茶渣多肽制备及其对羟自由基的清除能力

分别以酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶以及复合蛋白酶水解茶渣粗蛋白制备茶渣多肽,并对多肽的羟自由基清除能力进行考察。通过单因素试验证明:复合蛋白酶的效果最好,其最佳水解工艺条件为粗蛋白液质量分数0.5%、加酶量600U/g、温度55℃、pH8.0、水解5h,在此条件下,多肽对羟自由基的清除能力达27.3%;碱性蛋白酶的效果也较好,其最佳工艺为蛋白液质量分数0.5%、加酶量400DU/g、pH8.5、温度50℃、时间1.0h,在此条件下,多肽对羟自由基的清除能力达25.3%,与前者的清除能力没有显著差异,但用时少4h;利用碱性蛋白酶作为酶源制得茶渣多肽粗品中含有蛋白质、多肽、游离氨基酸分别为28.4%、11.0%、1.5%,其对羟自由基的半清除率IC50为8.432mg/mL,相同条件下VC的IC50为0.897mg/mL。     

棉籽蛋白多肽的制备及对DPPH自由基的清除作用

以棉籽蛋白为底物,采用木瓜蛋白酶为水解酶进行水解,以DPPH清除率来测定其水解产物的抗氧化能力.结果表明:木瓜蛋白酶最适作用条件:pH值为8.0,酶与底物浓度比[E]/[S]为10%,温度为55℃.不同水解度(DH)的棉籽蛋白多肽清除DPPH自由基的能力不同,当水解度为3.81%时,DPPH自由基的清除率最高可达70.7%.     

蛋清酶解多肽的制备及其清除自由基活性

为探索蛋清酶解多肽体外清除自由基活性,开发功能性蛋制品,本文采用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶,通过对比实验、单因素实验和正交实验确定了蛋清酶解多肽的制备方法,采用体外清除自由基对比实验研究了蛋清酶解多肽的体外清除自由基活性。结果表明:蛋清蛋白浓度调整至4 g/100 mL(m/V),用18000 U/g蛋白的碱性蛋白酶在pH9.0于60 ℃水解7 h,制备的蛋清多肽清除DPPH自由基能力最强;用碱性蛋白酶制备的蛋清多肽在体外对超氧阴离子、羟自由基、DPPH自由基清除能力和Fe³⁺还原能力均明显优于蛋清,但远不及V_C。证明蛋清经碱性蛋白酶控制水解能明显增强其清除自由基能力,提高其保健性能。     

东海海参胶原蛋白多肽的制备及清除自由基功能研究

以东海海参为原料,采用酶法提取胶原蛋白。选取木瓜蛋白酶、风味蛋白酶以及复合酶(木瓜-风味),在其最佳水解条件下水解,以自由基清除率为指标,确定最佳水解时间及酶种类。研究结果表明,用木瓜蛋白酶水解4 h得到的多肽清除自由基的能力最强,清除率在70%以上;多肽清除羟自由基和超氧自由基的IC50分别为27.8mg/mL和49.3mg/mL。通过超滤处理及DEAE琼脂糖离子交换柱(DEAE Sepharose FF)分离纯化抗氧化肽,得到分子质量小于5kDa的肽,其功能性最强。利用HPLC测定该肽的氨基酸含量,结果显示该肽段以甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、谷氨酸(Glu)、脯氨酸(Pro)、天冬氨酸(Asp)、精氨酸(Arg)、丝氨酸(Ser)和苏氨酸(Thr)为主。     

菜籽多肽的制备及羟自由基的清除作用

以菜籽蛋白为原料,用碱性蛋白酶对菜籽蛋白进行部分水解。结果表明,水解得到的多肽对Fenton体系产生的羟自由基有清除能力。通过正交试验,得出最优水解条件为碱性蛋白酶[E]=4000U／g,温度为50℃,ph10．0,控制水解3h,水解度14．98％的条件时,菜籽多肽的羟自由基清除能力最强,为14．65％。     

山核桃蛋白多肽的制备及对羟自由基的清除作用

实验确定山核桃蛋白水解最适宜的酶制剂为风味蛋白酶。蛋白酶最适作用条件为：底物浓度为10％，水解时间为2h，温度为55，pH值为6．5，酶用量为1．5％。不同水解度的蛋白多肽清除羟自由基能力不同，结果表明水解度5％时，自由基清除率最高可达50．90％。     

不同蛋白酶水解棉籽蛋白制备抗氧化多肽的研究

利用6种蛋白酶对棉籽蛋白进行酶解,测定了各酶在水解过程中的水解度及其变化,对酶解产物的抗氧化活性进行了分析比较。研究表明,各蛋白酶在水解的前2h内,水解度迅速增加,2h之后水解曲线变得平缓。其中胃蛋白酶的水解能力最强,其4h水解产物水解度最大,为30.40%;胰蛋白酶的水解能力最差,最终水解产物的水解度为17.61%。中性蛋白酶水解产物的抗氧化活性较强,经测定其DPPH清除能力为54.95%,羟自由基清除能力为68.98%,超氧阴离子自由基清除能力为58.38%。     

酶解法制备草鱼鱼鳞多肽及其清除羟自由基的研究

采用复合蛋白酶酶解草鱼鱼鳞制备多肽并研究其清除羟自由基能力,考察酶解条件对多肽清除羟自由基的影响,通过单因素试验和响应面试验优化得到清除羟自由基的多肽酶解工艺条件为：底物质量浓度为6g/100mL,酶解时间2.11h,加酶量为5.22g/100mL,酶解温度49.33℃,最高清除率为99.24%。层析分离的结果有5 个洗脱峰,第4 个峰的羟自由基清除率最高,达到98.34%。     

葡萄籽多肽制备及其自由基清除能力的研究

用复合酶(碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶)水解方法制备葡萄籽多肽,通过单因素试验考察酶添加量、酶解时间、酶解温度和酶解p H值对脱脂葡萄籽蛋白水解度的影响。在基于单因素试验的条件下,选用三因素三水平试验确定复合酶分析3个因素对响应值的影响。结果表明最佳酶解工艺参数为:复合蛋白酶质量比例为7∶3,酶添加量为2%、酶解时间3 h、酶解温度50℃、pH 7.4,在该条件下脱脂葡萄籽蛋白的水解度达24.33%,葡萄籽蛋白复合蛋白酶酶解物在质量浓度为120μg/mL～600μg/mL的范围内,其对DPPH自由基的清除能力为19.25%～41.03%,且存在明显的量效关系,与VC、VE相比,葡萄籽多肽用量为0.15%时抗氧化效果较好。     

棉籽多肽的制备工艺优化及功能特性

为有效利用棉籽这一优质蛋白质资源,以棉籽蛋白水解度(DH)和水解液感官(色泽,气、滋味)为评价指标,对蛋白酶进行选择,再以棉籽蛋白DH为指标,利用单因素实验及响应面实验对复合蛋白酶水解棉籽蛋白制备棉籽多肽的工艺条件进行优化,并研究了棉籽多肽的氨基酸组成及功能特性。结果表明：选择碱性蛋白酶和风味蛋白酶按质量比2∶1构成复合蛋白酶;最优工艺条件为水解pH 10、水解温度60℃、加酶量6 000 U/g、水解时间90 min,在此条件下棉籽蛋白DH为29.35%;棉籽多肽中有7种必需氨基酸,必需氨基酸总含量达到12.50 mg/100 mg,占氨基酸总量的26.25%;与棉籽蛋白相比,棉籽多肽的吸湿性有较大提升;在20℃时棉籽多肽的吸油性较好;在弱碱性时棉籽多肽的乳化性与乳化稳定性较好;棉籽蛋白DH与棉籽多肽的起泡性呈正相关,与泡沫稳定性呈负相关。采用该工艺制备的棉籽多肽氨基酸含量丰富,具有良好的功能特性。     

海马骨粉酶解条件优化及清除DPPH自由基能力测定

以海马骨粉为原料,采用碱性蛋白酶对其水解,对水解物功效测定,以DPPH自由基清除的能力作为评定指标,在单因素的基础上,利用响应面设计方法进行酶解条件优化。单因素结果表明:酶解最佳时间为3 h,最佳温度为50℃,最佳p H为8;再采用Central Composite Design法,研究各因子及其交互作用对海马骨粉酶解液清除DPPH自由基能力的影响。利用Design Expert.8.0.5b软件得到回归方程的模型,并进行响应面分析,得出最佳条件为:酶解温度为48.60℃、酶解时间为4 h、酶解p H为7.04,此时的DPPH自由基清除率为63.89%。      

糯米糠抗氧化肽的制备工艺及自由基清除能力研究

为开发利用糯米糠资源,研究了糯米糠抗氧化肽的制备工艺及自由基清除能力。选取中性蛋白酶为水解酶,以抗氧化肽还原力为指标,采用单因素实验和正交实验方法优化糯米糠抗氧化肽的制备工艺。结果表明,制备糯米糠抗氧化肽的最佳工艺条件为糯米蛋白底物浓度4%、[E]/[S]2%、pH7、酶解温度40℃、酶解时间6h,在该条件下制备的糯米糠抗氧化肽对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力明显优于米糠抗氧化肽,且存在一定的量效关系,提示糯米糠抗氧化肽可用作功能性食品或天然抗氧化剂被深入研究和开发利用。      

反相高效液相色谱法分离菜籽蛋白水解物及其组分清除自由基能力的研究

采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)技术分离菜籽蛋白的蛋白酶k水解物(PKH),并通过分析其DPPH·、O-2·、·OH的清除能力和氧自由基吸附能力(ORAC),评价了PKH及其分离组分清除自由基的能力。结果表明:菜籽肽清除DPPH·的能力与其疏水性之间具有显著的正相关性,疏水性最高的组分清除DPPH·的能力与谷胱甘肽(GSH)相当,IC50值为(0.183 8±0.002 1)mg/m L;分离后菜籽肽的O-2·和·OH清除能力虽然有所提高,但是仍然弱于GSH;4个分离组分的ORAC值高于PKH,其中2个组分的ORAC值与GSH的相当,1个组分(F7)的ORAC值是GSH的1.5倍,其ORAC值(Trolox)高达(2 413.41±162.98)μmol/mg。研究认为,基于疏水性的RP-HPLC分离显著提高了菜籽肽清除自由基的能力,获得的分离组分(尤其是F7)可以作为抗氧剂开发相关功能性食品。     

紫苏提取物体外清除自由基能力的研究

以紫苏茎、叶为研究对象,采用不同溶剂获取各种提取物,用茶多酚、维生素E、TBHQ作为对照,采用DPPH自由基体系、烷基自由基引发的亚油酸氧化体系、超氧阴离子自由基体系、羟基自由基体系,研究各种提取物对不同自由基的清除作用。结果表明,提取物对四种自由基均有清除作用,其清除效果依次为羟基自由基>DPPH自由基>烷基自由基>超氧阴离子自由基。紫苏茎、叶的95％乙醇(v/v)与碱水混合物提取物(8:2v/v)的总黄酮得率最高,紫苏叶提取物的抗氧化性强于紫苏茎提取物。      

不同脱乙酰度蚕蛹壳聚糖结构分析及其清除自由基能力的比较研究

首次采用无水乙醇浸泡辅助脱乙酰基与间歇式碱处理相结合的方法,通过控制反应时间制备不同脱乙酰度的蚕蛹壳聚糖。同时对其脱乙酰度、表观黏度和分子量等理化指标进行测定,用红外光谱对其基本结构进行表征,并分别采用邻二氮菲-Fe2＋氧化法、核黄素-光-氮蓝四唑法和DPPH法对其清除羟自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O2-·）和DPPH自由基能力进行了测定。结果表明：当反应时间为5、7、9h时,蚕蛹壳聚糖的脱乙酰度分别为：78.12%、86.45%、95.96%;蚕蛹甲壳素和不同脱乙酰度壳聚糖的红外光谱图的不同说明其结构上的差异,可为进一步研究其性质提供理论参考;蚕蛹壳聚糖对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率均较低,但均高于虾蟹壳来源的壳聚糖;对DPPH·的清除率较高。三种壳聚糖对三种自由基清除率的大小顺序均为：脱乙酰度为95.96%的壳聚糖〉脱乙酰度为86.45%的壳聚糖〉脱乙酰度为78.12%的壳聚糖。     

五谷酸奶的研制及其清除自由基的能力

根据动植物蛋白营养平衡互补的原理,以黑芝麻、黑豆、玉米为主要原料,研制新型五谷酸奶。通过单因素和正交试验确定五谷酸奶的最佳制作工艺为黑芝麻汁添加量10mL/100mL、黑豆汁添加量13.3 mL/100 mL、玉米汁添加量13.3mL/100mL、奶粉添加量7.9g/100mL、白砂糖添加量5g/100mL、接种量3mL/100mL、发酵时间7h、发酵温度42℃。该条件下制得的五谷酸奶酸甜可口,质地细腻。通过研究五谷酸奶、五谷汁原液和市售某品牌酸奶的DPPH自由基和羟基自由基清除能力,结果表明:五谷酸奶对DPPH自由基、羟自由基的清除率均随其浓度的增加而增强。当其浓度为50mg/mL时,五谷酸奶对DPPH自由基清除率为(84.9±0.10)%,羟基自由基的清除率为(55.6±0.12)%,且在相同浓度时,五谷酸奶的自由基清除率高于市售某品牌酸奶。     

黑米花青苷胶囊体外清除自由基及抗氧化作用的研究

利用Fenton反应产生羟自由基、邻苯三酚在微碱条件下自氧化产生O-2、磷钼络合物法分别研究了黑米花青苷胶囊和黑米色素对羟基自由基、超氧阴离子的抑制和其总抗氧化活性。结果表明黑米花青苷胶囊和黑米色素能有效清除自由基,具有良好的抗氧化作用。其中黑米花青苷胶囊和黑米色素对羟自由基、超氧阴离子的抑制和其总抗氧化活性随着样品浓度增高而增加。黑米色素对羟自由基、超氧阴离子的抑制和总抗氧化活性显著高于黑米花青苷胶囊。     

毛豆腐提取物的自由基清除活性研究

利用20%、40%、60%乙醇溶液（v/v）、pH4.5水、pH6.5水作为提取溶剂,对发酵时间为3、5、7、9d的毛豆腐分别进行提取,测定提取物中蛋白质的提取率、水解度,以及采用DPPH、ABTS法评价提取物的体外自由基清除活性。研究结果表明,随着毛豆腐发酵时间的延长,提取物中蛋白质的提取率、水解度均逐渐增加,并且提取物的自由基清除活性也明显地提高;通过比较还发现,毛豆腐乙醇提取物的自由基清除活性高于水提取物,且随着乙醇浓度的提高,提取物的自由基清除活性提高。排阻色谱分析结果证明,发酵9d后毛豆腐中蛋白质充分水解,5种提取物的主要成分为肽与氨基酸。     

腐植酸钠清除自由基作用的研究

利用DPPH自由基清除法、羟自由基清除法、超氧阴离子自由基清除法、总还原力的测定4种方法对腐植酸钠的抗氧化活性进行了检测和评价。研究结果表明,腐植酸钠具有较强的自由基清除能力和一定的抗氧化能力,且随着腐植酸钠浓度的增加,其抗氧化能力逐渐增强。