离子液体双水相提取木瓜蛋白酶及条件优化

采用[C4mim]Br/K2HPO4双水相体系提取木瓜蛋白酶。首先考察各成相试剂对木瓜蛋白酶活性的影响,其次考察了离子液体侧烷基链长度、离子液体浓度、酶添加量、pH、温度对木瓜蛋白酶分配行为的影响;并采用响应面法(CCD)优化[C4mim]Br/K2HPO4双水相萃取木瓜蛋白酶的条件。结果表明:离子液体对木瓜蛋白酶的活性影响较小,低浓度时还能促进酶活性,而无机盐对木瓜蛋白酶活性的影响较大;高温不利于离子液体双水相萃取木瓜蛋白酶;各因素对木瓜蛋白酶萃取的影响从大到小依次为K2HPO4的浓度、[C4mim]Br的浓度、酶添加量、pH。响应面优化得到的最佳萃取条件:0.30 g/mL的[C4mim]Br,0.30 g/mL的K2HPO4,pH 6.0,酶添加量3.0 mg/mL,温度30℃。在此条件下木瓜蛋白酶的酶活性回收率达到91.20%,纯化因子可以达到1.73。为该体系的放大实验或规模化生产提供理论指导。     

离子液体双水相体系及其在蛋白分离中的应用

本文简要介绍了离子液体双水相体系(ILATPS)在生物萃取分离中的研究进展及其体系的分类、特点、应用对象等;采用文献计量学的方法,对国内外近十年来发表的ILATPS研究文献进行简要统计分析;讨论了ILATPS的成相机理及其萃取分离蛋白质的机理的研究进展,热力学研究表明,虽然静电相互作用和盐析作用是蛋白质在双水相中转移的推动力,但其中起主要作用的驱动力是疏水相相互作用;应用实例展现了国内外对离子液体双水相萃取分离蛋白质研究的现状和发展趋势.总之,ILATPS在蛋白质和酶等生物分离中的应用前景将十分巨大.     

离子液体双水相体系及其在萃取分离蛋白质中的应用研究进展

本文简要介绍了离子液体双水相体系(ILATPS)在生物萃取分离中的研究进展及其体系的分类、特点、应用对象等;采用文献计量学的方法,对国内外近十年来发表的ILATPS研究文献进行简要统计分析;讨论了ILATPS的成相机理及其萃取分离蛋白质的机理的研究进展,热力学研究表明,虽然静电相互作用和盐析作用是蛋白质在双水相中转移的推动力,但其中起主要作用的驱动力是疏水相相互作用;应用实例展现了国内外对离子液体双水相萃取分离蛋白质研究的现状和发展趋势。总之,ILATPS在蛋白质和酶等生物分离中的应用前景将十分巨大。     

盐析法联合离子液体双水相纯化木瓜蛋白酶

本实验以海南产番木瓜为研究对象,采取盐析法联合离子液体双水相对其富含的木瓜蛋白酶进行提取纯化。以不同饱和度的(NH4)2SO4对粗酶液进行盐析,通过实验结果分析,确定了以饱和度分别为20%和45%的两步盐析法的最佳条件。然后再进行双水相萃取,通过单因素试验结果设计3因素3水平的响应面试验,优化双水相萃取条件为离子液体[C4mim]N(CN)2质量分数29.76%、(NH4)2SO4质量分数16.08%、pH?8.18,在此最优条件下木瓜蛋白酶萃取率为89.01%,酶活力回收率为86.72%,所得到木瓜蛋白酶比活力为1?056?U/mg,纯化倍数达到9.6?倍。然后对实验产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,经纯化的酶中杂条带明显减少,验证了分离纯化的效果。     

离子液体双水相萃取-HPLC分析红酒中的痕量氯酚类物质

建立亲水性离子液体[C_4MIM]BF_4与无机盐(NH_4)_2SO_4形成的离子液体双水相萃取富集红酒样品中6种痕量氯酚类物质的方法。通过考察离子液体和盐的种类、pH值、离子液体和盐质量分数对氯酚萃取率和富集倍数的影响,确定萃取氯酚的最优条件。在最佳萃取条件下,6种氯酚的线性范围为20~200μg/L,相关系数(R~2)达到0.999,6种氯酚的检出限在3.68~12.16μg/L之间。对实际红酒样品进行测定,加标回收率为87.73%~103.44%,相对标准偏差在0.33%~6.35%之间。该法操作简单、迅速、绿色且具有较高的萃取效率。     

离子液体双水相萃取-HPLC测定饮料中的8种合成着色剂

试验旨在建立一种离子液体双水相萃取-高效液相色谱法检测饮料中8种合成着色剂(新红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、酸性红和赤藓红)的方法。考察了萃取剂的种类及体积、盐的种类及添加量、样品pH、萃取时间、离心时间对萃取效率的影响。在优化条件下,各物质在30~1200μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,方法检出限为2.4~6.0μg/L。在加标量50,250和500μg/L水平下,样品加标平均回收率为86.5%~99.0%,相对标准偏差为0.3%~3.8%(n=6)。该法操作简单、迅速、环保且具有较高的萃取效率。     

离子液体及聚离子液体在基于固相萃取技术的食品安全分析中的应用

由于食品样品多样性和复杂性,样品前处理成为食品安全分析的关键。固相萃取技术是食品安全分析中富集痕量组分、分离干扰物质的重要前处理方法。将具有特殊物理化学性质的离子液体及聚离子液体,应用于固相微萃取、基质固相分散萃取、分子印迹固相萃取、整体柱固相萃取等固相萃取技术中,改善了固相吸附剂性能,提高了固相萃取效率,实现了对食品样本中重金属离子、农兽药残留、违规或超标添加剂等的高效富集、分离,合并其他分离分析方法,达到了准确测定这些物质的含量的目的。离子液体及聚离子液体在食品分析的前处理中的应用将越来越广泛。     

咪唑类离子液体提取天然产物的应用研究

离子液体因具有良好的溶解性、热稳定性、化学稳定性、可设计性等特点,在提取分离天然产物方面具有显著的提取效果。本文综述了近年来咪唑类离子液体作为提取剂在提取天然产物方面的应用,提出了离子液体在分离天然产物领域中存在的问题,并指出安全、功能化离子液体的研制和离子液体的高效回收是解决这些问题的主要手段,为离子液体在天然产物提取中的应用奠定基础。     

菜籽粕蛋白提取及其氨基酸分析

为了综合利用菜籽粕资源,采用碱法和酸法分步提取,分析pH值、料液比、提取温度、提取时间对蛋白提取率的影响,进一步对其氨基酸组成进行分析。结果表明:碱法提取菜籽粕蛋白的最佳提取工艺为:pH=13,料液比1∶15(g/mL),提取温度45℃,提取时间1 h,提取率为67.86%。第二步酸法提取菜籽粕蛋白的最佳提取工艺为:pH=0.5,料液比1∶15(g/mL),提取温度45℃,提取时间2 h,提取率为36.10%。氨基酸分析结果表明:菜籽粕蛋白含有17种氨基酸,其中必需氨基酸含量占29.41%。     

涡旋辅助离子液体双水相萃取五味子中木脂素类化合物

建立一种简单、高效、绿色的涡旋辅助离子液体双水相法萃取五味子中7种木脂素类化合物,结合高效液相色谱法对目标物进行分离和定量.研究以离子液体[C4mim]BF4为萃取剂,以MgSO4为成相盐,在涡旋辅助作用下形成双水相体系且目标物则被萃取至离子液体相中,分别对双水相体系的组成和萃取条件进行了考察和优化,并进行了方法评价....     

水相酶解法提油工艺对菜籽蛋白功能特性的影响

采用纤维素酶、果胶酶、Alcalase蛋白酶对油菜籽进行水相酶解法制取油脂和蛋白。对传统水剂法制油及水相酶解法提油工艺所得菜籽蛋白的功能特性进行了对比研究。研究表明：在实验条件下，工艺过程对菜籽蛋白的功能特性有一定的影响，表现为低度改性，所得菜籽蛋白溶解度显著提高，尤其是在菜籽蛋白等电区域。同时具有更好的起泡性、乳化性、持水性、吸油性，但泡沫稳定性和黏度比传统水剂法有所降低。这些功能特性的变化使之更有利于用做食品原料。     

双液相溶剂并流浸出油菜籽的模拟研究

为简化双液相溶剂浸出油菜籽工艺流程，把原流程对油菜籽中油和硫甙的两步浸出合而为一，并用串级实验对简化流程进行了验证。结果表明，用并流的双液相溶剂一步从油菜籽中同时提取油和硫式是可行的，可大大简化流程。在温度40—50℃，4级浸出，己烷相溶剂比2（L/kg)，甲醇相溶剂比5(L/kg)，甲醇相水含量10％(V/%)的条件下，菜粕中残油和硫甙可分别降到1％和30μmol/g以下。本实验结果为双液相工艺中试提供了依据。     

水酶法提取油菜籽粕中多酚的研究

采用水酶法和响应面设计法对菜饼粕中多酚的提取工艺进行研究。在单因素试验的基础上,选定pH、加酶量、温度和反应时间4个因素,通过响应面分析得到了优化组合条件。最佳工艺条件是:原料粒度80目,液料比25∶1,pH 5.0,加酶量4.3%,温度50℃,时间43 min,此时菜籽多酚得率为6.43 mg/g。     

油菜籽饼粕中植酸的提取技术研究

本文确立了简单有效的植酸测定方法，通过对油菜籽饼粕中植酸的提取量有影响的相关因素筛选，确定关键影响因素，并通过响应曲面法优化了植酸最佳提取工艺：在提取温度为44，11～55．23℃时，只需在pH为9．70～10．96，料液比为21，87～25．74g／mL的条件下，油菜籽饼粕植酸提取量即可达到62．367mg／g（本实验中心点预测值）以上的提取量。对二次多项式数学模型解逆矩阵得知：在pH、提取温度和料液比分别为10．96、56．07℃和23．96g／mL时，油莱籽饼粕植酸提取量可达到最大预测值为62．716mg／g。     

基于氨基功能化离子液体萃取番茄中超氧化物歧化酶

本实验利用新型绿色化学功能溶剂离子液体与无机盐形成的双水相体系对番茄中的超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）进行萃取,考察离子液体的种类和质量浓度、K2HPO4的质量浓度、萃取温度及萃取时间对SOD活力的影响。通过单因素试验及响应面优化试验得到的最佳萃取条件为[(H2NC2)Mim]Br质量浓度0.40 g/mL、K2HPO4质量浓度0.60 g/mL、萃取温度35 ℃、萃取时间25 min,在该条件下萃取得到的SOD活力为345.68 U/g。与传统的缓冲液法及[C4Mim]Br/K2HPO4双水相法相比,本实验所用方法提高了萃取酶的活性且标准偏差更小。本实验为果蔬中蛋白酶类物质的萃取提供了新的实验思路。     

离子液体辅助双水相系统提取茶渣中茶多酚工艺优化

为发展一种绿色、高效及温和的茶多酚提取方法,采用离子液体(IL)辅助乙醇/硫酸铵双水相系统(ATPS)提取茶渣中的茶多酚,考察了离子液体结构和用量对茶多酚得率和抗氧化性的影响,对提取工艺进行了正交试验优化。结果显示,少量IL添加可提高乙醇/硫酸铵ATPS的分相能力及其对茶多酚的得率,但对提取液的抗氧化活性没有明显影响;咪唑型离子液体对提取茶多酚具有更好的促进作用,咪唑环上侧链越长,其茶多酚得率越高;[C₄mim]Cl辅助乙醇/硫酸铵ATPS对茶渣中茶多酚得率明显高于其他体系,且其提取液中儿茶素类组分含量更高。茶渣多酚最佳提取工艺为[C₄mim]Cl质量分数10%、硫酸铵质量分数30%、乙醇体积分数60%,料液比1∶40 g/mL及超声功率540 W,在此条件下,茶渣中茶多酚得率为85.31±1.25 mg·g^-1。IL辅助双水相系统是一种有前景的茶多酚提取工艺,在保持茶多酚活性的同时,能获得较高的茶多酚得率和儿茶素类组分含量。