Separation and quantification of component monosaccharides of the tea polysaccharides from Gynostemma pentaphyllum by HPLC with indirect UV detection

A reversed-phase high-performance liquid chromatographic (HPLC) method is described for the simultaneous determination of aldoses and uronic acids. The separation was carried out on a RP-C₁₈ column (4.6 mm i.d. × 250 mm, 5 μm, Venusil, USA) using precolumn derivatization with 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP) and UV detection at 250 nm, and the 10 PMP derivatives of mannose, ribose, rhamnose, glucuronic acid, galacturonic acid, glucose, xylose, galactose, arabinose and fucose were baseline separated within 40 min. Furthermore, the described method was applied to the quantitative analysis of component monosaccharides in the water-soluble polysaccharides extracted from Gynostemma pentaphyllum Makino tea and the result showed that the tea polysaccharide was a typical heteropolysaccharide and consisted of mannose, ribose, rhamnose, glucuronic acid, galacturonic acid, glucose, xylose, galactose and arabinose in the molar contents of 16.3, 10.3, 47.1, 5.6, 24.0, 128.4, 25.0, 101.4 and 71.1 μM, respectively. Quantitative recoveries of the component monosaccharides in the tea polysaccharide were in the range of 94.6–108.0% and the RSD values were lower than 4.9%. The results demonstrated that the proposed HPLC method was precise and practical for the analysis of the G. pentaphyllum tea polysaccharide.     

PMP柱前衍生化HPLC法测定黄秋葵多糖的单糖组成

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱法,建立同时测定黄秋葵多糖中8?种单糖组分的方法。采用InfinityLab Poroahell C18色谱柱为固定相,流动相为磷酸盐缓冲液（0.1?mol/L,pH?6.85）-乙腈（82∶18,V/V）,流速为1.0?mL/min,柱温25?℃,紫外检测器,波长250?nm。各单糖组分的线性范围较宽,相关系数均大于0.999,检出限为0.13～0.45?mg/kg,定量限为0.43～1.49?mg/kg,相对标准偏差小于5%,加标回收率为94.51%～106.44%。方法灵敏度高、准确性好、实用可靠,适用于黄秋葵多糖的单糖组分分析。同时测定从黄秋葵中顺序提取的热水浸提物（hot buffer soluble solution,HBSS）、螯合剂浸提物（chelating agent soluble solution,CHSS）和碱提物（dilute alkaline soluble solution,DASS）的单糖组成,确定其单糖组分的物质的量比。HBSS中,甘露糖∶鼠李糖∶葡萄糖醛酸∶半乳糖醛酸∶葡萄糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=0.1∶7.0∶0.4∶5.8∶0.9∶14.6∶1.5;CHSS中,鼠李糖∶半乳糖醛酸∶半乳糖∶阿拉伯糖=4.7∶61.8∶9.6∶5.3;DASS中,甘露糖∶鼠李糖∶半乳糖醛酸∶葡萄糖∶半乳糖∶阿拉伯糖=9.5∶5.4∶1.3∶10.8∶2.4∶7.6。     

Structural characterisation of a water-soluble polysaccharide with high branches from the leaves of Taxus chinensis var. mairei

A large number of polysaccharides present in the leaves of Taxus chinensis var. mairei were successively extracted with hot water after preliminary treatments. The ion-exchange and gel-permeation chromatography was used to isolate and purify the major polysaccharides to afford a complex water-soluble polysaccharide, named T1 with a molecular mass of 3.44 × 10⁶ Da determined by HPGPC. T1 consisted of 2,4-di-O-methyl-mannose, rhamnose, arabinose, xylose, galactose, mannose, galacturonic acid and glucuronic acid in a molar ratio of 2:5:24:9:3:46:1:10, and the acetyl content was estimated to be 2.1%. On the basis of methylation analysis, periodate and chromium trioxide oxidations, Smith degradation, graded acid hydrolysis, and NMR and IR spectroscopy, T1 possessed a 1,3,6-linked β-d-Manp main chain, substituted by mannose, arabinose, galactose, xylose, rhamnose, 2,4-di-O-methyl-mannose, galacturonic acid, and glucuronic acid residues. These contained non-reducing end-units of mannose, arabinose, xylose, 2,4-di-O-methyl-mannose, and glucuronic acid. This is the first report on isolation of an acid heteropolysaccharide from Taxus species.     

鲍鱼内脏多糖的双水相盐析萃取-酶解法提取工艺研究及组成分析

目的建立一种鲍鱼内脏多糖的双水相盐析萃取—酶解法的提取工艺,并对多糖组成进行分析。方法样品经双水相盐析萃取,木瓜蛋白酶酶解醇沉后获得粗多糖。考察鲍鱼内脏干粉的加入量和酶对多糖得率的影响。结果鲍鱼内脏多糖双水相盐析萃取的最适条件为:乙醇30%(V:V)、碳酸钠12%(m:V)和鲍鱼内脏冻干粉加入量7 g/100 mL,酶解最适用酶为木瓜蛋白酶。在此条件下,鲍鱼内脏多糖得率为3.76%。结论经液相色谱分析,该多糖由甘露糖、氨基葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和岩藻糖组成,其质量比为3.54:2.41:14.75:1.00:1.25:6.79:84.04:7.79:3.38:10.83。     

微波消解-离子色谱法测定枸杞多糖的含量及组成

目的 建立微波消解-离子色谱法测定枸杞多糖含量及组成的方法.方法 分别考察了三氟乙酸浓度、微波消解温度及微波消解时间对枸杞多糖消解效率的影响,优化了离子色谱法检测枸杞多糖的色谱条件,并对所建立的方法进行方法学评价.结果 枸杞多糖最佳消解条件为温度120℃、时间20 min、三氟乙酸浓度3 mol/L;经方法学评价,9种...     

高效液相色谱法分析地瓜儿多糖的单糖组成

研究分析地瓜儿多糖的单糖组成。采用水提醇沉法提取地瓜儿多糖,用三氟乙酸水解多糖成单糖,单糖产物经衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化后,利用高效液相色谱法分析单糖的PMP衍生物。结果表明,地瓜儿多糖由甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(GlcUA)、半乳糖醛酸(GalUA)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)和阿拉伯糖(Ara)8种单糖组成,是一种酸性杂多糖,其中以半乳糖、葡萄糖和半乳糖醛酸为主,为进一步开发利用地瓜儿这一新的野菜资源提供了科学依据。     

黑老虎种子的营养成分分析及评价

为合理开发利用黑老虎种子,对其营养成分进行测定。结果表明：黑老虎种子营养成分丰富,以粗脂肪为主,粗蛋白质和糖类次之;黑老虎种子中多糖是由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖及岩藻糖9种单糖组成,以半乳糖和阿拉伯糖为主;黑老虎种子富含不饱和脂肪酸,其占总脂肪酸含量的81.89%,其中亚油酸占不饱和脂肪酸含量的88.89%;黑老虎种子中氨基酸种类较为齐全,游离氨基酸和水解氨基酸均包含7种人体必需氨基酸;黑老虎种子中鉴定出25种挥发性成分,以萜烯类化合物为主;此外,黑老虎种子还富含钾、镁、磷、锰、铁、锌等矿质元素。黑老虎种子具有营养和药用价值,极具开发价值。     

桑叶多糖的化学组成及其对胰脂肪酶的抑制作用研究

将复合酶辅助热水提取所得的桑叶粗多糖依次进行脱蛋白和脱色处理后得到桑叶多糖,研究其化学组成和对胰脂肪酶的抑制作用及作用类型.结果 表明,桑叶多糖的总糖含量为58.28％,其单糖组成及摩尔比为甘露糖∶鼠李糖∶葡萄糖∶半乳糖∶木糖∶阿拉伯糖∶葡萄糖醛酸∶半乳糖醛酸=8.61∶23.42∶4.23∶12.73∶1.31∶3....     

柱前衍生化高效液相色谱法分析发菜胞外多糖的单糖组成

采用水溶醇沉法提取发菜多糖,通过三氟乙酸（TFA）将其水解成单糖,经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生化后,利用RP-HPLC分析其单糖组成。结果表明,发菜胞外多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖组成,其摩尔比为0.71∶0.37∶0.44∶1.53∶1.03∶0.40。该方法具有操作简便、快捷,重现性良好等特点,可用于发菜胞外多糖中单糖组成的定性和定量分析。      

衍生化气相色谱法测定亚麻胶的单糖组成

目的采用衍生化气相色谱法(GC)测定亚麻胶的单糖组成。方法从亚麻粕中提取纯化得亚麻胶,经酸水解、衍生化后,用气相色谱分析。结果亚麻胶样品中鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖的质量分数分别为12.13%,6.83%,4.30%,12.70%,3.75%,10.15%,15.30%。结论亚麻胶主要由鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖7种单糖组成,以半乳糖含量最高。     

梭柄松孢菇子实体中多糖组分及体外抗氧化活性分析

采用热水浸提、85%、95%乙醇分级醇沉制备了两种梭柄松孢菇子实体多糖成分:CVP-85和CVP-95,分析了单糖组成,并测定多糖的体外抗氧化能力。结果表明:CVP-85和CVP-95的得率分别为9.57%±0.23%和5.02%±0.12%;CVP-85中的主要单糖物质为甘露糖、葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸;CVP-95中的单糖物质有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖醛酸。多糖提取物表现出显著的还原能力、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、ABTS·清除能力,且在一定浓度范围内,随浓度的增加而显著增强。      

鹰嘴豆非淀粉多糖的分离纯化及结构表征

提取鹰嘴豆中的粗多糖,通过酶处理和Sevag法除去多糖中的淀粉和蛋白质,经DEAE-52纤维素柱和Sephadex G-75凝胶柱分离纯化分别得到鹰嘴豆非淀粉中性多糖和酸性多糖,并通过紫外光谱、气相色谱、红外光谱、扫描电镜测定其性质和单糖组成。结果表明：鹰嘴豆非淀粉多糖在260 nm和280 nm波长处均无吸收峰,表明两种多糖均不含核酸、蛋白质以及肽类等;气相色谱测定表明鹰嘴豆非淀粉中性多糖单糖组成的物质的量比为鼠李糖∶岩藻糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=2.48∶1∶3.92∶0.87∶32.82∶18.79∶28.06,鹰嘴豆非淀粉酸性多糖单糖组成物质的量比为鼠李糖∶岩藻糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶半乳糖∶葡萄糖=2.22∶1∶3.92∶2.10∶5.92∶15.99∶8.57（均以岩藻糖为标准）;红外光谱测定表明二者均有多糖的特征吸收峰;扫描电镜显示鹰嘴豆非淀粉中性多糖呈线形结构而鹰嘴豆非淀粉酸性多糖呈卷曲的片状结构。     

Structural analysis of a polysaccharide from <Emphasis Type="Italic">Patinopecten yessoensis</Emphasis> viscera

A water-soluble polysaccharide, SVP-2, was obtained from Patinopecten yessoensis viscera. Its major structural features were elucidated using composition analysis, methylation analysis, periodate oxidation and Smith degradation, partial acid hydrolysis, and NMR spectroscopy. The results indicated that SVP-2, with an average molecular weight of 170 kDa, was composed of rhamnose, fucose, arabian, xylose, mannose, galactose, and glucose in molar ratios of 1.65:2.54:4.05:5.60:1.48:4.90:1.00. Furthermore, it could deduce that the backbone of SVP-2 consisted of 1,3,4-linked pyran fucose, 1,3,4-linked pyran galactose, and 1,3-linked pyran arabian residues.     

紫苏籽多糖分离纯化及抗肿瘤活性

为了探究紫苏籽多糖（Perilla frutescens seed polysaccharide,PFSP）的抗肿瘤活性,利用传统方法从紫苏籽中提取粗多糖,利用DEAE-52纤维素和葡聚糖G-100柱层析分离纯化获得紫苏籽多糖,并测定该多糖对H22荷瘤小鼠免疫系统的影响。结果表明,紫苏籽粗多糖得率为8.38%,分离纯化后得到3个组分,分别命名为PFSP-1、PFSP-2和PFSP-3。PFSP-1由甘露糖、半乳糖、木糖及阿拉伯糖（物质的量之比为0.01∶0.06∶0.11∶0.81）组成,PFSP-2由甘露糖、木糖及阿拉伯糖（物质的量之比为0.28∶0.28∶0.41）组成,PFSP-3由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖及阿拉伯糖（物质的量之比为0.013∶0.024∶0.040∶0.080∶0.120∶0.700）组成;3个组分均具有多糖特征吸收峰,为吡喃环型多聚糖。抗肿瘤实验表明,PFSP-2抑瘤率显著高于PFSP-1和PFSP-3(P<0.05);对PFSP-2进一步研究发现,与模型组相比,PFSP-2可显著降低乳酸脱氢酶、醛缩酶和白细胞介素（interleukin...     

响应面法优化白首乌多糖超声辅助提取工艺及其结构表征

为了提高白首乌多糖的得率,本文采用超声波辅助法提取白首乌中非淀粉多糖。在单因素实验基础上结合响应面法对超声波辅助法提取白首乌多糖工艺进行优化。结果表明,最优提取工艺参数为:液料比为22:1 mL/g、超声时间为44 min、超声功率为350 W及超声温度为52 ℃,在此条件下的多糖得率为1.35%±0.02%。该条件下提取的多糖的重均分子量集中在1.71×107 、1.15×106、5.93×104 Da ,由岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、核糖、半乳糖醛酸以及葡萄糖醛酸组成,含量分别为0.17%、1.66%、7.40%、10.51%、74.41%、0.79%、0.85%、0.36%、3.28%、0.57%,具有一般多糖的红外光谱吸收峰以及良好的溶解性, 为日后白首乌多糖的结构解析以及工业应用提供一定的参考。     

海带中褐藻糖胶的组成分析

对海带中褐藻糖胶进行了紫外薄层色谱、气相色谱、氨基酸分析等方面的研究.结果表明褐藻糖胶是由鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、硫酸根及蛋白质构成的复合物.其中单糖的摩尔比为RhaFUcXylManGalGlU=0.411.723.750.9612.17.褐藻糖胶的葡萄糖醛酸、硫酸根及蛋白质的含量分别为6.2%、8.7%和4.1%.     

香薷多糖的乙醇分级纯化及其性质

采用热水浸提法从香薷中得到多糖提取物,然后采用乙醇分级沉淀法纯化香薷多糖,收集得到乙醇体积分数为20%、30%、40%、50%、60%、70% 条件下析出的多糖沉淀物。之后经Sevag 法脱除多糖中的游离蛋白,得到纯化后的6 个香薷多糖组分HMP-1、HMP-2、HMP-3、HMP-4、HMP-5 和HMP-6。应用紫外和红外光谱检测HMP-1、HMP-2、HMP-3、HMP-4、HMP-5 和HMP-6 的光谱性质,测定糖含量、可溶性蛋白质含量和糖醛酸含量,并用气相色谱法测定单糖组成。结果表明：HMP-1、HMP-2、HMP-3、HMP-4、HMP-5和HMP-6 均为酸性多糖,蛋白含量较高。HMP-1 和HMP-2 主要含有阿拉伯糖和葡萄糖,HMP-3 主要含有阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖和核糖,HMP-4 主要含有阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖,HMP-5 和HMP-6 主要含有阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖和甘露糖。此外,6 个多糖组分均含有少量的鼠李糖、木糖,但单糖间物质的量比相差较大。     

蒲公英多糖酶解辅助提取工艺优化及其单糖组成分析

本试验以蒲公英多糖含量为指标,利用单因素结合Box-Behnken响应面法对酶解工艺进行研究,并测定了未酶解和酶解蒲公英粗多糖的单糖组成及扫描电镜。结果表明:蒲公英原料中添加10%麸皮,在温度57.6 ℃、酶添加量1532 U/g、含水量55%的条件下酶解12.3 h后,蒲公英多糖含量可达到218.21 mg/g,较酶解前（122.53 mg/g）提高了78.09%。酶解后蒲公英多糖主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖组成,其摩尔比为2.99:10.65:18:14.82:8.61:9.20:0.83;与酶解前相比,甘露糖、鼠李糖、半乳糖、木糖含量分别增加了0.74%、490.54%、1.56%、87.79%,同时产生了岩藻糖,但葡萄糖、阿拉伯糖下降了11.05%、8.66%。酶解后蒲公英多糖变得表面粗糙,孔洞增多,结构疏松,但其原因还有待进一步探讨。本试验研究结果将为深度开发利用蒲公英资源提供一定的理论依据。     

响应面试验优化木瓜蛋白酶法脱马齿苋多糖蛋白工艺

为确定木瓜蛋白酶法脱马齿苋多糖蛋白的最佳工艺,以酶液-样液体积比、酶解时间、酶解温度及pH值为影响因素,以马齿苋多糖损失率与蛋白去除率为指标,通过响应面试验优化木瓜蛋白酶法脱马齿苋多糖蛋白的工艺条件。结果表明,木瓜蛋白酶法脱马齿苋多糖蛋白的最佳工艺为酶液-样液体积比0.2∶1、酶解温度60?℃、酶解时间3?h、pH?6,在此条件下蛋白去除率为78.22%,多糖损失率为10.39%。马齿苋粗多糖溶液经分离纯化、高效液相色谱分析,结果表明马齿苋多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖单糖组成,其组成比例为5.3∶5.9∶1.3∶27.6∶1∶18.8∶14.6。     

黄秋葵发酵酒渣中果胶多糖的提取及理化性质分析

为了探讨黄秋葵发酵酒渣综合利用技术,减少资源浪费,本文采用酶法提取黄秋葵发酵酒渣中的果胶多糖,通过单因素实验和响应面优化提取工艺;采用PMP柱前衍生HPLC法测定黄秋葵酒渣果胶多糖的单糖组分。结果表明,果胶多糖提取得到的最佳工艺条件为:使用1%的纤维素酶,提取温度45℃、溶液pH5.5、液料比1:36、时间10 h、提取次数2次,此条件下的果胶多糖得率为6.85%;黄秋葵酒渣果胶多糖的理化性质:酯化度为74.45%、半乳糖醛酸含量20.07%、灰分含量8.52%、蛋白质含量2.24%、干燥失重率为18.06%、pH为6.47;从黄秋葵酒渣中提取的果胶多糖属于酸性杂多糖,其单糖摩尔比例为甘露糖:鼠李糖:葡萄糖醛酸:半乳糖醛酸:葡萄糖:半乳糖:阿拉伯糖为5.2:8.8:0.8:25.6:30.6:20.4:8.7。