荷叶生物碱的提取工艺优化及其清除羟基自由基能力的测定

研究了荷叶中生物碱的提取优化工艺及其抗氧化效果.采用正交实验设计,考察提取温度、提取时间、料液比和酸水pH对生物碱提取效果的影响.结果表明,最佳提取工艺为酸水pH2.5,提取温度80℃、提取时间2h和料液比1∶40;荷叶碱在5.20～26.00μg/mL范围内具有良好的线性关系,r=0.994,荷叶中荷叶碱的含量占荷叶生物碱水提物含量的1.752%;浓度为7mg/mL荷叶生物碱水提物溶液对水杨酸体系中羟基自由基(·OH)的清除率为55.2%.     

荷叶中荷叶碱的高效液相色谱检测方法及其提取工艺研究

通过正交试验探讨用乙醇回流提取荷叶中荷叶碱的最佳工艺,并建立荷叶碱含量测定的高效液相色谱测定方法。结果表明,用75%的乙醇在90℃温度下按固液比为1∶20(m∶V)回流提取3.5h,荷叶碱回收率高于95%;高效液色谱检测其含量在43.16～258.96μg/mL有很好的线性关系,相关系数达0.999 3,最低检出量为0.103 4μg/mL。说明用该方法提取荷叶碱可行,测定结果稳定、精确。     

荷叶生物碱的含量测定方法及抑菌活性研究

以酸性乙醇溶液作为提取荷叶生物碱的溶剂,经过一系列处理后用大孔吸附树脂进行纯化纯化,液经紫外扫描得到荷叶生物碱最大吸收波长后用紫外分光光度法对荷叶生物碱进行含量测定,使用荷叶生物碱纯化液对3种细菌进行抑茵实验,结果表明,荷叶生物碱在274 nm处有最大吸收波长,并得到标准曲线的回归方程为y=47.007x-0.012 2(R2=0.998 5).荷叶生物碱的纯化液对细菌的抑茵作用明显,浓度在4 mg/mL～6mg/mL之间即可达到最低抑菌浓度.同时表明在碱性条件下抑菌效果最明显.     

荷叶功能成分的提取及其对自由基清除作用的研究

研究了荷叶中的功能成分黄酮类化合物和生物碱的水提取工艺条件。结果表明 :以水为溶剂来提取荷叶中的黄酮类化合物及生物碱时 ,较佳的工艺条件为 ,m (水 )∶m(荷叶 ) =30∶1,于 80～ 90℃提取 1.5h ,提取液呈酸性。同时采用电子自旋共振捕集技术 (ESR) ,研究了以荷叶在水溶剂中的提取物 (LLE)对羟基自由基 (·OH)和超氧阴离子自由基 (O-2 ·)的清除效果。结果表明 :LLE对·OH和O- 2 ·有很强的清除能力 ,2 6.94 μg/mL的LLE对次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系产生O-2 ·的清除率达 65 .60 % ,LLE浓度大于 8.98mg/mL时 ,可以全部清除由Fenton反应体系产生的·OH。     

高效液相色谱法测定不同产地湘莲中荷叶碱、 莲心碱、芦丁的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定湘莲中荷叶碱、莲心碱、芦丁的方法。方法在酸性条件下超声提取3种待测组分。色谱条件如下:C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.1 mol/L乙酸铵(用乙二胺调节pH值至7.5~8.0)(55:45,V:V);流速:1.0 m L/min;检测波长:275 nm;柱温30℃;进样量10μL。结果荷叶碱、莲心碱、芦丁分别在7.636~152.7μg/mL(r~2=0.9999,n=5)、7.543~150.9μg/mL(r~2=0.9995,n=5)、7.543~150.9μg/mL(r~2=0.9998,n=5)范围内线性关系良好,加标回收率为96.9%~100.5%之间,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.1%~1.4%。结论该法同时测定湘莲中荷叶碱、莲心碱、芦丁,简单快速,定量准确,可以为评价不同产地湘莲功效成分提供参考。     

荷叶生物碱提取响应曲面优化研究

以荷叶为材料,在提取温度、提取时间、乙醇体积分数和液料比4 个单因素试验的基础上,利用响应曲面试验设计法对荷叶生物碱提取条件进行研究,并通过回归方程和响应曲面,得到的最佳提取工艺为：提取温度84℃,提取时间2.01h,乙醇体积分数90.65%,液料比29.74:1(ml/g)。验证实验结果显示,此条件下荷叶生物碱提取率为0.858%。荷叶碱在6.40～32.00μg/ml 范围内具有良好的线性关系,r =0.992,荷叶中荷叶碱占荷叶生物碱提取物的比例为7.952%,荷叶中荷叶碱的含量为0.186%。     

HPLC测定荷叶中碱盐的含量

以荷叶为原料,建立一种荷叶碱盐含量的测定方法.运用高效液相色谱法测定,色谱柱为Hypersil ODS2(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸盐缓冲溶液(0.05%磷酸-0.2%三乙胺-水)(25:75,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为270 nm.结果显示,荷叶碱盐在0.053～0.159 mg/mL(R2=0.999 2)范围内具有良好的线性关系,平均回收率为96.4%,RSD为0.05%.该方法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于荷叶碱盐成分的含量测定.     

湘莲莲房中主要生物碱成分提取方法优化与含量测定

目的以莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱为湘莲莲房质量评价指标,优化提取工艺参数,建立高效液相色谱法同时测定3种物质。方法用酸性80%乙醇作溶剂超声提取莲房生物碱类成分,碱化后分离定量。经Waters XSelect C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,以甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钠为流动相进行梯度洗脱。结果莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱分别在1.994~79.76μg/mL(r²=0.9993,n=6)、1.951~78.05μg/mL(r²=0.9996,n=6)、1.972~78.87μg/mL(r²=0.9998,n=6)范围内线性关系良好,回收率分别为99.5%、98.2%、98.7%(n=9)。结论该方法简便、回收率高,实验结果为莲房中生物碱定量分析和湘莲莲房质量评价提供参考。     

荷叶中生物碱的提取及组成成分的分析

实验是同步提取荷叶黄酮、生物碱、多糖工艺研究中提取生物碱的工艺部分,在提取荷叶黄酮后的荷叶残渣中提取总生物碱的条件是pH2.0,乙醇浓度为90%,液固比为25:1,提取时间为2h.提取温度为80℃,提取2次.回流除去乙醇后用0.25%盐酸复溶,在酸性条件下脱色后再将溶液调成碱性.经DIOI大孔树脂洗脱分离得到总生物碱.总生物碱的提取率为90.57%,纯度为82.8%,荷叶中主要的生物碱有5种,它们是番荔枝碱、原荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、荷叶碱和亚美罂粟碱.     

莲子心脂溶性生物碱的分离、鉴定

为进一步分离并鉴定保健食品莲子心中活性脂溶性生物碱,根据脂溶性成分和酚性生物碱的化学性质,先将莲子心脂溶性成分提取、分离酚性和非酚性二个部位;再运用多种柱色谱技术分别对这二个提取部位进行分离纯化,并对所得化合物的理化性质和光谱数据(UV,IR,MS,~1H NMR、~(13)C NMR及其2D-NMR)进行分析归纳,最终确定它们的化学结构。从莲子心脂溶性部位共获得12个单体化合物,经鉴定其中10个成分为生物碱。酚性部位有6个化合物,分别为:l-薄荷醇(l-menthol,1),甲基莲心碱(neferine,2),亚美罂粟碱(amepavine,3),4'-甲氧基-N-甲基衡州(4'-methoxy-N-methyl coclaurine,4),异莲心碱(isoliensinine,5),莲心碱(liensinine,6);非酚性部位有6个化合物,分别为:谷甾醇(sitosterol,7),荷叶碱(nuciferine,8),前荷叶碱(pronuciferine,9),莲明碱(lysicamine,10),N-甲氧基头花千金藤二酮B(N-methoxycepharadione B,11)和N-甲基紫堇定(N-methylcordaldine,12)。其中1、4、10、11和12则为该植物中首次发现的化合物。     

山楂荷叶复合固体饮料的制备工艺优化及功能性成分含量测定

目的:建立一种以山楂荷叶为主要原料的固体饮料的制备工艺,同时拟定总黄酮和荷叶碱为主要质量控制指标,建立其含量测定方法。方法:分别以总黄酮含量和水溶性生物碱的雷氏盐沉淀量及干膏得率为指标,通过正交试验确定荷叶和莱菔子有效成分的最佳提取工艺;分别采用紫光分光光度法和反相高效液相色谱法测定总黄酮及荷叶碱的含量。结果:荷叶的最佳提取工艺为60倍量80%乙醇于80 ℃回流提取2次,每次2.5 h;莱菔子的最佳提取工艺为10倍量水提取3次,每次1.5 h。含量测定的结果为:芦丁在0.0192~0.1152 mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9996),平均加样回收率为100.53%,RSD值为1.45%(n=6);荷叶碱在1.5~24.0 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为100.16%,RSD值为1.17%(n=6)。结论:设计的制备工艺合理、可行,含量测定方法简便、准确、重复性好,可为山楂荷叶复合固体饮料的生产和质量控制提供科学依据。     

Application of high-speed counter-current chromatography for the isolation of 5 alkaloids from lotus (Nelumbo nucifera Gaertn.) leaves

A high-speed counter-current chromatography (HSCCC) method was developed for isolation of 5 alkaloids from lotus (Nelumbo nucifera Gaertn.) leaves. The 2-phase solvent system of HSCCC composed of light petroleum-ethyl acetate-methanol-water was set up in 2- step separation process in the proportion of 3:5:3:5 for isolation of N-nornuciferine and armepavine, and in the proportion of 1:5:1:5 for that of anonaine, pronuciferine, and nuciferine. The purity of anonaine (14.6mg), pronuciferine (29.7 mg), N-nornuciferine (31.4 mg), nuciferine (22.1 mg), and armepavine (23.3 mg) isolated from 150 mg crude extract of lotus leaves were examined as 95.6, 88.2, 92.5, 94.3, and 92.1%, respectively.     

荷叶提取物的镇静催眠作用

目的：研究荷叶提取物（乙醇提取物、生物碱、总黄酮和小分子水溶物）对小鼠的镇静催眠作用,筛选其活性组分。方法：利用空场实验、戊巴比妥钠阈下催眠剂量实验和延长戊巴比妥钠睡眠时间实验,给予小鼠灌胃荷叶50%乙醇提取物（150、450 mg/kg）和不同分离组分（30、90 mg/kg）后,观察其对小鼠的镇静催眠作用。结果：高剂量荷叶乙醇提取物和低、高剂量荷叶生物碱均能显著抑制小鼠的自主活动,增加阈下剂量戊巴比妥钠引起的小鼠入睡率,缩短戊巴比妥钠阈上剂量的小鼠入睡潜伏期,延长睡眠时间。结论：荷叶乙醇提取物具有显著的镇静催眠作用,生物碱是其主要活性成分。     

Supercritical fluid extraction and identification of isoquinoline alkaloids from leaves of Nelumbo nucifera Gaertn

Isoquinoline alkaloids from leaves of Nelumbo nucifera (N. nucifera) were extracted using supercritical CO₂. The effects of the parameters such as the dynamic extraction time, temperature, pressure, various modifiers, and flow rate of the modifier on the yield of nuciferine and the ratio of total isoquinoline alkaloids to the total extract were investigated. Nuciferine content of the extract was determined by high-performance liquid chromatography (HPLC). The results indicated that the yield of nuciferine increased with increases in the dynamic extraction time, pressure, temperature, and flow rate of the modifier. The highest nuciferine yield of 325.54 μg/g was obtained when the extraction was carried out for 2 h at 70 °C under 30 MPa, with 10% (v/v) diethylamine and 1% (v/v) water in methanol as the modifier which kept a flow rate of 1.2 mL/min. The ratio of total isoquinoline alkaloids to the extract was 49.85% at the highest nuciferine yield. Five kinds of isoquinoline alkaloids extracted from N. nucifera leaves were identified by high-performance liquid chromatography combined with ion trap/time-of-flight mass spectrometry (LC/MS-ITTOF). They were Dehydronuciferine, N-nornuciferine, O-nornuciferine, Nuciferine, and Roemerine in the order of retention time.     

不同干燥方法对荷花花瓣抗氧化活性和化学成分的影响

研究不同干燥方法(阴干、晒干、鼓风干燥、微波干燥、冷冻干燥)对荷花花瓣抗氧化活性和总黄酮、总酚、花青素含量的影响。以抗坏血酸作为阳性对照,采用还原能力、DPPH自由基清除和羟基自由基清除3种体外抗氧化模型,评价了不同干燥方式处理的荷花花瓣的抗氧化能力,并对总黄酮、总酚和花青素的含量进行了测定。结果表明:荷花花瓣具有较强的还原能力、清除DPPH自由基和羟基自由基的能力;不同干燥方法对荷花花瓣的抗氧化活性和活性物质的含量均有较大的影响,其中冷冻干燥的荷花花瓣抗氧活性能力最强,且总黄酮、总酚和花青素的含量最高,分别为60.20、85.35 mg/g和150.3 ng/g;而晒干荷花花瓣的抗氧化能力最差,黄酮、总酚和花青素的含量最低,分别为0.39、19.08 mg/g和2.8 ng/g。     

莲藕采后生理及保鲜技术研究进展

指出莲藕在贮藏过程中发生褐变和衰老的主要原因是组织内部的多酚氧化酶催化氧化酚类物质产生黑色素。概述了近年来莲藕多酚氧化酶的催化反应动力学特性;pH值、温度、金属离子对莲藕多酚氧化酶活性的影响;莲藕采后多酚氧化酶活性与组织褐变、呼吸及衰老之间的关系;莲藕褐变和衰老的抑制及其保鲜技术等方面的研究进展。     

毛细管电泳-电化学发光法测定荷叶中荷叶碱与莲子心中莲心碱含量

建立毛细管电泳-电化学发光法同时测定荷叶中荷叶碱与莲子心中莲心碱含量的方法。对三联吡啶钉(Ru(bpy)_3~(2+))溶液浓度、检测电位、磷酸盐缓冲液浓度和pH值、进样时间和分离电压等实验条件进行考察和优化。结果表明,在检测电位为1.20 V,运行缓冲液为10 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 5.74),5 mmol/L Ru(bpy)_3~(2+)溶液,检测池内磷酸盐缓冲液浓度为60 mmol/L(pH 8.30),进样电压为8 kV,进样时间为10 s,分离电压为13 kV,荷叶碱检出限为7.7×10~(-7)mol/L(R_(SN)-3),莲心碱检出限为7.8×10~(-7)mol/L(R_(SN)-3)。对浓度为6.8×10~(-5)mol/L荷叶碱和3.1×10~(-5)mol/L莲心碱的标准品溶液进行5次平行测定表明:荷叶碱峰面积的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为3.76%,迁移时间RSD为0.83%;莲心碱峰面积RSD为4.28%,迁移时间RSD为1.37%。该方法可用于测定荷叶中的荷叶碱与莲子心中莲心碱含量。     

莲心生物碱保健功能研究进展

莲心生物碱具有降压、抗氧化、保护心肌等多种药用及保健功能。该文对莲心生物碱的化学成分、保健作用、药用机理及研究方法等方面研究进展进行概述,并对其应用前景进行展望。     

以药食两用中药为基质的灵芝发酵

本文研究了以药食两用中药为基质的灵芝发酵，并用响应面分析法对培养基进行了优化，结果表明：山药、芡实适合于作碳源，莲子、薏苡仁适合于作氮源；以山药、薏苡仁为基质的最佳发酵培养基为：葡萄糖2．1％，山药3％，薏苡仁1．96％，灵芝菌体生物量可达2．05g／100ml。