HPLC法测定红参中人参皂苷Rg1的含量

建立红参药材中人参皂苷Rg1的含量测定方法。利用高效液相色谱(HPLC)法测定红参中人参皂苷Rg1的含量,采用Ulitimate XB-C18(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相∶乙腈-水(23∶77);柱温:室温;流速:0.7 m L·min-1;检测波长:203 nm;进样量为10μL。人参皂苷Rg1的线性回归方程为A=438355.8C-1328.9(r=0.9999)。人参皂苷Rg1在0.1~5μg范围内呈良好的线性关系。人参皂苷Rg1的平均回收率为103.6%,RSD为1.581%。采用此法测定红参中人参皂苷Rg1的含量,准确可靠,可用于该药材的质量控制。     

口腔护理凝胶中人参皂苷Rg1含量的检测方法研究

建立用高效液相色谱法测定口腔护理凝胶中人参皂苷Rg1含量的方法。采用HPLC法,配置DAD检测器,PG-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,以乙腈和水为流动相,经梯度洗脱分离,流速为1.0 mL/min,检测波长203nm,进样量10μL。将口腔凝胶样品用无水乙醇涡旋萃取,再用超声提取30 min,将滤液倒入蒸发皿中,用无水乙醇重复提取一次,合并滤液于蒸发皿中,水浴挥干溶剂后用甲醇定容,注入色谱仪,采用外标一点法定量。平均加样回收率为96.23%(RSD=1.83%)。本方法简便可行,准确可靠,灵敏度高,重现性好,可用于口腔护理凝胶的质量控制。     

人参皂苷Rg1对辐射致造血干/祖细胞衰老的影响及其机制

目的探讨人参皂苷Rg1对辐射致造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,HSC/HPC)衰老的影响及其机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为假照射组、照射组和照射+Rg1组,照射组与照射+Rg1组利用6.5 Gy的X射线全身一次性辐射小鼠。照射+Rg1组于照射前第7天起连续经腹腔注射人参皂苷Rg1 20 mg/(kg·d),照射后继续注射同剂量人参皂苷Rg1直至处死;照射组同时注射等剂量的生理盐水;假照射组小鼠处理同照射组,但不照射。辐射后不同时间点处死各组动物,改良免疫磁性吸附细胞分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法分离、纯化骨髓Sca-1+HSC/HPC并计数;SA-β-gal染色检测衰老细胞百分率;流式细胞术分析细胞周期;造血祖细胞混合集落(colony forming unit-mixture,CFU-Mix)体外培养评价人参皂苷Rg1对辐射小鼠HSC/HPC衰老的影响;彗星试验测定细胞DNA损伤;并检测细胞内SOD活性和MDA含量。结果经MACS分离纯化后,Sca-1+HSC/HPC的纯度可达93.66%,活性可达99.4%。照射组Sca-1+HSC/HPC数量显著降低,且恢复缓慢,照射+Rg1组Sca-1+HSC/HPC数量下降在照射后第3天和第7天得到阻止,与照射组比较,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.001);照射组SA-β-gal阳性细胞率明显高于假照射组和照射+Rg1组(P<0.001);照射组Sca-1+HSC/HPC与假照射组相比出现G1期阻滞,照射+Rg1组第3和第7天G1期细胞比例较照射组降低(P<0.05或P<0.01);照射组Sca-1+HSC/HPC形成CFU-Mix的数量明显低于假照射组(P<0.001),照射+Rg1组形成CFU-Mix的数量较照射组明显增加(P<0.001);照射组DNA彗星尾长和Olive尾矩均明显大于假照射组和照射+Rg1组(P<0.001);与假照射组相比,照射组Sca-1+HSC/HPC的SOD活性明显降低(P<0.001),MDA含量明显升高(P<0.001),与照射组相比,照射+Rg1组Sca-1+HSC/HPC SOD活性明显升高(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.001)。结论辐射损伤可导致HSC/HPC衰老;人参皂苷Rg1具有抗辐射致HSC/HPC衰老的作用,其机制可能与抑制辐射致HSC/HPC氧化应激反应,减少氧化应激介导的DNA损伤密切相关。本实验为人参皂苷抗辐射损伤致细胞衰老提供了实验依据。     

人参皂苷Rg1对白消胺诱导细胞衰老的延缓作用

目的探讨人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1,Rg1)对白消胺(Busulfan,BU)诱导的人胚肺成纤维细胞衰老的延缓作用。方法将人胚肺成纤维细胞(<24代)随机分为空白对照组(常规培养)、BU组(以120μmol/L BU处理复制细胞衰老模型)、BU+Rg1组(120μmol/L BU+10μmol/L Rg1)、Rg1预+BU组(10μmol/L Rg1预处理后加入120μmol/L BU)和Rg1预+BU+Rg1组(10μmol/L Rg1预处理后加入120μmol/L BU,再加入10μmol/L Rg1),通过倒置显微镜观察细胞形态的变化,细胞增殖试验检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期的分布;半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法观察细胞衰老情况。结果 BU组细胞胞体扁平、宽大、不规则,出现空泡,而Rg1处理各组细胞的衰老表型出现一定程度的改善,以Rg1预+BU+Rg1组效果最佳,但未完全恢复;BU组细胞增殖能力较空白对照组明显降低,Rg1处理组细胞增殖能力有所恢复,且随着时间的延长效果越明显,其中以Rg1预+BU+Rg1组最佳;Rg1预+BU组和Rg1预+BU+Rg1组G2/M期比例较BU组显著降低(P<0.05),其中以Rg1预+BU+Rg1组降低最明显;Rg1预+BU组和Rg1预+BU+Rg1组衰老细胞数较BU组显著降低(P<0.05)。结论 Rg1能有效对抗BU诱导的细胞早衰,其具体作用机制有待进一步深入研究。     

迎头色谱法测定人参皂苷Rg1和Re的吸附量

制备色谱分离条件优化的基础是吸附等温线的测定及保留时间的预测。本文以人参皂甙Rg₁、Re为研究对象，用色谱单柱制备了人参粗粉中的人参皂甙Rg₁、Re,以迎头法测定了人参皂甙Rg₁、Re在C₁₈球形固定相中的吸附等温线，在竞争Langmuir模型基础上确定了吸附参数G和b，并应用非线性色谱理论的结果预测了人参皂甙Re的保留时间，上述结果与实验值进行了比较，平均相对误差为3.68%。在实验中发现了运用竞争Langmuir模型进行拟合的一些问题并进行了讨论。     

HPLC法同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1的含量

目的:采用HPLC法同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1含量。方法:采用SGE protecol C18(5μm,4.6×250mm)色谱柱,流动相为乙腈—水梯度洗脱(0~12min,19∶81;12~60min,19~36∶81~64),检测波长为203nm,流速1.0mL/min,进样量20μL。结果:人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1分别在25.625~430mg/L、26.875~410mg/L、10.625~170mg/L范围呈线性,相关系数r分别为0.9999、0.9998、0.9996;该方法重复性及回收率均符合要求。结论:本法用于同步测定三七粉中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1的含量,具有简便、准确、高效等特点。     

人参皂苷Rg3体外经皮渗透特性研究

研究人参皂苷Rg3体外经皮渗透特性以及不同促渗剂的影响。测定人参皂苷Rg3与经皮渗透相关的物理参数。通过扩散池试验,采用HPLC法测定人参皂苷Rg3的累积透过量(Q),拟合Q-t曲线,考察体外经皮渗透性能;测定β-环糊精、吐温-80、油酸、氮酮、薄荷油的增渗倍数(ER),考察不同促渗剂对人参皂苷Rg3经皮渗透性质的影响。人参皂苷Rg3的表观溶解度为66.70μg/mL,油水分配系数(logP)为2.63,熔点为312.2℃。人参皂苷Rg3经皮渗透为恒速过程;不同促渗剂对人参皂苷Rg3的促渗作用存在差异,薄荷油增渗倍数为2.38。人参皂苷Rg3体外释放符合零级过程,薄荷油对其促渗作用效果显著,可作为一种具有发展潜力的新型外用镇痛化合物。     

人参皂苷Rb1对肾脏疾病影响研究进展

人参皂苷Rb1是人参的主要活性成分之一,对免疫系统、心血管系统、中枢神经等系统疾病有明显的调节作用。因其有较好的药理活性,对部分肾脏疾病有一定的治疗作用。体内外结果显示,人参皂苷Rb1主要通过抗氧化损伤、抗炎、抗凋亡、调节水电解质平衡等作用来减弱疾病的侵害进而保护肾脏。本文主要针对人参皂苷Rb1在各种肾脏疾病中对肾功能保护作用及机制研究的报道进行综述。     

模拟移动床分离人参皂苷Rg1和Re的稳态、暂态过程

利用三带无回流模拟移动床(Moving-bed Simulation,简称MBS)系统分离了人参皂苷Rg1、Re,对其分离的稳态和暂态过程进行了考察。首先,用三角形法确定了MBS的可分离区间,从而确定MBS操作参数选择范围。对稳态过程,分析了三角形区间内不同参数对MBS产品质量分数的影响。对暂态过程,讨论了三角形中不同参数对暂态过程经历时间的影响。还讨论了采用预注入(Pre-loading)和预洗脱(Pre-elution)对暂态过程经历时间的影响。结果表明:在暂态过程中,增大进样流量(QF)或降低切换时间(tS),可以缩短两个出口的暂态过程经历的时间。用Pre-loading和Pre-elution可以显著地缩短暂态过程经历时间。     

双波长薄层扫描法测定乳癖消片中人参皂苷Rg1含量

应用双波长薄层扫描法测定乳癖消片中人参皂苷Rg1含量 ,平均回收率 97.0 % ,RSD为1 .98%。结果 :方法重现性良好 ,结果准确可靠     

高效液相色谱法测定紫丹活血胶囊中人参皂苷Rg1的含量

建立高效液相色谱法测定紫丹活血胶囊中人参皂苷Rg1的含量。色谱条件:色谱柱为Shim-pack VP-ODS(150×4.6 mm,5μm);流动相︰乙腈-水(19︰81);流速:1.0 m L/min;检测波长:203 nm;柱温:30℃;进样量:10μL。线性范围为0.17875~0.89375 mg/m L(r=0.9999),加标平均回收率为99.03%,RSD为0.61%。本方法准确度高、精密度高、重复性好、简捷易操作,可以作为紫丹活血胶囊中人参皂苷Rg1含量的测定方法。     

RP-HPLC-UV法测定清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg1、Rb1的含量

目的采用RP-HPLC-UV色谱法同时测定清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的含量影响。方法采用色谱柱:依利特C_(18)柱(Sinochrom ODS-BP,4.6mm×200mm,5μm),流动相采用A为乙腈,B为水,梯度洗脱,流速为1.0mL·min~(-1),进样量为10μL,检测波长为203nm,柱温25℃,理论塔板数大于6000。结果在100min内,人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1分离度良好,进样的含量与色谱峰面积具有良好的线性关系,人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的线性方程分别为:y=0.5752x-0.0961 (r=0.9994)、y=1.3157x-0.2006(r=0.9998)、y=0.6637x+0.2091(r=0.9997),人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的平均加样回收率分别是:101.08%(RSD=1.77%)、99.40%(RSD=2.55%)、100.11%(RSD=2.83%)。结论本文建立的含量测定方法快捷稳定可靠,加样回收率高,适用于清心莲子饮中人参皂苷Re、Rg_1、Rb_1的含量测定,为清心莲子饮的质量评价提供了理论支持和实验依据。     

高浓度人参皂苷Rg3的制备及其在化妆品中的应用

通过筛选合适的酸催化剂以及酸含量、水解温度和水解时间,制备了一种富含高浓度人参皂苷Rg3的人参提取物。采用细胞功效模型探究富含高浓度人参皂苷Rg3的人参提取物体外功效作用的同时,结合人体功效评价试验来进一步验证其化妆品领域应用的功效表现。结果表明：优选DL-酒石酸作为酸催化剂,当酸含量为5%,水解温度为80℃,水解时间为2 h时,人参皂苷Rg3的转化效率最高,达到64.91 mg/g。高浓度人参皂苷Rg3的人参提取物的细胞模型评价试验显示出其具有修护H₂O₂氧化应激损伤和抑制TNF-α分泌的作用。同时,结合人体功效评价试验结果来看,高浓度人参皂苷Rg3的人参提取物具有较好的修护皮肤屏障、改善皮肤泛红的功效。     

以PCL-PEG为载体的人参皂苷Rg3纳米粒的制备及表征

以PCL-PEG为载体,采用乳化溶剂蒸发法制备人参皂苷Rg3纳米粒,以包封率和载药量为指标,通过正交实验优化制备条件。结果表明,最优制备条件为:人参皂苷Rg3浓度为3 mg/mL,PCL-PEG浓度为5 mg/mL,胆酸钠的体积为5 mL,胆酸钠浓度为0.5%。得到的纳米粒为球形,表面圆整光滑,粒径为129.1 nm,电位为-38.7 mV,包封率为90.03%,载药量为34.18%,稳定性良好,具有明显的缓释性能。     

附子人参配伍对CYP1A2和CYP3A4酶活性的影响

目的:通过建立Cocktail探针药物法及体外肝微粒体孵育体系,测定大鼠肝微粒体中CYP1A2和CYP3A4酶的活性,探索附子配伍人参对附子主要成分乌头类生物碱的代谢酶CYP1A2和CYP3A4酶活性的影响。方法:采用Cocktail探针药物法,利用CYP1A2和CYP3A4酶的特异性探针底物咖啡因和咪达唑仑,建立同时测定两种探针底物的体外肝微粒体孵育体系;采用RP-HPLC法测定两种探针底物在大鼠肝微粒体孵育体系中的浓度,计算CYP1A2和CYP3A4酶活性的变化。结果:与空白组比较,附子组、人参组、附子人参组对CYP1A2酶活性没有影响,附子组、附子人参组对CYP3A4酶活性没有影响,人参组对CYP3A4酶活性有抑制作用,进而减慢附子主要药效成分乌头类生物碱的代谢,因此,从代谢酶角度可以阐释,附子人参配伍能够增强附子的药效。     

生化黄腐酸对3种肿瘤细胞体外增殖影响的初步研究

本试验采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,研究了生化黄腐酸对3种肿瘤细胞(人胃癌细胞株SGC、人肝癌细胞株SPCA和人肺癌细胞株BEL)在体外增殖的影响。在3种不同肿瘤细胞培养液内分别加入6种不同浓度的生化黄腐酸,用酶标仪测定3种不同培养肿瘤细胞的吸光值(OD值),计算生化黄腐酸对3种不同肿瘤细胞的抑制率。试验结果表明:在各个浓度下,生化黄腐酸对3种不同肿瘤细胞的抑制率均低于50%,属于非敏感型药物。生化黄腐酸对肿瘤细胞的体外增殖没有明显的直接抑制作用,且在某种浓度下,生化黄腐酸可能对肿瘤细胞有促进生长的作用。     

黄腐酸对苜蓿固氮效率及产量的影响研究

通过对苜蓿进行喷施黄腐酸或接种根瘤菌(Sinorhizobium meliloti CCBAU01290)处理,比较不同处理对苜蓿固氮效率及其生长的影响。结果发现,喷施黄腐酸或接种根瘤菌显著增加了苜蓿的根瘤数、根瘤鲜重及固氮酶活性;喷施黄腐酸使两年年产量分别增加了29.57%和20.35%,接种根瘤菌则分别增加了10.27%和29.34%。     

黄腐酸及黄腐酸钠对糖尿病小鼠的降糖作用研究

研究黄腐酸及黄腐酸钠的降血糖作用,并对其降糖机制进行初步探讨.采用腹腔注射四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠造模,考察黄腐酸及黄腐酸钠对正常小鼠血糖,对糖尿病小鼠血糖、总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)以及口服糖耐量的影响。研究表明,中、高剂量黄腐酸及黄腐酸钠能明显降低正常小鼠的血糖含量(P<0.01);中、高剂量黄腐酸及黄腐酸钠明显降低糖尿病小鼠体     

黄腐酸对酒精所致胃溃疡小鼠胃蛋白活力的影响

为了研究黄腐酸(FA)对酒精所致胃溃疡小鼠胃蛋白活力的影响,选取产自黑龙江宝清(BQ)、云南弥勒(ML)和云南建水(JS)3地的褐煤为原料,提取制备实验用黄腐酸样品(BQ-FA、ML-FA、JS-FA),建立酒精致小鼠胃黏膜损伤模型,检测各组小鼠胃组织中胃蛋白酶活力。结果表明：与空白对照组相比,模型组中胃蛋白酶活力显著增强(P<0.01);与模型组相比,3个给药组中胃蛋白酶活力均有所下降,其中BQ-FA和ML-FA给药组具有显著性差异(P<0.05)。综上,从黑龙江宝清、云南弥勒和建水3地褐煤中提取的黄腐酸可有效降低酒精所致的胃溃疡小鼠胃组织中胃蛋白酶活力,其中BQ-FA和ML-FA效果较好。本实验说明黄腐酸对酒精型胃黏膜损伤的保护作用可能与降低胃蛋白酶活力有关。     

稀有人参皂苷Rh_3及Rk_2的制备及结构确认

Rh_3和Rk_2有良好的抗肿瘤和免疫功效,但要简便制备高含量的Rh_3及Rk_2却相对困难。本文以人参皂苷Rg_3为底物,经葡萄糖苷酶催化水解后生成产物Rh_2,然后在酸性条件下,Rh_2进一步转化为两个未知化合物。反应液经前处理后,通过制备色谱纯化得到高纯度的两个未知化合物的混合物。通过质谱和核磁对未知物进行了结构确证,结果表明,两个未知化合物为Rh_3和Rk_2。