扇贝边活性肽的分离及其对羟自由基的清除活性研究

目的:确定扇贝边酶解产物中对羟自由基(·OH)具有清除作用的活性肽的分布及活性肽分子量的大小。方法:采用葡聚糖凝胶G-25和G-200分别对扇贝边酶解产物进行分离,用标准分子量作为参照,检测各分离组分对羟自由基的清除率及活性肽分子量的大小。结果表明:枯草杆菌蛋白酶酶解扇贝边的酶解产物中,有两个分离组分具有羟自由基清除活性,其对应的活性肽分子量为8000Da和1800Da,这两种活性肽对羟自由基的清除率分别为73.6%和64.3%;木瓜蛋白酶酶解扇贝边的酶解产物中,也有两个分离组分具有羟自由基清除活性,其对应的活性肽分子量为9000Da和1400Da,这两种活性肽对羟自由基的清除率分别为72.7%和66.1%。结论:用枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解扇贝边所得的酶解产物中分别含有两种对羟自由基具有清除作用的活性肽。     

小球藻锌结合金属硫蛋白(Zn-MT-like)的抗氧化活性研究

目的:研究锌胁迫诱导小球藻类金属硫蛋白的抗氧化活性.方法:小球藻经60 μmol/L锌诱导胁迫培养8d,离心收集藻细胞;超声波破碎细胞,离心,上清液经凝胶层析柱(葡聚糖G-75)及脱盐柱(葡聚糖G-25)分离、纯化,得到锌结合金属蛋白;经光谱特征分析,确认为类金属硫蛋白(Zn-MT-like).对Zn-MT-like的抗氧化活性进行比较研究,包括基于Fenton反应体系的羟自由基(·OH),1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)产生的自由基和邻苯三酚自氧化产生的超氧阴离子(·O2-)自由基的清除能力.结果:小球藻诱导产生的Zn-MT-like对这3种自由基均有较强的清除作用.其清除羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的半数抑制率浓度(IC50)分别为13.12、2.23和48.59 mg/L;其抗羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的能力高于谷胱苷肽和兔肝锌诱导的金属硫蛋白(Zn-MTs).结论:小球藻锌结合类金属硫蛋白具有显著的抗氧化活性能力.     

西式发酵火腿粗肽的制备及抗氧化活性和氨基酸组成分析

采用磷酸盐缓冲液和盐酸溶液提取西式发酵火腿的粗肽,测定并比较2种溶液提取的粗肽1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟自由基清除能力、Fe2+螯合能力及总抗氧化能力,同时对氨基酸组成进行分析.结果表明:磷酸盐法提取得到的粗肽粉A的质量和肽含量显著高...     

玉米低聚肽和小麦低聚肽及其金属螯合物的抗氧化和抗过敏活性

以分析玉米低聚肽和小麦低聚肽理化性质为基础,对2种低聚肽及玉米低聚肽-Ca螯合物与小麦低聚肽-Fe螯合物2种金属螯合物的抗氧化能力和抗过敏活性进行研究。利用DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力及还原能力测试3种方法评价样品的抗氧化能力,并选择透明质酸酶抑制法评价样品的抗过敏活性。抗氧化能力分析表明,4种样品均有较强的抗氧化能力,且在羟自由基清除能力测试中,2种金属螯合物的羟自由基清除率明显高于对应的低聚肽。抗过敏活性分析表明,在质量浓度<20 mg/mL时,低聚肽金属螯合物的透明质酸酶抑制率远高于对应的低聚肽。这与羟自由基测试的结果类似,可见该条件下样品的抗氧化能力和抗过敏活性存在一定的正相关联系。而质量浓度为20～100 mg/mL时低聚肽的抑制率随浓度明显增大,螯合物的抑制率增长则趋于平缓。螯合物在质量浓度<20 mg/mL条件下同时具有较强的抗氧化能力和抗过敏活性,可在食品药品方向进一步应用发展。     

茶花花粉蛋白酶解物抗氧化性的研究

茶花花粉蛋白经过风味酶(外切酶)和中性蛋白酶(内切酶)组成的复合酶水解得到活性肽,并进一步研究活性肽的抗氧化特性。结果表明:茶花花粉多肽有很强的抗氧化性,总抗氧化能力、还原力、清除DPPH自由基的能力、抑制羟自由基的能力、清除超氧阴离子能力均随着水解度的增加而增强。     

海参蛋白肽对H_2O_2诱导RAW264.7细胞氧化损伤的保护作用

以海参为原料,研究海参蛋白肽的抗氧化性以及对H2O2诱导RAW264.7巨噬细胞氧化损伤的保护效果和作用机制。以清除羟自由基(·OH)能力、Fe2+螯合能力和Fe3+还原能力为指标,评价海参蛋白肽的体外抗氧化活性。以H2O2刺激RAW264.7巨噬细胞建立氧化损伤细胞模型,采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针法测定细胞活性氧(ROS)水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活力,实时荧光定量PCR测定细胞血红素氧合酶-1(HO-1)m RNA表达水平。结果表明,海参蛋白肽能够清除·OH,具有Fe2+螯合能力和Fe3+还原能力,海参蛋白肽的这种体外抗氧化能力呈现浓度依赖效应。海参蛋白肽显著降低氧化损伤RAW264.7巨噬细胞ROS水平和提高氧化损伤细胞活力(P0.05)。而且,海参蛋白肽显著提高巨噬细胞内HO-1 m RNA表达(P0.05),HO-1抑制剂锌原卟啉IX(Zn PPIX)部分逆转海参蛋白肽对氧化损伤巨噬细胞活力的促进作用。这些结果说明,海参蛋白肽通过上调RAW264.7巨噬细胞HO-1 m RNA表达水平,发挥对巨噬细胞氧化损伤的保护作用。     

条斑紫菜活性肽的抗氧化作用

以条斑紫菜为原料,使用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶水解紫菜蛋白制备活性肽,采用还原能力、清除羟自由基和二苯代苦味酰基自由基作为抗氧化性评价指标,研究紫菜活性肽的体外抗氧化活性,并测定其分子质量分布。结果表明：3种蛋白酶对紫菜蛋白具有较好的酶解效果,酶解产物具有一定的还原能力;自由基清除率和底物浓度之间具有正相关关系,木瓜蛋白酶酶解活性肽清除羟自由基活性最强,半数清除率质量浓度为0.397mg/mL;胃蛋白酶酶解活性肽清除二苯代苦味酰基自由基活性最强,半数清除率质量浓度为0.261mg/mL;经测定,具有抗氧化活性的小分子肽分子质量分布在148～1963u之间。     

3种大米蛋白肽的制备及其抗氧化活性比较

为研究不同品种大米蛋白肽的品质特性,在采用碱式酸沉法提取大米蛋白的基础上,合理酶解制备大米蛋白肽,并以超氧自由基(O_2~—)、羟基自由基(OH~—)、DPPH自由基(DPPH·)清除率为指标,比较不同大米蛋白肽的水解度和抗氧化活性。结果表明,3种大米蛋白肽的水解度差异显著(P0.05),由高到低依次为籼米粳米糯米。3种大米蛋白肽的半数自由基清除率(IC_(50))具有明显差异(P0.05),其中籼米蛋白肽清除半数DPPH·自由基、O_2~—自由基、OH~—自由基的IC_(50)值最低,抗氧化活性最高,而糯米蛋白肽清除半数自由基的IC_(50)值远大于籼米、粳米蛋白肽,抗氧化活性最低。综合分析,籼米和粳米更适宜进行大米抗氧化肽的开发和利用。     

核桃蛋白肽的抗氧化活性研究

以VC为对照,研究了分子质量小于3000u的核桃蛋白肽混合物的还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力以及二苯代苦味酰基自由基清除能力。结果显示,随着核桃蛋白肽浓度的增加,其还原能力、羟自由基的清除能力和超氧阴离子清除能力增大,在浓度为30mg/mL时,核桃蛋白肽还原能力达到VC的57.1%;在浓度为50mg/mL时,核桃蛋白肽对羟自由基(OH.)的清除率分别69.1%,对超氧阴离子自由基的清除率达到了85%。而对二苯代苦味酰基自由基清除能力则是先增大后变小,在20mg/mL时达到最大值66%。核桃蛋白肽的分子质量分布主要有2大区域,蛋白肽氨基酸含量达到89.74%。     

林蛙油蛋白小肽抗氧化活性比较

在对林蛙油蛋白质进行酶解后,经超滤,获得P1及P2两种小肽。从DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除能力3个方面对林蛙油蛋白小肽的体外抗氧化活性进行考察。结果表明,林蛙油蛋白小肽对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除效果,且清除率与样品溶液的浓度存在剂量依赖关系;在10 mg/m L时,林蛙油蛋白小肽P1,P2对羟自由基清除率分别为30.46%和24.24%;对超氧阴离子的清除率分别为39.57%和36.19%;DPPH自由基清除率则分别为51.49%和44.21%。