葛仙米藻胆蛋白提取工艺及藻蓝蛋白稳定性研究

对葛仙米藻胆蛋白的提取工艺及其稳定性进行了研究。采用单因素实验优化葛仙米藻胆蛋白的提取工艺。结果表明，NaCl浓度为0．24mol／L，pH7及提取时间为4．2h时，藻胆蛋白的得率最高，分别为7．004％，7．438％，5．924％；藻蓝蛋白的稳定性实验表明，藻蓝蛋白在30℃以下，酒精浓度在10％以下，pH值在6～8的范围内比较稳定，     

葛仙米藻胆蛋白粗提物、藻蓝蛋白和藻红蛋白的体外抗氧化活性比较研究

在体外模型上,对人工养殖的葛仙米藻胆蛋白粗提物、藻蓝蛋白和藻红蛋白的抗氧化活性进行比较研究。通过考察羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、脂质过氧化抑制能力,对葛仙米中藻胆蛋白粗提物、藻蓝蛋白和藻红蛋白的抗氧化活性进行评价。体外抗氧化作用结果显示藻胆蛋白、藻红蛋白和藻蓝蛋白都有明显的抗氧化作用,但作用方式和抗氧化程度也有不同,在羟基自由基清除试验中,抗氧化活性由强到弱依次为藻胆蛋白藻蓝蛋白藻红蛋白;在超氧阴离子清除试验中藻红蛋白≧藻蓝蛋白藻胆蛋白;在抑制脂质过氧化试验中藻红蛋白藻胆蛋白藻蓝蛋白。人工养殖的葛仙米中藻蓝蛋白、藻红蛋白及藻胆蛋白粗提物具有很好的体外抗氧化活性,但三者抗氧化方式略有差异。     

葛仙米藻胆蛋白和藻蓝蛋白对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的影响及其作用机制

目的:对人工养殖的葛仙米藻胆蛋白和藻蓝蛋白在S180荷瘤小鼠肿瘤生长的影响及作用机制研究。方法:通过考察S180荷瘤小鼠肿瘤体积、小鼠脏器指数和肿瘤组织切片观察,对葛仙米中藻胆蛋白、藻蓝蛋白的体内抗肿瘤活性进行评价,并初步研究了其作用机制。结果:体内抗肿瘤作用结果显示,葛仙米藻胆蛋白12.5、25、50 mg/kg剂量组对小鼠肉瘤S180的抑瘤率分别为11.19%、20.14%、37.65%。葛仙米藻蓝蛋白12.5、25、50 mg/kg剂量组对小鼠肉瘤S180的抑瘤率分别为19.74%、35.00%、52.06%。藻蓝蛋白能够明显促进抑癌蛋白P53和促凋亡蛋白Bax的表达,抑制凋亡抑制蛋白Bcl2的表达。结论:葛仙米藻蓝蛋白高剂量组可显著减少S180肉瘤细胞的增殖,葛仙米藻蓝蛋白低、中剂量和葛仙米藻胆蛋白高剂量也有一定的抑制作用,人工养殖的葛仙米中藻胆蛋白和藻蓝蛋白具有较好的体内抗肿瘤活性。     

葛仙米藻胆蛋白提高小鼠免疫功能的研究

研究葛仙米藻胆蛋白对昆明小鼠的免疫增强活性。分别以100、300、500 mg/（kg·d）的葛仙米藻胆蛋白溶液剂量对小鼠连续灌胃30 d。然后分别对腹腔巨噬细胞吞噬率、自然杀伤（natural killer,NK）细胞活性,T淋巴细胞增殖、细胞因子、抗体、迟发型超敏反应（delayed type hypersensitivity,DTH）等免疫参数进行测定。结果表明：葛仙米藻胆蛋白可以提高腹腔巨噬细胞吞噬率、NK细胞活性、T淋巴系统增殖以及血清中白细胞介素（interleukin-2,IL-2）和IL-4细胞因子水平。同时葛仙米藻胆蛋白处理组的小鼠DTH显著高于对照组,表明葛仙米藻胆蛋白是一种潜在的免疫增强剂。     

葛仙米藻胆蛋白与色度降解动力学

以葛仙米藻胆蛋白为原料,研究pH值、温度和光照对其色度和含量的影响,建立葛仙米藻蓝蛋白及其色度的降解动力学,结果发现pH 3色素溶液在可见光区几乎没有藻蓝蛋白特征吸收峰,随pH值增加藻蓝蛋白特征吸收峰值逐渐增强,至pH 6达最高,之后逐渐下降;pH值增加藻蓝蛋白特征峰有轻微的蓝移效应。pH 4色素溶液Hunter-b最小,其蓝色最深,且每种pH值色素溶液的Hunter-b差异极显著。藻蓝蛋白在50 ℃半衰期分别是60 ℃和70 ℃的8.09 倍和11.05 倍;而色度在50 ℃半衰期分别是60 ℃和70 ℃的29.17 倍和72.74 倍。     

葛仙米藻蓝蛋白抗氧化作用研究

通过非脂质体系抗氧化实验、体外抗氧化实验研究了葛仙米藻蓝蛋白的抗氧化能力。结果表明:葛仙米藻蓝蛋白对清除O2·、·OH自由基和H2O2具有较好的量效关系。在体外反应体系中,葛仙米藻蓝蛋白能显著地降低MDA生成和血和肝中过氧化物的含量,起到保护细胞膜和红血球的作用。显示葛仙米藻蓝蛋白对小鼠肝线粒体损伤具有保护作用,并能显著影响血浆的抗活性氧能力。     

葛仙米藻胆蛋白的体外消化特性

研究葛仙米藻胆蛋白在体外模拟胃液和肠液的消化产物性质,重点测定不同消化时间产物的可溶性蛋白质、游离氨基含量变化及其抗氧化作用,并利用HPLC法测定消化产物分子质量变化情况。结果表明：在胃液和肠液消化作用下蛋白质含量均呈现下降趋势,而游离氨基含量呈现上升趋势,消化产物较初始产物对ABTS+·和脂质过氧化具有更强的抑制作用,但对·OH的清除能力却有所下降;偏相关分析结果表明,与葛仙米藻胆蛋白消化产物的抗氧化作用紧密相关的是消化产物中的分子质量为6ku和0.2ku的肽类。     

葛仙米藻蓝蛋白和藻红蛋白的体外抗炎和抗紫外活性比较研究

目的:对葛仙米藻蓝蛋白和藻红蛋白的抗炎和抗紫外活性进行体外比较研究。方法:通过Lipopolysaccharide(LPS)诱导RAW264.7细胞分泌NO和TNF-α,比较葛仙米中藻蓝蛋白和藻红蛋白的抗炎活性;通过Ultraviolet radiation B(UVB)辐照诱导NIH-3T3成纤维细胞损伤,考察藻蓝蛋白和藻红蛋白的抗紫外损伤活性。结果:体外抗炎结果显示LPS能极显著诱导RAW264.7细胞分泌NO和TNF-α(P<0.01),藻蓝蛋白和藻红蛋白均能极显著抑制LPS诱导RAW264.7分泌的NO和TNF-α的含量水平(P<0.01),其中藻红蛋白抑制NO分泌能力高于藻蓝蛋白,藻蓝蛋白对TNF-α的分泌抑制作用高于藻红蛋白。体外抗紫外损伤结果显示UVB 4000 mJ/cm²可以成功诱导NIH-3T3细胞的紫外损伤,但是藻蓝蛋白和藻红蛋白对NIH-3T3细胞的紫外损伤并无明显保护作用。结论:葛仙米中藻蓝蛋白和藻红蛋白具有很好的体外抗炎活性,但两者对UVB诱导的细胞损伤并无明显保护作用。     

藻胆蛋白的提取纯化研究进展

本文从提取原料、细胞破碎方法、粗提和纯化方法等几方面对近期有关藻胆蛋白的提取纯化研究做一介绍。常用的提取原料有螺旋藻、多管藻、条斑紫菜等;细胞破碎方法有反复冻融法、化学试剂处理法等五种;粗提方法主要有盐析法等四种;而常用的纯化方法有羟基磷灰石柱层析法、DEAE-纤维素离子交换柱法和葡聚糖凝胶柱层析法等三种。实际应用中为获得较好的提取纯化效果,经常混合使用多种细胞破碎方法和多种纯化方法。     

紫菜中藻胆蛋白的提取及纯化

紫菜经800W功率超声波作用800s，用30倍体积的水浸提得到藻胆蛋白的粗提物，再用饱和度为45％的硫酸铵盐析沉淀及透析后，经羟基磷灰石（HA）层析柱，用不同浓度的磷酸缓冲液梯度洗脱，可分离纯化出紫菜藻胆蛋白（含藻红蛋白和藻蓝蛋白），两种活性组分的纯度（Amaxnm／A280nm）达到4．32。藻红蛋白的最大吸收峰在558nm，藻蓝蛋白的最大吸收峰在616nm。     

双水相技术分离纯化藻胆蛋白的研究进展

综述了双水相萃取技术的原理,应用于藻胆蛋白分离机纯化的特点,工艺流程,以及蛋白分离纯化的影响因素.并对双水相萃取技术在藻胆蛋白分离纯化中的应用前景作了展望.     

藻胆蛋白提取纯化及生理活性研究进展

藻胆蛋白是一类结构相似的色素蛋白,它们是由藻胆色素与相应的脱辅基蛋白中保守性半胱氨酸残基的巯基以硫醚键共价结合而成,藻胆蛋白由于其荧光特性广泛应用在医药行业。本文综述藻胆蛋白的种类和结构,藻胆蛋白的提取过程尤其是细胞破碎、纯化的方法,并详细比较其优缺点;阐述藻胆蛋白的抗氧化、抗炎及抗癌作用,并对其部分作用机制进行综述。     

3种处理方式对葛仙米藻胆蛋白清除超氧阴离子自由基能力的影响

主要研究反复冻融、溶剂、pH值等对葛仙米藻胆蛋白清除超氧阴离子自由基能力的影响,并探讨藻胆蛋白的模拟胃肠液降解产物对超氧阴离子自由基清除能力的变化情况。结果发现反复冻融不会影响葛仙米藻胆蛋白清除超氧阴离子自由基的能力,磷酸缓冲液可提高藻胆蛋白清除超氧阴离子自由基的能力。pH 5.6和pH 7.3浸提物清除超氧阴离子自由基的能力差异不显著,但pH 8.1浸提液略优于其他两种。随着处理时间延长,模拟肠液消化产物清除超氧阴离子自由基能力逐渐增强,模拟胃液消化产物却逐渐下降。     

超声辅助同时提取条斑紫菜多糖及藻胆蛋白工艺的优化

以条斑紫菜为原料,通过单因素和正交试验,确定了超声辅助同时提取条斑紫菜多糖和藻胆蛋白的最佳工艺条件.结果表明,超声辅助同时提取条斑紫菜多糖和藻胆蛋白的最佳工艺条件为:超声60min,功率880W,水浴30℃,4h,料液比1:50.利用本法优化后的工艺同时提取条斑紫菜多糖和藻胆蛋白,紫菜多糖提取得率为 34.03%,藻胆蛋白提取得率为1.2%,藻红蛋白纯度为0.356.     

液体悬浮培养发状念珠藻胞外多糖的提取、纯化及性质研究

采用超滤浓缩与乙醇沉淀法提取液体悬浮培养的发状念珠藻胞外多糖,经离子交换和凝胶柱层析纯化后得到2个组分.对组分Ⅱ(NFPS2)进行理化性质研究并用高效液相色谱法测定其表观分子量.结果表明,发状念珠藻多糖组分Ⅱ是非硫酸化多糖,含有较长的侧链和分支,不含核酸和蛋白质,分子量为2.79×105.     

葛仙米藻红蛋白体外抗活性氧自由基作用的研究

葛仙米以其资源稀少、营养价值丰富,独特的生物活性和药理作用而引起人们广泛地关注。为探讨葛仙米中的生物活性成分,本文以野生葛仙米藻红蛋白为研究对象,在系统研究葛仙米藻红蛋白的提取、分离和纯化的基础上,采用微弱化学发光法,研究了葛仙米藻红蛋白清除氧自由基的能力。结果表明:清除氧自由基的能力为:粗提物>藻红蛋白>藻蓝蛋白;葛仙米藻红蛋白清除氧自由基的能力为:H2O2自由基的清除率>·OH自由基的清除率>O2·自由基的清除率。     

反复冻融增强葛仙米藻胆蛋白抗氧化特性研究

研究反复冻融处理对葛仙米藻胆蛋白抗氧化特性的影响,测定其对抗氧化活性和对H2O2诱导的红细胞溶血和脂质过氧化的抑制作用。结果发现:经过反复冻融处理的葛仙米藻胆蛋白以pH7.3的50mmol/L的磷酸氢二钾-氢氧化钠为溶剂溶解的样品对ABTS+.的抗氧化活性和对H2O2诱导的红细胞溶血和脂质过氧化抑制作用强于其他处理,同时对铁离子的还原能力也较强,主要原因是反复冻融处理增加了葛仙米藻胆蛋白的溶出量,改变其中藻蓝蛋白和藻红蛋白的比例关系。     

虾夷扇贝多糖提取及纯化方法的优化

以青岛虾夷扇贝为原料,利用单因素试验以及正交试验,对水提、酶提醇沉法结合超声波辅助提取扇贝柱多糖工艺及多糖脱蛋白进行研究,并对三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)和D-葡萄糖酸-δ-内酯(D-glucono-δ-lactone,GDL)的脱蛋白效果进行对比,其中利用GDL对多糖中的蛋白质进行脱除尚属首次。结果显示,多糖提取最佳工艺条件为液料比40∶1(m L/g)、加酶量2.5%、60℃提取3 h,在此条件下虾夷扇贝多糖得率可达10.90%;TCA法脱蛋白的最佳工艺条件为脱蛋白时间5 h、TCA质量分数5%、脱蛋白次数3次;GDL法脱蛋白的最佳条件为反应时间1 h、反应温度45℃、GDL质量分数0.3%。在两者最佳条件下,分别进行3次平行实验,TCA蛋白脱除率为88.654%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.905%;GDL蛋白脱除率为99.062%,RSD为0.679%;对比两种脱蛋白方法,GDL法脱蛋白效率更高,实验效果也更为稳定。