1名Am亚型患者的血型血清学鉴定及输血策略

目的对Am亚型患者的血型进行血清学鉴定,并为其输血选择适合的血液成分。方法对1名ABO正反定型不相符患者,用抗-A、抗-A1、抗-B、抗-AB和抗-H单抗检测红细胞ABH抗原;A、B、O型红细胞与血浆反应检测ABO血型抗体及不规则抗体;吸收放散试验检测红细胞弱抗原;中和抑制试验检测唾液中ABH血型物质。根据患者血型血清学检测结果,选择相容血液成分进行输血。结果该患者符合Am亚型的血型血清学特征,输入O型少白细胞红细胞6U,A型单采血小板1治疗量后,均能达到预期疗效,无不良反应。输血后3个月的血型血清学检测结果与输血前完全一致。结论ABO血型鉴定时坚持正、反定型,可避免将Am亚型误定为O型,对Am亚型的准确鉴定有赖于多种血型血清学试验。Am亚型患者输血时可选择O型红细胞、A型血小板、A型或AB型血浆。     

一例稀有CisAB血型血清学及遗传机理分析

目的对1例献血者血型血清学鉴定为A2B血样进行基因型分析。方法应用常规血型血清学方法进行血型鉴定;采用PCR-SSP法进行ABO初步基因分型的检测,并对ABO基因第6和第7外显子的核苷酸序列进行扩增、测序和分析。结果血型血清学鉴定为A2B亚型,基因分型为BB型,初步判定为B(A)型;基因测序发现两条等位基因第6外显子均不存在261delG及297 G/G,判定该献血者血型为B与B基因的组合,经与A101核苷酸序列比对,对第7外显子的核苷酸序列分析发现,有一条核苷酸链上有526C>G,657C>T、703G>A及803G>C点突变,另一条核苷酸链上有297A>G、526C>G、657C>T、703G>A、796C>A、803G>C及930G>A点突变,确定该献血者血型基因型为CisAB02/B101。结论血型血清学对CisAB和B(A)判定有一定的局限性,通过核苷酸序列及分析能够明确本例献血者基因型为CisAB02/B101。     

1份正反定型不符献血者标本的血清学及分子特性分析

目的对1份正反定型不符的献血者标本进行血清学及分子特性分析。方法采用吸收放散试验进行红细胞弱抗原检测,SSP-PCR方法进行基因分型,PCR产物克隆后进行测序分析。结果该标本血清学反应格局符合Ax亚型,分子生物学检测为A型。测序结果表明,Exon4含有2个连续碱基错义突变位点,分别为nt187G>A,nt188C>T,导致第63位氨基酸的改变(Arg63His)。结论该Ax亚型是由于Exon42个碱基突变,引起氨基酸的改变,导致糖基转移酶活性的降低,从而使红细胞上表达的A抗原大大减少。     

ABO血型不合新生儿溶血样本抗体效价的检测分析

目的探讨新生儿溶血病与ABO血型抗体效价的关系。方法检测768例孕妇抗体效价。结果抗体效价异常比率为11.20%,随着抗体效价的升高,有异常生育史的比率从15.25%高达50.00%。结论抗体效价值越高,异常生育史所占的百分率亦增高,临床上应予于及时治疗。     

岳阳市献血者Rh血型系统表型的调查及Rh阴性献血者档案库的建立

目的调查岳阳市无偿献血人群Rh血型系统的表型,建立Rh阴性献血者档案库。方法使用Rh血型定型试剂,采用平板法进行初筛,结果可疑者用试管法确认。初筛阴性标本送血型参比室做确认试验,并进行Rh因子C、c、E、e和不规则抗体筛选。结果在183 596名无偿献血者中共筛出RhD阴性献血者404名(0.22%),弱D 5名(0.003%)。404名Rh阴性献血者中共检出A型112名(27.7%),B型112名(27.7%),O型128名(31.7%),AB型52名(12.9%)。表型共7种:ccdee 212名(52.5%),Ccdee 124名(30.7%),CCdee 30名(7.4%),ccdEe 18名(4.4%),ccdEE 8名(2.0%),CcdEe 8名(2.0%),CCdEe 4名(1.0%)。结论已建立了岳阳市Rh阴性献血者档案库。     

应用转瓶大规模培养杂交瘤细胞生产ABO血型单克隆抗体的工艺

目的建立用转瓶悬浮培养杂交瘤细胞生产ＡＢＯ血型抗原单抗的工艺。方法 在无ＣＯ２条件下, 应从转瓶培养分泌抗人Ａ和Ｂ血型抗原单抗的杂交瘤细胞。结果在适当的ｐＨ、转速和起始密度的条件下,细胞 的生长密度和单抗效价均超过静态培养水平。结论该工艺投资少,操作简便,运行稳定,适于规模化生产。     

稀有血型队伍建立的现状分析及科学管理

人类Rh血型是最复杂的红细胞血型系统,其中D抗原具有较强的抗原性,因能导致严重的新生儿溶血病(HDIV) 、溶血性输血反应备受人们的关注.     

猪圆环病毒2b亚型Cap融合蛋白的原核表达及其免疫原性分析

目的原核表达猪圆环病毒2b亚型(porcine circovirus subtype 2b,PCV2b)Cap融合蛋白,并分析其免疫原性。方法以PCV2毒株(CAU0673)基因组为参考序列,His-Sumo-PCV2b-Cap-pUC57重组质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增目的片段;将其产物克隆至pMAL-C4x载体中,构建pC4x-PCV2b-Cap重组质粒,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物进行直链淀粉树脂纯化。SDS-PAGE分析目的蛋白的可溶性,Western blot检测其反应原性;以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,Western blot检测小鼠血清抗体特异性。结果经双酶切及测序鉴定,重组质粒pC4x-PCV2b-Cap构建正确;融合蛋白MBP-Cap(matlose binding protein Cap)最适诱导条件为1 mmol/L IPTG 37℃诱导6 h,其以可溶性形式存在,相对分子质量约为81000,与PCV2b阳性猪血清、兔抗MBPtag多克隆抗体及免疫小鼠抗血清均可发生特异性反应。结论成功构建了pC4x-PCV2b-Cap重组表达载体,获得了可溶性的MBP-Cap蛋白,其纯化蛋白具有较好的免疫原性。本文为PCV2b诊断试剂盒的研发奠定了理论基础。     

马抗H7N9亚型流感病毒精制免疫球蛋白的制备及其治疗效果评价

目的制备马抗H7N9亚型流感病毒精制免疫球蛋白,并评价其对BALB/c小鼠的治疗效果。方法应用昆虫细胞-杆状病毒表达系统分别构建的表达H7N9亚型流感病毒HA、NA及M1蛋白的病毒样颗粒制备抗原,免疫健康马匹,当抗体效价达1∶10 000以上时,采血,对血清进行粗处理;采用亲和层析的方法获得纯化的马抗H7N9免疫球蛋白F(ab’)_2。对纯化的免疫球蛋白进行蛋白含量测定和质量检测。用H7N9亚型流感病毒BALB/c小鼠感染模型评价F(ab’)_2的治疗效果。结果免疫马匹血清中产生高滴度的中和抗体,获得的纯化马抗H7N9免疫球蛋白F(ab’)_2中和抗体效价达1∶5 120,质量检测合格。攻毒4 h后给药0.4和0.2 mg,小鼠存活率均达100%。结论获得了安全、高效的马抗H7N9亚型流感病毒精制免疫球蛋白F(ab’)_2,为人禽流感治疗用制剂的研发提供了参考。     

一种改良Rh血型基因及其单倍型频率估计方法的推导

目的推导出一种符合实际工作的Rh血型基因及其单倍型频率估计方法。方法基于目前普遍使用5种血清鉴定Rh血型的实际情况,根据Hardy-Weinberg定律,得出每种表现型频率和相应遗传型频率之间的关系,从而推导出计算Rh血型基因及其单倍型频率的公式;应用本文方法及另一种方法进行实例计算,并比较结果。结果计算结果显示,两种方法算出的P值均大于0.05,显示观察值与期望值差异无统计学意义,Hardy-Weinberg吻合度良好,但用本文方法算出的P值较大。结论本文方法符合目前检测Rh血型的实际情况,且估计其基因及单倍型频率的效率较高,是一种效果良好的改进型Rh血型单倍型频率估计方法。     

ABO Blood Group System and Gastric Cancer: A Case-Control Study and Meta-Analysis

This study focuses on the association between the ABO blood group system and the risk of gastric cancer or Helicobacter pylori infection. The data for the ABO blood group was collected from 1045 cases of gastric cancer, whereby the patient underwent a gastrectomy in Ruijin Hospital, Shanghai. The information on the ABO blood group from 53,026 healthy blood donors was enrolled as control. We searched the Pubmed database on the relationship between ABO blood groups and gastric cancer risk for meta-analysis. In our case-control study, the risk of gastric cancer in blood group A was significantly higher than that in non-A groups (O, B and AB) (odd ratio, OR1.34; 95% confidential interval, CI 1.25–1.44). Compared with non-O groups (A, B and AB), individuals with blood group O demonstrated a reduced risk of gastric cancer (OR = 0.80; 95% CI 0.72–0.88). The proportion of H. pylori infection in blood group A individuals was significantly higher than that in non-A blood groups (OR = 1.42; 95% CI 1.05–1.93). We further combined our data with the published data of others, and crossreferenced the risk of gastric cancer with the blood type, finding consistent evidence that gastric cancer risk in the blood A group was higher than that in the non-A groups (OR = 1.11; 95% CI 1.07–1.15), and that blood type O individuals were consistently shown gastric cancer risk reduction (OR = 0.91; 95% CI 0.89–0.94). Our study concluded that there was a slightly increased risk of gastric cancer in blood group A individuals, and people with blood type A are more prone to be infected by H. pylori than other ABO blood type individuals, whereas, a slightly decreased risk of gastric cancer was identified in blood type O individuals.     

高密度介质固相抗人球蛋白法检测孕妇ABO血型系统IgG抗体效价

目的探讨利用高密度介质固相抗人球蛋白法检测孕妇ABO血型系统IgG抗体效价的可行性。方法应用不完全抗体检测试剂盒(高密度介质固相抗人球蛋白法)检测40例O型血孕妇ABO血型系统IgG抗体效价,并与传统抗人球蛋白试管法进行对比。结果以IgG抗A(B)效价≥1:64定为阳性,两种方法的阳性检出率一致,均为50%(20/40);两种方法检测的抗体效价的几何均数差异无统计学意义(P>0.05);两种方法高度相关,r=0.9079(tr=13.36,P<0.001)。结论高密度介质固相抗人球蛋白法与传统抗人球蛋白试管法比较,操作简单,耗时短,结果准确,可应用于ABO血型系统IgG抗体效价的检测。     

人MNS_s血型系统抗N单克隆抗体的研制

应用杂交瘤技术,将 NS-1细胞与完整的红细胞免疫的 BALB/c 鼠脾细胞融合,获得MNS_s 血型系统分泌 IgG 抗 N 抗原的杂交瘤细胞株——10D_6。细胞培养上清效价1∶1024,亲和力7秒,经过8个月以上的连续传代培养,细胞增殖良好,性状稳定,持续分泌高效价,高亲和力,抗N 抗原的单克隆抗体。可作为血型检测的又一标准试剂。     

抗人M型红细胞膜血型糖蛋白A单克隆抗体的理化特性研究

本文报告了理化因素对抗人M型红细胞膜血型糖蛋白A单克隆抗体（4E6、4H6、4D8、2C8）活性的影响。在PH7.5～9.5，反应温度20～30℃范围内，只有4E6特异性凝集具有M血型抗原的红细胞，其余各单克隆抗体与N型红细胞有交叉凝集反应。选择pH8.0，20℃适宜的反应条件，用4E6单充隆抗体对516份成人外周血及65份胎儿脐带血进行MN分型，结果与市售MN分型用动物免疫标准血清完全一致。4E6对猪等8种动物红细胞无交叉反应。     

吸附A群脑膜炎球菌蛋白菌苗接种婴幼儿的反应及血清学效果

从A群脑脊髓膜炎奈瑟氏菌（78051，血清型4型）提取的外膜蛋白制备成菌苗，接种363例6个月到2岁的婴幼儿，结果局部及全身反应轻微，未发现局部强反应及无菌化脓。中度反应发生率低于0．7％，48小时消失。免后6～72小时内中度以上发烧率，50μg蛋白菌苗组为1．1％～4．3％，25μg蛋白菌苗组为0．5％～1．6％，30μg多糖菌苗组为0～1．2％，吸附剂对照组为0～2．1％。免后人血清的杀菌抗体几何平均滴度，蛋白菌苗组显著高于多糖菌苗组及吸附剂对照组（P＜0．05）；免后6个月时两个蛋白菌苗组的阳转率显著高于多糖菌苗组。提示蛋白菌苗免后所产生的杀菌抗体较多糖菌苗持久，可考虑以A群蛋白菌苗为婴幼儿免疫的候选菌苗。     

B→O血型转换批量制备通用型红细胞的研究

目的建立B→O血型转换红细胞(通用型红细胞)批量制备工艺,为临床提供通用型红细胞制品。方法用不同pH值的缓冲液对1个使用单位(200ml)的B型红细胞进行预处理。在专门设计的转型密闭处理系统中,用α半乳糖苷酶对B型红细胞表面B抗原进行酶解,并检测酶解后红细胞ABO血型抗原及结构、功能。结果酶解前用pH4.2缓冲液预处理组上清游离Hb含量显著低于pH2.8缓冲液处理组;经α半乳糖苷酶(100Uml红细胞)在pH5.6,26℃条件下酶解60min,红细胞B型抗原被完全清除,转换为O型;红细胞形态、变形性、ATP、2,3DPG、胆固醇含量、乙酰胆酐酯酶活性、渗透脆性、pH、上清游离Hb、K+、Na+含量与对照组(正常红细胞)比较差异无显著意义,均在正常范围。结论建立了B→O血型转换通用型红细胞的批量制备工艺。通用型红细胞结构、功能、形态均正常,细菌、热原实验合格。