沪酿3.042米曲霉紫外诱变及高活力蛋白酶菌株选育

采用沪酿3．042米曲霉的孢子为对象，对其孢子进行紫外诱变，利用酪蛋白平板对2261株再生株进行初筛，得到34株蛋白酶活力提高的菌株，复筛得到一株蛋白酶活力高且遗传稳定的突变株LY06，37℃培养44h产酶活力由313U／g曲料高到556U／g曲料，为原菌株的1．78倍，传代培养15次，蛋白酶活力基本保持稳定，没有明显的下降。     

4株鲜酵母菌株抗冻性及产气性能比较

比较4株鲜酵母菌株在-20℃下的抗冻性以及酵母用量分别为3．2％，1．0％，0．75％和0．5％下的无糖活力。结果发现。FX-2和FX-8属于低糖鲜酵母菌株，NHS01和NHS02为高糖酵母菌株。高糖鲜酵母在-20℃下的抗冻性要好于低糖鲜酵母；在无糖面团制作中，酵母用量为3．2％时，发酵1h，低糖鲜酵母活力高出高糖鲜酵母活力36．75％；酵母用量为0.75％时，高糖鲜酵母活力同低糖鲜酵母活力相差不到8％。所以，在进行鲜酵母菌种挑选时，选用高糖酵母更加合适。     

繁茂膜海绵中产甲壳素酶菌株筛选的研究

通过富集培养和初筛，从繁茂膜海绵中分离到108株产甲壳素酶菌株；其中有12株菌产生的透明圈比较明显。结合平板法和酶活力比较法，筛选出1株高酶活力的优良菌株H7，酶活力为0．5415／mL。通过16SrRNA同源序列分析和系统发育树分析，鉴定菌株H7为Pseudoaheromonas属，和P．ganghwensis/DQ011614相似性达到98％。     

豆乳凝固酶菌株的筛选及产酶条件的初步优化

以蜀南地区的豆腐乳为原材料,通过平板粗筛出白色沉淀圈／透明圈比值大的5株菌。再将这些菌株用三角瓶复筛,得到1株豆乳凝固酶活力／蛋白酶活力比值较大的菌株,经显微镜初步鉴定为毛霉。通过正交试验对该菌株进行产酶条件优化,当培养基中水分含量为70％,起始pH6．5,温度25℃时,其豆乳凝固酶的产酶活力可达93．3U／g。该菌株具有豆乳凝固酶活力的能力,值得深入开发研究。     

生物转化法生产L－苹果酸的研究（Ⅰ）──富马酸酶产生菌株的筛选

经对３０余份采自不同地区土样的菌种筛选，得到２０株可将富马酸转化为Ｌ－苹果酸的菌株，其中尤以Ｇ（０４）株的转化活力最高。对该菌株的较佳转化条件研究表明：较适的转化温度为３７℃，基质初始ｐＨ值为７．５。菌体经０．２％胆酸３８℃处理２０ｈ，可使富马酸转化率较未处理的对照提高７４．３％。另外，采用０．２％胆酸或０．０６％ＴＰＣ处理菌体，均可在转化反应中抑制琥珀酸副产物的形成。     

黑曲霉固态培养生产纤维素酶的研究

黑曲霉突变株ＤＭ－１是一株产纤维素酶菌株，其中β葡萄糖苷酶活性特别高。采用粗纤维原料固体培养，发酵９６小时（培养温度３１℃），其滤纸酶活和β葡萄糖苷酶活分别为９５和１２００ｍｇ葡萄糖／ｇＤＭｈ。本试验系统研究了各种营养成份和培养条件对ＤＭ－１菌株产纤维素酶的影响。最适发酵培养基为：稻草杆（或麦杆）∶麦麸为６０∶４０、硫酸铵３．０、硫酸镁０．３、玉米浆３．０，加水２００％，自然ｐＨ；环境湿度８５％－９０％。酶反应最适温度和ｐＨ分别为５５℃－６０℃和ｐＨ５．０。酶ｐＨ稳定性较好，在ｐＨ３．０－８．０范围内处理１小时，残余酶活力在８５％以上，该酶经５５℃处理３０ｍｉｎ，剩余酶活力为８６．０％。     

胆红素氧化酶产生菌的选育及发酵工艺条件的研究

对胆红素氧化酶产生菌的菌和选育进行了研究。以科研室保藏菌种Mv9201为出发菌株，通过紫外线、硫酸二乙酯单独处理和复合诱变，从353株突变株中筛选出一株高产菌株MyrotheciumverrucariaMv9352，并对其产酶条件进行了研究。以20％的土豆汁（含0．25％的葡萄糖和蛋白胨）为发酵培养基，初始pH6～7，摇床转速为140～160r／min，24～26℃培养96h，酶活力可达4．0～4．5u／ml，比出发株的产酶能力提高近4．5倍。     

泰国发酵食品Tuanua中蛋白酶菌株的分离及初步鉴定

研究从泰国发酵食品Tuanua中分离蛋白酶菌株，在所分离的6个株菌株中，有3株在蔗糖废蜜培养基试管培养中即超过1000单位／ml，比1990年Margarita分离到的枯草杆菌BIOTECH113的235单位／ml和1993年Moon分离到的坚强芽抱杆菌NRS的234单位／ml高5倍多。该3株菌初步鉴定为芽孢杆菌属第一群的B亚群。其中一株用蔗糖废蜜培养基在3L搅拌通气发酵罐中发酵，于7h内产生250单位／ml的蛋白酶活性。通过补充大豆饼粉和蔗糖废蜜，培养到35h细胞数量和蛋白酶活力分别达到1010／ml和13770单位／ml。比我国蛋白酶生产用菌株枯草芽胞杆菌AS1．398和地衣芽胞杆菌2709的高近一倍。最佳发酵温度33．8℃,产酶活力随通气和搅拌速度的减小而减小，随通气和搅拌速度的增加而增加。所产蛋白酶的最佳作用pH为8．5。且在此pH8．5的条件下是稳定的，在0．05M、pH9．5的甘氨酸溶液中，20h活力仍然保持70％。最佳催化温度65℃，但只有在45℃以下时才稳定。     

从酱油生产用菌粉中选诱优良米曲霉菌种的研究

以酱油酿造用菌粉为出发菌(S)，经分离、纯化后再经紫外线诱变(15W，20cm，30min)及控温培养处理后，获得1株变异菌株。结果表明：能在44℃环境中旺盛生长；酶活力可达8158．6u／g(干曲)，较出发菌株S酶活力提高了77．84％；遗传稳定性较好；发酵成酱油后经测定，其指标可达“GB18186—2000低盐固态发酵酱油”特级品，明显优于出发菌株酿造的酱油。     

酱油生产用菌诱变优化的研究

本文以酱油酿造用菌粉为出发菌(S)，经分离、纯化后再经紫外线诱变(30W，25cm，30min)及控温培养处理后，获得1株变异菌株。结果表明：能在42℃环境中旺盛生长；酶活力可达7263．5μ／g(干曲)，较出发菌株S酶活力提高了108．3％；遗传稳定性较好；发酵成酱油后经测定，其指标可达“GB18186—2000低盐固态发酵酱油”特级品，明显优于出发菌株酿造的酱油。     

产纤维素酶细菌的选育

以产纤维素酶芽孢杆菌JJQ8为出发菌株，进行了紫外线和HNO2诱变处理，采用透明圈法初筛和摇瓶培养复筛，获得2株高产纤维素酶的突变株HS—T001和HS-T002。与出发菌株相比，经紫外线诱变处理的HS．T001突变株产酶活力提高了1．9倍，用HNO2诱变处理的HS—T002突变株产酶活力提高了2倍。     

酸性异淀粉酶产生菌的筛选及鉴定

从淀粉厂附近的土壤中分离出产脱枝酶的菌株,通过初筛和复筛,得到1株产偏酸性异淀粉酶活力较高的菌株YDF30。其发酵56h时酶活力最大,达到16．4U/mL。所产生的异淀粉酶最适反应温度为55℃,最适pH值为5．2,在低于50℃和pH5．2～9．6条件下较稳定。依据其形态特征和生理生化实验结果,初步鉴定该菌株为芽孢杆菌(Bacillus sp．)。     

一株产品纤维素酶细菌M7的紫外诱变选育

以细菌M7为出发菌株,通过紫外诱变处理,经刚果红培养基初筛及摇瓶发酵复筛获得突变株。经紫外诱变获得6株正突变株以第2株产酶活力最高,CMCase、FPA相对酶活力较原始菌株提高了6．06倍、6．88倍。紫外诱变可使细菌M7产纤维素酶活力提高。     

产酸性果胶酶菌株的筛选及产酶条件的研究

从实验室保藏的9株黑曲霉菌株和1株宇佐美曲霉菌株中，通过初筛和复筛获得了一株高产酸性果胶酶菌株一宇佐美曲霉（Aspergillus usamii）YL-1。YL-1菌株产酶发酵条件为：29℃静置培养72h，期间在24h翻曲1次。采用单因素试验确定了该茵株固态发酵优化培养基组成为：250mL锥形瓶装发酵基料10g（麸皮8g＋豆饼粉2g），食用果胶0．9g，玉米浆0．5mL，吐温-800．15％，（NH4）2SO4 2．0％，KH2PO40．4％（均相对于基料），料水比1：1，自然pH。酸性果胶酶活力最高达4831 IU／g干曲。     

里氏木霉91－3纤维素酶产生条件的研究

里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）Ａ＿３经亚硝基胍和紫外线复合处理，获得一株纤维素酶高产菌株９１－３。该菌株在最适固态发酵条件下，纤维素酶滤纸酶活力为１７０ｕ／ｇ曲，产酶水平是出发菌株的１．６倍。酶作用的最适条件为ｐＨ４．８，５０℃；ｐＨ稳定范围为３～７；９０℃处理７ｍｉｎ，酶活保存率为９１．６４％；室温放置半年，酶活保存率在９０％以上，室温放置一年，酶活保存率在８０％以上。     

里氏木霉91－3纤维素酶产生条件的研究

里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）Ａ＿３经亚硝基胍和紫外线复合处理，获得一株纤维素酶高产菌株９１－３。该菌株在最适固态发酵条件下，纤维素酶滤纸酶活力为１７０ｕ／ｇ曲，产酶水平是出发菌株的１．６倍。酶作用的最适条件为ｐＨ４．８，５０℃；ｐＨ稳定范围为３～７；９０℃处理７ｍｉｎ，酶活保存率为９１．６４％；室温放置半年，酶活保存率在９０％以上，室温放置一年，酶活保存率在８０％以上。     

鲫鱼肠道细菌菌群初步分析

从健康鲫鱼肠道分离出62 株细菌菌株,革兰氏染色分析结果表明,其中18 株为革兰氏阳性菌株,44 株为革兰氏阴性菌株。实验分析各菌株产纤维素酶和产淀粉酶的情况。筛选到26 株产淀粉酶菌株,占筛选菌株的41.94%,没有从鲫鱼肠道内筛选到产纤维素酶菌株。使用16S rDNA 基因序列检测,确定相关菌株分别属于Aeromonas、Shewanella、Pseudomonas 等。分析产酶活性较高的菌株F2 的致病性和产酶活力,确定其不是鲫鱼致病菌,其分泌性淀粉酶在pH7、温度32℃时表现出最大酶活力。     

常压室温等离子体诱变选育淀粉酶菌株及其酶学特性研究

目的:以云南马龙C3F-2016烟叶表面筛选的产淀粉酶菌株为出发菌株,诱变选育高产淀粉酶菌株并研究诱变前后酶学特性。方法:ARTP技术选育菌株后采用3,5-二硝基水杨酸法测定诱变前后菌株产生的淀粉酶酶活力,并探讨不同温度、不同pH、金属离子、紫外光对淀粉酶活力的影响。结果:诱变选育出一株酶活力有较大提高且传代稳定的突变株Bacillus koreensis FS-103,其淀粉酶活力达9050 U/mL,较出发菌株提高了90%。高产突变株FS-103所产淀粉酶的最适作用温度为60 ℃,最适作用pH5.5,在40~50 ℃和pH5~6之间具有良好的稳定性,Ca2+、Mg2+对淀粉酶活性具有促进作用,紫外照射对淀粉酶活力影响减弱。结论:此诱变选育产淀粉酶菌株的方法可行,为该类菌株进行酶制剂的研究与开发奠定理论基础。     

无蒸煮生淀粉糖化酶霉菌的选育

从23份土样中筛选出105株野生型霉菌，其中有10株具有较高的糖化生淀粉的能力，尤以A－4（Ⅱ）、C和E6 3株菌酶活力最高，分别达112562，825．1和825．1个酶活性单位；对C株菌进行紫外光诱变，从诱变后的菌株中筛选出有较大正向突变的两株菌株C（1）和C（5），与诱变前相比，C（1）菌的生淀粉糖化酶活力提高了27．3％，经生淀粉酒精发酵试验，相同条件下酒精度提高了22．4％；C(5) 的生淀粉糖化酶活力提高了12．1％，酒精度提高了5．97％。     

纤维素酶菌株的选育及其产酶条件

试验以具有一定纤维素酶活力的黑曲霉菌株A．niger598为出发菌株，经紫外光、甲基磺酸乙酪(EMS)的复合诱变，选育出一优良的突变株An—238，其产生的纤维素酶活力是出发菌株的2．48倍。同时对菌株An—238的产酶培养基和条件进行了优化，并最终测得纤维素酶活453U／g。