恩施富硒大蒜中不同含硒粗蛋白体外抗氧化活性研究

本文以恩施高硒地区所产富硒大蒜为研究对象,采用连续提取法依次提取不同种类的蛋白质,并采用D-脱氧核糖法、改进邻苯三酚自氧化法及TBA比色法分析不同含硒相蛋白清除自由基及抗脂质过氧化的效果.结果表明:四种含硒粗蛋白对清除羟基自由基·OH、O2-具有较好的量效关系,其活性由弱到强的顺序为:醇溶性蛋白<盐溶性蛋白<碱溶性蛋白<水溶性蛋白.在体外反应体系中,水溶性、碱溶性和盐溶性蛋白能显著地降低MDA生成和肝中过氧化物的含量,显示富硒大蒜含硒相蛋白对肝组织损伤具有很好的保护作用.通过抗氧化活性与硒含量之间的相关分析,发现存在显著或者极其显著的正相关性.     

富硒大米中不同溶解性硒蛋白理化特性和抗氧化活性

目的:以富硒大米中不同溶解性的硒蛋白为研究对象,研究了其理化特性和抗氧化活性。方法:采用Osborne分级分离法从富硒大米中制备水溶性硒蛋白（WSP）、盐溶性硒蛋白（SSP）、醇溶性硒蛋白（ESP）和碱溶性硒蛋白（ASP）,对比其蛋白含量、总硒含量和硒蛋白的亚基分子量分布,通过紫外、红外光谱分析确定其特征官能团,并采用液相色谱-质谱联用法分析其硒代氨基酸组成等理化特性;在此基础上进一步分析了各类大米硒蛋白的抗氧化活性。结果:在4种不同溶解性的大米硒蛋白中,ASP具有最高的蛋白含量和硒含量（P<0.05）,且以小分子蛋白为主。ASP中存在3种硒代氨基酸,包括硒代半胱氨酸（300.22 ± 6.88 μg/kg）、甲基硒代半胱氨酸（170.19 ± 2.87 μg/kg）及少量硒代甲硫氨酸。大米硒蛋白的总抗氧化能力（T-AOC）、DPPH自由基清除能力与样品浓度呈良好的量效关系;在相同浓度下,不同大米硒蛋白的T-AOC、DPPH自由基清除能力的强弱顺序均为ASP>WSP>SSP。通过抗氧化活性与硒含量之间的相关性分析,两者之间存在极显著的正相关性（P<0.01）。结论:ASP是进一步纯化和研究较为理想的富硒大米提取物。     

富硒灵芝中不同蛋白提取物的组成特性及抗氧化活性研究

研究了富硒灵芝中不同蛋白质提取物的组成特性及其抗氧化活性。在富硒灵芝的4种蛋白质提取物中,水溶性蛋白提取物具有最高的硒含量(2.771 mg Se/g pr),最多种类的蛋白质组成(13条带)和最为宽泛的蛋白质分子质量范围(22~107 ku),以及最强的自由基清除活性。碱溶性蛋白提取物具有最少的糖含量,而醇溶性蛋白提取物具有与其它3种提取物不同的氨基酸组成。清除羟基和超氧自由基的活性由弱到强的顺序为:醇溶<盐溶<碱溶<水溶,这个趋势与4种提取物的单位质量蛋白中硒含量的趋势一致。水溶性蛋白提取物是进行进一步纯化和研究的最为理想的提取物。     

梭子蟹中硒形态分析及其分布研究

为研究梭子蟹中硒的赋存形态,并进一步探究梭子蟹硒蛋白组分中硒含量的分布,以梭子蟹为研究对象,采用透析法提取有机硒、连续提取法提取不同种类蛋白质、热水浸提法提取多糖、原子荧光光谱法测定原料和各组分中的含硒量。结果表明:梭子蟹中64.5%的硒是以有机硒形态存在,并主要与蛋白结合(蛋白硒占总硒的48.8%);碱溶性蛋白和水溶性蛋白是梭子蟹结合硒的主要蛋白,总结合硒量占蛋白硒含量的77.9%,按照结合硒量的多少,硒在蛋白中的分布依次是:碱溶性蛋白水溶性蛋白盐溶性蛋白醇溶性蛋白;也有部分硒和多糖结合,占总硒含量的3.59%。     

富硒花生中含硒蛋白的提取及其抗氧化性的研究

脱脂富硒花生干粉(0.3147μg/g)的硒含量是普通花生脱脂干粉的2.5倍以上。富硒花生中蛋白质的提取率为23.39%,碱溶性蛋白是富硒花生中蛋白质的主要形式,蛋白含量占总可提取蛋白的92.82%,它结合的硒占总蛋白硒的77.33%,在富硒花生的不同溶解性的蛋白质提取物中,水溶性蛋白相比于其他蛋白提取物具有更高的DPPH自由基清除能力,更高的还原力和更长的诱导时间,这在很大程度上可以解释为由于它的高硒含量。     

硒在富硒灵芝中的分布

为深化富硒灵芝的基础研究,指导富硒灵芝的生产与应用,以不同含硒量的富硒灵芝子实体为试样,系统地研究了硒在富硒灵芝中的分布,结果表明:富硒灵芝子实体中81.71%～87.92%的硒是以有机硒形式存在,并主要与子实体中的蛋白结合(蛋白硒占总硒的56.0%～61.2%);水溶性蛋白和碱溶性蛋白是灵芝结合硒的主要蛋白,总结合硒量占蛋白硒的75.2%～79.2%。按照结合硒量的多少,硒在蛋白中的分布依次为:水溶性蛋白>碱溶性蛋白>醇溶性蛋白>盐溶性蛋白。此外,应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离富硒灵芝子实体中的含硒蛋白组分,并采用氢化物原子荧光法(HGAFS)对蛋白或多肽条带按分子质量段切割进行硒含量测定,结果表明:在分辨出的13条蛋白条带中,分子质量在8.709～142.53kDa的蛋白或多肽均结合了不同程度的硒,但硒主要分布在分子质量不超过16kDa的蛋白或多肽中。     

富硒灵芝发酵培养工艺及产物抗氧化能力研究

本文以亚硒酸钠为硒源,以灵芝为富硒载体,采用液体发酵方式进行富硒灵芝培养;主要研究了培养基中亚硒酸钠浓度对富硒灵芝的生物量及总硒含量的影响,并通过正交试验对富硒灵芝液体发酵培养工艺进行优化,此外还对富硒灵芝中四类不同性质的蛋白的抗氧化能力进行了初步探讨。结果表明:为获得最佳的富硒效果,发酵液中亚硒酸钠浓度在1000 mg/L左右为宜。接种量为12%,pH 8.0,摇床转速200 r/min为富硒灵芝发酵培养的最适工艺条件。碱溶性蛋白为富硒灵芝中含量最高一类蛋白,含量达到了8.64%;其次是水溶性蛋白,含量为6.64%;接下来是盐溶性蛋白,含量为4.62%;醇溶性蛋白的含量最低,含量仅有0.30%。但比较四类蛋白粗提物的硒含量,发现醇溶性蛋白的硒含量最高,达510.0 mg/g;其次是水溶性蛋白和碱溶性蛋白,硒含量分别为278.55 mg/g和115.51 mg/g;盐溶性蛋白的硒含量最低,为49.68 mg/g。考察四类灵芝蛋白粗提物的抗氧化能力,发现其抗氧化能力与其硒含量呈一定的正相关,醇溶性蛋白具有最高的抗氧化能力,其次是碱溶性蛋白和水溶性蛋白,盐溶性蛋白的抗氧化能力最低,且富硒样的抗氧化能力均高于相应的对照样。     

富硒灵芝中高抗氧化活力、高硒含量的水溶性硒蛋白的纯化

在富硒灵芝蛋白的各种溶剂提取物中,水溶性蛋白是其中结合硒含量最高的。本文以高硒(Se)含量、高自由基清除能力为考查指标,通过优化的柱层析等方法对富硒灵芝中的水溶性硒蛋白进行了提取、分离和纯化。通过电感偶合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定蛋白质结合的硒元素(se)含量,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)进行纯度鉴定。通过电子自旋共振捕捉(EPR)技术测定样品对羟自由基和超氧自由基的清除能力。研究结果表明,纯化后的硒蛋白显示出很强的羟自由基和超氧自由基的清除能力,并且这种抗氧化能力随着硒蛋白中硒含量的增加而增强,从而反映了硒元素在富硒灵芝蛋白抗氧化活力提高方面的重要作用。     

富硒灵芝中不同粗蛋白的抗氧化活性及其协同作用研究

通过电子自旋共振捕捉技术(ESR)对富硒灵芝中不同种类的粗蛋白的抗氧化活性进行了评价,研究了羟自由基清除率同蛋白质剂量之间的关系,并对它们之间的抗氧化协同作用进行了分析。结果表明,四种粗蛋白都具有一定的·OH和O2ˉ·清除活性,并且以水溶性粗蛋白的抗氧化活性最高。每种粗蛋白对·OH的清除率与蛋白浓度之间的关系可以用对数(指数)方程来表示。各种粗蛋白之间不存在抗氧化活性的协同作用,而且醇溶性粗蛋白对其它三种蛋白还具有一定程度的拮抗作用。     

富硒糙米蛋白理化特性及抗氧化活性的研究

本文以三种富硒糙米为原料,对糙米中蛋白的理化特性和富硒糙米蛋白的抗氧化活性进行分析与测定。研究发现:相较于普通糙米,富硒糙米中硒含量显著增加(P<0.05);富硒处理可提高糙米中粗蛋白含量,造成肉豆蔻酸含量降低,硬脂酸含量升高;相较于普通糙米蛋白,富硒糙米蛋白中蛋氨酸含量上升,半胱氨酸含量下降;富硒处理对蛋白质分子量及亚基组成无显著影响,但会增加β-折叠、无规则卷含量增加,降低β-转角、α-螺旋含量。富硒糙米蛋白具一定的DPPH自由基、羟自由基清除能力与还原力,且均明显高于普通糙米蛋白,表现出较强的体外抗氧化活性。