低温电镜术证实了兔出血症病毒亚基因组颗粒的存在

从病兔肝细胞分离纯化的兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）的低温电镜术显示出存在两种核心密度有明显差异的颗粒－－高密度颗粒和低密度颗粒；而病毒的负染电镜术则显示绝大多数病毒颗粒具有完整病毒颗粒的形态。结构分析表明高密度颗粒和低密度颗粒具有相同的衣壳结构，且不存在释放核酸的通道。对低密度颗粒核心区的密度分析表明相当数量的颗粒并非空衣壳。我们认为这部分低密度颗粒是含病毒亚基因组ＲＮＡ的病毒颗粒，从而为兔出血症病毒在复制过程中其７．５ｋｂ基因组和２．２ｋｂ亚基因组ＲＮＡ分别包装成病毒颗粒提供了结构证据。     

肾综合征出血热(HFRS)病毒和新疆出血热(XHF)病毒形态比较

用超薄切片电镜技术,比较了包括朝鲜出血热汉坦病毒76—118株在内的来源不同的7株HFRS病毒,并与分类地位已明确的XHF病毒作了形态对比,结果表明①HFRS病毒形态多样(圆形、椭圆形、杆形、哑铃形、蝌蚪形等)、大小多变,毒粒芯核内有横纹丝结构,说明其为有囊膜、螺旋对称的多形态病毒②HFRS病毒的成熟     

肾综合症出血热(HFRS)病毒的形态学研究

应用铁蛋白和辣根过氧化物酶标记抗体间接法染色免疫电镜超薄切片技术对经Vero E—6细胞从HFRS患者血清中直接分离到的二株病毒(H—8205及H—8278株)的形态作了观察。结果在细胞基质内、胞浆空泡内及细胞外查见为免疫复合物和铁蛋白颗粒或酶反应沉淀物包绕的病毒颗粒,园形或卵园形,平均直径108nm,变化范围50—156nm。颗粒有双层膜结构及表面突起,有的囊膜不连续,有小孔通过,颗粒内部为疏松的细颗粒状及微管状结构。两株病毒在形态上无差别。对照组(包括用正常人血清取代恢复期病人血清的对照)未见到类似     

猪肺炎霉形体兔化弱毒株的超微结构

猪肺炎霉形体(M.hyopneumonia,Mh)诱发猪的霉形体性肺炎(MPS),在世界各地广泛流行,严重危害着养猪生产的发展。长期以来,世界各国对该病的免疫预防作了大量的研究,但至今仍末有成功的疫苗问世。中国兽药监察所利用生物学的方法,将致病性的猪肺炎霉形体济南株(简称z株)适应于乳兔体内,培育出兔化弱毒株(简称R株)。R株对猪的致病力减弱,但仍然保持良好的免疫原性。以R株为菌种制备的弱毒疫苗经实验室研究及野外大量应用证明了安全,有效,在国内外首次研制出能够在生产上应用的预防MPS的弱毒疫苗,这对于猪霉形体肺炎的研究实属一重大突破。随着对动物霉形体病研究的     

GPV和IBRV的超微结构与形态发生的冰冻蚀刻研究

用冰冻断裂技术并结合其它电镜技术,研究了GPV和IBRV囊膜和核壳体的形态和发生。GPV发育早期,病毒从中部断裂,围绕病毒的膜样结构是均匀排列的两层颗粒,而成熟病毒在囊膜中间断裂,说明发育早期的囊膜脂质很少,主要成分是蛋白质颗粒,随后脂质才进入囊膜。而细胞质内成熟GPV囊膜的PF和EF都仍有大量膜内蛋白颗粒,GPV释放到细胞外后囊膜膜内蛋白颗粒大为减少。成熟的IBRV囊膜PF上膜内蛋白比EF上多。在囊膜周缘有时可见剌突样结构。在与疾毒接触的细胞质膜的区域有规则排列的颗粒,似与病毒释放有关。在感染细胞核内同时装配着IBRV的核心、空衣壳和核壳体。细胞核内核壳体固断裂部位不同可分为5种类型,深度蚀刻后对其形态进行了观察。文中还对不同方法制备的样品的形态进行了比较。     

猪肺炎霉形体兔化弱毒株的超微结构及致病性研究：Ⅱ.兔化弱毒株的致病性

扫描电子显微镜观察表明,已适应于兔体的猪肺炎霉形体兔化弱毒株能够在猪肺内繁殖,接种后30天可见到大量的霉形体生长于支气管纤毛丛表面;45天霉形体数量减少且变形;60天霉形体趋向消失。在长达60天的感染过程中,兔化弱毒株对纤毛的损伤轻微,肺泡的病变也较轻。而济南株强毒在接种后15天就造成了纤毛大面积脱落,45天内仍然持续进行;既使无眼观病变的部位其支气管纤毛丛也发生了严重脱落。结果证明猪肺炎霉形体兔化弱毒株对猪的致病力减弱。     

狂犬病病毒不同毒株的形态学研究

将狂犬病（Rabies vims）固定毒CTN株（中国济南株）、CVS株（国际标准攻击毒株）、ERA株（兽用疫苗弱毒株）分别在小鼠脑组织增殖及ERA毒株在BHK21传代细胞增殖,通过超薄切片和负染色制备样品,电镜观察.结果发现在鼠脑组织中,CTN株病毒粒子比较难查找,而较易发现CVS株和ERA株.另外,在不同毒株的脑组织和细胞培养物中还发现了大量的非典型粒子,诸如截断的粒子及锥形、柱形等形态,同时还发现了胞浆包涵体.研究揭示：（1）典型病毒粒子数量与免疫原性呈正相关;（2）在观察鼠脑组织的病毒时,发现有神经髓鞘部位难以找到病毒粒子;（3）狂犬病病毒粒子存在于宿主细胞的胞浆内.     

兔病毒性急性传染病病原的电子显微镜观察

近年来,在江南一带流行的兔急性传染病,据流行病学调查及电镜观察,已确认为是一种病毒性疾病,但目前对该病毒的类属及性质尚存有不同意见。我们用人工感染致死的病兔肝组织作超薄切片及匀浆抽提液负染观察,发现有大量直径为30nm左右的颗粒存在,颗粒均位于白细胞的细胞质中,有的散在分布;有的聚集成堆;     

胶体金免疫电镜技术用于植物病毒的检测

胶体金免疫电镜技术具有步骤简便。胶体金探针能精确定位、电镜下分辨率高等优点,给细胞化学标记体系带来了一种改革,近年来越来越多地应用于生物学和医学研究中,如:细胞内某些生物活性物质的定位研究、组织细胞形态发生研究、酶的研究等,但在农业科研中的应用还很少。尤其在病毒检测方面,目前国内只见到以胶体金免疫电镜技术检测动物病毒的报道,而用于植物病毒检测的报道尚无。本文报道了以改良的柠檬酸钠—鞣酸还原法制备大小适于植物病毒标记的胶体金颗粒的方法,制备的胶     

猪瘟病毒与辛德毕斯病毒成熟和释放特征的比较研究

电镜下观察了二种有囊膜的正链ＲＮＡ病毒－－猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）与辛德毕斯病毒（ＳｂＶ）感染的宿主细胞。在ＳｂＶ ６Ｋ蛋白突变株感染的ＢＨＫ２１细胞中,可清楚地显示病毒从细胞质膜出芽与释放的过程,并在细胞擀中积累了大量的核衣壳。在ＣＳＦＶ感染的ＭＰＫ细胞中首次观察到较多的病毒核衣壳与成熟的病毒粒子,因而有可能对其成熟与释放方式的不同进行比较研究。此外,对病毒诱导的细胞超微病变特征进行了报道     

猪瘟病毒的形态结构与形态发生的电子显微镜研究

猪瘟病毒的形态结构与形态发生的电子显微镜研究王镇闵光伟李明义藤俊琳丁明孝翟中和（北京大学生命科学学院，北京１００８７１）猪瘟病毒（Ｃｌａｓｓｉｃａｌｓｗｉｎｅｆｅｖｅｒｖｉｒｕｓ，ＣＳＦＶ）属瘟病毒属（Ｐｅｓｔｉｖｉｒｕｓ）、黄病毒科（Ｆｌａｖｉｖｉ...     

在可能的生物恐怖袭击中病毒的电镜诊断附:微波和数码图像技术应用于快速电镜诊断简介

本文介绍了在可能的生物恐怖袭击中,电镜在病毒诊断和鉴别诊断的应用.文中重点描述了痘病毒科和4种不同科的出血热病毒,包括:丝状病毒科、沙拉病毒科、布尼病毒科和黄病动毒科所属病毒在电镜下的形态学和形态发生学特征.电镜在痘病毒与疱疹病毒的鉴别诊断中也是快速和可靠的方法.在附录中还简要介绍了微波和数码图像技术在快速电镜诊断中的应用.     

胶体金免疫电镜技术检测番茄环纹斑点病毒

本实验利用胶体金免疫电镜技术检测番茄环纹斑点病毒（ tomato zonate spot virus, TZSV）,分别以TZSV的N 蛋白多克隆抗体及TZSV的Gn蛋白多克隆抗体为一抗,然后以胶体金标记羊抗兔IgG?gold（10 nm）为二抗对病毒进行胶体金标记,电镜观察用TZSV Gn蛋白抗体标记的胶体金颗粒能很好地结合到病毒粒体上。结果表明该方法可以实现对TZSV更为准确可靠地检测。     

猪瘟病毒的形态结构及侵染机理的研究

猪瘟病毒 (ｃｌａｓｓｉｃａｌｓｗｉｎｅｆｅｖｅｒｖｉｒｕｓ ,ＣＳＦＶ) ,属黄病毒科 ,瘟病毒属成员 ,是严重危害养猪生产的主要病原体之一。ＣＳＦＶ是具有囊膜的正链ＲＮＡ病毒。除基因组ＲＮＡ外 ,还有衣壳蛋白Ｃ和三种囊膜蛋白Ｅ0 ,Ｅ1和Ｅ2组成。一般认为病毒侵染细胞是通过囊膜蛋白与细胞表面受体相互作用形成Ｉｎｆｅｃｏｓｏｍｅ后进入宿主细胞。然而对ＣＳＦＶ感染细胞的细节当不甚明了。本项研究在观察ＣＳＦＶ形态结构与发生过程的基础上对其侵染细胞的机理进行了初步研究。材料与方法本实验所用的ＣＳＦＶ Ｔ株 ,石门株 (Ｆ1…     

燕麦细胞癌裸小鼠移植瘤中C型病毒的电镜诊断

一株人肺燕麦细胞癌成功地移植到ＢＡＬＢ／ＣＡ／ＪＣＬ品系裸小鼠皮下生长并连续代传。电镜跟踪观察显示，传代早期移植瘤较好地保持了来源瘤的超微结构基本特征，最典型的结构是在移植瘤细胞胞浆中出现以成堆分布为主的神经分泌型颗粒。但是在第十八代移植瘤的细胞间隙以及胞浆中小胞和内质网小池内查见到Ｃ型病毒颗粒。神经分泌型颗粒与成熟的Ｃ型病毒在电镜下形态相似，即都有外膜、透明带和致密内核，粒径在１００ｎｍ左右。但     

葡萄球菌A蛋白在电子显微镜观察病毒中的应用研究

本文报导了国内首次使用葡萄球菌A蛋白(Stophylococca Protein A,简称SPA)在电镜观察病毒中的应用。并使用SPA所建立的固相免疫电镜方法(简称SPA-SPIEM)对轮状病毒、脊髓灰质炎病毒、类SV_(40)猴病毒分别进行了实验和检查。对比了各种浓度SPA、各种稀释度抗血清对检测病毒结果的影响。同时对直接电镜(简称DEM-PTA)、SPA-SPIEM和直接抗原抗体免疫电镜(简称IEM)三种制样方法所观察到的病毒形态结构进行了比较。结果表明:SPA-SPIEM法在镜下检出的病毒颗粒数比DEM-PTA法提高100—300倍左右,在显示病毒形态结构方面接近DEM-PTA法,比IEM法好。整个SPA-SPIEM制样过程,在1小时内可以全部完成。作者认为:SPA-SPIEM制样方法,在电镜检测病毒中是一种用材量微、灵敏度高、分辨率好、特异性强、快速准确的检测方法。在病毒分型、混合病毒分别检测、低滴度未知病毒检测等方面,具有独特的优点。是一种有发展前途,可应用于各种病毒检测的新方法。     

新生儿皮肤疱疹病毒感染的电镜诊断

目的：电镜观察疱疹病毒（HV），为临床诊断提供形态学依据；并进一步研究人皮肤HV感染的组织病理变化及形态特征。方法：应用透射电子显微镜观察新生儿皮肤活检组织超薄切片。结果：表皮细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞及神经纤维内均可观察到病毒颗粒，感染病毒的细胞有明显的形态学变化；成熟病毒颗粒直径约150－160nm，核衣壳直径约100－110nm。核衣壳的核心可分为空心型、颗粒型和致密型三种；郎格罕细胞和巨噬细胞数量明显增加。结论：HV可感染皮肤多种细胞及神经纤维；郎格罕细胞和巨噬细胞增生可能在限制病毒复制和阻止扩散中起重要作用；电镜对病毒疾病的诊断和研究具有很大的价值。     

动物病毒疫苗研制及其产品的电镜检测

应用电镜技术检查了某些原代和传代细胞，并且跟踪检查了疱疹病毒、痘病毒、腺病毒、细小病毒、冠病毒、RNA反录病毒、呼肠病毒、动脉炎病毒、小RNA病毒、弹状病毒、杯状病毒、黄病毒、双RNA病毒、正粘病毒、副粘病毒等某些成员的驯化、培育及筛选的目的毒。结果发现了部分培养细胞有支原体污染，有的还有细菌污染；同时在某些培养的原毒、基础种毒、生产种毒及其产品中也发现了一些病毒的污染和联苗中互相感染现象。如此证明了电镜技术能够及时发现问题，及时解决问题，使之科研少走弯路，提高产品质量。     

人巨细胞病毒在人胚肺细胞内的形态发生研究

以人巨细胞病毒AD-169株感染人胚肺成纤维细胞20分钟后,在电镜下观察到病毒颗粒吸附和穿透过程。感染后18小时,细胞核内出现包涵体。包涵体内有空心的核衣壳、含有病毒核心的核衣壳和二个同心园状的核衣壳。并见到病毒核心样物正在嵌入到核衣壳内的不同阶段形态(图1)。这提示核内包涵体是病毒复制和装配的场所。核内成束的小管状结构,其直径与核衣壳相同,可能是核衣壳结构蛋白或其前体物质的不稳定形态(图2)。胞浆包涵体内除含有成熟病毒和致密体外,尚有许多吞噬溶酶体,空泡和肿洚的内浆网、线粒体等。胞浆包涵体范围以外的胞质内细胞器基本正常,很少病毒颗粒和致密体(图     

野生型兔出血症病毒空间结构的低温电镜术及像重构研究

兔出血症病毒 ( Rabbit Haemorrhagic Disease Virus,RHDV)造成家兔患烈性传染病 ,其发病率和死亡率极高 ,对养兔业造成严重危害。该病毒基因组为约 7.5 kb正链单股 RNA,含有两个开放阅读框架 ( ORF)。其中 ORF1约占基因组全长的 86 % ,编码一种结构蛋白 ( VP6 0 )以及若干种非结构蛋白 ,即螺旋酶 ,蛋白酶和 RNA聚合酶。负染色电镜术研究表明 ,RHDV颗粒具有 2 0面体对称性 ,其直径为 32 - 4 2 nm。根据形态学特征和基因组结构 ,RHDV被归为杯状病毒科 ( caliciviridae)。在 80年代初 ,我国学者首先发现了兔出血症病毒 ,从形态学 …