麦麸多肽抗氧化及吸湿保湿性能的测定

采用超声提取法提取麦麸蛋白,并利用风味蛋白酶和碱性蛋白酶混合酶法进行酶解反应制备麦麸多肽。通过对麦麸多肽抗氧化性能测定,发现其具有一定的自由基清除能力,对ABTS自由基清除能力与维生素C相当,且对亚油酸的自氧化有显著的抑制作用。通过进一步考察其保湿性能,证实麦麸多肽具有一定的吸湿保湿能力,尤其在高湿环境中展现出超强的吸湿和保湿能力,在化妆品保湿方面有较大的应用前景。     

双酶水解芝麻11S蛋白制备抗氧化肽的工艺研究

芝麻11S蛋白是芝麻蛋白的主体,研究其在水解过程中产生的多肽的抗氧化能力有利于深入了解水解芝麻蛋白制备抗氧化肽的作用机理,更好地指导实际加工生产过程。探索了混料酶(Alcalase和胰蛋白酶以酶活比为1∶1混合)水解芝麻11S蛋白产物抗氧化性的工艺条件。通过单因素试验讨论了水解过程中加酶量、p H、温度、时间、底物浓度这5个因素对水解多肽产率、DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率和总抗氧化能力的影响,确定了水解所需最适加酶量和底物浓度,并筛选出用于响应面优化试验的水解p H、温度、时间的范围。通过响应面优化试验,得到水解芝麻11S蛋白多肽产物抗氧化能力相对较高的工艺条件为:温度44.81℃,加酶量10 000 U/g,水解p H 8.6,底物浓度3%,时间1.96 h。在此条件下,实际测定多肽产率为(77.41±0.30)%,总抗氧化性为(1.40±0.02)mmol/L,DPPH自由基清除率IC50值为1.41 mg/m L,ABTS自由基清除率IC50值为1.06 mg/m L。结果表明,响应面所建立的回归模型方程准确可靠,而且与其他天然抗氧化肽相比,芝麻11S蛋白显示出较好的抗氧化活性,具有制备高活性抗氧化肽的能力,为进一步分离纯化芝麻11S蛋白抗氧化肽提供了参考。     

双酶酶解制备花生多肽的工艺研究

以水解度和蛋白提取率为指标,采用胰蛋白酶和风味蛋白酶双酶复合酶解花生粕制备花生多肽.结果表明,双酶复合酶解花生粕的最佳工艺条件为:风味蛋白酶与胰蛋白酶的添加比例为5∶4、pH为8.0、处理温度为50℃、底物浓度为5%.在此条件下酶解3 h水解度达到11.71%,蛋白提取率达到63.86%,多肽得率高达52.15%;酶解24 h,水解度达到26.21%,蛋白提取率及多肽得率分别降低至53.56%和26.88%.     

响应面法优化核桃ACE抑制肽的制备工艺研究

以核桃分离蛋白为原料,用Neutrase 0.8L酶解制备高活性的ACE抑制肽.采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定酶解多肽的ACE抑制率,同时以水解度和ACE抑制率为考查指标,通过单因素试验及响应面试验设计,优化了中性蛋白酶（Neutrase 0.8L）酶解核桃分离蛋白的酶解工艺.结果表明：各因素对水解度的影响顺序为pH〉温度〉E/S,对ACE抑制率的影响顺序为pH〉E/S〉温度;最佳酶解工艺条件为：pH 6.81、温度55℃、时间2h、底物质量浓度2%、酶与底物比3.43%,酶解产物的水解度达到8.52%,ACE抑制率达到67.94%.     

响应面优化弹性蛋白酶酶解罗非鱼下脚料的工艺研究

以罗非鱼加工鱼片的下脚料鱼头、鱼骨、鱼尾等为原料,选用弹性蛋白酶对其水解,通过响应面进行分析并优化酶解条件.以水解度与多肽含量为指标,分别对酶浓度、温度、pH值、料液比、酶解时间等因素对弹性蛋白酶酶解罗非鱼下脚料水解效果的影响进行分析.结果表明,弹性蛋白酶水解罗非鱼加工下脚料的最佳条件为：酶浓度0.553 mg/g,料液比1:5、自然pH、温度41.94 ℃、酶解3.31 h,在此条件下得到的水解度为18.09%,多肽含量为0.9 mg/mL.     

超声辅助酶解谷朊粉制备ACE抑制肽工艺优化

以谷朊粉为原料,采用超声辅助碱性蛋白酶酶解制备ACE抑制肽,并对碱性蛋白酶酶解条件进行单因素分析及正交试验设计,确定最优的水解工艺条件.研究结果表明:超声波作用能够提高酶解的水解度和抑制率,同时能够缩短酶解的反应时间.各因素对水解度的影响顺序为:超声功率>酶浓度>温度>时间;最佳酶解工艺条件为:酶浓度为30 mg/g、功率为250 W、时间为60min、温度为50℃,此时水解度为14.64%,抑制率为80.37%.     

菜籽凝血酶抑制肽的酶法制备研究

以菜籽蛋白为原料,比较多种蛋白酶(碱性蛋白酶2709、Alcalase 2.4L、Protex 6L、Protex 7L和Neturase 1.5MG)对菜籽蛋白水解特性的影响,以及不同水解产物的凝血酶抑制活性,确定Alcalace 2.4L为制备菜籽抗凝血肽的最佳用酶,并获得其最优制备工艺条件为:底物浓度3.0g/100 mL、温度60℃、pH 8.5、加酶量7 000 U/g、酶解时间2.0 h,在此条件下菜籽蛋白的水解度为18.1%,酶解液的凝血酶抑制率达到98.8%.     

菜籽凝血酶抑制肽的酶法制备研究

以菜籽蛋白为原料,比较多种蛋白酶(碱性蛋白酶2709、Alcalase 2.4L、Protex 6L、Protex 7L和Neturase 1.5MG)对菜籽蛋白水解特性的影响,以及不同水解产物的凝血酶抑制活性,确定Alcalace 2.4L为制备菜籽抗凝血肽的最佳用酶,并获得其最优制备工艺条件为:底物浓度3.0g/100 mL、温度60℃、pH 8.5、加酶量7 000 U/g、酶解时间2.0 h,在此条件下菜籽蛋白的水解度为18.1%,酶解液的凝血酶抑制率达到98.8%.     

鸡蛋清蛋白酶解肽的抗氧化活性

分别采用胃蛋白酶和碱性蛋白酶对鸡蛋清蛋白进行单酶和双酶水解,筛选得到水解度较高的鸡蛋清蛋白酶解产物Ⅰ(P-A)H,并对上述酶解产物依次进行超滤和树脂分离,得到高活性的组分ⅠF2。通过总还原力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和羟自由基(·OH)抗氧化评价体系,分析酶解产物Ⅰ(P-A)H和组分ⅠF2的抗氧化能力。结果表明:Ⅰ(P-A)H具有较强的总还原力和DPPH清除力以及显著的·OH清除能力;组分ⅠF2与酶解产物Ⅰ(P-A)H的抗氧化活性相比,其活性显著性提高。     

鸭肉蛋白酶解液制备的工艺优化

为了使鸭肉香精制备过程中的美拉德反应可以获得更好的前期条件,通过复合蛋白酶对鸭肉蛋白进行酶解,以鸭肉蛋白酶解后的水解度为指标,通过单因素试验和正交试验来确定鸭肉蛋白酶解液制备的最佳酶解条件。结果表明:用肉类水解专用酶与风味蛋白酶组成复合的水解蛋白酶,其最佳酶比为肉类水解专用酶:风味蛋白酶=2∶1;酶解最适时间为5 h;最适酶解温度为50℃;最佳酶解起始pH为7.5;最适宜的加酶量为0.3%(W/W)(以肉类水解专用酶计),该参数下鸭肉蛋白的水解度可以达到34.1%。     

Alcalase酶解芝麻蛋白制备ACE抑制肽的工艺研究

以芝麻蛋白为原料,采用酶解法制备血管紧张素转化酶(Angiotensin I-Converting Enzyme,ACE)抑制肽。通过比较Alcalase酶、碱性蛋白酶2709、胰蛋白酶、菠萝蛋白酶和中性蛋白酶的酶解结果,筛选出Alcalase酶作为制备ACE抑制肽的工具酶。通过单因素试验,分析了时间、p H、加酶量、温度及底物浓度对短肽生成率和水解度的影响。基于单因素试验结果,固定加酶量为3 000 u/g和底物浓度为3%,以短肽生成率和ACE抑制率为考察指标,通过响应面优化试验确定Alcalase的最佳水解条件为:时间147 min,p H 8.24,温度55℃。在此条件下短肽生成率和ACE抑制率分别为75.27%和70.80%,IC50值为1.004 mg/m L。     

栉孔扇贝裙边酶解物及其美拉德产物特性

以中性蛋白酶和木瓜蛋白酶为工具酶,制备栉孔扇贝裙边酶解物。研究了酶解物的水解度(DH)、肽分子质量分布、氨基酸组成、酶解物及美拉德产物清除DPPH自由基的能力。结果表明,加酶量3 000U/g,底物质量分数4%,酶解时间3h,经中性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解获得的酶解物水解度分别达到了37.6%和19.2%。酶解物中的肽分子质量以3ku以下为主,其中木瓜蛋白酶水解产物占59.7%~67.6%,中性蛋白酶水解产物占64.5%~78.2%。随着酶解时间的延长,酶解物对DPPH的清除能力逐渐提高。经美拉德反应后,IC_(50)降低到酶解物的1/17~1/36,抗氧化能力显著提高。     

酶解大豆粉蛋白条件优化研究

从底物浓度、pH值、酶解温度、加酶量、酶解促进剂和酶解时间等方面研究了碱性蛋白酶Alcalase和木瓜蛋白酶复合对全脂大豆粉酶解的影响,并运用单因素和正交试验设计优化酶解条件.结果表明,底物体积分数4.5%、pH值8.5、温度60℃、复合酶加酶量（碱性蛋白酶Alcalase与木瓜蛋白酶活力之比为2∶1）2 640 U/g,添加5 mmol/L Mn2＋酶解180 min效果较好,水解度达到17.8%.     

不同蛋白酶酶解河蚬产物的抗氧化活性研究

以河蚬为原料,采用Alcalase、Neutrase、Flavourzyme、Papain四种蛋白酶水解河蚬,考察不同酶酶解产物的抗氧化活性包括DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基(O-2·)清除能力、羟自由基(·OH)清除能力及还原力。研究发现,Alcalase2 h酶解产物DPPH自由基清除能力最佳,清除率为83.17%,Alcalase8 h酶解产物O-2·的清除率最高达到72.52%。Papain6 h酶解产物·OH清除效果最佳,清除率达83.86%,Papain 6 h酶解产物还原力最高,酶解产物OD700nm值为0.74。可见蛋白酶种类和酶解时间对河蚬酶解产物的抗氧化活性具有较大影响,且抗氧化活性指标不一样,不同的蛋白酶酶解河蚬产物的抗氧化活性也有较大差异。     

碱性蛋白酶酶解鸡蛋清抗氧化肽的分离纯化

用碱性蛋白酶水解蛋清制备酶解液,通过超滤、离子交换、凝胶层析等手段对鸡蛋清酶解液抗氧化肽进行分离纯化并用薄层层析检验其纯度。研究表明,鸡蛋清酶解液经超滤除去杂蛋白,经DEAE-52离子层析分离出5个组分,其中组分2的抗氧化活性最强,超氧阴离子半抑制(IC50)质量浓度为13.32mg/mL,纯化倍数为2.51,蛋白回收率为25.04%。组分2经Sephadex G-25葡聚糖凝胶进一步分离得3个组分,其中组分3超氧阴离子的清除活性最强,其IC50为5.63mg/mL,纯化倍数达到5.93,蛋白回收率为13.42%,经薄层层析检测为单点,说明蛋清抗氧化肽得到纯化。     

双酶酶解11S球蛋白的工艺优化研究

以大豆分离蛋白为原料,采用等电点冷沉法提取11S大豆球蛋白,选用碱性蛋白酶、胃蛋白酶对11S大豆球蛋白进行双酶酶解。以水解度为指标,考察酶添加量、温度、p H和时间对酶解液水解度的影响,通过单因素试验和正交试验得到最佳水解工艺条件。在单酶水解的基础上,组合碱性蛋白酶和胃蛋白酶,按照分步水解的方式对11S大豆球蛋白进行复合酶解,得到的最优参数为:胃蛋白酶在温度35℃、p H 3.0、酶添加量1 500 U/g的条件下水解1 h,碱性蛋白酶在温度50℃、p H 10、酶添加量12 000 U/g的条件下水解5 h,得到的11S球蛋白酶解物水解度为19.65%,比碱性蛋白酶单酶水解时高14%。     

亚铁血红素的酶法制备及其保护工艺

选用碱性和风味酶对血红蛋白进行复合酶解制取亚铁血红素,分别利用单因素、正交和回归试验优化水解条件,且采用单一抗氧化剂、还原剂及抗氧化剂/还原剂组合保护亚铁血红素中的二价铁。试验结果表明:在碱性蛋白酶底物质量分数为7%,酶质量分数为1%,pH值为8,酶解2h,二次酶解风味酶pH值为6.5,酶质量分数为2%,继续酶解2h,亚铁血红素得率可达到11.18mg/mL;保护剂亚硫酸钠(0.03%)/L-抗坏血酸棕榈酸酯(0.03%)的亚铁保护性能最强,可使亚铁血红素得率达到12.60mg/mL,提高了11.27%。     

超声波辅助酶解制备花生抗氧化肽的研究

选用风味酶、Alcalase酶和双酶酶解花生蛋白,采用超声波辅助酶解制备花生抗氧化肽.以水解度为评价指标,研究超声预处理、水浴处理和超声波与酶同时处理对花生分离蛋白酶解过程的影响.结果表明:3种酶解过程中,在相同酶解时间下,超声预处理的水解度均大于水浴处理和超声波与酶同时处理.超声预处理辅助Alcalase酶酶解8h时水解度最大,为29.81％.酶解过程中随着水解度增大,花生肽的还原力均呈现先增高后降低的趋势.Alcalase酶超声预处理条件下制备的花生肽还原力最大,其抗氧化能力相当于浓度为50.92 μg/mL的Vc.     

蛋白酶水解鳗鱼鱼头蛋白质工艺的研究

研究了Alcalase碱性蛋白酶、复合蛋白酶Protamex、中性蛋白酶Neutrase、风味蛋白酶Flavorzyme、木瓜蛋白酶等5种蛋白酶对鳗鱼鱼头蛋白质的水解效果.结果表明:Alcalase碱性蛋白酶酶解鳗鱼鱼头蛋白质的效果最佳,在55℃、pH9、反应时间200 min、酶量48 AU/kg的条件下,水解度达到12.12%.     

响应面分析法在菜籽蛋白酶水解研究中的应用

应用响应面分析方法对影响菜籽蛋白的酶水解的因素进行分析 ,得到复合风味蛋白酶的最佳酶水解条件为温度 5 5 5℃ ,pH6 2 ,酶与底物浓度比 74 3LAPU/g ,底物浓度 1 2 0 % ,水解时间 3h ,最佳酶水解条件下的水解度为 2 6 4% .在最佳酶水解条件下对水解度和时间的关系进行了研究 ,证实了预测值和实测值是一致的 .