高效液相色谱法测定酵母浸粉中维生素B_6的含量

建立了高效液相色谱法测定酵母浸粉中维生素B6含量的方法。色谱条件为Symmetry-C18柱(3.9 mm×150mm,5μm);流动相:A相为甲醇,B相为含0.05 g/L的EDTA和1.1 g/L的庚烷磺酸钠的2.5%的乙酸溶液(p H 3.40),以V(A)∶V(B)为1∶6比例等度洗脱;流速为0.8 m L/min;柱温为30℃;检测波长为280 nm;样品分析时间为10 min。结果表明:维生素B6的线性范围为0.10~100.00μg/m L(r=0.999 9)。该方法检出限位16.0μg/100 g,定量限为50.0μg/100 g。日间和日内精密度均小于15%,低、中、高三种浓度下酵母浸粉样品中维生素B6的提取回收率分别平均为93.16%±2.00%、96.70%±2.08%、93.76%±1.79%(n=4)。此法操作简便、快速、准确,可作为酵母浸粉中维生素B6含量的检测方法。     

液相色谱-串联质谱法测定咀嚼片中B12含量

目的建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定多种维生素咀嚼片(儿童型)中维生素B12的分析方法,为维生素B12及其制剂的含量测定提供参考。方法样品中的维生素B12用10 mmol/L乙酸铵超声提取,三氯甲烷沉淀蛋白质,以10 mmol/L乙酸铵-甲醇作为流动相经SUPELCO DiscoveryHS C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm)梯度洗脱分离,流速0.6 m L/min,采用LC-MS/MS在正离子模式下检测,外标法定量。结果 LC-MS/MS法在30~150 ng/m L范围内,维生素B12的浓度和峰面积的线性良好,相关系数r=0.993,精密度为2.4%,在不同的添加水平下,方法的回收率85.9%~95.7%,检出限为5 ng/g。结论液相色谱-串联质谱法简单快速、灵敏度高、准确性强,适用于保健食品中维生素B12的分析。     

高效液相色谱法测定饮料中B族维生素

建立高效液相色谱测定饮料中B族维生素含量的方法。采用直接或者稀释后0.22μm孔径滤膜过滤直接上样,使用Phenomenex C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,采用水、乙腈、甲醇三相梯度洗脱,紫外检测波长为266 nm。结果显示,5种B族维生素在1μg/m L~100μg/m L范围内线性关系良好(R~2=0.997 5~0.999 4),平均加样回收率为95.75%~102.38%,平均相对标准偏差(RSD)为1.39%~2.92%。该方法简便、快速、准确、灵敏,可用于饮料中B族维生素含量的测定。     

免疫亲和-HPLC法测定婴幼儿配方乳粉中维生素B_(12)

目的:建立免疫亲和-高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中维生素B12的方法。方法:样品经缓冲溶液提取、过滤,滤液过维生素B12免疫亲和柱净化后,洗脱液在60℃下氮吹定容上机。采用C18色谱柱,柱温为30℃,流动相为乙腈和水(15∶85),梯度洗脱,流速为0.25m L/min,紫外检测器波长为361nm,外标法定量。结果:维生素B12在0.01~1μg/m L范围内呈良好线性关系,相关系数(r)为0.999 9。本方法的检出限为5μg/kg。在样品中添加不同添加量水平的标准物质,加标回收率为80%~89%;选择不同含量的样品,重复测定相对标准偏差(RSD)为0.3%~1.6%。结论:该方法较现行国标GB 5413.14—2010的微生物法操作简便,易于掌握,可提高工作效率。     

亲水高效液相色谱法测定饮料中的维生素C含量

目的:建立一种简便、快速、灵敏的测定饮料中维生素C含量的方法。方法:采用氨基丙基色谱柱Agilent Zorbax carbohydrate(250mm×4.6mm,5μm),流动相为0.02mol/L磷酸二氢钾+甲醇=95+5,流速1.0m L/min,检测波长:249nm,柱温:25℃,测定饮料中的维生素C含量。该方法检测线性范围为1.46~146μg/m L,样品检出限为0.08μg/m L,加样回收率为99.34%。结论:该方法利用亲水色谱的原理,使用氨基丙基色谱柱分析饮料中维生素C的含量,克服了传统液相色谱方法维生素C在C18柱上保留不足的问题,能够实现样品中杂质与目标峰的有效分离,且前处理简单,测定准确、简便、快速,是一种更为实用快速的维生素C的液相色谱分析方法。     

HPLC法测定南瓜中β-胡萝卜素

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定南瓜中β-胡萝卜素含量的方法,并对12份南瓜样品中β-胡萝卜素含量进行测定。方法:色谱柱:Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:水(A)+丙酮(B);检测波长:450nm。结果:南瓜中β-胡萝卜素在35 min内得到较好分离,重复性好(RSD=5.11%),精密度高(RSD=0.70%),稳定性好(RSD=2.73%),加标回收结果准确可靠(RSD=2.06%)。12份南瓜样品中β-胡萝卜素含量差异较大(8.9~94.4μg/g),印度南瓜16296-1中β-胡萝卜素含量最高,其次为中国南瓜9132、印度南瓜16291-2和16167-8,这3种南瓜中β-胡萝卜素含量较接近(均≥76μg/g),含量最低的为印度南瓜16185-6。结论:建立了一种快速测定南瓜中β-胡萝卜素的高效液相色谱方法,该方法准确、可靠;12份南瓜样品中β-胡萝卜素含量差异较大。     

超高效液相色谱-大体积流通池荧光法检测配方乳粉中维生素A及维生素E

文章建立了超高效液相色谱-大体积流通池荧光检测器同时测定配方乳粉中维生素A和维生素E的方法。样品经碱溶液皂化、石油醚萃取、水洗、旋蒸、定容后，采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8μm)分离，以甲醇-水(V_甲醇:V_水=95∶5)为流动相洗脱，大体积流通池荧光检测器检测。结果表明，维生素A在0.2～10μg/m L、维生素E在2～100μg/m L内线性良好(r>0.999)，检出限分别为0.6μg/100 g、0.8μg/100 g。荧光法受干扰小，测定维生素E的灵敏度是紫外法的30倍。配方乳粉3个浓度水平的加标回收率为85.2%～103.4%，相对标准偏差(n=6)为2.5%～5.6%。该方法具有重复性好、专属性强、灵敏度高、结果准确等优点，适合于批量检测配方乳粉中脂溶性维生素含量。     

高效液相色谱-柱后衍生法测定保健品中维生素B_1的含量

文章建立了测定保健品中维生素B_1含量的高效液相色谱-柱后衍生法。方法采用色谱柱:Ultimate XB-C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:(0.01%辛烷磺酸钠+1.5%乙酸+5%甲醇+0.12%三乙胺)-甲醇(65∶35);流速:1.0 mL/min;柱温:35℃;检测波长:Ex=375nm,Em=435nm。研究发现该柱后衍生法测定同一样品中维生素B_1含量得到的峰面积是柱前衍生法测定结果的1.6-18.8倍,维生素B_1含量在0.01-32μg/mL范围内线性良好,R2=0.999,检出限为1 ng/mL。该方法灵敏、简便、准确,重现性好,可用于保健品中维生素B_1含量的测定。     

气相色谱法测定薄荷糖中薄荷脑含量

目的：建立薄荷糖中薄荷脑含量的测定方法。方法：样品经乙酸乙酯提取,以DB-WAX毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm,0.25μm)分离,用气相色谱-氢火焰离子化检测器检测。结果：薄荷脑在1.168 0～584.000 0μg·mL^-1线性关系良好,R²=0.999 9;回收率在98.3%～104.1%,RSD为1.79%(n=12)。结论：该方法简单、快速准确、重复性好,可用于薄荷糖中薄荷脑含量的测定。     

HPLC-DAD/FLD测定婴幼儿配方奶粉中B族维生素及不确定度分析

建立了高效液相色谱法同时测定婴幼儿配方奶粉中维生素B2、烟酸、烟酰胺、吡哆醇、吡哆醛的方法。样品经1%甲醇的0.1%磷酸水溶液提取并沉降蛋白后,采用Thermo Hypersil GOLDTMaQ(5μm,4.6 mm×250 mm)分离,以二极管阵列检测器(DAD)和荧光检测器(FLD)串联模式检测。同时构建了不确定度评定模型,考察了不确定度的来源。结果表明,维生素B2、吡哆醇、吡哆醛在0.025～4.000μg/m L,烟酸、烟酰胺在0.125～20.00μg/m L范围内,标准曲线呈现良好的线性(R²>0.999),加标回收率在93.20%～108.00%(n=6),相对标准偏差(RSD)<8%。当婴幼儿配方奶粉中烟酸、烟酰胺含量为4 mg/100 g时,其扩展不确定度分别为0.300 mg/100 g(k=2)、0.182 mg/100 g(k=2);当吡哆醇、吡哆醛、VB2含量为800μg/100 g时,其扩展不确定度为100μg/100 g(k=2)、71.5μg/100 g(k=2)、41.9μg/100 g(k=2),其不确定度主要来源...     

超高压液相色谱-串联质谱法同时测定人乳中的硫胺素、核黄素、烟酰胺、泛酸和吡哆醛

目的建立一种快速、灵敏的同时测定人乳中多种B族维生素的超高压液相色谱-串联质谱法。方法样品经甲醇沉淀蛋白、乙醚去除非极性杂质,UPLC HSS T3色谱柱分离后采用保留时间和多反应离子检测(MRM)定性、定量,同位素内标校正。结果维生素B1(硫胺素)、维生素B2(核黄素)和维生素B6(吡哆醛)的定量下限(LOQ)均为0.2μg/100 g,维生素B3(烟酰胺)和维生素B5(泛酸)的LOQ均为0.3μg/100 g。标准加入法测定所有被测物的高、中、低三个浓度加标水平的回收率在93.1%~101.1%之间,相对标准偏差(RSD)在2.8%~6.2%之间。5种水溶性维生素在各自浓度范围内线性良好,R2均大于0.998。结论本文建立了同时测定人乳中5种B族水溶性维生素的超高压液相色谱-串联质谱法。方法前处理简单、快速,样品需要量少;采用质谱检测器同位素内标一对一校正定量,检测结果准确、灵敏。方法可以为人乳中维生素含量的检测、调查、研究提供技术支持。     

微波萃取-反相高效液相色谱法测定钙片中维生素D3的含量

目的建立微波萃取-反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定钙片中维生素D3含量的分析方法。方法以甲醇为萃取溶剂,微波萃取保健食品中的维生素D3。甲醇为流动相,检测波长264 nm,流速1 ml/min,经C18反相高效液相色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离分析,测定钙片中维生素D3的含量。结果采用本方法的线性范围为0~4μg/L(r=0.999 8),检出限为0.02μg/L,回收率为98.8%~100.0%,RSD为0.4%(n=9)。结论本文建立的方法具有操作简单、快速,准确度高,稳定性好等优点,适用于实验室测定钙片中维生素D3的含量。     

HPLC法有效测定发酵液中维生素B_(12)的含量

建立了一种更简便、快速、准确的测定谢氏丙酸杆菌发酵液中脱氧腺苷钴胺素(维生素B12)含量的检测方法,使用高效液相色谱直接检测.利用Apollo C18(5μm,4.6mm×25cm) 色谱柱;以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH3.0)作流动相;柱温25℃;检测波长260nm;流速1.0mL/min;恒速洗脱.在所选定的液相色谱条件下,脱氧腺苷钴胺素和杂质分离良好,维生素B12在20μg/mL80μg/mL范围内线性良好,线性方程相关系数为0.99995,平均回收率为99.92%,相对标准偏差RSD为0.12%.此方法重复性好,样品预处理方法简单,分析速度快,7min内即可实现目的产物和杂质的完全分离.适用于整个发酵过程条件的优化及发酵产物提取过程的监控.     

基于凝胶渗透色谱及液相色谱串联质谱测定油脂性食品中的维生素A、D、E

本研究拟采用凝胶渗透色谱净化,建立液相色谱串联质谱联用测定油脂性食品中脂溶性维生素含量的新方法。对试验条件进行优化后发现,通过凝胶渗透色谱法以PT785 Bio-BeadsS-X3型为色谱柱,环己烷-乙酸乙酯(5:5,V/V)溶液为流动相,选择5m L/min的流速进行样品前处理;在质谱分析部分采用电喷雾离子源(ESI)、正离子扫描方式,以多反应监测(MRM)进行定性定量分析能满足油脂性食品中维生素A、D、E含量测定的需求。实验表明:视黄醇、视黄醇醋酸酯、维生素D2、维生素D3、维生素E在5~200μg/L的浓度范围内线性关系良好(相关系数r均在0.999以上),检出限分别为2μg/kg、1μg/kg、5μg/kg、2μg/kg、10μg/kg;回收率为93.1%~l06.6%;相对标准偏差(n=6)1.09%~4.77%。该法具有准确度高、灵敏度高、分析周期短、操作简便等多重优势,适合油脂性食品中维生素A、D、E的测定。     

高效液相色谱法同时测定维生素D3和维生素K2的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定维生素D_3和维生素K_2的含量的分析方法。方法以95%甲醇水:异丙醇=(98:2, V:V)为流动相,梯度洗脱,样品经C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)分离,并于264 nm波长检测。结果维生素D3在浓度0.1282～1.2818μg/mL之间呈现良好的线性关系,r~2=0.9999,平均回收率为95.7%～100.7%,相对标准偏差为1.7%;维生素K_2在浓度0.51397～5.1397μg/mL之间呈现良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率在97.3%～100.7%之间,相对标准偏差为1.3%。结论该方法操作简便、准确、重现性好,能同时测定维生素D_3和维生素K_2含量,可在实验室推广。     

高效液相色谱-多波长荧光检测法同时检测多维生素片中维生素A和维生素E的含量

目的建立高效液相色谱-多波长荧光法同时快速检测多维生素保健品中维生素A和维生素E的含量方法。方法采用WATERS SUNFIRE-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱进行分离,甲醇与水梯度洗脱,控制柱温30℃,荧光检测器定量检测。结果维生素A和维生素E在质量浓度为0.3～30μg/ml范围内线性关系良好(R20.995);检测限:维生素A为0.08μg/ml、维生素E为0.10μg/ml;维生素A和维生素E 3个浓度点回收率均在91.4%～104.2%;维生素A和维生素E方法重复性(n=6)分别为2.32%和3.11%。结论此法简单、可靠、准确,可用于多维生素保健品中维生素A和维生素E含量的测定。     

高效液相色谱法测定婴幼儿配方奶粉与保健食品中维生素B12的含量

建立高效液相色谱法检测婴幼儿配方奶粉与保健食品中维生素B₁₂的分析方法。选择SB-AQ柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm)作为色谱柱,流动相为0.025%三氟乙酸溶液+乙腈,流速1.0 mL·min^-1,梯度洗脱,进样量100μL,检测波长361 nm。保健品：B族维生素片等样品采用水提取的方式;基质复杂的样品用固相萃取的方法。婴幼儿配方奶粉：含量<4μg/100 g的样品用固相萃取法,含量≥4μg/100 g的样品用直接提取方式,经高效液相色谱仪分析。结果表明,维生素B₁₂标准溶液线性良好,r²> 0.999,加标回收率在86.2%～96.0%,RSD为1.3%～1.8%,检出限为0.4μg/100 g。该方法简便快捷,所用试剂耗材少,灵敏度高,结果准确。     

HPLC测定维敏酸钾洗眼液中维生素B_6的含量及有关物质

目的建立HPLC测定维敏酸钾洗眼液中维生素B6含量及有关物质的方法。方法采用ZorbaxSB-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相己烷基磺酸钠缓冲液-甲醇(92:8),流速1.0mL/min,柱温35℃;检测波长含量测定291nm,有关物质检查275nm。结果维生素B6在9.976～498.8μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=1.0000,n=6),平均回收率100.82%(n=9,RSD=0.63%),最低检测限3.7ng。结论该方法简便、灵敏、准确,专属性强、重现性好,可用于测定维敏酸钾洗眼液中维生素B6的含量及有关物质。     

高效液相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中的维生素B1、维生素B2

目的建立高效液相色谱法快速测定婴幼儿配方乳粉中的维生素B1、B2的含量。方法样品进行前处理后,采用Waters Xbridge C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 5μm)进行分离。以0.05 mol/L乙酸钠溶液-甲醇为流动相等度洗脱,柱温为30℃,流速为1 mL/min,荧光检测器进行检测,外标法定量。结果在优化的实验条件下,维生素B1、维生素B2可以有效分离,线性范围为0.05～1.00μg/mL,相关系数均大于0.999。维生素B1的加标回收率为87.4%～99.1%,相对标准偏差为1.2%～3.06%,检出限为0.03 mg/100 g;维生素B2的加标回收率为90.6%～97.8%,相对标准偏差为0.97%～3.44%,检出限为0.02 mg/100 g。结论此方法简单、快捷、高效,适用于婴幼儿配方乳粉中维生素B1、维生素B2的测定。     

免疫亲和柱—超高效液相色谱法测定维生素饮料中维生素B_(12)

采用免疫亲和柱—超高效色谱法建立维生素饮料中维生素B_(12)的测定方法,样品经免疫亲和柱富集、净化后,用3mL甲醇以流速为1滴/秒的速度洗脱,氮气吹干后溶解再经超高效液相色谱法测定。色谱柱为HSS T3,柱温35℃,流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速为0.6mL/min,波长为360nm测定。结果表明,维生素B_(12)在浓度为0.4~10μg/L内线性关系良好,回归方程为Y=4 040X-364,相关系数为0.997 00,回收率为94.68%,检出限为0.1μg/L。本方法具有操作简单、灵敏度高、结果准确、检测效率高等优点,满足于成分复杂、维生素含量低的维生素饮料中B_(12)的测定要求。