河蚬汤纳米颗粒细胞毒性及对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

许多传统食品中存在大量的伴生性纳米颗粒,其纳米尺度的构造赋予它们特殊的活性与功能,然而这类纳米颗粒对人体细胞的影响尚未被充分揭示。以河蚬汤及其伴生纳米颗粒为例,采用狗肾上皮细胞(MDCK)、人结肠腺癌细胞(Caco-2)、人正常肝细胞(L-02)和大鼠原代腹腔巨噬细胞模型,研究以液相色谱方法分离制备的河蚬汤纳米颗粒的细胞毒性,以及其对大鼠原代腹腔巨噬细胞功能的影响。实验结果表明:15.63~500.00μg/mL河蚬汤伴生纳米颗粒对4种细胞均无明显毒性;这些纳米颗粒能被大鼠原代腹腔巨噬细胞吞噬,对正常巨噬细胞的膜电位和吞噬功能无明显影响,抑制AAPH诱导氧化应激引起的细胞膜超极化,拮抗线粒体的氧化应激与细胞吞噬功能损伤。抗氧化测试结果显示,河蚬汤伴生纳米颗粒具有FRAP、ABTS抗氧化活力,但不具有ORAC活性。研究旨在为后续深入开展河蚬汤及其伴生纳米颗粒的功效以及作用机制提供必要的基础数据和理论支持。     

毛细管电泳分析河蚬汤与巨噬细胞的相互作用

本研究旨在建立一种快速检测食品组分与巨噬细胞相互作用的方法.在前期建立毛细管电泳检测和分析河蚬汤纳米胶粒的基础上,利用毛细管区带电泳分离分析大鼠外周血巨噬细胞,以及河蚬汤的溶质、胶粒等多尺度组分与巨噬细胞共孵育后汤的组分变化和巨噬细胞的电泳行为及形态学改变.结果表明:巨噬细胞可被毛细管电泳分离成多个迁移时间的细胞群,且...     

河蚬汤食源纳米颗粒对非酒精性脂肪肝长爪沙鼠的影响

通过构建非酒精性脂肪肝长爪沙鼠模型,探讨河蚬汤食源纳米颗粒(FNPs)对高脂长爪沙鼠的非酒精性脂肪肝的改善作用.结果显示:连续喂养高脂饲料4周后,高脂组长爪沙鼠肝脏TC、TG及AST与ALT水平均显著升高(P﹤0.05),经组织切片染色发现,高脂组肝组织呈现灶状坏死情况,说明非酒精性脂肪肝长爪沙鼠模型建立成功.与高脂模...     

酶法提取河蚬多糖的研究

选择木瓜蛋白酶法提取河蚬多糖,确定了不同料液比、酶解时间、酶解温度、加酶量、酶解pH等因素对河蚬多糖提取率的影响。通过正交实验,结果表明,河蚬多糖的最佳提取工艺条件为:料液比1:30,酶解温度55℃,加酶量1.5%,酶解pH7.5。在此条件下提取2h,河蚬多糖的提取率为4.53%。     

河蚬软包装即食调理食品的工艺研究

以河蚬为原料,通过试验确定了河蚬软包装即食调理食品的调料配方及杀菌条件。利用正交试验设计优化得出最佳调料配方:食盐0.5%,白砂糖1.0%,水8.0%,酱油2.0%,干辣椒0.2%,酒糟0.9%,食醋0.7%;最佳杀菌条件为温度100℃,时间9~10min,产品感官品质良好,达到商业无菌状态。     

河蚬糖蛋白体外免疫功能研究

目的:研究河蚬糖蛋白对小鼠体外免疫功能的影响。方法:无菌分离小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,与不同质量浓度(5、25、125、625μg/mL)的河蚬粗糖蛋白和高纯度糖蛋白CFP共同培养,采用MTT法测定其对淋巴细胞增殖和腹腔巨噬吞噬能力的影响。结果:在无有丝分裂原诱导下,125μg/mL的粗糖蛋白和4个浓度的CFP都有促进脾淋巴细胞的作用。在有丝分裂原刺激下,粗糖蛋白和CFP的刺激指数都比未加有丝分裂原时增大。125μg/mL粗糖蛋白和4个浓度的CFP都有提高巨噬细胞的吞噬能力,且2种河蚬糖蛋白都表现出一定的剂量效应关系。结论:河蚬粗糖蛋白和CFP均有免疫增强活性,其中CFP的活性较强。     

河蚬营养成分的提取及其生理功能研究进展

河蚬(Corbicula fluminea)是一种双壳类软体动物,富含蛋白质、多糖、不饱和脂肪酸、矿物质及维生素等营养物质,具有清热解毒、醒酒护肝、利尿明目等多种生理功能。近年来,研究发现河蚬提取物能够抑制肝癌细胞HepG-2的生长,清除O2^-·、·OH、DPPH·自由基,降低血清胆固醇,甘油三酯的含量,促进胆固醇代谢,减少动脉粥样硬化,调控乙醇代谢过程中的关键酶细胞色素P4502E1(CYP2E1)的表达,降低对人体有害自由基的生成,抑制脂质过氧化反应,减少脂质过氧化物的生成,可以有效缓解酒精对肝脏造成的损伤。本文主要阐述了河蚬的营养成分、提取方式、生理功能及其开发研究现状,为实现河蚬精深加工以及工业化生产提供理论依据。     

河蚬肉抗氧化肽的分离及活性研究

目的:为制备具有抗氧化活性的河蚬肉抗氧化肽。方法:河蚬肉酶解液经膜分离后,采用Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱进行分离,得到抗氧化性最强的组分经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离,并对各组分的体外抗氧化活性进行测定。结果:经Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱分离得到5个活性组分A、B、C、D和E,其中组分C的抗氧化活性较强,其总抗氧化能力A_(700 nm)、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为1.79、83.33%和26.35%。组分C经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离得到2个活性组分C1和C2,其中C2的抗氧化活性最强,总抗氧化能力A_(700 nm)、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为2.03、92.34%和35.94%。结论:河蚬酶解液抗氧化肽的羟自由基清除能力突出,该研究为河蚬肉抗氧化肽的开发提供理论技术依据。     

河蚬多肽螯合亚铁的制备工艺研究

以河蚬肉为原料制备河蚬多肽,探讨河蚬多肽与亚铁离子螯合的最佳工艺条件。在单因素实验的基础上,采用响应面分析法对河蚬多肽螯合亚铁离子的工艺条件进行优化,确定最佳的螯合工艺条件为pH6.0,多肽与亚铁离子质量比1.5:1,螯合时间41 min,螯合温度31℃,螯合率预测值为82.40%,实测值为81.63%。红外光谱分析表明,多肽中的氨基和羧基均参与了螯合反应。本研究拓宽了河蚬的加工利用途径,并为多肽螯合亚铁的开发应用提供理论基础。     

河蚬肉抗氧化肽的分离及活性研究

目的:为制备具有抗氧化活性的河蚬肉抗氧化肽。方法:河蚬肉酶解液经膜分离后,采用Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱进行分离,得到抗氧化性最强的组分经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离,并对各组分的体外抗氧化活性进行测定。结果:经Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱分离得到5个活性组分A、B、C、D和E,其中组分C的抗氧化活性较强,其总抗氧化能力A_{700 nm}、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为1.79、83.33%和26.35%。组分C经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离得到2个活性组分C1和C2,其中C2的抗氧化活性最强,总抗氧化能力A_{700 nm}、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为2.03、92.34%和35.94%。结论:河蚬酶解液抗氧化肽的羟自由基清除能力突出,该研究为河蚬肉抗氧化肽的开发提供理论技术依据。      

河蚬酶解物美拉德反应产物抗氧化活性研究

将河蚬软体经酶解制得的河蚬酶解液(Corbicula fluminea hydrolysates,CFH)用超滤法分离得到分子量10 ku、5 ku～10 ku和5 ku三个组分。三种分子量范围酶解液分别与D-木糖进行美拉德反应制备河蚬酶解物美拉德反应产物(CFH-MRP),测定反应前后河蚬酶解物抗氧化能力,pH值、接枝度和褐变程度变化,并对美拉德产物结构进行初步分析。结果表明,通过美拉德反应能够显著提高河蚬酶解物的抗氧化能力,其中5 ku～10 ku的CFH-MRP具有最高的羟基自由基清除率(增加31%)、超氧离子自由基清除率(增加33%)和总还原能力(增加152%),10 ku的CFH-MRP具有最高的DPPH自由基清除能力(增加106%)。同时,美拉德反应使CFH的pH值降低,酶解液褐变程度增加。傅里叶红外光谱(FT-IR)表明CFH和D-木糖发生共价交联,反应产物氨基含量减少;GC-MS分析结果显示反应生成了酮类、酯类、醇类、烯烃、酚类和杂环类物质,在一定程度上提高了反应产物的抗氧化活性。     

河蚬抗氧化肽抗氧化稳定性研究

以河蚬抗氧化肽清除羟自由基的活性变化为指标,研究温度、p H、食品原料、防腐剂和不同金属离子对河蚬抗氧化肽抗氧化稳定性的影响。结果表明:河蚬抗氧化肽具有较强的耐热性,加热到100℃仍能保持95%以上的活性;在酸性环境中活性保持较好,在碱性条件下丧失较快;蔗糖、Na Cl对河蚬抗氧化肽的稳定性影响不明显,而葡萄糖和山梨酸钾会明显降低河蚬抗氧化肽活性（p<0.05）;K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+等金属离子对河蚬抗氧化肽稳定性均有不同程度的影响,其影响大小顺序为:Cu2+>Zn2+>Ca2+>K+>Mg2+。      

河蚬抗氧化肽抗氧化稳定性研究

以河蚬抗氧化肽清除羟自由基的活性变化为指标,研究温度、p H、食品原料、防腐剂和不同金属离子对河蚬抗氧化肽抗氧化稳定性的影响。结果表明:河蚬抗氧化肽具有较强的耐热性,加热到100℃仍能保持95%以上的活性;在酸性环境中活性保持较好,在碱性条件下丧失较快;蔗糖、Na Cl对河蚬抗氧化肽的稳定性影响不明显,而葡萄糖和山梨酸钾会明显降低河蚬抗氧化肽活性(p0.05);K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+等金属离子对河蚬抗氧化肽稳定性均有不同程度的影响,其影响大小顺序为:Cu2+Zn2+Ca2+K+Mg2+。     

河蚬肉酶解产物解酒护肝功效

采用体外试验法测定河蚬肉酶解产物对乙醇脱氢酶(ADH)活性的影响,采用动物试验测定灌胃河蚬肉酶解产物后小鼠醉酒时间、醒酒时间、血液乙醇浓度的变化以及小鼠肝组织中丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、谷胱甘肽(GSH)等相关生化指标评价其解酒护肝的功效。体外试验表明:河蚬肉酶解产物对ADH具有激活作用,激活率为52%。动物试验表明:河蚬肉酶解产物组与阴性组比较,可显著延长小鼠的醉酒时间和缩短醒酒时间,时间延长率为69.42%,缩短率为13.40%,且能显著降低小鼠血液乙醇浓度(P0.05)。此外,河蚬肉酶解产物能显著降低小鼠肝组织中的MDA、TG的含量(P0.05),减缓GSH的消耗(P0.05)。综上可知河蚬肉酶解产物具有解酒护肝的功效。     

可控酶法制备河蚬抗氧化肽工艺优化

为优化酶法制备河蚬抗氧化肽的最佳工艺条件,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken中心组合试验和响应面分析法,研究不同因素水平时酶解产物对羟自由基清除率的影响。获得河蚬抗氧化肽的最佳制备条件为:添加0.94%中性蛋白酶(以河蚬肉计),在料液比1∶2(m∶V),pH 6.00,温度54.70℃的条件下酶解3.91h,该条件下羟自由基清除率为81.63%。     

河蚬免疫活性糖蛋白分离及结构初步分析

采用DEAE-52纤维素柱层析,SephadexG-75葡聚糖凝胶层析和RP-HPLC柱层析手段分离纯化,从河蚬中分离纯化得到一种酸性糖蛋白CFP。经RP-HPLC和SDS-PAGE测定,CFP纯度为94.74%,其相对分子量为19030D。经苯酚-硫酸法测定,CFP的含糖量为5.18%,蛋白质含量为93.22%。碱性β-消除反应表明,河蚬糖蛋白中存在O-糖肽键。经红外光谱分析,CFP具有多糖的特征吸收,含有吡喃糖β-型糖苷键。     

蛤肉预煮液反渗透膜浓缩工艺研究

以蛤肉预煮液为原料,经非热力浓缩--反渗透膜(RO膜)处理达到理想料液浓缩度.通过选择RO膜种类以及对操作压力、操作温度和进料流速三因素的L9(34)正交试验,确定二级反渗透浓缩的最佳工艺条件.结果表明:选用三醋酸纤维素RO膜效果最好;二级RO膜浓缩的最佳工艺条件为压力3.5 MPa、温度38℃、流速1.5 m/s;浓缩后料液浓缩度可达32.5°Bx.