甘蔗制糖文摘(三)

纤维素酶活力测定方法评述刘洁等，工业微生物，1994（4），27～32天然纤维素是具三维结构的，物理、化学性质是非均匀分布的高聚物，它的完全降群至少需三类酶的协同作用。依经典的酶反应动力学方法对水溶性底物作用时拟合的方程不能确切反应纤维素酶的作用机制和活力。用水溶性或物理、化学性质改变的纤维性材料为底物只能反映某些纤维素酶组分的作用。现在通行的纤维素酶活力测定方法大都属经验性方法，各有一定的适用范围。应根据工作的目的选择或拟定纤维素酶活力测定方法。甘蔗施用酒精废液增产效果及施用技术冯奕玺，湛江科技，1992…     

纤维素酶活力测定方法

用DNS为显色剂，分别以滤纸和CMC为底物，以滤纸糖酶活性（FPA）和羧甲基纤维素酶活性（CMCase)表征纤维素酶活力，确定酶活测定用波长为530nm，参比溶液应为失活酶，底物和DNS等共热的反应物；比较了两种底物的酶活力测定方法，结果表明，CMCase比FPA高，说明酶对水溶性底物有较高的活力，也表现吸附对酶的活性部位与纤维素分子链段的结合及催化均有很大影响，对于不同牌号的纤维素酶，织物的酶减量率与CMC酶活力关系密切。     

化学助剂对纺织用纤维素酶活力的影响

选用C-1214、苯甲酸钠、山梨醇等化学助剂，分别加入纺织用纤维素酶处理液中，以CMC法测定各试剂不同加入量下的纤维素酶的酶活力，作出酶活力变化曲线，分析这些助剂对酶活力的影响，得出其最佳的工艺用量。     

酸性纤维素酶酶活力的测定

用DNS法测定酸性纤维素酶活力。分析了酶促反应时间、pH、酶液稀释度、温度对酶活力测定结果的影响。研究表明，该纤维素酶酶促反应的最适条件为：酶促反应时间为30min，最适、pH为5．0，酶液稀释至130倍，最适温度50℃。最适条件下的酶活力为1685IU／g。     

稀土离子对绿色木霉产纤维素酶的影响

研究了ErCl3和NdCl_3对绿色木霉产纤维素酶的影响。实验结果表明:在绿色木霉生长过程中加入ErCl_3和NdCl_3后,纤维素酶酶活力明显提高。当Er Cl3浓度为10-7 mol/L到10~(-1) mol/L时,羧甲基纤维素酶和滤纸酶活力均有提高,其中ErCl3浓度为10-2 mol/L时,羧甲基纤维素酶活提高率为673.9%,滤纸酶活提高率为651.3%,2种纤维素酶酶活力提高率均优于其他报道。当NdCl_3浓度为10-8 mol/L到10~(-1) mol/L时,羧甲基纤维素酶和滤纸酶活力都有提高。ErCl_3浓度为10-3 mol/L到10~(-1) mol/L时,对羧甲基纤维素酶和滤纸酶活力的作用较明显。当NdCl_3浓度为10~(-1) mol/L时羧甲基纤维素酶活力提高率为462.08%,滤纸酶活力提高率为453.36%。而NdCl_3、Er Cl3对发酵粗酶液纤维素酶活力也具有直接作用,作用与浓度有关,低浓度激活,高浓度抑制。其中NdCl_3对粗酶液中羧甲基纤维素酶活力提高率为55.88%,滤纸酶活力提高率为58.18%;ErCl_3对羧甲基纤维素酶活力提高率为62.79%,对滤纸酶活力提高率为60.58%。稀土离子对粗酶液中纤维素酶的激活作用较微弱,强度远不及对绿色木霉产纤维素酶过程的影响。因此,推测稀土NdCl_3和Er Cl3主要作用位点是绿色木霉合成纤维素酶的生物过程,而对纤维素酶酶蛋白本身的作用也有,但较弱。遗传稳定性研究表明,该菌株遗传性能稳定。     

纤维素酶的滤纸酶活和CMC酶活的测定

采用3，5-二硝基水杨酸（DNS）为显色剂、滤纸或CMC为底物，测定纤维素酶的滤纸酶活（FPA）和CMC酶活（CMCA）。分析确定了酶活测定用波长为530nm，参比溶液应为失活酶、底物和DNS等共热的反应物，比较了两种底物的酶活测定方法，结果表明：纤维素酶的CMC酶活比滤纸酶活高，酶对水溶性底物有较高的活力，吸附对酶的活性部位与纤维素分子链段的结合及催化均有很大影响。     

纤维素酶活力测定研究进展

纤维素酶是一种多酶复合体系,其作用的底物比较复杂,活力测定方法也存在差异.如何准确测定纤维素酶活力的大小,对于研究该酶的特性及应用具有重要的意义.本文对纤维素酶测定的常用方法进行了综述和评价.     

还原糖测定方法的规范

探讨了３,５－二硝基水扬酸（ＤＮＳ）添加量、显色时间、氧的溶解量、离子强度以及ＤＮＳ显色后存放时间对纤维素酶酶活力测定的影响．氧的溶解量对测定结果影响显著;测定波长的变化对检测样品光吸收值的灵敏度和线性范围影响很大,一般选定５４０ ｎｍ 为进行纤维素酶酶活力测定的波长．另外,当以葡萄糖为标准来测定还原糖时,不同的测定方法会使得纤维二糖的测定值不同．因此,在测定纤维素酶酶解产物时,用ＤＮＳ方法来测定还原糖,使测定结果更加准确．     

纤维素酶酶活力测定方法的校正

探讨了测定条件对纤维素酶酶活力测定的影响．研究表明,测定条件对测定结果影响较大,因此进行纤维素酶酶活力测定时,必须对测定条件作出规定．纤维素酶是一种复合酶,底物纤维素不溶于水,底物的不饱和程度对纤维素酶酶活力测定的影响较大．底物的不饱和程度越高,所测得酶活力就越低．利用酶液稀释率、蛋白质浓度和酶活力之间的关系建立一校正方程,得出一种纤维素酶酶活力测定的校正方法．     

海藻糖对纤维素酶的干燥保护作用

纤维素酶液中加入不同剂量的海藻糖作为干燥保护剂,喷雾干燥后纤维素酶活力的回收率由空白对照的63.7%提高到89.0%;硅藻土吸附酶液经50℃干燥后,空白对照的酶活力回收率为60.5%,海藻糖组的回收率为65.8%;90℃10min造粒后,纤维素酶活力的回收率由空白对照的62.4%提高到92.7%。造粒的纤维素酶置50℃保存240h后,空白对照的剩余酶活力为70.5%,而海藻糖组的酶活力仍保持在81.2%。结果表明,海藻糖在纤维素酶的干燥和保存过程中有较好的保护效果。     

白腐真菌粗酶液对里氏木霉发酵玉米秸秆的影响

研究比较了不同白腐真菌[变色栓菌(Trametes versicolor)、粗毛革孔菌(Coriolopsis gallica)、爪哇漏斗状侧耳(Pleurotus sajor-caju)]预处理玉米秸秆得到的粗酶液对里氏木霉(Trichoderma reesei)产纤维素酶和木聚糖酶及糖化产生的影响。结果表明,3种白腐真菌粗酶液对里氏木霉产酶影响均为降低纤维素酶的酶活力,提高木聚糖酶的酶活力,作用效果依次为变色栓菌爪哇漏斗状侧耳粗毛革孔菌。加入变色栓菌制备的酶液后,里氏木霉产纤维素酶酶活降低60.61%,木聚糖酶酶活增长60.94%;糖化产葡萄糖量降低了38.84%,产木糖量增长了395%。研究证实白腐真菌粗酶液对里氏木霉发酵产纤维素酶和纤维素酶的糖化有抑制作用,对产木聚糖酶和木聚糖酶水解糖化有协同作用。     

酸性酶对纤维素的水解性能

用酸性纤维素酶分别处理棉、粘胶和天丝织物,通过测定处理液中还原糖含量,研究了影响酶水解的各种因素.结果表明,酸性酶对粘胶的水解活力最高,纯棉次之,对天丝织物的活力最低;织物所受前处理条件、酸性酶浓度、机械搅拌条件和不同缓冲体系等对酸性纤维素酶水解性能也会产生影响.经退浆、煮练、漂白后的织物,酶水解能力较高;适当地增加机械搅动,采用HAc-NaAc缓冲体系,酶活力也较高.     

影响纤维素酶活力测定的几个因素

鉴于当前尚无纤维素酶的酶活力测定的标准方法 ,也没有用以评价纤维素酶活力的统一的测量单位 ,我们研究了各种因素 ,其中包括底物的特性和浓度、纤维素酶的浓度、反应时间和反应温度以及DNS的数量等等对测定纤维素酶酶活的影响。研究表明 ,改变这些因素 ,会得到不同的纤维素酶酶活的测值。因此 ,应根据纤维素酶的特性使上述因素成为最佳条件。这样 ,我们就可能建立起统一的测定纤维素酶活力的方法。     

浓香型大曲水解酶系及测定方法的研究

对浓香型大曲的分解酶体系中的液化型淀粉酶、糖化型淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶和木聚糖酶测定方法作了全面的研究。研究发现，（1）大曲不同部位的液化型淀粉酶、糖化型淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶含量不同，它们主要存在于曲外层。（2）pH值对大曲水解酶活力有影响。发现液化型淀粉酶、糖化型淀粉酶受pH影响较大，而对酸性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶活力影响较小。（3）测定了不同等级曲的水解酶活力。     

滤纸糖—DNS比色法测定纤维素酶活力

在大量实验的基础上，从酶处理过程的各种参数、活力测定用波长参比液等方面，探讨了用ＤＮＳ比色法测定纺织工业用纤维素酶活力的方法，并给出详细的测试过程及酶活力计算式，本测试方法在纺织工业应用中，对控制生产过程及产品质量具有一定的实际指导意义。     

酶洗加工中影响纤维素酶活力的因素分析

分析了酶洗工艺中影响纤维素酶活力的各种因素，以及提高纤维素酶活力的各种可行措施；通过试验，研制了能够提高纤维素酶活力、降低酶用量的洗涤添加剂。研究结果表明，纤维素酶TK的最佳温度为55～60℃，pH值为4.5～5.0，加入特定的盐可以提高酶的催化水解作用，而少量的非离子表面活性剂可提高酶洗效率。     

纤维素酶二、三级液体深层发酵条件的研究

选用青霉菌（Pemicillum sp)用于纤维素酶液体深层发酵条件和生产工艺的研究，研究了纤维素酶二级和三级液体培养的条件，确定了种子液和发酵液的配方、产酶活力FPA167u/mL,β-葡聚糖酶活力20万单位/mL，为纤维素酶三级液体深层发酵的工业生产提供了工艺路线和参数。     

纤维素酶的活性与织物减量率的关系探讨

1　前言　　近年来 ,酶特别是纤维素酶在纺织工业上的应用已受到纺织染整和生物工程界人士的高度关注。纤维素酶是个多组分的复合物 ,各个组分的底物专一性不同 ,使纤维素酶活的测定方法很多。我们选择滤纸、ＣＭＣ(羧甲基纤维素钠 )为底物 ,其原理均系利用纤维素酶催化水解纤维素 ,从而产生纤维多糖、二糖及葡萄糖等还原糖 ,与显色剂反应 ,求出还原糖的浓度 ,间接求出酶的活力。由不同底物测得的酶活分别称作ＦＰＡ(滤纸酶活 )和ＣＭＣＡ(ＣＭＣ酶活 )。本文比较两种底物的酶活测定方法的结果 ,研究纤维素酶的不同用量对织物的减量率的影响…     

黑曲霉菌种的筛选及培养条件的优化

本文培养黑曲霉,选取产酶活力最好的黑曲霉,通过对黑曲霉培养的主要条件,温度、p H、装液量、接种量、碳源以及氮源等条件的优化,提高黑曲霉产果胶酶活力。菌种M1、M2、M3产果胶酶、木聚糖酶和纤维素酶活力比KC1、KC2、KC3高。其中M1产果胶酶活力最高,产木聚糖活力较高。通过对M1产果胶酶、木聚糖酶、纤维素酶活力的比较,确定了最佳培养温度为30℃,pH4.0,接种量为5%,250mL锥形瓶装液量为50mL时,酶活力达到最大。通过对培养基碳源、氮源的优化,确定了最佳碳源为麸皮,最佳氮源为(NH_4)_2SO_4。     

粗壮脉纹孢菌所产纤维素酶的性质研究

本文对粗壮脉纹孢菌(Neurosporacrassa)所产纤维素酶的一般酶学性质进行研究,得出的结论如下:该酶的最适催化反应pH为4.8～5.3,最适催化反应温度为45～50℃,在50℃及pH为4.8时该酶稳定。CMC、C1和β-葡萄糖苷酶活力变化范围有一定差别。锰离子对该酶活力有一定的增强作用,而铜离子和铝离子对其活力有明显的抑制作用。在产酶培养基中加入洗衣粉可以促进产纤维素酶活力,而洗洁精则会抑制产酶活力。