联质谱技术建立了酱油中胱氨酸的分析方法。酱油样品用甲醇-水为提取溶液,加入乙二胺-N-丙级硅烷(PSA)和十八烷基硅烷(C18)吸附剂除去杂质,无需衍生化处理,采用亲水作用色谱(HILIC)柱,以乙腈/0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱进行液相色谱分离。结果显示在0.02~0.12μg/mL具有良好的线性关系,r=0.9996。方法的检出限(LODs,信噪比为3)在0.15mg/kg,定量下限(LOQs,信噪比为10)为0.5mg/kg。在生抽和老抽两种阴性基质中3个加标水平的回收率都在82.8%~108.2%,加标含量范围在0.5~1.0mg/kg,相对标准偏差(RSD,n=8)在1.19%~7.57%。方法的前处理简便,灵敏度和回收率高,选择性好,适用于酱油中胱氨酸含量的检测,也为鉴别"毛发水酱油"提供了有效检测手段。     

QuEChERS萃取-液相色谱法测定酱油和酱制品中三氯蔗糖

建立了Qu ECh ERS萃取-液相色谱法测定酱油和酱制品中三氯蔗糖含量的分析方法。样品以乙腈作为萃取溶剂,采用改进的Qu ECh ERS方法进行萃取。以乙腈和水为流动相,C18色谱柱分离,液相色谱-蒸发光散射检测器进行检测。三氯蔗糖在20～1 500μg/m L呈良好线性关系,相关系数(r2)> 0. 99; 3个水平下的加标回收率为83. 2%～95. 4%;相对标准偏差(RSD)为4. 1%～6. 3%;方法检出限为1 mg/kg,定量限为3 mg/kg;方法简单、快速、准确可靠,适用于酱油及酱制品中三氯蔗糖的快速检测。     

一种快速测定食醋和酱油中脱氢乙酸含量的高效液相色谱法

建立一种简单、高效、准确测定食醋和酱油中脱氢乙酸（DHA）的液相色谱法。探讨了样品前处理的提取溶剂、蛋白沉淀剂、提取温度和净化方式等参数对提取的回收率和精密度的影响。获得了样品前处理的最佳条件：水为提取溶剂，硫酸锌和亚铁氰化钾（v/v=1∶1）联合使用作为蛋白沉淀剂，30～50℃超声提取20 min。该方法效率高、重现性好，回收率高，在5.0 mg/kg～100 mg/kg的加标水平下，食醋和酱油中DHA的加标回收率为96.91%～99.59%，相对标准偏差（RSD）小于5%(n=3)。该方法在1.0～100μg/mL浓度范围线性关系良好，相关系数大于0.999。方法的检出限和定量限分别为0.24 mg/kg和0.73 mg/kg。在实际样品的检测中，该方法与国标方法的检测结果无显著性差异，结果表明，该方法适用于食醋和酱油样品中DHA的检测。     

17种市售广式酱油中风味物质的检测分析

广式酱油是国内产销量最大的一类酱油,不仅风味独特而且调味效果好。为进一步明晰广式酱油的风味构成,该实验运用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）、高效液相色谱仪（HPLC）与全自动氨基酸分析仪对酱油中的挥发性风味物质、氨基酸、有机酸进行分析。结果表明,苯乙醇（69.79～11 079.31 μg/kg）、苯乙醛（43.62～92 052.78 μg/kg）、4-乙基愈创木酚（71.47～13 086.21 μg/kg）、愈创木酚（79.78～11 542.93 μg/kg）与3-苯基-呋喃（52.61～10 009.73 μg/kg）对广式酱油香气活性值（OAV）贡献较大;谷氨酸（4.85～77.24 mg/g）对酱油滋味活度值（TAV）贡献最大且远高于其他氨基酸,其次是缬氨酸（1.58～4.21 mg/g）、丙氨酸（1.28～5.07 mg/g）与赖氨酸（1.46～3.74 mg/g）等;TAV贡献最大的有机酸是丁二酸（23.78～193.16 mg/mL）,其次是柠檬酸（7.29～173.24 mg/mL）。     

高效液相色谱法测定发酵调味品中5-羟甲基糠醛

采用10%甲醇水提取酱油、食醋、甜面酱、豆瓣酱等发酵调味品中5-羟甲基糠醛（5-HMF）,用高效液相色谱仪定量分析其含量。结果发现,5-HMF的加标回收率在99.2～104.8%之间,说明该方法具有操作简便、灵敏度高、准确等特点。对市面上常见的发酵调味品酱油、食醋、甜面酱、豆瓣酱等进行5-HMF污染水平评价,结果表明甜面酱中5-HMF平均值高达207.38mg/kg,醋中5-HMF含量范围为2.993～132.676mg/kg,豆瓣酱、酱油中5-HMF含量检出值均低于5mg/kg。     

挥发性铵盐盐析辅助液液萃取结合超高效液相色谱-串联质谱法测定酱油中4种黄曲霉毒素

摘要：目的 建立基于挥发性铵盐盐析辅助液液萃取结合超高效液相色谱-串联质谱技术检测酱油中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 4种黄曲霉毒素含量的分析方法。方法酱油样品用乙腈提取，乙酸铵作为盐析助剂分层，提取液加水定容后，采用C18反相色谱柱以5mmol/L乙酸铵溶液-甲醇/乙腈为流动相进行梯度洗脱，采用电喷雾正离子模式检测，外标法定量。实验考察了萃取溶剂、盐析助剂及pH对萃取效率的影响。结果 最优实验条件下，在0.2~8.0 μg/kg范围内4种黄曲霉毒素线性良好，决定系数均大于0.999，检出限为0.01~0.04 μg/kg，对空白酱油样品进行0.8 μg/kg、4.0 μg/kg、8.0 μg/kg三个水平的加标实验，回收率为73.2~94.5%，相对标准偏差为0.9~5.9%。结论 新建立的方法操作简捷、成本低、准确度高，可以满足对酱油中4种黄曲霉毒素的快速准确分析要求。     

高效液相色谱内标法测定酱油中糖精钠和苯甲酸钠

以山梨酸钾为内标物,采用高效液相色谱法测定酱油中的糖精钠和苯甲酸钠的含量。样品经体积分数为50%的乙醇溶液提取后,采用Nova-Pak C18色谱柱(3.9 mm×15 mm×5 μm)分离,以甲醇-0.02 mol/L乙酸铵（5∶95,V/V）为流动相进行洗脱,流速1 mL/min,紫外检测波长230 nm。结果表明,在0.1～1.4 mg/kg的添加范围,糖精钠、苯甲酸钠的加标回收率分别为99.5%～102.3%,95.1%～102.1%,相对标准偏差(RSD)分别为0.69%和0.82%。所测酱油中糖精钠和苯甲酸钠的含量分别为3.27 mg/kg和0.133 mg/kg。采用该方法回收率高、准确性好,可用于酱油中糖精钠和苯甲酸钠含量分析。     

高效液相色谱法同时检测酱油中8种防腐剂

建立了同时检测酱油中苯甲酸、山梨酸和6种对羟基苯甲酸酯的高效液相色谱-二极管阵列检测器(High performance liquid chromatography-diode array detector,HPLC-DAD)定量分析方法。酱油样品经0.1%甲酸乙腈提取后采用BEH Shield RP18色谱柱分离,乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,外标法定量。结果表明:8种防腐剂在(0.1~25)mg/kg范围内线性关系良好(r~2=1.0000);方法检出限介于(0.1~0.25)mg/kg之间,在3个浓度水平的加标回收率为97.3%~101.4%,相对标准偏差为0.83%~2.81%(n=6)。该方法操作简便、净化效果好、准确度高,适用于酱油中防腐剂的检测。     

黑豆酱油的开发及其品质分析

以黑豆为原料,采用原池浇淋工艺制备黑豆酱油,并对其品质进行分析。结果表明,黑豆酱油呈黑褐色、酱香浓郁、味道鲜美,其可溶性无盐固形物（16.62 g/100 mL）、全氮（1.53 g/100 mL）、氨基酸态氮（0.85 g/100 mL）含量均高于黄豆酱油,原花青素含量为24.2 mg/100 g,大豆异黄酮含量为6.82 mg/100 g,并可满足相关国标特级酱油要求。黑豆酱油中共鉴定出75种风味化合物,以醇类（740.54 μg/kg）、醛类（230.90 μg/kg）、酯类（121.01 μg/kg）为主;共检测出17种游离氨基酸（含7种必需氨基酸）,总含量为37 749.61 μg/mL（其中必需氨基酸含量为16 793.43 μg/mL）。该工艺制备黑豆酱油生产周期短、产品风味丰满,具有良好的营养保健功效及开发应用前景。     

基于QuEChERS-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定酱油类调味品中的氨基甲酸乙酯

建立四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测酱油类调味品中氨基甲酸乙酯的方法。样品采用乙腈提取,经优化后的QuEChERS方法净化后,用高分辨质谱QExactive进行测定。该实验对目标物二级特征碎片进行同位素匹配,推测断裂规律,并对不同酱油类样品完成基质效应评价。结果表明:该方法在1～20μg/L范围内的线性范围良好,精密度与准确度高,检出限达到1.5μg/kg,4种不同类酱油对均无基质效应,适用于酱油中氨基甲酸乙酯的快速检测与确证分析。     

超快速液相色谱测定食品中对羟基苯甲酸酯类

对比建立了超快速液相色谱测定食品中4种对羟基苯甲酸酯类防腐剂的分析方法,在5min内完成样品分析,检测灵敏度高,样品前处理方法简捷,并能有效避免假阳性的干扰,保障了定性的可靠性和定量的准确性。对市售部分果汁、饮料、腌菜及酱油样品进行检测,线性相关系数达0.9999,最低检出限降低为0.9mg/kg,加标回收率可达89.9%以上。     

优化气相色谱法测定酱油中对羟基苯甲酸酯类含量的方法

目的:优化气相色谱法测定酱油中对羟基苯甲酸酯类含量的分析方法。试样先后经饱和氯化钠溶液洗涤,盐酸酸化,无水乙醚提取,碳酸氢钠溶液洗涤后浓缩近干,无水乙醇溶解的条件下以外标法定量,通过5种不同极性的色谱柱与柱温箱温度的系列变化进行测试,最终确定最佳分离柱为Inert Cap 1301,柱温箱的初始温度为90℃。结果:对羟基苯甲酸酯类的加标回收率在91%～103%之间,相对标准偏差在0.6%～0.8%之间,对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯与对羟基苯甲酸丁酯的方法检出限分别为0.528mg/kg、0.497mg/kg、0.473mg/kg与0.440mg/kg。结论:优化仪器分析方法后,测定酱油中对羟基苯甲酸酯类含量的灵敏度明显提高,分析时间明显缩短,加标回收良好,这有利于提高检测分析效率,减小分析时间成本。     

蒸汽爆破花生壳对花生酱油风味的影响

为促进花生壳再利用,将其经蒸汽爆破后代替部分面粉酿造花生酱油,并采用电子鼻检测及顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用技术（HS-SPME-GC-MS）法对5种酱油样品的风味进行分析。电子鼻结果表明,添加花生壳或蒸汽爆破花生壳会影响酱油的整体风味;GC-MS结果表明,不添加花生壳酿造的酱油（HS0）风味物质主要由酯类构成,其相对含量高达85.35%;添加花生壳的酱油（HS1、HS2）风味物质总含量只有HS0（128.40 mg/kg）的21.79%～33.59%,且酯类相对含量下降至21.95%～38.47%;添加蒸汽爆破花生壳的酱油（BS3、BS4）风味物质组成结构（酯类相对含量为46.28%～86.51%）与HS0具有一定相似性,风味物质总含量大幅度提升（分别为514.89 mg/kg、451.74 mg/kg）,远高于HS0,其中蘑菇醇、十六酸乙酯、亚油酸乙酯等香气活性物质更突出。结果表明蒸汽爆破花生壳代替部分原料可明显提升酱油风味。     

高效液相色谱法测定发酵食品中组胺的含量

建立了柱前衍生—高效液相色谱分析食品中组胺含量的方法,通过对广州市售不同品牌的大豆发酵制品、酸奶和啤酒中组胺含量的测定,对各种食品的组胺含量有一个初步的了解,为保障食品安全提供技术依据。检测结果为豆豉中组胺平均浓度为464.28 mg/kg,豆酱为481.50 mg/kg,酱油为461.78 mg/L,三类大豆发酵制品组胺浓度平均值没有明显区别;酸奶样品中组胺平均含量为312.15 mg/kg;啤酒样品中组胺平均含量为2.36 mg/L。广州市售的大豆发酵制品、酸奶和啤酒中均有组胺检出,其中大豆发酵制品中组胺含量普遍较高。     

毛细管液相色谱测定食品中对羟基苯甲酸酯类防腐剂

建立了利用毛细管液相色谱测定食品中7种对羟基苯甲酸酯类防腐剂的分析方法。牛乳、乳饮料及植物蛋白饮料采用乙腈超声提取,酱油样品采用90%甲醇水溶液超声提取,提取液经反相毛细管液相色谱柱分离,流动相乙腈-水梯度洗脱,泵流速0.05 mL/min,紫外检测器254 nm检测。该方法在1.0~100μg/mL质量浓度范围内线性关系良好(r2≥0.999),在液体乳、乳饮料和植物蛋白饮料中的定量限为2.5 mg/kg,在酱油中的定量限为10 mg/kg,加标回收率为75.2%~94.1%,相对标准偏差小于6%。该方法操作简单、经济、绿色环保,为食品中对羟基苯甲酸酯的检测提供了新的技术手段。